CC BY
87
Биология
нетуберкулезные (атипичные) МИКОБАКТЕРИИ, ВЬІДЕЛЕННЬІЕ ОТ ЖИВОТНЫХ И ЛЮДЕЙ
Н. И. ПРОКОПЬЕВА, доктор ветеринарных наук, профессор, Г. П. ПРОТОДЬЯКОНОВА, кандидат ветеринарных наук, доцент, Якутская ГСХА, Н. Г. ПАВЛОВ, кандидат ветеринарных наук, старший научный сотрудник, Фтизиатрия» МЗ РС (Я), Н. А. ОБОЕВА, кандидат ветеринарных наук, научный сотрудник,.Якутская НииСХ, Н. В. ГРИШИНА, научный сотрудник, НИВИ НЧРФ
677007, Республика Саха (Якутия), г. Якутск , ул. Красильникова, д. 15
Ключевые слова: нетуберкулезные микобактерии, реакции на туберкулин, атипичные миобактерии, классификация по Раньону.
Keywords: nontubercular mycobacteria, reactions on tuberculin, atypical mycobacteria, Runyon classification.
В современных условиях возрастающая роль нетуберкулезных микобактерий (микобактериозов) создает трудности при диагностике туберкулеза и требует изучения многих вопросов совместными усилиями медицинских и ветеринарных специалистов.
Необоснованный убой реагирующих животных, дополнительные затраты на дифференциальную диагностику, потеря приплода и продукции животных — это неполный перечень последствий реагирования животных, сенсибилизированных нетуберкулезными микобактериями, на диагностический тест ППД туберкулином для млекопитающих.
Известно, что большое значение в проявлении неспецифических реакций на туберкулин у животных имеют быстрорастущие микобактерии [1-4], что подтверждают и наши исследования [5-8].
Цель и методика исследований.
Цель данной работы — изучение этиологии неспецифических реакций у животных и микобактериального фона у людей, больных туберкулезом, в Республике Саха (Якутия).
Исследования проводили в 2002-2009 гг. в Якутском НИИ сельского хозяйства, республиканской ветеринарно-испытательной лаборатории, а также в хозяйствах разных форм собственности Республики Саха (Якутия). Проанализированы документы ветеринарной отчетности по республике, данные собственных аллергических и бактериологических исследований на туберкулез. Проведены исследования по изучению фона микобактерий туберкулеза, выделенных от людей в ГУ НПЦ «Фтизиатрия» Министерства Здравоохранения Республики Саха (Якутия).
Штаммы микобактерий были изучены с помощью морфологических, культурально-биохимических и хемотак-сономических методов. Исследовали скорость роста штаммов, оптимальный рост при различных температурах, рост на плотной яичной среде с салицилатом натрия,
нитратом натрия, на среде с 5 % хлористого натрия. Хемотаксономические особенности жирно-кислотного состава клеток изучали методом сопиролитической газожидкостной хроматографии на газовом хроматографе марки Цвет-500 в ГНУ НИВИ НЧ РФ [9]. Определение чувствительности штаммов к антибиотикам изучали дискодиффузионным методом в соответствии с Методическими указаниями с использованием стандартного набора антибиотиков (НИЦФ Москва, Санкт-Петербург).
Результаты исследований.
В Республике Саха (Якутия) ежегодно при плановых аллергических исследованиях на туберкулез в 15-18 (42-51 %) улусов выявляют животных, реагирующих на ППД-туберкулин для млекопитающих. Микобактериозы выявлены в хозяйствах независимо от их форм собственности, степень их распространения в стадах варьирует от 0,06 до 1,9 % от числа исследованного крупного рогатого скота.
Анализ данных статистической отчетности показал, что ветеринарными лабораториями республики за 2002-2009 г. проведено 850 бактериологических экспертиз биологического материала от реагирующего на туберкулин крупного рогатого скота из благополучных по туберкулезу хозяйств. Выделены 244 (28,2 %) культуры микобактерий, которые в 100 % случаев идентифицированы как атипичные микобактерии МУ группы по Раньону.
Выявлено 11 видов нетуберкулезных микобактерий, персистирующих у крупного рогатого скота в благополучных по
туберкулезу стадах в условиях Якутии. Исследования по идентификации культур нетуберкулезных микобактерий, изолированных от реагировавших на туберкулин животных, показали, что 77 % культур микобактерий относятся к IV группы по классификации Раньона, тогда как отмечены лишь единичные случаи выделения фотохромо-генных, скотохромогенных и нефотохромо-генных микобактерий (табл. 1).
Большинство быстрорастущих микобактерий были идентифицированы как М. vaccae, что является особенностью региона [5, 6, 8].
Исследовано 6 культур, выделенных из биоматериала от больных туберкулезом людей (смыв с бронхов, мокрота), и 1 культура изолирована из проб внешней среды (смыв с полки процедурного кабинета). Посевы производили на среде Левенштейна-Йенсена и Финн-2.
