CC BY
22
■ Т. Е. Макарова и др. Состояние проницаемости гематоэнцефалического барьера у вольных бактериальными гнойными менингитами
Литература:
1. Платонов А. А. Заболеваемость гнойными менингитами у детей в регионах России / А. А. Платонов, М. И. Николаев // Эпидемиология и инфекционные болезни. — 2007. — № 3. — С. 10—18.
2. Сорокина М. Н., Иванова В. В., Скрипченко Н. В. Бактериальные гнойные менингиты у детей. — М., 2003. — 376 с.
3. Верещагин Е. И. Состояние проницаемости ГЭБ у больных с ЧМТ / Е. И. Верещагин, Ю. С. Дорожкин // Неврология и психиатрия. — 2002. — № 4. — С. 36—39.
4. Алексеева Л. А. Диагностическое значение белкового спектра цереброспинальной жидкости при бактериальных и вирусных менингитах у детей / Л.А.Алексеева, М.Н.Сорокина // Клин. лабораторная диагностика.— 2001.— №7.— С. 215—219.
5. Эпштейн Э. Белки мозга в спинномозговой жидкости в норме и патологии: Пер. с анг. — М. 1998.
6. Клинико-эпидемиологические и иммунологические особенности острых нейроинфекций у детей в современных условиях / С.С.Афанасьев и др. //Ж. теоретической и практической медицины. — 2004. — № 1. — С. 23—26.
Роль цитокинов в ПАТОГЕНЕЗЕ ОСЛОЖНЕНИЙ у детей c менингококковыми менингитами
О. А. Рычковд, Э. А. Кашуба, Т. Г. Дроздова, О. В. Пряхинд, А. А. Бельтикова, М. Д. Орлов
ГОУ ВПО Тюменская государственная медицинская академия, Областная инфекционная клиническая больница, Тюмень
Проведено исследование фагоцитарной функции и цитохимического профиля нейтрофилов, уровня цитокинов в сыворотке крови у пациентов с менингококковым менингитом. Показано различие профилей провоспалительных и противовспалительных цитокинов в сыворотке в зависимости от наличия таких осложнений, как отек-набухание головного мозга и септический шок. Ключевые слова: менингококковый менингит, цитокины, нейтрофилы, фагоцитоз, цитохимия
УДК 616.98
RoLe of cytokines in pathogenesis of compucaTions in chiLdreN wrm Meningococcus meningitis
O. A. Rychkova, Je. A. Kashuba, T. G. Drozdova, O. V. Prnarnna, A. A. Bel'tikova, M. D. Orlov
The Federal State Institution of Higher Professional Education Tumen' State Medical Academy The Regional Infectious Diseases Clinical Hospital, Tumen'
A study of fagocytal function and cytochemical profile of neutrophils as well as the level of cytokines in blood serum in patients with Meningococcus meningitis was conducted. Differences of pro-inflammatory and anti-inflammatory cytokines in serum depending on such complications as brain edema and swelling and skeptical shock were found.
Key words: Meningococcus meningitis, cytokines, neutrophils, phagocytosis, cytochemistry
Менингококковый менингит (ММ) — тяжелое инфекционное заболевание, при котором в процесс вовлекаются мягкие мозговые оболочки основания головного мозга и верхней части спинного мозга. Тяжесть заболевания нередко усугубляется присоединением осложнений, из которых наиболее часто встречаются отек-набухание головного мозга (ОНГМ) и септический шок. Развитие осложнений в остром периоде ММ ухудшает прогноз заболевания даже в условиях адекватной специфической терапии [1].
Основное звено первичной защиты организма от распространения микробов представлено нейтрофильными гранулоцитами (Нф). Нф являются тем ключевым фактором в цепи защитных реакций организма, который во многом определяет возможность локализации возбудителя в месте инвазии [2, 3].
