CC BY
137
S. M. Adekenov
SYNTHESIS AND BIOLOGICAL ACTIVITY OF NEW DERIVATIVES OF ARGLABIN AND PROSPECTS FOR THE ORGANIZATION OF THE PRODUCTION OF ORIGINAL PHYTOPREPARATIONS
Institute of Phytochemistry, Ministry of Education and Science, Karaganda, Kazakhstan
ABSTRACT
The results of chemical modification conducted on the molecule of the sesquiterpene lactone arglabin from Artemisia glabella Kar. et Kir. are generalized. 32 new compounds were obtained. Bioscreening of arglabin and its derivatives using models of Artemia salina, experimentally transplanted tumors and tumor cell lines allowed to establish their anti-tumor, cytotoxic, anti-inflammatory, immune-stimulating, anti-fungal and antiviral activity. «Structure-bioactivity» relationship in the series of the compounds obtained is discussed. A new anti-tumor preparation Arglabin was developed on the basis of dimethylaminoarglabin hydrochloride; Arglabin is currently manufactured at Karaganda Pharmaceutical Factory by GMP standards.
Key words: Artemisia glabella Kar. et Kir., sesquiterpene lactone, bioscreening, anti-tumor activity.
С. М. Адекенов
СИНТЕЗ И БИОЛОГИЧЕСКАЯ АКТИВНОСТЬ НОВЫХ ПРОИЗВОДНЫХ АРГЛАБИНА И ПЕРСПЕКТИВЫ ПРОИЗВОДСТВА ОРИГИНАЛЬНЫХ ФИТОПРЕПАРАТОВ
Институт фитохимии МОН РК, Караганда, Казахстан
РЕЗЮМЕ
Обобщены результаты химической модификации молекулы сесквитерпенового лактона арглабин из Artemisia glabella Kar. et Kir. Получено 32 новых соединения. При биоскрининге арглабина и его производных на моделях Artemia salina, экспериментальных перевиваемых опухолей и линиях опухолевых клеток установлено их противоопухолевое, цитотоксическое, противовоспалительное, иммуномодулирующее, противогрибковое, антивирусное действия. Обсуждается взаимосвязь «структура-биоактивность» в ряду полученных соединений. На основе гидрохлорида диметиламиноарглабина разработан новый противоопухолевый препарат аргпа-бин, который выпускается Карагандинским фармацевтическим заводом по требованиям GMP.
Ключевые слова: Artemisia glabella Kar. etKir., полынь гладкая, сесквитерпеновый лактон, арглабин, биоскрининг, противоопухолевая активность.
Сесквитерпеновые у-лакгоны представляют интерес как потенциальные биологически активные соединения. Среди них обнаружены представители с широким спектром биоактивности, в частности — цитотоксической, противоопухолевой, антимикробной, противовоспалительной, аншмутагенной и др. [б]. Известно более 200 сесквитерпеновых лактонов из растений с выраженной цитотоксической и противоопухолевой активностью [7-12].
Сесквитерпеновый лактон гвайанового типа — арглабин (1), содержащийся в надземной части эндемичного растения Казахстана полыни гладкой {Artemisia glabella Kar. etKir.) и являющийся действующим нача-
лом нового противоопухолевого препарата [1-5], как возобновляемый материал представляет интерес для химической модификации его молекулы. По результатам экспериментов выявлено, что арглабин (1) ингибирует фарнезилпротеинтрансферазу — фермент, ответственный за образование злокачественных опухолей [13; 14]. В молекуле данного гвайанолида присутствуют такие функциональные группы, как а,|3-ненасы-щенный у-лактонный цикл, трехзамещенная двойная связь и эпоксидный цикл, наличие которых и обусловливает ее высокую биологическую активность.
