CC BY
116
УДК 615453.6:543.42.062:54.062
РАЗРАБОТКА СПЕКТРОФОТОМЕТРИЧЕСКОЙ МЕТОДИКИ КОЛИЧЕСТВЕННОГО ОПРЕДЕЛЕНИЯ ДЕЙСТВУЮЩИХ ИНГРЕДИЕНТОВ ТАБЛЕТОК ((МОДУРЕТИК»
С. ОНИЩЕНКО Н.Ю.БЕВЗ ВЛ. ГЕОРГИЯНЦ
Разработана спектрофотометрическая методика количественного определения действующих ингредиентов таблеток «Модуретик», в состав которых входят гидрохлортиазид и ами-лорида гидрохлорид.
Национальный фармацевтический университет, г. Харьков
Ключевые слова: спектрофотометрия, Модуретик, количественное определение.
e-mail:[email protected]
В настоящее время гипертоническая болезнь (ГБ) является одним из наиболее распространенных заболеваний в развитых странах мира. Сегодня не вызывает сомнения, что ГБ влияет на состояние здоровья человека, приводит к ухудшению качества жизни, является предвестником сердечной недостаточности, преждевременной смерти [l].
По данным официальной статистики, в Украине зарегистрировано свыше и млн лиц с артериальной гипертензией (АГ), что составляет 29,9% взрослого населения. Однако есть определенные расхождения между данными официальной статистики и результатами эпидемиологических исследований, которые показывают, что часть больных с повышенным артериальным давлением (АД) в Украине остается необнаруженной. Исследования, проведенные ННЦ «Институт кардиологии им. акад. М.Д. Стражеско», установили, что повышенное (>140/90 мм рт. ст.) АД имеют почти 36% взрослого населения. Такое же количество больных АГ регистрируется в других европейских странах и США [2] .
Современной тенденцией в лечении АГ является комбинированная терапия двумя или более препаратами различного механизма действия. Это обусловило создание лекарственных средств, содержащих несколько активных ингредиентов.
К несомненным преимуществам фиксированных комбинаций относятся: l) простота назначения и удобство для больного и врача, а также простота дозирования, что повышает приверженность больного к лечению; 2) потенцирование антигипертензивных эффектов за счет сочетания препаратов с разными механизмами действия (аддитивный или синергический эффект), что позволяет лучше контролировать АД у больных с недостаточным ответом на один из компонентов; 3) ослабление побочных эффектов благодаря взаимной нейтрализации нежелательных эффектов, а также за счет использования более низкой дозы одного или обоих компонентов; 4) уменьшение стоимости лечения, учитывая, что стоимость комбинированных препаратов обычно меньше, чем стоимость компонентов, прописываемых по отдельности, и др. [3].
Однако наличие нескольких активных субстанций усложняет анализ препарата, поэтому очень важной является разработка высоко специфических методик количественного анализа, которые позволяют избежать взаимного влияния действующих ингредиентов на их определение.
Цель работы. Разработка методики количественного определения действующих ингредиентов таблеток Модуретик методом абсорбционной спектрофотометрии в одной навеске.
Материалы и методы исследования. Объекты исследования - таблетки Модуретик производства Merk Sharp & Dohme B.V., the Netherlands (серия NP 29740), гидрохлортиазид (сертификат анализа №582, Changzhou Pharmaceutical Co. Ltd),амилорида гидрохлорид. Методы исследования: абсорбционная спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой облас-тяхАналитическое оборудование: спектрофотометр Evolution 60s, аналитические весы «Axis» модель ANG 200, мерная посуда класса А, реактивы и вспомогательные вещества, соответствующие требованиям ГФУ.
Результаты и их обсуждение. Американская фармакопея количественное определение амилорида гидрохлорида и гидрохлортиазида в таблетках рекомендует определять методом высокоэффективной жидкостной хроматографии [4]. В то же время в литературе описаны методики спектрофотометрического определения амилорида гидрохлорида и гидрохлортиазида в смеси с другими диуретиками и лекарственными средствами [5,6,7].