Антимикробная активность Нф регулируется моноцитами и лимфоцитами главным образом через цитокины. Дисбаланс в выработке цитокинов на уровне местной ин-
Рычкова Ольга Александровна — к. м. н., доцент кафедры инфекционных болезней с курсами детских инфекций, иммунологии и аллергологии ТюмГМА; 625002, Тюмень, ул. Комсомольская, 54а; (3452) 24-02-09
фекции может нарушить существующие в системе связи, что приводит к генерализации инфекции и является одной из ведущих причин летальности у больных с инфекцион-но-воспалительными заболеваниями [4]. Оценка содержания цитокинов в биологических жидкостях помогает охарактеризовать состояние иммунной системы организма. Изучение уровня цитокинов позволяет получить информацию о функциональной активности иммунокомпе-тентных клеток, о тяжести воспалительного процесса, его переходе на системный уровень и прогнозе, о соотношении процессов активации Т-хелперов 1 и 2-го типов, что очень важно при дифференциальной диагностике ряда инфекционных и аутоиммунных заболеваний. Патологические состояния при большинстве инфекций, в том числе септические, связаны с нарушением иммунорегуляторных процессов на уровне дифференцировки Т-лимфоцитов, приводящих к нарушению баланса ТЫ/ТЬ2 и анергии клеточных эффекторов иммунитета [4, 5]. Принятая в настоящее время концепция механизмов иммунного ответа показывает, что секреция цитокинов ^-2 и Т^-а ведет к активации ТЫ-типа ответа, оказывающего влияние на клеточный иммунитет, а секреция ^-4, ^-6, ^-10 обеспечивает ТЬ2-тип ответа и стимуляцию гуморального звена иммунитета. Реализация механизмов действия провоспа-
■ О. А. Рычковл и др. Роль иитокинов в патогенезе осложнений у шей c мЕнингококковыми менингитами
Таблица 1. Показатели фагоцитоза, цитохимического профиля Нф и цитокинов при ММ в зависимости от развития осложнений
*— p <0,05 по сравнению с нормой
лительных цитокинов отличается их синергидным действием на клетку-мишень, в связи с чем важна комплексная оценка стимулирующих и подавляющих эффектов цитокинов в развитии инфекционного заболевания [6, 7].
Целью исследования было определение роли цитокинов в развитии осложнений при ММ.
Материалы и методы исследования
Обследовано 38 больных от 1 до 18 лет с ме-нингококковыми менингитами при поступлении в стационар: 1 группа (17 больных) — пациенты с неосложнен-ным течением ММ, 2 группа (21 пациент) — больные с ММ, осложненным ОНГМ и/или септическим шоком. Контрольную группу составили 24 здоровых ребенка. Исследовали фагоцитарную функцию, активность миелопе-роксидазы (МПО) и содержание катионных белков в Нф, определяли концентрацию цитокинов в плазме крови.
Фагоцитарную функцию Нф оценивали, подсчитывая фагоцитарный индекс (ФИ) и фагоцитарное число (ФЧ) по методике в модификации И. В. Нестеровой с соавт. (1996). Для выявления катионных белков в Нф использован цитохимический метод с красителем прочным зеленым (метод Пигаревского модифицированный). Цитохимическое определение активности миелопероксидазы осуществляли бензидиновым методом (Sato A.). Количественная характеристика содержания в клетках продуктов цитохимических реакций выражалась в единицах дисперсионной оптической плотности при сканирующей денсито-метрии с использованием лабораторного комплекса «Ме-кос-Ц1». Концентрацию цитокинов (IL-1, IL-2, IL-4, IL-6, IL-8, IL-10, TNF-a) в плазме определяли методом ИФА с использованием тест-систем «BCM Diagnostics» (США) на планшетном ридере «Мультискан» (Финляндия).
Статистическую обработку полученных результатов проводили с использованием стандартных программ Excell 2000. Определяли основные статистические характеристики: среднее (M), стандартную ошибку среднего (m). Проверку гипотезы проводили с помощью t-критерия Стьюдента.
Результаты и их обсуждение
В ходе проведения анализа выявлено, что ме-нингококковый менингит является генерализованной бактериальной инфекцией, сопровождающейся выраженным повышением количества клеток, способных к фагоцитозу при высокой их поглотительной способности (табл. 1). Установлено, что значительное повышение ФИ и ФЧ отмечается в обеих группах обследуемых пациентов. Снижение МПО и катионного белка в Нф характерно для острого воспалительного процесса и наблюдается в разгаре различных инфекционных заболеваний бактериальной и вирусной этиологии. По данным литературы, изменения содержания катионного белка коррелируют со степенью тяжести заболевания [4]. Полученные нами результаты также выявили снижение концентрации катионного белка и МПО в Нф. Эти изменения были достаточно выраженные в обеих группах обследуемых (табл. 1). Повышение таких фагоцитарных функций Нф, как захват и поглощение в сочетании со снижением их метаболической активности может свидетельствовать о незавершенности фагоцитоза и способствовать генерализации инфекционного процесса и пролонгации воспаления.