В плане направленного изменения биологической активности и поиска новых производных арглабина
8 АРГЛАБИН
(1)
проведен ряд химических модификаций его молекулы, которые можно условно разделить на четыре группы:
1) реакции по эпоксидному циклу арглабина;
2) реакции по трехзамещенной двойной связи;
3) реакции по экзометиленовой двойной связи а-метилен-у-лактонного цикла;
4) реакции одновременно по нескольким функциональным группам.
Реакции по эпоксидному циклу арглабина
Катализируемый тетрафторбораном (НВР4) гидролиз арглабина (1) сопровождается образованием реакционной смеси из трех компонентов (2-4). Взаимодействием (2) с хлорокисью фосфора в пиридине получен эпиарглабин (5).
Раскрытие эпоксидного цикла с образованием соединений (6-8) способствовало снижению показателей прогнозируемой противоопухолевой активности до 68,4 % для (6), 50,4 % для (7) и 51,3 % для (8). Экспериментально подтверждается, что соединения (6) и (7) незначительно подавляют рост перевиваемых опухолевых штаммов лимфосаркомы Плисса, саркомы-45, саркомы М-1, альвеолярного рака печени.
Реакции по трехзамещенной двойной связи Эпоксидированием арглабина надуксусной кислотой в дихлорметане получено два диэпоксипроизводных (9) и (10).
Прогноз биологической активности методом математического моделирования с использованием программы «PASS» (В. В. Поройков, Д. А. Филимонов) для соединений (1-5) характеризует вероятное наличие у них антинеопластической и цитостатической активности. Причем максимальные значения прогнозируемой противоопухолевой активности колеблются от 66,8 для (5) до 86,8 % для (1). Цитостатическая активность имеет сравнительно низкие показатели — от 56,6 для (4) до 66,8 % для (1). В эксперименте установлено, что (1) обладает ингибирующим эффектом в отношении ряда перевиваемых опухолей (лим-фосаркома Плисса, карциносаркома Уокера, рак молочной железы RMC-1, альвеолярный рак печени, лейкемии Р-388 и L-1120), а также в отношении опухолевых штаммов, устойчивых к стандартным химиопрепаратам (фторурацилу, сарколизину, проспи-дину, рубомицину).
При раскрытии эпоксидного цикла арглабина под действием хлороводорода получено два стереоизомер-ных хлоргидриновых производных (6) и (7). Кроме того, наблюдается присоединение хлороводорода по экзометиленовой группе лактонного цикла с образованием дихлорпроизводного (8).
(10)
Эпоксидирование олефиновой двойной связи в молекуле арглабина (1) значительно повышает биологическую активность. По результатам прогноза биологической активности максимальное подавление фарнезилпротеинтрансферазы как основного фермента опухолевого роста под влиянием синтезируемых соединений (9) и (10) может составлять 96,1 %, что экспериментально подтвердилось выраженной противоопухолевой активностью 3,4(3-эпоксиаргла~ бина (9) в отношении перевиваемых опухолей лимфосаркомы Плисса, альвеолярной карциномы печени РС-1, саркомы М-1 и саркомы-45, ингибируя их рост на 70-90 % и превосходя при этом активность исходного арглабина (1).
Еще одним примером реакции по трехзамещенной двойной связи является фотохимическое окисление арглабина (1) в ацетоновом растворе в токе кислорода, при котором происходит перегруппировка двойной связи из положения СЗ-С4 в С2-СЗ с образованием 4а-гидроксипроизводного (11), прогнозируемая про-
(1)
(11)
тивоопухолевая активность которого составляет
86,7 %, фарнезилтрансферазаингибирующая активность — в пределах 63,3 %.
При взаимодействии арглабина (1) с бромом в хлороформе наблюдается селективное образование 3,4-дибромарглабина (12) с выходом 71 %. Потенциальные фарнезилтрансферазаингибирующая (88,9 %) и противоопухолевая (85,5 %) активности (12) подтвердились в эксперименте подавлением роста перевиваемых штаммов карциномы Герена и саркомы-45.
