CC BY
24
МАТЕРИАЛЫ КОНФЕРЕНЦИИ «ОТЕЧЕСТВЕННЫЕ ПРОТИВООПУХОЛЕВЫЕ ПРЕПАРАТЫ»
35
М.П. Киселева, Л.М. Борисова, Л.В. Эктова,
B.А. Еремина, Н.И. Тихонова, М.В. Дмитриева,
C.Е. Миронова, Л.А. Медведева
исследование противоопухолевой активности новых соединений в ряду производных ГликоЗидов индолокарбазолов
ФГБУ«НМИЦ онкологии им. Н.Н. Блохина» Минздрава России, Москва, Россия
введение. Известна способность представителей класса N-гликозидов индоло[2,3-а]карбазолов к взаимодействию с внутриклеточными мишенями и индукции различных путей гибели опухолевых клеток. В связи с этим поиск ингибиторов топоизомераз, циклинзависимых киназ и ин-теркаляторов ДНК в ряду производных индолокарбазолов остается актуальным для лечения злокачественных опухолей. Данная работа является продолжением исследования противоопухолевой активности синтезированных в лаборатории химического синтеза НИИ экспериментальной диагностики и терапии опухолей (НИИ ЭДиТО) оригинальных соединений класса индолокарбазолов, отличающихся структурой агликона и/или углеводного остатка.
Цель исследования. Провести первичное исследование 10 новых углеводсодержащих производных индолокарбазолов на перевиваемых моделях опухолей мышей лимфо-лейкозе P-388 и эпидермоидной карциноме легкого Льюис (LLC) для сравнения противоопухолевых свойств соединений и выявления среди них наиболее активных.
материалы и методы. В опытах использованы мыши-гибриды F1 (C57B1/6 х DBA/2). Р-388 трансплантировали внутрибрюшинно (в/б) самкам, LLC перевивали самцам подкожно в область правой подмышечной впадины. Лечение начинали через 24 ч после перевивки P-388 и через 48 ч — LLC. Свежеприготовленные лекарственные формы производных индолокарбазолов с концентрацией действующего вещества 2 мг/мл изучались при ежедневном в/б введении в течение 5 дней в дозах 10, 25 и 50 мг/кг (на мышах с Р-388) и в дозах 10, 25, 35, 50 и 75 мг/кг (на мышах с LLC). Критериями оценки противоопухолевого эффекта служили торможение роста опухоли (ТРО, %) и увеличение продолжительности жизни (УПЖ, %) подопытных мышей по сравнению с контрольными.
результаты. Высокая противоопухолевая активность соединений ЛХС-1325 в дозе 25 мг/кг, ЛХС-1355 и ЛХС-1364 в дозах 50 мг/кг (УПЖ = 147, 127 и 130 % соответственно), установленная на Р-388, позволила изучить их эффективность на LLC. Соединение ЛХС-1325 оказалось неактивным, ЛХС-1364 в дозе 25 мг/кг проявило высокий, но кратковременный противоопухолевый эффект непосредственно после окончания лечения (ТРО = 76 %). При повышении дозы до 50 мг/кг ЛХС-1355 и ЛХС-1364 показали кратковременное противоопухолевое действие сразу после окончания лечения: ТРО = 54 и 65 % соответственно. Однако применение дозы 50 мг/кг вызывало гибель животных.
Заключение. При первичной оценке новых противоопухолевых агентов среди производных N-гликозидов индоло[2,3-а]карбазолов обнаружена высокая противоопухолевая активность соединения ЛХС-1364 при в/б
введении в дозе 25 мг/кг на перевиваемых опухолях мышей Р-388 (УПЖ = 104 %) и LLC (ТРО = 76 %).