При записи УФ-спектра 0,001% спиртового раствора гидрохлортиазида (і) и аналогичного раствора с добавлением 0,0001% спиртового раствора амилорида гидрохлорида (2) (рис. і) было установлено, что максимумы наблюдаются в области 227 нм, 270 нм и 315 нм, и амилорида гидрохлорид не мешает определению гидрохлортиазида. Кроме того, максимум при длине волны 270 нм довольно пологий и был выбран нами в качестве аналитической полосы для количественного определения гидрохлортиазида.
Рис. 1. УФ-спектр 0,00196 раствора гидрохлортиазида в спирте этиловом (1) ио,00196 раствора гидрохлортиазида в спирте этиловом сдобавлением 0,000196 раствора амилорида гидрохлорида (2)
При исследовании подчиняемости спиртовых растворов гидрохлортиазида закону Буге-ра-Ламберта-Бера установлено, что линейная зависимость наблюдается в пределах концентраций 1,оохю-4- 1,оохю-з%, удельный показатель поглощения составляет б20±13 (рис. 2, табл. 1).
Рис. ^.Зависимость оптической плотности от концентрациистандартных растворов гидрохлортиазида при
длине волны 270 нм в спирте этиловом
Таблица1
Результаты зависимости оптической плотности от концентрации стандартных растворов гидрохлортиазида
С,96 1,0-10-4 2,0-10-4 3,о-іо-4 4,о-іо-4 5,о-іо-4 6,0-10-4 7,о-іо-4 8,0-10-4 9,о-іо-4 1,0-10-3 1,1-10-3
А 0,056 0,126 0,191 0,253 0,312 0,375 0,439 0,508 0,562 0,636 0,712
А1% 560 630 637 633 624 625 627 635 624 636 593
УФ-спектр 0,0005% спиртового раствора амилорида гидрохлорида (і) (рис. 3) в области от 220 нм до 400 нм характеризуется наличием максимумов поглощения при длинах волн 288
нм и 364 нм. Нами установлено, что в максимуме при длине волны 364 нм ни гидрохлортиазид, ни вспомогательные вещества не мешают определению амилорида гидрохлорида.
Рис. 3. УФ-спектры 0,000596 раствора амилорида гидрохлорида в спирте этиловом (1) и 0,000596 раствора амилорида гидрохлорида в спирте этиловом с добавлением 0,00196 раствора гидрохлортиазида (2)
При исследовании подчиняемое™ спиртовых растворов амилорида гидрохлорида закону Бугера-Ламберта-Бера при длине волны 364 нм установлено, что линейная зависимость наблюдается в пределах концентраций 2,00x10 -* - 1,оохю_з%, удельный показатель поглощения составляет от 739±7 (рис. 4, табл. 2).
А 0,8 0,7 0,6 0,5 • 0,4 -0,3 0,2 0,1 -О -
Рис. ^.Зависимость оптической плотности от концентрациистандартных растворов амилорида гидрохлорида при длине ВОЛНЫ364 нм в спирте этиловом
Таблица 2
Результаты зависимости оптической плотности от концентрации стандартных растворов амилорида гидрохлорида
С,96 2,0-10'4 3,о кг4 4,0 ю-4 5,010-4 6,010-4 7,0-10-4 8,0-10'4 9,0-10'4 1,010-3
А 0,143 0,218 0,298 0,370 о,445 0,522 0,598 0,670 о,743
Л10/0 СЛ1 715 726 745 740 742 745 748 744 743
Таким образом, количественное определение ингредиентов таблеток «Модуретик» мы рекомендуем проводить в одной навеске методом абсорбционной спектрофотометрии в ультрафиолетовой области, используя в качестве растворителя спирт этиловый. Содержание гидрохлортиазида определяли, измеряя оптическую плотность полученного раствора при длине волны 270 нм и количество амилорида гидрохлорида при длине волны 364 нм. Параллельно измеряли оптическую плотность стандартных образцов.