Реакции по экзометиленовой двойной связи <х-ме-тилен-у-лактонного цикла
Аминирование по а,Р-ненасыщенному фрагменту метиленлактона, протекающее по типу реакции Михаэля, является наиболее часто используемым методом модификации, позволяющего получать водорастворимые производные, что является практически важным.
Взаимодействием арглабина (1) с диметиламином, диэтиламином, морфолином и бензиламином в этаноле получены аминопроизводные (13; 15; 16; 20), а из 3,4(3-эпоксиарглабина (9) — соответствующие (17-19). Строение полученных аминопроизводных установлено на основании спектральных данных (ИК-, ЯМР 'Н, 13С), элементного анализа, а гидрохлорида 13-диме-тиламиноарглабина (14) — методом рентгеноструктурного анализа.
Ме1/ЕЮАс
Реакцией взаимодействия исходного лактона (1) с соответствующими диалкиламинами в безводном этаноле получили диалкиламинопроизводные арглабина (13) и (20), которые образуются с количественными выходами. Полученные производные потенциально обладают высокими противоопухолевыми свойствами. Так, если вероятность фарнезилтрансферазаингибирующей и противоопухолевой активности для (13) составили
96.8 и 84,7 % соответственно, то результаты эксперимента указали на выраженный противоопухолевый и цито-токсический эффекты у данного производного, превышающие таковую активность исходного арглабина (1).
Взаимодействием диалкиламинопроизводных арглабина (13) и (20) с метилиодидом в этилацетате получены четвертичные аммонийные соли (21) и (22).
В эксперименте выявлено, что противоопухолевая активность в ряду аминопроизводных зависит от скорости гидролитического дезаминирования. Относительно легкое дезаминирование наблюдается в ряду четвертичных аммониевых солей, которые и обладают сравнительно высокой противоопухолевой активностью. Кроме того, для аминопроизводных арглабина установлены выраженная иммуномодулирующая, противовоспалительная, противогрибковая и антибактериальная активности.
Математический прогноз противоопухолевой активности для соединений (14), (20) и (21) по фарнезил-трансферазаингибирующей активности составил 96,8;
98.8 и 98,7 % соответственно, а по антинеопластичес-кой активности — 84,7; 89,2 и 85,3 % соответственно. Экспериментально, помимо подтверждения противоопухолевого эффекта, для указанных соединений установлена выраженная противовоспалительная активность.
о^/""""М(А1к)2
О^У N (А1к)гМеГ
Ы-Ме
Ме
НМ(СН2СН2)20
Перспективным направлением химической модификации молекул сесквитерпеновых лактонов является синтез их фосфорсодержащих производных.
Взаимодействие арглабина (1) с диметил-, диэтил-, дипропил- и дибутилфосфитами при комнатной температуре селективно приводит к образованию соответствующих фосфонатов (23-26), строение которых установлено с использованием спектральных методов (ИК-, ПМР, С13~ и Р31 ЯМР). Пространственное строение молекулы (24) однозначно установлено методом РСА.
^>(0^2 Н=Ме(23), ЕЩ4)
5 О Рг (25), В и (26)
Введение диалкилфосфонатной группы снижает биологическую активность. Однако при увеличении длины алкильных заместителей противоопухолевая активность незначительно повышается, что связано с увеличением липофильности производных арглабина. Прогнозирование биоактивности фосфорсодержащих производных арглабина позволяет предположить наличие у них выраженной противоопухолевой активности, подтвержденное в эксперименте для соединения (26). Одновременно для (24) проявляется выраженная противовоспалительная активность, а для (23) — слабая антибактериальная.
Необычным примером селективного гидроксили-рования экзометиленовой двойной связи лактонного цикла арглабина (1) является его окисление с помощью КМп04 в присутствии катализатора межфазного переноса.
Окисление арглабина (1) КМп04 в бензоле в условиях межфазного катализа в присутствии дициклогек-сил-18-краун-6 (ДДК) происходит регио- и стереосе-лективно и приводит к единственному продукту — 11,13-дигидроксипроизводному арглабина (27) с выходом 70 %.