С.Г. Клочков, А.В. Семаков, М.Е. Неганова, С.А. Пухов
сесквитерпеновые лактоны в медицинской химии: перспективы использования в качестве мультитаргетных субстанций с противоопухолевыми свойствами
ФГБУН ИФАВ РАН, Черноголовка, Московская область, Россия
Природные соединения — неисчерпаемый источник химического разнообразия, который можно сравнить только с современными методами комбинаторной химии. Вторичные метаболиты растений (флавоноиды, алкалоиды, сесквитерпеновые лактоны и т. д.) вызывают активный интерес в связи с их широким спектром биологической активности. Объект нашей работы — сесквитерпеновые лактоны, широко распространенные среди высших растений, особенно среди представителей семейства Astera-ceae. Биологическая активность, в том числе противоопухолевая, сесквитерпеновых лактонов хорошо известна и документирована. Первоначально считалось, что активность сесквитерпеновых лактонов связана с их способностью к алкилированию SH-групп белков. Теперь становится очевидным, что механизмы их действия сложны и разнообразны, и связаны не только с их алки-лирующей способностью.
В настоящем докладе обобщены данные о биологической активности сесквитерпеновых лактонов за последние 20 лет, рассмотрены основные биохимические цели. Рассмотрены соотношение структура—активность, молекулярные механизмы и потенциальное применение. Особый интерес представляют комплексные исследования, в которых взаимодействие сесквитерпеновых лактонов с ферментами и рецепторными структурами наиболее подробно рассматриваются на примере использования сесквитерпе-новых лактонов в качестве потенциальных противоопухолевых препаратов. В ИФАВ РАН ведутся многолетние работы по изучению сесквитерпеновых лактонов растений и разработке на их основе мультитаргетных противоопухолевых препаратов. Ведутся работы по созданию подходов к синтезу оригинальных функционально замещенных аналогов сесквитерпеновых лактонов путем трансформации углеродного скелета. Было получено около 50 скаффолдов лактонов, которые использовали для введения их в реакцию с различными нуклеофилами. Были проведены предварительные эксперименты. Эксперименты по определению антипролиферативной активности в отношении ряда опухолевых клеточных линий показали наличие высокой цитотоксичности (на уровне 10-8 М) для ряда соединений. Методами проточной цитометрии было показано, что среди соединений с антипролиферативным действием на уровне 10-8—10-9 М выявлены соединения, активирующие каспаз-ный путь апоптоза. Кроме того, эти соединения не только останавливают клеточный цикл в G2/M фазе, но и влияют на формирование актина цитоскелета клеток. Наиболее активные соединения могут быть предложены для проведения доклинических испытаний и создания на их основе
36 МАТЕРИАЛЫ КОНФЕРЕНЦИИ «ОТЕЧЕСТВЕННЫЕ ПРОТИВООПУХОЛЕВЫЕ ПРЕПАРАТЫ»
инновационных гибридных мультитаргетных противоопухолевых препаратов.
М.И. Ковалев1, А.М. Ковалева1, В.А. Олейников2,
A.А. Чистяков2, Ю.В. Алексеев3, В.М. Поминальная4,
B.И. Вознесенский4, Г.К. Ермошин1, А.О. Гарина1, А.Д. Москвичева1, Н.А. Титова1
рамановская спектроскопия в диагностике рака шейки матки
ФГАОУ ВО «Первый МГМУ им. И.М. Сеченова» Минздрава России (Сеченовский Университет), Москва, Россия; 2 ФГБУН ИФАВ РАН, Москва, Россия; 3ФГБУ ГНЦЛМФМБА России, Москва, Россия; 4ГКБ им. Д.Д. Плетнёва, Москва, Россия
введение. За 10 лет, с 2005 по 2014 г., заболеваемость раком шейки и тела матки увеличилась в РФ в абсолютных цифрах на 31,8 % — с 30,2 до 39,8 тыс. женщин в год. Летальность пациентов от рака шейки матки (РШМ) на 1-м году после постановки диагноза за 2004—2014 гг. составляла от 16,3 до 20,8 %. Эти данные свидетельствуют о высокой актуальности проблемы ранней диагностики РШМ.
Цель исследования. Повысить эффективность диагностики РШМ с помощью использования Рамановской спектроскопии.
