CC BY
23
DOI 10.31588/2413-4201-1883-237-1-151-155
УДК: 616- 0025 + 6362 + 616-07
РЕЗУЛЬТАТЫ КОМПЛЕКСНЫХ НАУЧНЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ ПО ТУБЕРКУЛЕЗУ
Протодьяконова Г.П. - д.в.н.
ФГОУ ВО «Якутская государственная сельскохозяйственная академия»
Ключевые слова: туберкулез, M.bovis, M.tuberculosis, вакцина БЦЖ, атипичные микобактерии, Ш1Д--туберкулин, средства диагностики и профилактики туберкулеза, пробиотики
Keywords: tuberculosis, M.bovis, M.tuberculosis, BCG vaccine, atypical mycobacteria, PPD-tuberculin, diagnostic aids and tuberculosis prophylaxes, probiotic
В ряду хронических инфекций туберкулез сельскохозяйственных животных продолжает занимать ведущее место, причиняя коллективным и частным хозяйствам значительный экономический ущерб, представляя несомненную опасность для здоровья людей, поэтому своевременная диагностика туберкулеза, предупреждение возникновения и распространения этой зоонозной инфекции имеет большое социальное значение [2 ,3, 7, 8].
Ситуация по туберкулезу среди населения республики остается напряженной. Высокими являются, по сравнению с РФ, показатели заболеваемости детей и взрослого населения. Растет число больных туберкулезом в столице республики и количество больных с множественной лекарственной устойчивостью.
Животноводческие хозяйства Республики Саха (Якутия) оздоровлены от туберкулеза и в течение трех последних десятилетий республика остается одной из относительно благополучных по туберкулезу крупного рогатого скота в Дальневосточном регионе.
Общеизвестно, что туберкулез принадлежит к числу межвидовых инфекций, возбудители которых склонны к циркуляции в организме многих видов животных и миграции между животным и человеком [11, 12, 14]. В 50-80-е годы ХХ столетия краевой эпидемиологической особенностью Якутии считалось распространение возбудителя туберкулеза бычьего вида среди людей, была установлена корреляция между показателями инфицированно-сти туберкулезом животных и людей.
Чаще микобактерии туберкулеза бычьего вида выделялись у больных из сельскохозяйственных районов республики, где развито животноводство [8, 12].
В последние годы, в связи с улучшением эпизоотологической обстановки по туберкулезу крупного рогатого скота случаи выявления возбудителя туберкулеза бычьего вида у людей значительно сократились. В 1997 году данный показатель составлял 0,6%, а с 1998 года не зарегистрирован.
За последние годы не всегда прослеживается четкая связь между уровнем заболеваемости туберкулезом жителей села и эпизоотической обстановкой в данной местности. Поэтому проблема взаимосвязи туберкулеза человека и животных сохраняет свою актуальность и в настоящее время и требует дальнейшего всестороннего изучения.
В 1998 году в результате совместных исследований с НПО «Фтизиатрия» Министерства здравоохранения Республики Саха (Якутия) из биоматериала крупного рогатого скота Намского района республики, реагировавшего на ППД туберкулин для млекопитающих, была впервые в республике выделена культура микобак-терий туберкулеза человеческого вида. Источником заражения в данном случае являлся человек больной туберкулезом, который состоял на учете в противотуберкулезном диспансере.
В 2001 году в Сунтарском районе вновь был зарегистрирован туберкулез крупного рогатого скота (до этого в 1996 году) в частном подворье с. Сунтар.
Идентификацией выделенных культур микобактерий определены виды возбудителей туберкулёза - M.bovis и M.tuberculosis в ассоциации.
Комплексными исследованиями установлена причина вспышки туберкулеза в ранее оздоровленных хозяйствах - это больные туберкулезом хозяева животных и толерантные животные, полученные от коров из неблагополучного хозяйства, бесконтрольно оставленных и переданных в другое село во время оздоровительных мероприятий. В начале 2004 г. в крестьянском хозяйстве Намского района, занимающегося выращиванием свиней, был установлен диагноз туберкулез, из проб биологического материала свиней были выделены культуры микобактерий, которые идентифицированы как вирулентные микобактерии туберкулеза человеческого вида.
Таким образом, комплексные исследования подтверждают особенности туберкулеза в нашей республике как межвидовой инфекции. Несмотря на проведенные оздоровительные и профилактические мероприятия, туберкулез сельскохозяйственных животных в республике все еще проявляется в виде спорадических случаев и с позиций теории эпизоотических закономерностей не исключается их периодическая повторяемость. Источниками возникновения спорадического туберкулеза среди сельскохозяйственных животных в республике за последнее время являются неблагополучные по туберкулезу в прошлом хозяйства, а также больные туберкулезом люди - владельцы животных и работники хозяйств, что требуют со стороны медицинской и ветеринарной службы постоянного жесткого мониторинга за эпизоотическим состоянием животноводческих хозяйств.
