CC BY
40
УДК 615.1/.4
СИНТЕЗ И БИОЛОГИЧЕСКАЯ АКТИВНОСТЬ 5-АРИЛ-3-ГИДРОКСИ-1-(2-ТИАЗОЛИЛ)-4-ТИОФЕНОИЛ-3-ПИРРОЛИН-2-ОНОВ
М.А. МАРЬЯСОВ, Т.А. СИЛИНА, В.Л. ГЕЙН, Э.В. ВОРОНИНА! Р.Р. МАХМУДОВ
2 i Пермская государственная фармацевтическая академия 2 Пермский государственный национальный исследовательский университет e-mail: marsikprovisor@mail.ru
Для синтеза 5-арил-3-гидрокси-1-(2-тиазолил)-4-(2- тиеноил)-3-пирролин-2-онов была использована ранее описан- ная трехкомпонентная реакция замещенных эфиров ацилпиро- виноградных кислот с альдегидами и аминами. Структура полу- ченных соединений установлена на основании данных ЯМР1Н-спектров и качественных реакций. Исследованы острая токсич- ность, бактериостатическая и анальгетическая активность полу- ченных соединений.
Ключевые слова: 3-гидрокси-3-пирролин-2-оны, бактерио- статическая активность, анальгетическая активность, острая токсичность.
¿2 №10(1 29)_18_4. pdf - Adobe Reader EBB
File Edit View Window Help
èfi ta № <S> S M IH let) Gô I™ I ' ™ I « ® 1125°'° M la s | © p 10 Tools | Sign | Comment
Введение. В продолжение изучения биологической активности 1,4,5" тризаметценных пирролидин-2,з-дионов представляло интерес получить 3-гидрокси-З-пирролин-2-оиы, содержащие в положении 1 остаток 2-аминотиазола и в положении 4 тиеноильный фрагмент, установить их структуру и исследовать их бактериостатиче-скую и анальгетическую активность.
Материалы и методы. Для этой цели была использована ранее описанная [1, 2, 3] трехкомпонентная реакция замещенных эфиров ацилпировиноградных кислот с альдегидами и аминами. В ходе исследования установлено, что единственным продуктом реакции, протекающей при кратковременном нагревании эквимолярных количеств метилового эфира 2-тиеноилпировиноградной кислоты со смесью ароматического альдегида и 2-аминотиазола являются 5-арил-з-гпдрокси-1-(2-тиазолил)-4-тиофеноил-з-пирролин-2-оны (1-ХУ1).
еооон, + к < + ча
// \ V
N~
NH
nAS
О-Ц_
-снзон
R N
\=/
R N О
I-XVI
СбН5 (I); 3-СН3ОС0Н4 (II); £-КО,СбН4 (Ш); з-Ж)аСбН4 (IV); 4-НОСбН, (V); 4-(СН3),ЖбН4 (VI); пиридинил-з (VII); Е-НО-б-ГТОаСШа (УШ);2-С1С6Н4 (IX); 4-С1СбН4 (X); 3-БгСбН, (XI); 4-ЕгСбН4 (XII); 2-РСбН4 (XIII); 3"РС6Н4 (XIV); 4-ЕСбН4 (XV); з-НОСбН4 (XVI)
Обсуждение результатов. Полученные соединения (1-ХУ1) - кристаллические вещества от светло-желтого до желто-коричневого цвета, не растворимые в воде,
№10(129J_lS_4.pdf,,. О Zimbra: Входящие (1,.. Щ ДокументЗ - Microso..,
растворимые в этаноле при нагревании, растворимые в диоксане, ледяной уксусной кислоте, с высокими температурами плавления. Высокие точки плавления можно, по-видимому, объяснить их способностью к образованию межмолекулярных водородных связей и существованию их в форме димеров. Строение полученных 5-арил-3-гидрокси-1-(2-тиазолил)-4-тиофеноил-3-пирролин-2-онов было доказано на основании данных ИК и ЯМР-1Н спектров. Спектры соединений измерены в среде ДМСО на спектрометре TeslaBS-567A, рабочая частота 100 МГц, внутренний стандарт ТМС. Кроме сигналов протонов ароматических колец (6,79 - 7,56 м.д.),
