CC BY
40
«Дни иммунологии в СПб 2017» Immunology Days in St. Petersburg 2017
Медицинская Иммунология Medical Immunology (Russia)/Meditsinskaya Immunologiya
РОЛЬ АУТОАНТИТЕЛ К CD4 И РЕГУЛЯТОРНОГО РЕВМАТОИДНОГО ФАКТОРА В ГИБЕЛИ СD4+ ЛИМФОЦИТОВ У КРЫС, ИММУНИЗИРОВАННЫХ gp120 ВИЧ-1
Храмова Т.В., Снигирёв А.Я., Ворожцова В.С., Вайтина А.М.
ФГБОУ ВО «Удмуртский государственный университет», Ижевск, Россия БУЗ УР «Удмуртский республиканский центр по профилактике и борьбе со СПИДом и инфекционными заболеваниями», Ижевск, Россия
Введение. Сегодня одним из центральных вопросов патогенеза ВИЧ-инфекции, сдерживающим разработку эффективных способов лечения и предотвращения заболевания, является выяснение механизма гибели неинфи-цированных ВИЧ CD4+ лимфоцитов, которые составляют основную массу гибнущих клеток при ВИЧ-инфекции. Предложенные в разное время гипотезы, объясняющие механизм истощения незараженных CD4+ лимфоцитов при ВИЧ-инфекции, либо не получили экспериментального подтверждения, либо не считаются полностью доказанными. Наиболее непротиворечивой и обоснованной является аутоиммунная гипотеза. Согласно аутоиммунной гипотезе СПИДа, основной причиной гибели неза-раженных ВИЧ CD4+-лимфоцитов, является аутоиммунная реакция против CD4.
Цель. Исследование роли аутоантител к CD4, продукцию которых индуцирует gp120 ВИЧ, в гибели CD4+ лимфоцитов.
Материалы и методы. Крыс Wistar (n = 12) иммунизировали рекомбинантным gp120 гликопротеином ВИЧ-1 (ACROBiosystems) однократно в/к в составе неполного адъюванта Фрейнда (НАФ) в дозе 20 мкг. Уровень антител к gp120 ВИЧ-1 в плазме крови крыс определяли методом иммуноферментного анализа. Определяли уровень антител к рекомбинантному CD4 человека и уровень аутоантител к рекомбинантному CD4 крыс методом иммуноферментного анализа. Кроме того, определяли аутоантитела к CD4+ лимфоцитам крыс с помощью разработанного нами метода конкурентного иммуноцитохи-мического анализа. Количество CD4+ лимфоцитов в периферической крови крыс измеряли методом проточной цитофлуориметрии, используя меченые FITC антитела к CD4 крыс. Также определяли титр регуляторного ревматоидного фактора методом агглютинации танизиро-ванных нагруженных гомологичным IgG эритроцитов.
Результаты. Обнаружено, что иммунизация gp120 ВИЧ-1 вызывает продукцию аутоантител к CD4 у всех иммунизированных крыс, в то время как у контрольных крыс, получивших инъекцию НАФ, аутоантител к CD4 не обнаружено. Показано, что аутоантитела к CD4 связываются как с рекомбинантным СD4 крыс, так и с мембра-носвязанным CD4 крыс. Индуцированные иммунизацией gp120 аутоантитела к CD4 крысы способны связывать также рекомбинантный CD4 человека. Полученные факты служат подтверждением того, что gp120 ВИЧ-1 способен не только индуцировать продукцию антител к gp120, но и вызывать активацию аутореактивных лимфоцитов, продуцирующих аутоантитела, перекрестно реагирующие с CD4 крысы и человека.
У иммунизированных крыс, продуцирующих ауто-антитела к CD4, наблюдалось транзиторное снижение количества CD4+ лимфоцитов. Непосредственной связи
между уровнем антител к CD4+ лимфоцитам и количеством CD4+ клеток обнаружено не было. Однако снижение числа CD4+ лимфоцитов совпадало со спонтанным повышением уровня регуляторного ревматоидного фактора в крови. Обнаружена обратная корреляция между уровнем регуляторного ревматоидного фактора и количеством CD4+ лимфоцитов в крови крыс, продуцирующих аутоантитела к CD4, в ответ на иммунизацию gp120 гликопротеином ВИЧ-1 (г = - 0,73, р < 0,05). Регуляторный ревматоидный фактор был исследован у крыс с целью выяснения его роли в регуляции иммунного ответа к gp120, так как ранее на нескольких экспериментальных моделях было показано его участие в предотвращении развития аутоиммунных заболеваний (Beduleva, 2015). В регуляции иммунного ответа против gp120 ВИЧ регуляторный ревматоидный фактор участия не принимает.
Заключение. Таким образом, гибель CD4+ лимфоцитов у крыс, иммунизированных gp120 ВИЧ-1, является результатом совместного действия аутоантител к CD4 и регуляторного ревматоидного фактора. Мы предполагаем, что аутоантитела к CD4 вызывают активацию CD4+ лимфоцитов, что приводит к экспрессии на их поверхности активационных молекул, к которым специфичен регуляторный ревматоидный фактор. Связывание последнего ведет к гибели CD4+ лимфоцитов. Данное предположение не противоречит ранее обнаруженному факту, что регуляторный ревматоидный фактор убивает активированные CD4+ лимфоциты. Вопрос о том, какие именно молекулы активации на CD4+ лимфоцитах являются ли-гандом для регуляторного ревматоидного фактора, является предметом дальнейших исследований.
РЕАКЦИЯ ТУЧНЫХ КЛЕТОК В СЕМЕННИКАХ НА РАЗЛИЧНЫЕ ВИДЫ ИХ ПОВРЕЖДЕНИЯ
Храмцова Ю.С., Тюменцева Н.В., Юшков Б.Г., Бухарина А.Ю.
Институт иммунологии и физиологии УрО РАН, УрФУ, Екатеринбург, Россия
Тучные клетки являются неотъемлемым компонентом иммунного микроокружения семенников, а именно важными посредниками в управлении Т-клеточной толерантностью. Они также выделяют ряд цитокинов, участвующих в физиологическом апоптозе зародышевых клеток, происходящем в нормальном яичке. Вместе с тем, выявляется отчетливая отрицательная корреляция между такими показателями, как число мастоцитов и состояние сперматогенеза. Вырабатывая провоспалительные медиаторы, они могут усугублять воспалительные процессы, происходящие в яичке после повреждения. Причины, которые могут привести к повреждению семенников, самые разнообразные. Однако остается невыясненным вопрос о типе реакции тучных клеток в ответ на разные виды повреждения яичек. В связи с этим целью работы является изучение реакции тучных клеток в семенниках на различные виды его повреждения.
Материалы и методы. Исследование проведено на 35 половозрелых крысах-самцах линии Wlstaг, которые были разделены на 4 группы: 1) интактные; 2) животные с проколом левого семенника иглой диаметром 3 мм; 3) животные с тупой травмой левого семенника путем его сдав-ления; 4) животные с экспериментальной моделью ва-рикоцеле. Семенники исследовали на 7 и 30 сутки после воздействия. Для подсчёта тучных клеток в тканях срезы
