Регуляторные т-клетки у больных колоректальным раком и раком желудка Текст научной статьи по специальности «Фундаментальная медицина»

Результаты. Время задержки роста опухоли для ФЗТ с препаратом Фонетраст увеличилось в два раза по сравнению с облучением без препарата. Время дорастания опухоли до двойного объема для ФЗТ увеличилось приблизительно в 1,5 раза по сравнению с облучением в той же дозе без препарата. Индекс роста опухоли для ФЗТ в два раза меньше, чем при рентгеновском облучении.

Выводы. Показана большая, приблизительно в два раза, эффективность ФЗТ с препаратом Фонетраст по сравнению с традиционной дистанционной терапией меланомы В16F10. Полученные данные хорошо согласуются с результатами экспериментальных исследований по терапии асцитной карциномы Эрлиха.

регуляторные т-клетки у больных колоректальным раком и раком желудка

Е.В. КУРГАНОВА1, М.А.ТИХОНОВА1, И.Ю. лУБКИНА.3, Р.В. ШОРОХОВ2, и.м. перфильева2, а.а. останин1, е.р. черных1

Учреждение Российской академии медицинских наук НИИ клинической иммунологии СО РАМН,

г. Новосибирск1

Городская муниципальная клиническая больница № 1, г. Новосибирск2 Новосибирский государственный университет3

Развитие и прогрессирование опухолевого процесса связаны с формированием иммунологической толерантности к опухолевым антигенам. Одним из возможных участников в формировании толерантности к антигенам опухоли могут быть регуляторные Т-клетки (Трег). Так, на экспериментальных моделях опухолей показано возрастание естественных Трег (CD4+CD25+), а элиминация этих клеток ведет к уменьшению и отторжению опухоли. У человека увеличение CD4+CD25+ клеток в периферической крови и среди опухольин-фильтрирующих лимфоцитов выявлено при многих солидных опухолях, включая колоректальный рак (КРР) и рак желудка (РЖ). Однако субпопуляции cD4+CD25hlgh, CD4+FOXP3+ и CD8+FOXP3+ регуляторных Т-клеток при данных патологиях до сих пор не оценивались. Тем более отсутствуют данные о численности этих клеток в регионарных лимфатических узлах и взаимосвязи Трег с распространенностью опухолевого процесса.

Цель исследования - оценить количественное содержание различных субпопуляций регуляторных Т-клеток в периферической крови и лимфатических узлах у больных с различными стадиями рака желудка и колоректального рака.

Материал и методы. Объектом исследования стали 13 пациентов с КРР и 13 пациентов с диагнозом РЖ. Контрольную группу составили 30 здоровых доноров. Содержание CD4+CD25+. CD4+CD25ыg^ CD4+FOXP3+ и CD8+FOXP3+Т-клеток в периферической крови (ПК) и лимфатических узлах (ЛУ) определяли методом проточной цитофлюориметрии на лазерном клеточном сортере-анализаторе FACSCallbur с использованием меченых моноклональных антител. Пролиферативный ответ мононукле-арных клеток на антиСD3 антитела (1мкг/мл) оценивали по включению Н3-тимидина.

Результаты. Пациенты с РЖ характеризовались тенденцией к увеличению содержания CD4+CD25+, CD4+FOXP3+ и CD8+FOXP3+ клеток и значимому возрастанию CD4+CD25hlgh клеток в ПК (1.6±0.2% vs 1.1±0.1%. р=0,02). В ЛУ этих больных уровень исследуемых клеток был таким же. как в периферической крови. Больные КРР. наоборот. характеризовались значимым снижением популяций CD4+CD25+ и CD4+CD25hlgh клеток в ПК крови. тогда как количество этих клеток в ЛУ было высоким и значимо превышало таковое в периферической крови. Причем при утяжелении процесса данные изменения проявлялись более выраженно. Несмотря на снижение CD4+CD25+ клеток со-

держание CD4+FOXP3+ и CD8+FOXP3+ клеток у больных КРР в ПК было повышенным. что проявлялось в виде тенденции у пациентов с 1-11 стадиями и значимым возрастанием этих клеток у больных с Ш-ГУ стадиями. При этом уровень CD4+FOXP3+ клеток в ЛУ при КРР был в 2 раза выше. чем в периферической крови. Увеличение популяций регуляторных Т-клеток при РЖ и КРР сопровождалось угнетением пролиферативной активности Т-клеток. Причем наиболее глубокое снижение функциональной

активности Т-лимфоцитов было выявлено в лимфатических узлах. где регистрировалось одновременное увеличение нескольких субпопуляций регуляторных Т-клеток.

