CC BY
9МЕДИЦИНСКИЕ НАУКИ MEDICAL SCIENCES
УДК 577.112:615.37]:616.001.5
РЕПАРАТИВНЫЕ И АНТИОКСИДАНТНЫЕ ЭФФЕКТЫ НЕКОТОРЫХ
РЕГУЛЯТОРНЫХ ПЕПТИДОВ В УСЛОВИЯХ КОЖНОГО ПОВРЕЖДЕНИЯ
МАЛЬ ГАЛИНА СЕРГЕЕВНА
Д.м.н., зав. каф. фармакологии Курского государственного медицинского университета
ДУДКА ВИКТОР ТАРАСОВИЧ
К.м.н., зав. каф. патологической анатомии Курского государственного медицинского
университета
ЧУЛАНОВА АННА АЛЕКСАНДРОВНА
Ассистент каф. биологической химии Курского государственного медицинского
университета
СМАХТИНА АНГЕЛИНА МИХАЙЛОВНА
Студентка лечебного факультета Курского государственного медицинского университета
ПОЛЯНСКАЯ ПОЛИНА АНДРЕЕВНА
Студентка лечебного факультета Курского государственного медицинского университета
г. Курск, Россия
Аннотация: Актуальность. Поиск эффективного ранозаживляющего средства не теряет своей актуальности. Препараты на основе регуляторных пептидов имеют ряд преимуществ по сравнению с другими лекарственными средствами. Цель исследования -установить влияние тимогена, даларгина и экспериментального трипептида 01у-И1$-Ьу$ и их комбинаций при внутрибрюшинном введении на состояние антиоксидантной защиты и репарацию кожи при ее экспериментальном повреждении. Материалы и методы. Исследование выполнено на 120 крысах Вистар. На холке животных под наркозом моделировалось кожное повреждение. Пептиды вводились в эквимолярных концентрациях внутрибрюшинно на протяжении 10 дней. Для гистологического исследования готовили срезы кожных ран и определяли общую морфологическую картину. Состояние антиоксидантной защиты оценивали по активности каталазы плазмы крови. Результаты. Моновведение пептидов приводило к коррекции гистологической картины и активности каталазы крови. При сочетанном применении олигопептидов отмечалось усиление выявленных эффектов. Выводы. Тимоген, даларгин и 01у-И1$-Ьу$ обладаютрепаративными и антиоксидантными эффектами в условиях кожной раны. Установлено синергичное действие данных пептидов в отношении изучаемых показателей.
Ключевые слова: кожное повреждение, репаративная регенерация, каталаза плазмы крови, тимоген, даларгин, 01у-И1$-Ьу$ (ОИК)
Введение. В середине прошлого столетия было сформулировано понятие регуляторных пептидов, что послужило предпосылкой к разработке новых высокоэффективных лекарственных средств на их основе [7]. В настоящее время пептидные препараты используются практикующими врачами для лечения различных нозологий и интерес к данной химической группе лекарственных средств остается высоким [5]. Это обусловлено некоторыми преимуществами пептидных молекул по сравнению с другими фармакологическими препаратами: необходима небольшая доза препарата для обеспечения терапевтического эффекта, низкая вероятность развития нежелательных лекарственных
Impact Factor: SJIF 2020 - 5.497 2021 - 5.81 МЕДИЦИНСКИЕ НАУКИ
MEDICAL SCIENCES
реакций ввиду особенностей метаболизма пептидов, при котором образуются свободные аминокислоты, используемые организмом для биосинтеза собственных белков.
Травматизм широко распространен среди всех слоев населения и часто является причиной развития длительной нетрудоспособности и инвалидности [1, 2, 5]. С учетом высокой угрозы террористических актов в Российской Федерации и проведением Специальной военной операции на Украине становится крайне актуальной проблема активации репаративной регенерации органов и тканей, для чего могут быть использованы пептидные препараты.