Реакции одновременно по нескольким функциональным группам
При бромировании арглабина (1) И-бромсукцини-мидом в водном ацетоне образуется дибром- и бром-гидринпроизводные (12) и (29), а также продукт присоединения брома по двум двойным связям (трехза-мещенной СЗ-С4 и экзоциклической лактонного цикла) (28).
В плане получения новых биологически активных производных арглабина (1) проведены реакции соль-вомеркурирования-демеркурирования по модифицированному методу Брауна.
В результате сольвомеркурирования (1) Н§(ОАс)2 в водном ацетонитриле при пониженной температуре (-10 °С) с последующим демеркурированием ИаВН4 с хорошим выходом (74 %) получено 4Р-гидрокси-11,13-дигидропроизводное (30) — продукт гидрокси-лирования двойной связи СЗ-С4 и одновременного гидрирования экзометиленовой связи лактонного цикла. Строение молекулы (30) установлено на основании данных спектров ЯМР 13С, 'Н и подтверждено методом РСА.
Перспективным направлением химической модификации молекулы арглабина (1) является реакция карбохлорирования. При взаимодействии (1) с дихлор-карбеном, полученным in situ из хлороформа и гидроокиси натрия в присутствии катализатора межфазного переноса (дициклогексил-18-краун-6), образуется бис-дихлорметиленовое производное (31), обладающее высокой противоопухолевой активностью. В частности, фарнезилтрансферазаингибирующая (91,1 %) и ан-тинеопластическая активности (79,7 %) значительно превосходили таковой эффект исходного лактона (1). Экспериментально помимо противоопухолевой активности у (31) выявлены цитотоксическая, фагоцитоз-стимулирующая, противотрихомонадная, противогрибковая и слабая антибактериальная активности.
При взаимодействии (1) с дибромкарбеном, затем молекулярным бромом образуется производное (32). Введение атомов галоида у (32) способствует повышению прогнозируемой активности до 92,3 % (подавление фарнезилтрансферазы) и 79,7 % (анти-неопластическая), которые сочетаются с экспериментально подтвержденными противогрибковой
(в отношении Ергйегторку^п/1оссотт и Аяре^Шт Аамия) и фагоцитозстимулирующей активностью в сравнении с хлорпроизводными арглабина.
В плане создания принципиально новых лекарственных форм (с контролируемым высвобождением действующего начала из полимерной матрицы), эмульсионной полимеризацией 1-винилэтинилцикло-гексанола-1, метилметакрилата и этилакрилата получены полимерные наночастицы с арглабином (рис. 1).
<з| Ышшпифш.
Рис. 1. Строение нанокорпускулярных носителей лекарственных веществ:
1 — липосома; 2 — наночастица; 3 — нанокапсула
По экспериментальным данным отмечается, что значительная цитотоксичность характерна для полимеров на основе акриловой и метакриловой кислот. Цитотоксическая активность полимерного комплекса полиметилметакрилата с включением арглабина в отношении линии опухолевых клеток X 63. Ag 8.653 превосходит как нативный арглабин (1), так и гидрохлорид диметиламиноарглабина (14). Индивидуальные полимеры не обладают противоопухолевой активностью в отношении клеток карциномы Н157 и меланомы НТ 244, однако при включении в их состав арглабина наблюдается значительное повышение противоопухолевого эффекта. Наиболее перспективным является полимерный комплекс арглабина на основе р-винилоксиэтиламида акриловой кислоты.
Резюмируя вышеизложенное, в плане выявления закономерности «структура-активность» методом математического моделирования с использованием программы «PASS» (В. В. Поройков, Д. А. Филимонов) следует отметить, что все производные арглабина (2-32) в той или иной степени потенциально обладают биологической активностью. При этом максимальные значения противоопухолевой активности наблюдаются для диэпоксипроизводных (9) и (10), аминопроизводных (13-16), фосфорсодержащих производных арглабина (23-26), подтвержденные в эксперименте подавлением роста перевиваемых опухолевых штаммов карциномы Герена, лейкемии Р-388 и саркомы-45. Вы-
сокая вероятность фунгицидной и антимикробной активности, характерная для соединений (21); (31) и (32), коррелирует с. экспериментальными значениями данных биоскрининга.
