CC BY
132
УДК 615.26:615.451.3:616-003.214
РАЗРАБОТКА МЕТОДИКИ
КОЛИЧЕСТВЕННОГО ОПРЕДЕЛЕНИЯ ИБУПРОФЕНА В ПЕРОРАЛЬНОМ ПРОЛОНГИРОВАННОМ ГЕЛЕ
Ю.В. Антипова, Е. О. Бахрушина, М.Н. Анурова
ГБОУ ВПО «Первый Московский государственный медицинский университет имени И.М. Сеченова» Министерства здравоохранения Российской Федерации г. Москва, Россия
Аннотация. Для разработки теста растворения для новой лекарственной формы ибупрофена — перорального пролонгированного геля было необходимо предложить метод количественной идентификации лекарственного вещества в средах растворения: 0,1 М растворе хлористоводородной кислоты и фосфатном буферном растворе рН 6,8. Метод прямой спектрофотометрии, широко использующийся для анализа препаратов и субстанции ибупрофена, невозможно использовать в связи с оптической активностью вспомогательных веществ в аналитической области. Была предложена методика дифференциальной спектрофотометрии при длине волны 220 ± 2 нм и определены ее метрологические характеристики. Методика валидирована по показателям линейность и сходимость.
Ключевые слова: УФ-спектрофотометрия, дифференциальная спектрофотометрия, ибупрофен, пероральный пролонгированный гель, количественное определение ибупрофена.
Ибупрофен — нестероидное противовоспалительное средство, является производным фенил-пропионовой кислоты. Благодаря высокой эффективности и низкому риску развития побочных реакций ибупрофен широко используется в клинической практике [1]. Разработана новая лекарственная форма ибупрофена — пероральный пролонгированный гель (ППГ) на основе комбинированной матричной системы, состоящей из интерполимерного комплекса полиметакриловой кислоты и по-лиэтиленгликоля (ИПК), натрий карбоксиметил-целлюлозы (ЫаКМЦ) и сополимера поливинил-капролактам-поливинилацетат-поливинилгликоль 8о1ир1ш® [2].
В настоящее время согласно ЕРЬ 8.0 и ШР/№ 38/33 количественное определение субстанции ибупрофена проводят титрованием спиртового раствора ибупрофена гидроксидом натрия при добавлении фенолфталеина в качестве индикатора. В качестве альтернативного метода рекомендуется использовать УФ-спектрофотометрию (СФМ), как наиболее доступный универсальный метод.
Цель работы — разработка методики количественного определения ибупрофена методом спектрофотометрии в пероральном пролонгированном геле.
Применение спектрофотометрии для количественного определения ибупрофена основано на поглощении электромагнитного излучения хромофорными (С=С, С=О) и ауксохромной (-ОН) группами. Количественное определение проводили с использованием спектрофотометра SЫmadzu ЦУ-3600 (Япония) в двух биорелевантных средах: 0,1 М хлористоводородной кислоты и в фосфатном буферном растворе с рН 6,8. Согласно литературным данным, ультрафиолетовый спектр раствора ибупрофена в данных средах в диапазоне длин волн от 210 до 300 нм имеет три максимума поглощения при длинах волн 220 ± 2, 264 ± 2 и 272 ± ± 2 нм [3; 4].
На основе полученных спектров поглощения (рис. 1) аналитической длиной волны была выбрана 220 ± 2 нм, поскольку оптическая плотность
The Journal of scientific articles "Health and Education Millennium", 2016. Vol. 18. No 5
----—
рас [ вора ППГ ибупрофна при данной X максимальна. Оптическая плотность раствора лекарственной формы при длинах волн 264 ± 2 и 272 ± 2 нм имеет низкие значения и не подходит для количественного измерения.
А
nm.