В связи с этим нами совместно с сотрудниками Якутского НИИ туберкулеза было подготовлено методическое пособие «Комплексные противоэпидемические и ветеринарно-санитарные мероприятия в очаге туберкулезной инфекции животноводческих хозяйств», которое утверждено коллегией Департамента ветеринарии МСХ РС (Я), учеными советами факуль-
тета ветеринарной медицины Якутской государственной сельскохозяйственной академии и Якутским НИИ туберкулеза [7]. Следующая проблема, требующая комплексного подхода - это проблема неспецифических туберкулиновых реакций у крупного рогатого скота и возрастающая в современных условиях роль нетуберкулезных микобактерий (микобактериозов) в патологии человека. Необоснованный убой реагирующих животных, дополнительные затраты на дифференциальную диагностику, потеря приплода и продукции животных - это неполный перечень последствий реагирования животных, сенсибилизированных нетуберкулезными микобак-териями, на диагностический тест ППД туберкулином для млекопитающих [2, 4, 8, 13]. Причиной этого, как показали комплексные исследования, могут быть атипичные микобактерии, а также иммунологический дефект, развивающийся у животных при актиномикозах, микозах, при патологиях неинфекционной природы, среди которых преобладают лимфадениты, болезни печени, бронхопневмонии, инвазии. Взаимосвязи между частотой тех ли иных причин реагирования и географическими особенностями территорий нами не выявлено. В разрезе отдельных улусов существенной разницы в частоте патологий не выявлялось.
Выбраковка животных, проявивших неспецифическое реагирование на ППД-туберкулин для млекопитающих, в том числе независимо от их племенной и хозяйственной ценности, наносит, как известно большой экономический ущерб их владельцам. Так, в качестве примера можно привести Мегино-Кангаласский улус, в котором только за 2002 год было убито 46 коров, в том числе 41 животное из частного сектора. При этом туберкулез у выбракованных животных не был подтвержден.
В связи с наличием большого поголовья животных, неспецифически сенси-били-зированных к ППД туберкулину для млекопитающих, нами в 2000 - 2002 г.г. были разработаны рекомендации «Выяснение причин туберкулиновых реакций у крупного рогатого скота в благополучных
по туберкулезу хозяйствах Республики Саха (Якутия)», в которых рекомендуется повторное исследование реагирующих животных проводить 1И 1Д --туберкулином для млекопитающих в дозе 2500 МЕ и использовать прижизненную ПЦР диагностику.
Дальнейшие исследования проведены в 2002-2010 г.г. в Якутском НИИ сельского хозяйства. Исследовано 48 культур нетуберкулезных микобактерий, изолиро-ванных от реагировавших на туберкулин животных в благополучных по туберкулезу крупного рогатого скота хозяйствах Якутии и 6 культур, выделенных от людей в НПО «Фтизиатрия».
У исследуемых микобактерий были изучены морфологические, культуральные и биохимические свойства. Хемотаксоно-мические особенности жирно-кислотного состава клеток изучали методом сопироли-тической газожидкостной хроматографии на газовом хроматографе в ГНУ НИВИ НЧ РФ [1].
Результаты исследований показали, что из 11 видов нетуберкулезных микобак-терий, персистирующих у крупного рогатого скота в благополучных по туберкулезу стадах в условиях Якутии, максимальную значимость имеет инфицирован-ность животных быстрорастущими мико-бактериями IV группы по классификации Раньона (63,6%), тогда как отмечены лишь единичные случаи выделения фотохромо-генных, скотохромогенных и нефотохро-могенных микобактерий [11]. Ранними исследованиями ученых Якутского НИИ сельского хозяйства было установлено, что культуры микобактерий 100% случаев идентифицированы, как атипичные микобактерии I-IV группы по Раньону и большинство быстрорастущих микобактерий были идентифицированы как M. vaccae, что является особенностью региона[8, 11]. Культуры из биоматериала людей идентифицированы как нетуберкулезные микобактерии II (M. scrofulaceum) и IV (M. fortuitum) группы по Раньону, а также родоккоки. Установлено одновременное персистирование в организме больных людей возбудителя туберкулеза и комплекса М. avium-
ш1хасе11и1аге. Таким образом, обнаружение условно-патогенных микобактерий свидетельствует о важной этиологической роли нетуберкулезных микобактерий в заболевании человека и животных. Следующее звено для комплексного подхода к решениям проблем туберкулеза - это средства профилактики туберкулеза. Вакцинация - основной метод специфической профилактики инфекционных болезней.