Практическим результатом направленного поиска производных арглабина с потенциальной биологической активностью стала разработка в Институте фитохимии нового препарата на основе гидрохлорида
1 (10)Р-эпокси-11,13-дигидро-13-диметиламино-5,7р,6,11 р(Н)-гвай-3(4)-ен-6,12-олида (14). Препарат защищен патентами в 11 странах мира: Японии, Китае, США, Великобритании, Германии, Швейцарии, Франции, Австрии, Италии, Нидерландах и Швеции [3; 4].
В настоящее время завершен полный цикл клинических испытаний, и фармпроизводством института налажен выпуск лекарственной формы данного препарата. Министерством здравоохранения Республики Казахстан препарат зарегистрирован в качестве противоопухолевого средства и выданы регистрационные удостоверения на «Арглабин — порошок лиофилизи-рованный для приготовления раствора для инъекций ампулах 0,04 г, № 20 и № 60» (РК-ЛС-5 № 000625 от 07.01.05 г.), «Арглабин — порошок лиофилизирован-ный для приготовления раствора для инъекций во флаконах 0,04 г, № 20 и № 60» (РК-ЛС-5 № 003950 от 09.12.99 г., РК-ЛС-5 № 000725 от 07.01.05 г.). Фармакопейным комитетом РК утверждены фармакопейные статьи на «Арглабин-субстанцию» (ФС РК 42-224-99, ФС РК 42-652-04), «Арглабин-лиофилизированный» (ФС РК 42-245-99, ФС РК 42-679-04), «Арглабин лиофилизированный порошок для инъекций в ампулах
0.04 г» (ВФС РК-679-05 от 07.01.05 г.).
Препарат «Арглабин — лиофилизированный порошок 0,04 г для инъекций во флаконах или в ампулах» зарегистрирован в Республиках Таджикистан (регистрационное удостоверение Р-ЛС № 001610 от 14.09.04 г.) и Кыргызстан (регистрационное удостоверение Р-2004-347КР № 2461 от 28.07.04 г.). Приказами Министерства здравоохранения Республики Казахстан № 10/1 от 22.12.2000 г. и № 883 от 22.12.2004 г. препарат арглабин включен в «Список основных жизненно важных лекарственных средств Республики Казахстан».
Для повышения количественного выхода арпхаби-на и организации безотходного производства в Институте фитохимии разработан регламент комплексной переработки сырья полыни гладкой с предварительным извлечением эфирного масла. Эфирное масло полыни гладкой обладает противовоспалительной и антибактериальной активностью. При предварительной отгонке эфирного масла за счет подачи пара при пониженной температуре под вакуумом удаляются компоненты летучей фракции, освобождается доступ растворителя к местам локализации лакгонов в сырье, вследствие чего увеличиваются выход и чистота целевого вещества. В соответствии с требованиями ОМР к производству лекарственных средств технологии должны быть основаны на нетоксичных, экологи-
чески безопасных растворителях и реактивах. В связи с этим ранее используемый способ хлороформной экстракции полыни гладкой заменен экстракцией растительного сырья жидким диоксидом углерода (С02) при сверхкритических давлениях. Как показано в табл.
1, при С02-экстракции сырья выход арглабина выше, чем при экстракции другими растворителями.
Таблица 1
Количественный выход арглабина при экстракции сырья
Также в эксперименте установлено, что предварительное удаление эфирных масел из полыни гладкой влияет на эффективность последующей С02-экстрак-ции, позволяя достичь меньшего остаточного содержания арглабина в шроте (рис. 2) по сравнению с сырьем без предварительной обработки (рис. 3).