Известен олигопептидный препарат тимоген (МБНПК ЦИТОМЕД ЗАО (Россия) из группы иммуномодуляторов. Одним из показаний к использованию данного лекарственного средства является профилактика угнетения процессов регенерации и коррекция вторичного иммунодефицита [6]. Трипептид Gly-His-Lys (GHK) обладает выраженным репаративным действием, так как является одним из ростовых факторов, стимулирующим пролиферацию и дифференцировку клеток [4]. Даларгин (Микроген НПО ФГУП, Россия) используется в составе комбинированной терапии язвенной болезни желудка и двенадцатиперстной кишки, острого панкреатита из-за усиления репарации поврежденных тканей [6].
При этом данных о сравнительной оценке их эффективности и взаимодействии этих пептидов при кожных повреждениях в литературе нет, что обуславливает актуальность проведения настоящего исследования.
Цель исследования - изучить влияние тимогена, даларгина и экспериментального трипептида Gly-His-Lys и их комбинаций при внутрибрюшинном введении на состояние антиоксидантной защиты и репарацию кожи при ее экспериментальном повреждении.
Материалы и методы. Эксперимент проводился на 120 крысах-самцах Вистар. Под хлоралгидратным наркозом на холке животных наносили кожные повреждения стандартной площади 1 см2. Выбранные для эксперимента пептиды вводились внутрибрюшинно на протяжении 10 дней в эквимолярных концентрациях: разовая доза даларгина составила 1,2 мкг/кг, тимогена и Gly-His-Lys - 0,5 мкг/кг. Контрольная группа получала эквивалентный объем изотонического раствора натрия хлорида.
Под наркозом проводили забой лабораторных животных путем забора крови. Готовили срезы кожных ран для анализа по стандартной методике: материал для исследования фиксировали в формалине (10 % нейтральный на фосфатном буфере), после чего заливали в парафин, готовили срезы, которые окрашивали гематоксилин-эозином [3]. Активность репаративной регенерации оценивали по общей морфологической картине срезов, которую оценивали на световом микроскопе Leica CME.
Состояние антиоксидантной защиты определяли по активности каталазы плазмы крови по реакции с 3% раствором перекиси водорода.
Полученные данные статистически обрабатывались с использованием программного обеспечения STATISTICA 13.0 (TIBCO, США) путем расчета границ расхождения доверительных интервалов и критерия Манна-Уитни.
Результаты исследования. В контрольной группе определялась гистологическая картина рыхлой волокнистой соединительной тканью с выраженным отеком, инфильтрированной фибробластами различной степени зрелости, что представлено на рисунке 1.
МЕДИЦИНСКИЕ НАУКИ MEDICAL SCIENCES
Рисунок 1. Гистологическая картина среза кожной раны в контрольной группе, получавшей физиологический раствор. Увеличение х400. Окраска гематоксилин-эозином
На фоне моновведения препаратов в эквимолярных дозах определялось улучшение морфологической картины кожных срезов, причем выраженность репаративных изменений между группами была сопоставима. Определялось уменьшение плотности клеточного инфильтрата и снижение количества лимфоцитов и макрофагов, а также преобладание зрелых форм фибробластов над незрелыми. Определяется послойная ориентация грануляционной ткани, слой горизонтальных фибробластов (рисунок 2). При увеличении визуализируется фрагмент плотной волокнистой неоформленной соединительной ткани с очагами разрушения пучков коллагеновых волокон. Отмечаются отдельные скопления лимфоцитов, дифференцирующихся в макрофаги, скопление макрофагов. _
—
Рисунок 2. Гистологическая картина среза кожного повреждения в группе животных, получавших внутрибрюшинно GHK. Увеличение х400. Окраска гематоксилин-эозином
При комбинированном введении олигопептидных молекул было установлено усиление репаративной регенерации кожи. Наиболее выраженные гистологические изменения были получены в группе крыс, получавших GHK+даларгин (рисунок 3). Изменение соотношения клеток соединительной ткани в сторону увеличения количества терминально-дифференцированных и зрелых форм механоцитов по сравнению с рекрутируемыми в очаг воспаления фагоцитирующими клетками (нейтрофилы и моноциты), а также завершение процессов эпителизации раневого дефекта позволяет сделать заключение о завершенности репаративной регенерации.