материалы и методы. Исследование выполнено в Институте биоорганической химии им. академиков М.М. Шемякина и Ю.А. Овчинникова РАН на уникальной научной установке «Система зондово-оптической 3D-корреляци-онной микроскопии». Для возбуждения использовали аргоновый лазер с длиной волны 488 нм, мощность излучения 50 мВт. Исследовали спектральные характеристики тканей шейки матки (ШМ) с верифицированным путем гистологического исследования плоскоклеточным раком. В качестве контроля исследовали ткани интактной ШМ.
результаты. Выявлены различия в спектральных характеристиках между патологически измененными тканями ШМ в сравнении с тканями без патологических изменений. По мере увеличения длины волны наведенного излучения интенсивность флуоресценции ткани ШМ с плоскоклеточным раком увеличивалась. Интенсивность флуоресценции в ткани ШМ с плоскоклеточным раком была выше, чем в ткани интактной ШМ. Разница в интенсивности флуоресценции составляла от 37 до 151 % (в среднем 129 %).
Заключение. 1. Метод Рамановской спектроскопии может быть использован для диагностики РШМ при обработке биопсийного и операционного материала. 2. Интенсивность флуоресценции в тканях ШМ с плоскоклеточным раком превышает интенсивность флуоресценции в интактных тканях ШМ без патологических изменений в 1,4—2,5 раза.
А.М. Ковалева1, М.И. Ковалев1, И.П. Шилов2, Ю.В. Алексеев3, В.И. Вознесенский4, В.М. Поминальная4, Н.А. Титова1, А.Д. Москвичева1, А.О. Гарина1, Г.К. Ермошин1, А.В. Иванов5
диагностика рака ШЕйки матки по оценке интенсивности люминесценции при помощи спектрофлуориметрии
ФГАОУ ВО «Первый МГМУ им. И.М. Сеченова» Минздрава России (Сеченовский Университет), Москва, Россия;
Фрязинский филиал ФГБУНИРЭ РАН, Фрязино, Московская область, Россия; ФГБУ ГНЦ ЛМ ФМБА России, Москва, Россия; 4ГКБ им. Д.Д. Плетнёва, Москва, Россия; ФГБУ«НМИЦ онкологии им. Н.Н. Блохина» Минздрава России, Москва, Россия
введение. В РФ за 10 лет, с 2005 по 2014 г., индекс заболеваемости раком шейки и тела матки увеличился на 49,2 % (с 39,4 до 58,8 случая на 100 тыс. женщин). Каждая 5-я женщина с вновь установленным диагнозом «рак шейки матки» (РШМ) погибает в течение года после постановки диагноза. Эти данные свидетельствуют о высокой актуальности проблемы разработки доступной методики ранней диагностики РШМ.
Цель исследования. Разработать методику диагностики in vivo РШМ с использованием иттербиевых комплексов порфиринов (ИКП) и лазерной спектрофлуориметрии.
материалы и методы. Под наблюдением находились 90 женщин, которые были разделены на 3 группы. В 1-ю группу вошли женщины с плоскоклеточным РШМ. Диагноз верифицировали при помощи гистологического исследования. Во 2-ю — женщины с плоскоклеточными интра-эпителиальными поражениями высокой степени (HSIL). В 3-ю (контрольную) вошли женщины без патологических изменений шейки матки (ШМ). Измеряли уровень люминесценции тканей ШМ после их сенсибилизации ИКП. В качестве носителя ИКП использовали гель «Флюро-скан». Для измерения интенсивности люминесценции использовали лазерно-волоконный флуориметр, который позволяет одновременно облучать ткани ШМ лазерным излучением в диапазоне полосы Соре и измерять интенсивность люминесценции ИКП в ИК области спектра.
результаты. Выявлены достоверные (р <0,001) различия между 1, 2 и 3-й группами по уровню люминесценции. Интенсивность люминесценции от тканей ШМ в 1-й группе варьировала от 5 до 9 мВ, во 2-й — от 0,25 до 0,75 мВ, в 3-й - от 0,016 до 0,026 мВ.
Заключение. 1. Методика люминесцентной диагностики позволяет выявлять объективные различия между морфологически нормальными и патологически измененными тканями ШМ. 2. Методика отличается высокой чувствительностью: интенсивность люминесценции при РШМ увеличивается по сравнению с интактной ШМ в десятки раз.