1,6 1,4 1,2 1
% 0,8 0,6 0,4 0,2 0-
100/2 120/55 130/55 140/55 160/55 180/55
давление, бар/температура °С
Рис. 2. Остаточное количество сесквитерпенового лак-тона — арглабина (в % от исходного количества вещества в сырье) в шроте после С02-экстракции (сырье без предварительного удаления эфирного масла)
Как видно из рис. 2 и 3, в шроте после С02-экс-тракции остаточное содержание арглабина без удаления эфирных масел сравнительно выше (0,8-1,5 % от исходного количества вещества в сырье), чем в шроте с предварительным удалением эфирного масла (0,2-0,4 % от исходного количества вещества в сырье).
Полученную сумму экстрактивных веществ после С02-экстракции очищали от балластных веществ. Далее смолку методом колоночной хроматографии делили на индивидуальные компоненты. При элюировании толуолом выделили технический арглабин, который подвергли дальнейшей перекристаллизации. Очищен-
70/5 100/50 120/60 150/50 150/80 200/50
давление, бар/тмпература °С
Рис. 3. Остаточное количество сесквитерпенового лак-тона — арглабина в шроте после С02-экстракции (в % от исходного количества в сырье) (сырье после удаления эфирного масла)
ный арглабин аминировали диметиламином, затем через реакционную смесь пропускали газообразный хлористый водород. Выпавший осадок после гидрохлорирования перекристаллизовывали из этилацетата. Полученный продукт после перекристаллизации представляет собой гидрохлорид диметиламиноарглабина — субстанцию препарата арглабин. Ее растворяли в воде для инъекций и фильтровали на фильтрационной установке. Затем раствор разливали в стерилизованные ампулы по 2 мл и подвергали лиофильной сушке с последующей запайкой ампул в атмосфере стерильного кислорода.
Для организации промышленного выпуска препарата арглабин в Институте фитохимии создана база по производству сырья полыни гладкой. В опытном хозяйстве института под выращивание травы полыни гладкой в настоящее время задействовано 5,6 Га земельной площади, что способно обеспечить производство 6 т сырья в год. Ежегодно производственные площади под посевами полыни гладкой расширяются, и к 2007-му году планируется заготовка до 10 т сырья в год.
На базе Института фитохимии завершено строительство Карагандинского фармацевтического завода по производству препарата арглабин мощностью
2 млн ампул в год, соответствующего международным стандартам качества производства (ОМР). В структуре завода функционируют 3 основных подразделения: цех экстракции и синтеза субстанции, цех сублимационной сушки и ампулирования, склад тарного сырья и химреактивов (рис. 4).
Таким образом, выпуск препарата арглабин в промышленном масштабе позволит:
— обеспечить лечебные учреждения и население оригинальным противоопухолевым препаратом;
— провести широкомасштабные многоцентровые клинические испытания препарата арглабин в лечении рака предстательной железы, мочевого пузыря, яичников, шейки и тела матки, легкого и пищевода при сочетании с химио- и лучевой терапией;
N2 Вид экстракции Выход суммы веществ в % на сухое сырье Выход арглабина в % на сухое сырье
1 Вода 1.5 0.002
2 Петролейнын эфир:диэтиловый эфир (2:1) 3.2 0.003
3 Бензол 3.4 Следовые количества
4 Эфир 4.8 0.11
5 Хлороформ 6.7 0.34
б Спирт 5.1 0.18
7 С02 11.5 2,0
АРГЛАВИН
Участок хроматографической очистки
Участок углекислотной экстракции
1
| Участок синтеза субстанции
Г
Участок амі
ования
■
Рис. 4. Технологический цикл производства противоопухолевого препарата аршабин
— продолжить фундаментальные и прикладные исследования по направленному поиску новых производных сесквитерпенового лактона арглабин, обладающих противогрибковой, антивирусной (в т. ч. против вируса иммунодефицита человека), противовоспалительной активностью для разработки эффективных лекарственных препаратов.