дублетов тиазолового цикла (7,75 - 8,51 м.д.) и заместителей в положении 4 гетероцикла, наблюдается синглет метинового протона в положении 5 в области 6,02-6,40 м.д. Сигналы протонов других групп наблюдаются в ожидаемых областях. Все полученные соединения дают вишневое окрашивание со спиртовым раство-ром FeClз, что наряду с данными спектров, свидетельствует о их существовании пре-имущественно в енольной форме. Антимикробную активность изучали методом последовательных серийных раз-ведений в мясопептонном бульоне (МПБ). Для соединений была определена мини-мальная подавляющая концентрация (МПК) в отношении музейных штаммов - Б^ au-reusATTC 653811 и Е. СоПАТСС 25922. Использовали смыв суточной культуры, выра-щенной на МПБ, стерильным физиологическим раствором натрия хлорида, и готовили исходное разведение с концентрацией 500 млн. микробных тел в 1 мл смыва по бакте-риальному стандарту. Полученную смесь разводили стерильным МПБ в 100 раз. Это разведение бактериальной культуры с концентрацией 5 млн. микробных тел в 1 мл яв-лялось рабочим раствором, который в количестве 0,1 мл вносили в 2 мл МПБ. Бакте-риальная нагрузка на 1 мл жидкости составила 250 тыс. микробных тел. Результаты опытов учитывали после 18-20 часов выдержки контрольных и опытных культур в термостате при 36-37оС. За действующую дозу принимали минимальную подавляю-щую концентрацию в мкг/мл, которая задерживает рост соответствующего тест-микроба. Бактериостатический эффект исследуемых соединений сравнивали с дейст-вием этакридиналактата, 1% раствора хлорамина Б, 1% раствора диоксидина [4]. Ре-зультаты испытаний представлены в табл. 1.
Таблица 1 Бактериостатическая активность исследуемых соединений
Соединение № МПК(мкг/мл)
S. aureus E. coli
I 500 500
II 1000 1000
Iii 250 500
IV 250 500
V 250 500
VI 250 500
VII 500 500
VIII 250 250
IX 500 500
X 500 500
XI 500 500
XII 500 500
XIII 250 500
XIV 250 500
XV 250 500
Этакридина лактат 2000 500
Хлорамин Б (1% р-р) 500 250
Диоксидин 62,5 1000
Результаты первичных исследований анальгетической активности соединений I, IX, XVI показали, что вещества IX и XVI обладают достоверным анальгетическим эффектом, сопоставимым по силе с действием ряда применяемых лекарственных пре-паратов.
Для определения анальгетической активности использован метод термического раздражения («горячая пластинка» по Эдди и Леймбах) [5]. Показателем болевой чув-ствительности являлась длительность пребывания животного (в секундах) на горячей пластинке до наступления оборонительного рефлекса (облизывание лапок). Изучение проводилось на беспородных белых мышах массой от 18 до 22 г. Исследуемые соеди-нения вводили в дозе 50 мг/кг внутрибрюшинно, в виде взвеси в 2% крахмальной сли-зи, за 30 минут до помещения животного на металлическую пластинку, нагретую до 55оС. Контрольной группе животных вводили 2% крахмальную слизь, в качестве пре-парата сравнения использовали метамизол-натрия (анальгин) в дозе 93 мг/кг (ЕД50).
Наблюдения проводили через 30 минут, 1 и 2 часа. Статистическую обработку экспе-римента проводили с использованием критерия Стьюдента. Эффект считали достовер-ным при р<0,05. Результаты испытаний представлены в табл. 2.