Методика количественного определения гидрохлортиазида и амилорида гидрохлорида в таблетках «Модуретик».
0,0002 0.0004 0.0006 О.ОООИ 0,001 С',°о
Испытуемый раствор (а). К точной навеске порошка таблеток 250,0 мг добавляют 50 мл 96% спирт Р, взбалтывают в течение 5 минут, доводят объём раствора тем же самым растворителем до 100 мл, фильтруют.
Испытуемый раствор (Ь). 0,50 мл испытуемого раствора (а) доводят 96% спиртом Р до объема 25,0 мл.
Раствор сравнения (1). Точную навеску гидрохлортиазида (СО) 50,0 мг растворяют в 50 мл 96% спирта Р, доводят объем раствора тем же самым растворителем до юо мл и перемешивают. 0,50 мл полученного раствора доводят 96% спиртом Р до объема 25,0 мл.
Оптическую плотность испытуемого раствора (Ь) и раствора сравнения (1) измеряют при длине волны 270 нм относительно 96% спирта Р.
Испытуемый раствор (с). 5,0 мл испытуемого раствора (а) доводят 96% спиртом Р до объема 50,0 мл.
Раствор сравнения (2). Точную навеску амилорида гидрохлорида (СО) 50,0 мг растворяют в 50 мл 96% спирта Р, доводят объем раствора тем же самым растворителем до юо мл и перемешивают. 0,50 мл полученного раствора доводят 96% спиртом Р до объема 50,0 мл.
Оптическую плотность испытуемого раствора (с) и раствора сравнения (2) измеряют при длине волны 364 нм относительно 96% спирта Р.
Таблица 3
Результаты количественного спектрофотометрического определения гидрохлортиазида в таблетках «Модуретик»
Масса навески порошка таблеток, г А Ао Найдено гидрохлортиазида, мг Метрологические характеристики среднего результата
0,2471 0,338 0,336 48,953 X = 48,6268 в2 = 0,0638 Я = 0,2526 =0,1031 Ах = 0,2651 Ах = 0,1082 е = 0,5596
0,2467 0,335 48,597
0,2529 0,342 48,397
0,2532 0,345 48,764
0,2507 0,340 48,537
0,2517 0,344 48,913
Рассчитывают содержание гидрохлортиазида и амилорида гидрохлорида в одной таблетке в миллиграммах, в пересчете на среднюю массу таблетки, исходя из заявленного содержания гидрохлортиазида и амилорида гидрохлорида в стандартных образцах.
Таблица 4
Результаты количественного спектрофотометрического определения амилорида гидрохлорида в таблетках «Модуретик»
Масса навески порошка таблеток, г А Ао Найдено амилорида гидрохлорида, мг Метрологические характеристики среднего результата
0,2471 0,310 0,320 4,714 X = 4,7397 в2 = 0,0031 8 = 0,0557 <5^ = 0,0227 Ах = 0,0584 Ах = 0,0238 8 = 1,2396
0,2467 0,306 4,661
0,2529 0,319 4,740
0,2532 0,322 4,779
0,2507 0,315 4,722
0,2517 0,323 4,822
Содержание гидрохлортиазида (х, мг) в таблетках рассчитывают по формуле:
А-т„ -т.
ср
X =
Ао'т„
Содержание амилорида гидрохлорида (х, мг) в таблетках рассчитывают по формуле:
А • m ■ m
О
о ср
X =
где А - оптическая плотность исследуемого раствора;Ао - оптическая плотность раствора
СО; тн - масса навески порошка таблеток, г;т0 - масса навески для приготовления раство-
ра СО, г.
Результаты количественного спектрофотометрического определения гидрохлортиазида и амилорида гидрохлорида в таблетках «Модуретик», а также метрологические характеристики среднего результатаприведены в табл. 3 и 4.