Определение провоспалительных цитокинов, в первую очередь ^-6 и ^-8, имеет диагностическое и прогностическое значение, а также используется при оценке эффективности проводимой терапии. У больных ММ происходит активация выработки провоспалительных цитокинов: ^-6 и ^-8, достоверно выше в группе больных с осложненным течением (табл. 1). Наиболее сильным индуктором ^-8 является бактериальный липополисахарид, что, по-видимому, определяет зависимость концентрации этого цитокина от уровня бактериальной нагрузки при различных по тяжести формах инфекции. Кроме того, гиперпродукция ^-8 может быть связана с развитием выраженной местной воспалительной реакции в мягкой мозговой оболочке, поскольку доказана стимуляция синтеза ^-8 как клетками воспалительного очага, так и внутрисосудистым свертыванием крови в области повреждения тканей [8]. Концентрация другого провоспалительного цитокина — Т^-а у больных с не-осложненным течением ММ практически не отличалась от таковой в контрольной группе и была повышена в 1,5 раза у больных с осложненным течением болезни (2-я группа). В настоящее время считается, что высокая концентрация Т^-а вызывает органные дисфункции, которые имеют место при тяжелом сепсисе и септическом шоке. В подобной ситуации в клинической практике встает вопрос о применении антицитокиновой терапии [1, 9].
В то же время концентрация основного провоспали-тельного цитокина (^-1) снижается в обеих группах по сравнению с контрольной (в 1 группе — в 1,4 раза, во 2-ой группе — в 2 раза), что может обусловливать низкий уровень реализации противоинфекционной защиты и способствует генерализации процесса с поражением мягких мозговых оболочек. По данным литературы ^-1 стимулирует развитие целого комплекса защитных реакций организма, направленных на ограничение распространения инфекции, элиминацию внедрившихся возбудителей и восстановлению поврежденных тканей [2, 9].
Показатель Норма (n =24) 1-я группа (n =17) 2-я группа (n =21)
ФИ, % 45 65,3 ± 16,2* 64,5 ± 14,8
ФЧ 2,8 26,6 ± 8* 30 ± 12,2*
Миелопе-роксидаза 0,254 ± 0,027 0,06 ± 0,02* 0,08 ± 0,02*
Катионные белки 0,158 ± 0,01 0,09 ± 0,01 0,1 ± 0,01
К-1, усл. ед. 1,4 ± 0,24 1,1 ± 0,1 0,73 ± 0,2*
Т№-б, усл. ед. 24,7 ± 6,4 26 ± 3,2 38,2 ± 4,4*
К-2, усл. ед. 17,2 ± 3,6 22,5 ± 4 3,7 ± 1,4*
К-4, усл. ед. 0,17 ± 0,02 0,6 ± 0,07* 0,18 ± 0,09
К-6, усл. ед. 0 15,2 ± 3,6* 20,3 ± 2,7*
К-8, усл. ед. 0 5 ± 1,3* 24 ± 1,9*
К-10, усл. ед. 1,8 ± 0,1 1,66 ± 0,5 0,37 ± 0,09*
■ О. А. РычковА и др. Роль цитокинов в патогенезе осложнений у лЕТЕй c мЕнингококковыми МЕНИНГИТАМИ
У больных с неосложненным ММ отмечалось незначительное повышение (в 1,3 раза) в сыворотке крови уровня лимфокина, вырабатываемого Th-1 лимфоцитами (IL-2), в то время как при осложненном течении концентрация этого цитокина в крови значительно снижалась (в 4,6 раз по сравнению с контролем). Эти изменения свидетельствуют об угнетении клеточного звена иммунитета при тяжелом и осложненном течении ММ.
Были выявлены разнонаправленные изменения концентрации в плазме лимфокинов, вырабатываемых Th2-лимфоцитами (IL-4, IL-10). Уровень IL-10 при неослож-ненном менингите практически не отличался от группы сравнения, в то время как при осложненном течении уменьшался в 5 раз. Концентрация IL-4 в плазме увеличивалась по сравнению с контрольной группой в 3,5 раза в 1 -ой группе и не отличалась от контроля во 2-ой группе. Учитывая то, что IL-10 и IL-4 являются основными противовоспалительными цитокинами, возможно, эти изменения их уровня в крови у больных с ММ приводят к недостаточной ингибиции провоспалительных интерлейкинов и развитию таких осложнений, как ОНГМ и ИТШ.