Изучение биологической активности производных арглабина позволит разработать принципы направленного поиска новых соединений, обладающих противоопухолевыми, противогрибковыми, антибактериальными, противовоспалительными, иммуномодулирующими свойствами и создать на их основе высокоэффективные лекарственные препараты.
ЛИТЕРАТУРА
1. Адекенов С. М., Мухаметжанов М. Н, Куприянов А. Н., Кагарлицкий А. Д. Арглабин — новый сеск-витерпеновый лактон из Artemisia glabella Kar. et Kir. // Химия природ, соедин. —1982. — № 5. — С. 655-656.
2. Adekenov S. М., Rakhimova В. В., Dzhazin К. А., Alikov V. В,, Shaushekov Z. К., Toregozhina Zh. R., Turdybekov К. M. Sesquiterpene lactones from Artemisia glabella // Fitoterapia. — 1995. — Vol. LXVI, № 2 — P. 142-146.
3. PCT/KZ /00006 от 20.12.97 г. Адекенов С. М. Способ получения гидрохлорида 1р,10р-эпокси-13-диметиламино-гвай-3(4)-ен-6,12-олида — противоопухолевого средства «Арглабин лиофизилирован-ный» и устройство для его осуществления.
4. Патент РК № 10913 от 07.01.2004 г. Адекенов С. М. «Способ получения гидрохлорида 1р,10(3-эпок-си-13-диметиламино-гвай-З (4)-ен-6,12-олида лиофи-лизированного, противоопухолевого средства «Арглабин» из растительного сырья, устройство для экстрагирования растительного сырья».
5. Arglabin. Its structure, properties and usage.-Virginia, USA: Virginia Beach, 1997. — 38 p.
6. Pieman A. K, Biologigical Activites of Sesquiterpene Lactones // Biol. Syst. Ecol. — 1986. Vol. 14, No. 3. — P. 225-281.
7. Kupchan M. S. Recent Advances in the Chemistry of terpenoid Tumor Inhibitors // Pure and Applied Chemistry. — 1970. — Vol. 21. — P. 227-246.
8. Kupchan M S., Eakim M. A., Thomas A. M. Tumor Inhibitors. 69. Structure-cytotocity relationships among the sesquiterpene lactone // J. Med. Chem. — 1971. — Vol. 14, —P. 1147-1152.
9. Barbetti P., Casinovi C. G. Sesquterpeni lactonici di interesse farmacologico: proprieta strutturali e funzion-ali. Parte I: Eudesmanolidi // Ann. 1st. Super. Sanita. — 1981. — Vol. 17. — P. 255-282.
10. Barbetti P., Casinovi C. G. Sesquterpeni lactonici di interesse farmacologico: proprieta strutturali e funzion-ali. Parte II: Germacranolidi // Ann. 1st. Super. Sanita. — 1981. — Vol. 17. — P. 283-322.
11. Barbetti P., Far della G., Casinovi C. G. Sesquterpeni lactonici di interesse farmacologico: proprieta strutturali e funzionali. Parte III: Guaianolidi //Ann. 1st. Super. Sanita. — 1982. — Vol. 18, No. 4. — P. 819-830.
12. Barbetti P., Chiappini J., Fardella G., Casinovi C. G. Sesquterpeni lactonici di interesse farmacologico: proprieta strutturali e funzionali. Parte IV: Aggiomamento J. // Ann. 1st. Super. Sanita. — 1983. — Vol. 19, No. 2-3. — P. 283-322.
13. № EM29580328 US Patent, February 25, 1998. «Famesyl-protein transferase inhibitors». Shaikenov T. E., Adekenov S. M.
14. Shaikenov T E., Adekenov S. M, Basset S., Trivedi M„ Wolflnbarger L. Arglabine as a novel inhibitor of the famesylation of RAS proteines // Reports of MS-AS RK. — 1998. — No. 5. — P. 64-75.