Как видно из данных табл. 3 и 4, относительная ошибка среднего результата количественного определения гидрохлортиазида составляет 0,55%, амилорида гидрохлорида - 1,23%. Таким образом, методика может быть использована в качестве альтернативной в анализе таблеток «Модуретик».
Выводы.Изучены УФ-спектральные характеристики гидрохлортиазида и амилорида гидрохлорида в спирте этиловом при совместном присутствии. Установлено, что оптимальной длиной волны для количественного определения гидрохлортиазида является 270 нм, а амилорида гидрохлорида - 364 нм.
Разработана методика количественного определения активных ингредиентов таблеток Модуретик в одной навеске, которая позволяет определять гидрохлортиазид и амилорида гидрохлорид при совместном присутствии.
13. Кошля, О.В. Динаміка показників внутрішньо серцевої гемодинаміки на тлі лікування хартілом у хворих гінертонічною хворобою/О.В. Кошля // Український медичний альманах. - Київ, 2008. - Тлі, № і(додаток). -С 85-87.
14. Ркомемендації Української асоціації кардіологів з профілактики та лікування артеріальної гіпертензії //Посібник до Національної програми профілактики і лікування артеріальної гіпертензії. -4-евидання, випр. і доп.- Київ, 2008 .
15. Преображенский, Д.В. Преимущества комбинированной терапии гипертонической болезни: свободные и фиксированные комбинации ингибитора АПФ и диуретика / Д.В.Преображенский, Т.М.Стеценко, Е.В.Тарыкина, Т.В.Скавронская, АВ.Маренич / Моск.мед. академия им. И.М.Сеченова ; Учеб.-науч.мед. центр Управления делами Президента РФ //ConsiliumMedicum.- 2006. -Т. 8, № 5.
16. UnitedStatesPhamiacopoeiaXXII, 1995- - Р-107-109.
17. Dinc,E. Chemometricresolutionofamixturecontaininghydrochlorothiazide and amiloride Ъу absorption and derivative spectrophotometry/E.Dinc,0. Ustundag// J. Pharm. Biomed. Anal.- 2002. - Jun. 20, № 29(1-2). - P. 371-379.
18. Ferraro, M.C. A spectrophotometric-partial least squares (PLS-l) method for the simultaneous determination of furosemide and amiloride hydrochloride in pharmaceutical formulations / M.C.Ferraro, P.M. Castellano, T.S. Kaufman // J. Pharm. Biomed. Anal.- 2001. - Oct. 26(3). - P. 443-451.
19. El-Gindy, A. HPLC and chemometric-assisted spectrophotometric methods for simultaneous determination of atenolol, amiloride hydrochloride and chlorthalidone /A.El-Gindy,S. Emara, A. Mostafa // Fannaco. - 2005. - Mar. 60(3). - P. 269-278.
20. Державна фармакопея України / Державне підприємство «Науково-експертний
фармакопейний центр». - 1-е вид. - X.: РІРЕГ, 2001. - 978 с.
21. Державна фармакопея України / Державне підприємство «Науково-експертний
фармакопейний центр». - 1-е вид. - Доповнення 1. - Харків, 2004. - 520 с.
22. Державна фармакопея України / Державне підприємство «Науково-експертний
фармакопейний центр». - 1-е вид. - Доповнення 2. - Харків, 2008. - 620 с.
Литература
DEVELOPMENT OF THE SPEKTROPHOTOMETRIC METOD FOR ASSAY OF THE ACTIVE INGREDIENS OF TARIETS MODURETIC
SJI.ANISCHENKO N.YU.BEV2 V.A. GEORGIYNTS
The spectrophotometric method fo the assay of the active ingredients of tablets “Moduretic” which contain hydrochlorothiazide and amiloride hydrochloride was developed.
National University of Pharmacy, Kharkov
Keywords: spectrophotometry, Moduretic, assay.
e-mail:[email protected]