Таблица 2 Анальгетическая активность исследуемых соединений
№ Доза, мг/кг, в/0 Кол-во животных Исходное время оборонительного рефлекса, сек Время оборонительного рефлекса, сек, через
30 мин 60 мин 120 мин
I 50 6 11,52±0,86 12,10±0,58 р<0,02 14,75±1,90 р<0,01 1б,20±3,02 р<0,01
IX 50 6 10,30±0,66 15,66±2,30 р<0,01 17,06±2,86 р<0,01 17,18±1,62 р<0,01
XVI 50 6 11,48±0,7б 8,0б±0,82 р<0,5 19,84±3,76 р<0,001 19,08±3,7б р<0,05
Контроль (2% крахм. слизь) 50 6 8,75±0,80 8,45±0,88 8,95±0,78 10,75±1,63
Метамизол-натрий 9з (LD50) 6 10,6±1,51 13,08±0,89 р<0,01 12,75±1,85 р<0,05 1б,33±3,02 р<0,01
Также представляло интерес изучить токсичность полученных соединений. Оп-ределение острой токсичности проводили на мышах обоего пола массой от 18 до 22 г. При сортировке животных учитывали отсутствие статистически достоверного откло-нения по массе. Каждое соединение исследовали на 10 животных. Экспериментальным животным вводили исследуемые вещества в 3% крахмальной слизи однократно перо-рально в диапазоне дозировок от 100 до 2000 мг/кг. За животными вели наблюдение в течение 10 дней, фиксируя поведение, интенсивность и характер двигательной актив-ности, наличие судорог, координацию движений, тонус скелетной мускулатуры, реак-ции на раздражители, потребление воды и пищи, изменение массы тела. Контрольной группе вводили перорально 3% крахмальную слизь [4]. В результатах опыта достоверно значимых отклонений в массе эксперименталь-ных животных выявлено не было, что свидетельствует об отсутствии симптомов инток-сикации. ЛД50 исследуемых соединений при однократном пероральном введении со-ставляет >2000 мг/кг. Выводы. Учитывая результаты первичных испытаний, можно резюмировать, что среди 3-гидрокси-3-пирролин-2-онов, содержащих в положении 4 гетероцикла тиеноиль-ный остаток и в положении 1 тиазоловый фрагменты целесообразен поиск веществ, обла-дающих анальгетическим действием при сравнительно низкой токсичности.
Литература
1. Синтез и фармакологическая активность 1-замещенных-5-арил-4-ацил-з-гидрокси-з-пирролин-2-онов / В.Л. Гейн [и др.] // Химико-фармацевтический журнал. - 1998. - № 9. - С. 23-25.
2. Простой трехкомпонентный синтез 4-ацил-5-фенил-1-(2-гетерил)-з-гидрокси-з-пирролин-2-онов / Т.А. Силина [и др.] // Химия гетероциклических соединений. - 1998. - № 6. - С.844-845.
3. Противовоспалительная и анальгетическая активность 5-арил-4-ацил-1-гетерил-з-гидрокси-з-пирролин-2-онов / Т.А. Силина [и др.] // Химико-фармацевтический журнал. - 2008. - Т. 42, № 5. - С.24-26.
4. Руководство по экспериментальному (доклиническому) изучению новых фармаколо-гических веществ : учеб.пособие для послевуз. проф. образования врачей ; под ред. Р.У. Хабрие-ва. - 2-е изд., перераб. и доп. - М. : Медицина, 2005. - 828 с.
5. Eddy, N.B. Synthetic Analgesics. II. Dithienylbutenyl- and Dithienylbutylamines / N.B. Ed-dy, D.J. LeimbaA // J. Pharmacol Exp. Ther. - 195з. - 107(з). - С. з85-з9з.
synthesis and biological activity Tha^m>!dr^xnt1reac:honzowU4itphi;sess of
OF 5-ARYL-3-HYDROXY-1- (2- pyrrolin-2-ones. The structure of new compounds
TUinmiVIl Л TUinDUEUnil Q was proved by the data of NMR-1H spectra. Toxicity,
IHIAZOLlLJ-4- IHIOrHENOIL-3- analgesic and bacteriostatic activity of new
PYRROLIN-2-ONES mA MARYAS°VTA c°mp°unds was studied. к^ words: з-hydroxy-з-
riRROL|N 2 ONES Н1Л. I*IARIAS°U| 1 .A. pyrrolin-2-ones, bacteriostatic activity, analgesic
SILINAi, V.L. GEINi E.V. VORONINAi R.R. MACHMUDOV activity, acute toxicity.
2 i Perm State Pharmaceutical Academy 2 Perm
State National Research University e-mail: marsikprovisor@mail.ru