Выводы. Таким образом. при раке желудка наблюдается как системное. так и локальное увеличение содержания регуляторных Т-клеток. тогда как при колоректальном раке высокое содержание этих клеток выявлялось в зоне опухолевого микроокружения (региональных лимфатических узлах).

ИММУНОфЕНОТИП Р53/BCL-2 И ПРОлИфЕРАТИВНАЯ АКТИВНОСТЬ РАКА лЕГКОГО

а.ф. лазарев, д.с. кобяков, а.м. авдалян, Е.Ю. БЫЧКОВА, В.В. КлИМАЧЕВ

Алтайский филиал РОНЦ им. Н.Н. Блохина РАМН, г. Барнаул МЛПУ «Когалымская городская больница», г. Когалым Кафедра патологической анатомии АГМУ, г. Барнаул

Экспрессия белка р53 в клетках опухоли является неблагоприятным прогностическим фактором. а Ьс1-2 - благоприятным. Прогностическое значение имеет также уровень пролиферативной активности опухоли: благоприятный прогноз отмечается при низкой пролиферативной активности. неблагоприятный - при высокой.

Целью исследования явилось изучение взаимосвязи между экспрессией белков р53 и Ьс1-2 и пролиферативной активностью рака легкого.

Материал и методы. Исследованы 117 раков легкого. полученные после оперативного лечения. Средний возраст пациентов составил 60.6 года (от 43 до 78 лет). 100 мужчин и 17 женщин. Плоскоклеточный рак определен в 54 случаях (46%). аденокарцинома - в 40 (34%). железисто-плоскоклеточный рак - в 3 (3%). крупноклеточный рак - в 16 (14%). мелкоклеточный рак - в 4 (3%). Иммуногистохимическое исследование проводили на срезах толщиной 5 мкм. инкубация с первичными антителами к К1-67 (клон МГВ-1. <^ако»). р53 (клон DO-7. <^ако»). Ьс1-2 (клон 124. <^ако») 18-24 ч при +4С. иммунное окрашивание стрептавидин-биотиновым пероксидазным методом (<^ако».

LSAB+). В каждом случае исследовали 1000 эпителиальных клеток. в 5-7 полях зрения. при увеличении х400. Определяли индекс метки (ИМ) - количество положительно окрашенных клеток (К1-67 и р53 - ядерная экспрессия. Ьс1-2 -цитоплазматическая) от общего количества подсчитанных клеток (в процентах). Если индекс метки р53 или Ьс1-2 был более 20%. то опухоль считалась положительной (р53+ или Ьс1-2+). менее 20% - отрицательной (р53- или Ьс1-2-). По взаимной экспрессии р53 и Ьс1-2 были выделены 4 иммунофенотипа опухоли: 1 - р53+/ Ьс1-2+; 2 - р53-/Ьс1-2-; 3 - р53+/Ьс1-2-; 4 - р53-/ Ьс1-2+. Статистический анализ полученных данных осуществляли в программе STAГПSTГCA 6.0. результаты представляли в виде медианы и интерквартильного интервала. использовали непараметрические методы: и-тест Манна-Уитни. тест Краскела-Уоллиса и коэффициент корреляции Спирмена (г).

Результаты. В исследованном материале опухоли с 1. 2. 3 и 4 иммунофенотипом составили 11. 37. 51 и 18 случаев соответственно. ИМ К1-67 в опухолях 1. 2. 3 и 4 иммунофенотипа составил соответственно 42 (35-69) %. 31 (16-54) %. 42 (24-61) % и 30 (27-53) %. Не найдено статистически значимого отличия ИМ К1-67