Результаты исследований по изучению фона микобактерий, выделенных от больных людей, представлены в табл. 2.
Как видно из табл. 2, в трех случаях культуры отнесены к возбудителю человеческого вида, в одном — комплексы возбудителя птичьего вида и нетуберкулезных микобактерий, в одном случае изолирована нетуберкулезная микобактерия II группы по Раньону, представитель скотохромогенных микобактерий М^сго^1асеит и в одном случае изолированы Rodococcus.
Из проб с внешней среды идентифицирована нетуберкулезная нефо-тохромогенная микобактерия III группы по Раньону — М. ^гШ^ит.
таблица 1
видовой состав атипичных (нетуберкулезных) микобактерий, изолированных из
биоматериала крупного рогатого скота
Виды микобактерий Группа по классификации Раньона
M. kansasi, M.marinum 1 — фотохромогенные
M. scrofulaceum 2 — скотохромогенные
M. xenopi 3 — нефотохромогенные
M. vaccae, M. fortuitum, M. cheloni, M. phlei, M. diernhoferi, M. smegmatis, M. peregrinum 4 — быстрорастущие
Биология
таблица 2
результаты исследований микобактерий, выделенных от людей
пн/п Материал Скорость роста (сутки) Рост при температуре, ° Характер роста и пигментация Мазок Вид микобактерий
22 37 45
смыв с бронхов 94 + + - очень мелкие колонии, оранжевые КУМ короткие палочки M. scrofulaceum
22 смыв с бронхов 87 + + + крупные R колонии, б/п КУМ M. tuberculosis
33 мокрота (от ребенка) 24 - + - единичные S колонии, розовые синие кокки Rodococcus
44 смыв с бронхов 40 - + - крупныеR колонии, б/п КУМ M. tuberculosis
55 мокрота 63 + + + очень мелкие колонии, б/п КУМ короткие палочки M. avium+ комплекс
66 смыв с бронхов 35 - + - крупные R колонии, б/п КУМ M. tuberculosis
Примечание: кум — кислотоустойчивые микобактерии; б/п — беспигментные колонии.
При изучении лекарственной чувствительности штаммов к антибиотикам получены следующие результаты:
1. M. scrofulaceum — устойчив к 2 препаратам;
2. M. tuberculosis — 4;
3. Rodococcus — 10;
4. M. tuberculosis — 4;
5. M. avium+ комплекс — 2;
6. M. tuberculosis — 5 препаратам.
Наибольшей устойчивостью к
антибиотикам (10 препаратам) обладали Rodococcus, выделенные из мокроты ребенка.
Заключение.
Установлено, что большое значение в проявлении неспецифических реакций на ППД-туберкулин у крупного рогатого скота имеют быстрорастущие микобактерии.
В условиях Якутии от больных людей идентифицированы нетуберкулезные микобактерии II (М. scrofulaceum) и IV
(М. ^>г1иКит) группы по Раньону, а также родоккоки. Установлено одновременное персистирование в организме больных людей возбудителя туберкулеза и комплекса М. аушт-1п1гасе11и1аге.
Обнаружение условно-патогенных микобактерий свидетельствует о важной этиологической роли нетуберкулезных микобактерий в заболевании человека и животных.
Литература
1. Донченко А. С., Овдиенко Н. П., Донченко Н. А. Диагностика туберкулеза крупного рогатого скота. Новосибирск, 2004. 309 с.
2. Дифференциальная диагностика и профилактика неспецифических реакций на туберкулин у крупного рогатого скота : методические рекомендации / сост. Ю. И. Смолянинов [и др.]. Омск, 2005.
3. Зыков М. П., Ильина Т. Б. Потенциально-патогенные микобактерии и лабораторная диагностика микобактериозов. М. : Медицина, 1978. 176 с.
4. Оттен Т. Ф., Васильев А. В. Микобактериоз. СПб. : Медицинская пресса, 2005. 224 с.
5. Лазовская А. Л., Прокопьева Н. И., Пинчук Л. М. Микобактерии, выделенные от крупного рогатого скота в Якутии // Ветеринария. 1994. № 12. С. 16-18.
6. Контроль благополучия животноводческих хозяйств по туберкулезу крупного рогатого скота : методические рекомендации / сост. А. С. Донченко [и др.]. Якутск, 2004.
7. Выяснение причин туберкулиновых реакций у крупного рогатого скота в благополучных по туберкулезу хозяйствах РС (Я) : Рекомендации / сост. Г. П. Протодьяконова [и др.]. Якутск, 2003.
8. Прокопьева Н. И., Неустроев М. П., Тарабукина Н. П. Туберкулез крупного рогатого скота в Якутии (эпизоотология, диагностика, меры борьбы и профилактика). Новосибирск, 2006. 204 с.
9. Газохроматографический метод идентификации микроорганизмов - возбудителей болезней животных : методические рекомендации. Н. Новгород, 1993.