В свое время применение вакцины БЦЖ в неблагополучных по туберкулезу крупного рогатого скота хозяйствах приносило немалую пользу, несмотря на не высокий иммунизирующий эффект и до сих пор применяется у людей по причине отсутствия лучшей альтернативы.
Основным недостатком применения вакцины БЦЖ у животных является дифференциация поствакцинальной и инфекционной аллергии. Тем не менее, фундаментальные исследования, направленные на изыскание противотуберкулезной вакцины или других препаратов, повышающих противотуберкулезный иммунитет или стимулирующие иммунные силы организма против инфекционных болезней, в т.ч. туберкулеза, необходимо проводить. Одним из таких направлений является применение иммуномодуляторов.
Нами в 90-е годы в Институте экспериментальной ветеринарии Сибири и Дальнего Востока Сибирского отделения ВАСХНИЛ с положительными результатами была исследована и предложена схема профилактики туберкулеза у молодняка крупного рогатого скота с применением вакцины БЦЖ в сочетании с иммуномодулятором - полирибонат.
В результате проведенных исследований было научно доказано влияние туберкулезного процесса на показания гуморального, клеточного иммунитета и на общую резистентность организма, что введение в организм животных поли-рибоната в сочетании с вакциной БЦЖ стимулирует иммунный статус организма. При изучении иммунобиологических показателей организма были отмечены достоверные изменения в показателях опсонофагоцитарной реакции и реакции
бласттрансформации лимфоцитов. У телят, привитых вакциной БЦЖ совместно с полирибонатом, на протяжении всего опыта отмечались высокие показатели опсонофагоцитарной реакции и реакции бласттрансформации лимфоцитов, при этом достигнута полная защита организма подопытных животных от заражения возбудителем туберкулеза крупного рогатого скота [5].
По результатам научных исследований был получен патент на изобретение и утверждено Департаментом ветеринарии МСХ РФ «Наставление по применению полирибоната в ветеринарии в качестве иммуномодулятора.
В последнее время большой интерес и заслуженное место в научных исследованиях занимают пробиотики, как альтернативы антибиотикам, не рациональное применение которых привело к появлению устойчивых штаммов возбудителей инфекционных болезней [6, 9, 10].
Применение пробиотиков при туберкулезе животных обосновано тем, что заражение животных в основном происходит алиментарно и микрофлора кишечника во многом определяет резистентность организма к различным патогенным микроорганизмам и состояние иммунитета в целом. Применение пробиотиков снижает аллер-гизацию организма животных за счет улучшения микробиоценоза кишечника, т.е. уменьшает количество псевдоаллергических реакций на туберкулин.
Перспективно применение пробио-тиков и в медицине у инфицированных детей, принимающих большое количество химиопрепаратов и естественно имеющих дисбаланс в микробиоценозе кишечника и тем самым нарушения. Нами в опытах in vitro установлено, что пробиотик Сахабактисубтил, полученный из бактерий Bacillus subtilis, выделенных из мерзлотных почв Якутии, обладает способностью подавлять рост и развитие М. bovis и М. tuberculosis, который выражается в задержке образования фактора вирулентности - корд фактора мико-бактерий. По результатам экспериментальных исследований в организме лабораторных животных установлено, что
пробиотик Сахабактисубтил подавляет биологические свойства микобактерий, понижает культуральные и биохимические свойства возбудителя туберкулеза, тем самым продлевает жизнь подопытных животных по сравнению с контролем при экспериментальном заражении.
Таким образом, на данном этапе развития науки и практики при диагностике туберкулеза необходимо использовать все прогрессивные и классические методы для выявления «восприимчивого контингента» как среди людей, так и среди сельскохозяйственных животных, а также совершенствовать мероприятия для профилактики туберкулеза, в научном арсенале иметь средства общей и специфической профилактики туберкулеза, не прекращать мониторинговые комплексные исследования.
ЛИТЕРАТУРА:
1. Газохроматографический метод идентификации микроорганизмов - возбудителей болезней животных // Методические рекомендации. - Н.Новгород, 1993.
2. Гулюкин, М.И. Оздоровительные мероприятия при туберкулезе крупного рогатого скота / М.И. Гулюкин, А. Х. Най-манов, В.А. Ведерников и др. // Ветеринария. - 2012. - № 1. - С.3-8.
3. Донченко, А.С. Диагностика туберкулеза крупного рогатого скота // А.С. Донченко, Н.П. Овдиенко, Н.А. Донченко.
- Новосибирск, 2004. - 309с.
4. Донченко, А.С. Контроль благополучия животноводческих хозяйств по туберкулезу крупного рогатого скота / А.С. Донченко и др. // Методические рекомендации. - Якутск, 2004.