Выводы
1. При неосложненном течении ММ отмечается умеренное повышение концентрации как провоспалительных (IL-1, IL-2,IL-8, TNF-а), так и противовоспалительных цитокинов (IL-4, IL-6, IL-10), что может быть расценено как необходимое условие для защиты от инфекционного агента и, в то же время, направлено на защиту организма от системного повреждающего действия высоких концентраций провоспалительных цитокинов.
2. У больных с осложненным течением заболевания отмечается повышение концентрации провоспалительных цитокинов ( IL-8, TNF-а) при неизмененном и сниженном уровне противовоспалительных (IL-4, IL-10), что может лежать в основе патогенеза таких системных осложнений как септический шок и отек-набухание головного мозга.
3. Выраженное снижение основного Th 1 -цитокина — IL-2 в группе больных с осложненным течением заболева-
ния свидетельствует о нарушении баланса Th1/Th2 и развитии дисфункции иммунной системы в результате анергии клеточных эффекторов иммунитета у данных пациентов.
4. Низкая концентрация основного провоспалитель-ного цитокина — IL-1 у пациентов в обеих группах может обусловливать низкий уровень реализации противоин-фекционной защиты и способствовать генерализации процесса с поражением мягких мозговых оболочек и развитием менингита.
5. Выраженное снижение основного Th 1-цитокина — IL-2 и гиперпродукция IL-8 может служить критерием прогноза осложненного течения менингококкового менингита.
Литература:
1. Этиология и лабораторная диагностика гнойных бактериальных менингитов / Королева И. С. и др. // Эпидемиология и инфекционные болезни. — 2005. — № 3. — С. 5—9.
2. Долгушин И. И., Бухарин О. В. Нейтрофилы и гомеостаз. — Екатеринбург.: Наука, 2001. — 280 с.
3. Козинец Г. И., Высоцкий В. В., Погорелов В. М., Еровиченков А. А., Малов В. А. Кровь и инфекция.— Триада-Фарм, 2001.— 452 с.
4. Тотолян А. А. Место цитокинов в лабораторной диагностике // Лаборатория. — 1 999 — № 1. — С. 20—22.
5. СимбирцевА. С. Интерлейкин-8 и другие хемокины // Иммунология. — 1999. — № 4. — С. 9—14.
6. Козлова С. Н. Иммунофенотипирование лимфоцитов и уровень цитокинов сыворотки у беременных с вирусным гепатитом С / С. Н. Козлова, Ю. А. Топорищев // Цитокины и воспаление. — 2004. — Т. 3, №3. — С. 10—17.
7. Thomson A. W. The cytokine handbook (2nd Edition). Academic Press, London. — 1994. — 615 p.
8. Демьянов А. В. Диагностическая ценность исследования уровней цитокинов в клинической практике / А. В. Демьянов, А. Ю. Котов, А. С. Симбирцев // Цитокины и воспаление.— 2003. — Т. 2, № 3. — С. 20—36.
9. Дисбаланс цитокинов как фактор патогенеза гнойно-септических заболеваний и иммунокорригирующие эффекты лейкин-ферона / В. П. Кузнецов, В. П. Маркелова, В. А. Лазанович, Н. В. Колесникова //Мед. иммунология. — 2002. — Т. 4, № 1. — С. 11—20.
Роль РЕСПИРАТОРНО-СИНЦИТИАЛЬНОЙ ВИРУСНОЙ ИНФЕКЦИИ В РАЗВИТИИ ОСТРЫХ СТЕНОЭИРУЮШИХ ЛАРИНГОТРАХЕИТОВ У ДЕТЕЙ
С. Л. Бевза, Ф. С. Харламова, В. Ф. Учдйкин
ГОУ ВПО Российский ГОСУДАРСТВЕННЫЙ МЕДИЦИНСКИЙ УНИВЕРСИТЕТ РОСЗДРАВА, МОСКВА
Обследовано 214 больных в возрасте от 6 мес. до 14 лет с острым стенозирующим ларинготрахеитом (ОСЛТ). Показана роль РСВ (респираторно-синцитиального вируса) при ОСЛТ: моно РСВ-инфекция составила 17,29%, микст РСВ-инфекция — 14,02% случаев. Повторный и рецидивирующий круп выявлялись в 10,81 и 27,03% случаев соответственно. Клинические проявления существенно не отличались от ОРВИ другой этиологии.
Ключевые слова: респираторно-синцитиальная инфекция, острый стенозирующий ларинготрахеит, острый обструктивный бронхит, дети
УДК 616.921.5