МЕДИЦИНСКИЕ НАУКИ MEDICAL SCIENCES
Рисунок 3. Морфологическая картина среза кожной раны у крыс с внутрибрюшинным введением ОНК+даларгин. Увеличение х400. Окраска гематоксилин-эозином.
В контрольной группе отмечалось резкое снижение активности каталазы плазмы крови по сравнению с интактными животными (р<0,05). Исследуемые пептиды увеличивали активность антиоксидантного фермента. Их эффекты при моновведении были сопоставимы. При сочетанном использовании олигопептидных молекул также отмечается синергичное действие. Наибольшей эффективностью в отношении активности каталазы плазмы крови обладала комбинация ОНК+даларгин, нормализуя данный показатель до уровня интактных животных (р<0,05). Предположительно, коррекция состояния антиоксидантной защиты до нормальных значений может являться причиной максимально выраженных гистологических изменений, установленных в этой экспериментальной группе.
Выводы. Таким образом, в статье показана перспективность использования тимогена, даларгина и экспериментального трипептида Иу-Ив-ЬуБ в качестве репаративного и антиоксидантного средства. Установлено синергичное действие данных пептидов при комбинированном введении в отношении коррекции активности каталазы плазмы крови и ранозаживления экспериментальных кожных ран. В ходе исследования было установлено, что наиболее выраженными репаративными и антиоксидантными эффектами обладала комбинация ОНК+даларгин.
Impact Factor: SJIF 2020 - 5.497 2021 - 5.81 МЕДИЦИНСКИЕ НАУКИ
MEDICAL SCIENCES
СПИСОК ИСПОЛЬЗОВАННЫХ ИСТОЧНИКОВ:
1. Вишневский, А. А. Лечение и восстановление после травм и переломов / А. А. Вишневский. — М.: Изд-во Вектор, 2009. — 160 с.
2. Влияние пептида Gly-His-Lys и его аналогов на болевую чувствительность у мышей / И.И. Бобынцев, О.И. Чернышева, М.Е. Долгинцев и др. // Экспериментальная и клиническая фармакология. - 2015. - № 78 (1). - С. 13-15.
3. Иммунотропные, антиоксидантные и репаративные эффекты нового аналога тимогена, модифицированного D-аланином / М.Ю. Смахтин, Я.И. Бобынцев, В.Т. Корошвили и др. // Курский научно-практический вестник «Человек и его здоровье». - 2019. - № 1. - С. 77 - 82.
4. Иммунотропные и репаративные эффекты фактора роста клеток печени / М.Ю. Смахтин, Ю.В. Фурман, А.А. Чуланова, А.М. Смахтина // Российская наука и образование сегодня: проблемы и перспективы. - 2019. - № 2 (27). - С. 46-46.
5. Регенеративная активность регуляторных пептидов в условиях экспериментального перелома костей / М.Ю. Смахтин, И.И. Бобынцев, В.Т. Дудка, В.Ю. Чердаков и др. // Человек и его здоровье. - 2021. - Т. 24, № 4. - С. 59-67.
6. Регистр лекарственных средств (РЛС). Энциклопедия лекарств. - Выпуск 30. -https://www.rlsnet.rU/tn_index_id_5267.htm#pokazaniya (дата обращения 18.05.2023).
7. Хавинсон, В.Х. Лекарственные пептидные препараты: прошлое, настоящее и будущее / В.Х. Хавинсон // Клиническая медицина. - 2020 - № 98 (3). - С. 165-177.