5. Донченко, А.С. Влияние сочетан-ного применения вакцины БЦЖ и полири-боната на показатели иммунобиологического состояния организма животных / А.С.Донченко // Сибирский вестник сельскохозяйственных наук. - 2007. - № 10. - С. 64-69.
6. Лазовская, А.Л. Действие пробиоти-ков на патогенных микобактерий / А. Л. Лазовская, З.Г. Воробьева, К.Н. Слинина, М.А. Кульчицкая // Вестник ветеринарии.
- 2009. - № 1. - С. 28-31.
7. Найманов, А.Х. Эпизоотическая ситуация по туберкулезу крупного рогатого
скота в Российской Федерации / А.Х. Най-манов, Н. М. Ткач // Ветеринарный консультант. - 2008. - № 22 (185). - С. 13-14.
8. Неустроев, М.П. Мониторинг эпизоотической ситуации по туберкулезу крупного рогатого скота в республике Саха (Якутия) / М.П. Неустроев, Н.И. Про-копьева, Г.П. Протодьяконова // Матер. Всероссийской научн. -практ. конференции, посвящ. памяти проф. И.А. Косилова: «Современные проблемы диагностики и профилактики хронических зооантропо-нозных инфекций», 2009. - С. 143-145.
9. Неустроев, М.П. Пробиотики из штаммов Bacillus subtilis. в сельском хозяйстве Якутии / М.П. Неустроев и др. // Рос. акад.с.-х. наук. - 2010.- 10с.
10. Панин, А.Н. Пробиотики в животноводстве - состояние и перспективы / А.Н. Панин, Н.И. Малик, О.С. Илаев // Ветеринария.- 2012. - № 3. - С.3-8.
11. Прокопьева, Н.И. Нетуберкулезные (атипичные) микобактерии, выделенные от
РЕЗУЛЬТАТЫ КОМПЛЕКСНЫХ НАУЧ
животных и людей / Н.И. Прокопьева, Г.П. Протодьяконова, Н.Г. Павлов, Н.А. Обоева // Аграрный вестник Урала. - 2011. - № 5 (84). - С. 29-30.
12. Протодьяконова, П.Г. Вопросы диагностики и взаимосвязи туберкулеза крупного рогатого скота и человека в Якутии / П.Г. Протодьяконова, Н.Г. Павлов, Г.И. Алексеева // Научные труды молодых ученых аграрных вузов России: сб. ст. аспирантов и молодых ученых. Якутск, 2003. - С.71 - 74.
13. Протодьяконова, П.Г. Выяснение причин туберкулиновых реакций у крупного рогатого скота в благополучных по туберкулезу хозяйствах РС (Я) / Рекомендации. - Сост. Г.П. Протодьяконова и др. - Якутск, 2003. 14 с.
14. Протодьяконова, Г.П. Мико-бактерии туберкулеза человеческого вида в Якутии / Г.П. Протодьяконова // Аграрная наука. - 2005. - № 4. - С.29.
ИССЛЕДОВАНИЙ ПО ТУБЕРКУЛЕЗУ
Протодьяконова Г.П. Резюме
Представлен анализ комплексных научных исследований по туберкулезу в Республике Саха (Якутия). Затронуты эпидемиологические аспекты туберкулеза в республике, проблема неспецифических туберкулиновых реакций у животных, вопросы профилактики туберкулеза. Культуры из биоматериала людей идентифицированы как нетуберкулезные микобактерии II scrofulaceum) и IV fortuitum) группы по Раньону, а также родоккоки. Установлено одновременное персистирование в организме больных людей возбудителя туберкулеза и комплекса М. avium-intracellulare. Таким образом, обнаружение условно-патогенных микобактерий свидетельствует о важной этиологической роли нетуберкулезных микобактерий в заболевании человека и животных.
COMPLEX RESEARCH RESULTS ON A TUBERCULAR INFECTION
Protodyakonova G. P.
Summary
Analysis of complex research on a tubercular infection in the Republic of Sakha (Yakutia) is presented. Epidemiological aspects of tuberculosis in the republic, problem of nonspecific tuberculin reactions at animals, questions of prophylaxis of tuberculosis are affected. Human biomaterial cultures have been identified as non-tuberculous mycobacterium II (M. scrofulaceum) and IV (M. fortuitum) Runann group, as well as Rotococcus. The simultaneous persistence in the body of sick people of the causative agent of tuberculosis and the M. avium-intracellulare complex has been established. Thus, the detection of conditionally pathogenic mycobacteria indicates an important etiological role of non-tuberculous mycobacteria in human and animal diseases.