Б
Рис. 1. Спектр 0,02 мг/мл раствора ибупрофена в 0,1 М хлористоводородной кислоте (А), спектр 0,0335 мг/мл раствора ибупрофена в фосфатном буфере с pH = 6,8 (Б)
Установлено, что оптическая плотность вспомогательных веществ, входящих в состав гелей: ИПК и №КМЦ в данном диапазоне длин волн составляет не более 0,01, следовательно, они не оказывают выраженного влияния на оптическую плотность растворов ибупрофена при одновременном присутствии при проведении анализа. Выявлено, что значительное влияние на спектр ибупрофена оказывает Soluplus® в диапазоне длин волн от 210 до 220 нм, куда входит аналитическая длина волны (рис. 2). Soluplus® относится к группе поверхностно-активных веществ и способен образовывать
мицеллы, представляющие собой крупные ассо-циаты молекул, взывающие рассеивание падающего излучения, при котором оптическая плотность раствора увеличивается. Из литературных источников известно, что критическая концентрация мицеллообразования Soluplus® 0,007600 г/мл [5], рассчитанная концентрация Soluplus® в пробах на порядок меньше и составляет 0,000067 г/мл. Следовательно, в исследуемых пробах Soluplus® не образует мицелл в количестве достаточном для значимого светорассеяния. Однако наличие в структуре Soluplus® хромофорных групп обуславливает наличие поглощения электромагнитного излучения в области от 210 до 220 нм, спектр поглощения приведен на рис. 2.
Рис. 2. Спектр 0,01 мг/мл раствора Soluplus® в фосфатном буфере с pH 6,8
При расчете количественного содержания ибу-профена учитывают влияние всех вспомогательных веществ путем измерения оптических плотностей гелей-плацебо.
Для оценки пригодности использования СФМ в качестве методики количественного определения ибупрофена проводили оценку линейности зависимости оптической плотности от концентрации раствора лекарственного вещества. Исследование проводили для растворов ибупрофена в 0,1 М хлористоводородной кислоте и в фосфатном буфере с pH 6,8, так как в дальнейшем данную методику планируется использовать для количественного определения ибупрофена при проведении теста «Растворение».
В среде 0,1 М хлористоводородной кислоты методика линейна в диапазоне концентраций от 0,002 до 0,0200 мг/мл, что составляет от 12 до 120% уровня концентрации исходного раствора ибупрофена (рис. 3А). На основе анализа литературных источников, содержащих данные по растворимости ибупрофена при рН 1,2, в качестве
Антипова Ю.В., Бахрушина Е.О., Анурова М.Н. Разработка методики количественного определения...
—--—-
120% был принят раствор с концентрацией 0,0200 мг/мл [6]. Зависимость оптической плотности раствора ибупрофена от его концентрации подчиняется закону Бугера-Ламберта-Бера в данном интервале концентраций, при этом коэффициент корреляции составляет 0,9227. Ибупрофен обладает слабыми кислотными свойствами и в кислой среде находится в неионизированной форме, этим объясняется его низкая растворимость.
В среде фосфатного буферного раствора pH 6,8 методика демонстрирует линейность зависимости оптической плотности от концентрации в диапазоне концентраций от 0,0067 до 0,0603 мг/мл, что составляет от 20 до 180% уровня концентрации стандартного раствора (рис. 3Б). Зависимость оптической плотности раствора ибупрофена от его концентрации подчиняется закону Бугера-Ламбер-та-Бера в данном интервале концентраций, при этом коэффициент корреляции составляет 0,9975.
0,6 0,5 0,4 0,3 0,2 0,1 0
y = 28,346x R2 = 0,9227
С, мг/мл
0
3 2,5 2 ,5 1
0,5 0
0,005 0,01 A
у = 40,984х R2 = 0,9975
0,015 0,02
С, мг/мл
0,02
0,04
0,06
Б
Рис. 3. Зависимость оптической плотности от концентрации ибупрофена в растворе 0,1 М хлористоводородной кислоты (А); зависимость оптической плотности от концентрации ибупрофена в фосфатном буферном растворе с pH 6,8 (Б)
В соответствии с ОФС 1.1.0013.15. «Статистическая обработка результатов химического эксперимента» рассчитаны метрологические характеристики для методик количественного определения ибупрофена в двух средах растворения (табл.). Метрологические характеристики методик оценивали по результатам трех повторных измерений, при этом значение относительной погрешности не превышало 5,76% для количественного определения ибупрофена в кислой среде растворения и 6,90% в фосфатном буферном растворе.
Таблица 1 Метрологические характеристики методики количественного определения ибупрофена в 0,1 М хлористоводородной кислоте (ряд 1) и в фосфатном буферном растворе с рН 6,8 (ряд 2)
№ f x s2 s Р, T(P, f) Ах
ряда % %
1 3 0,563 0,0001 0,010 95 3,18 0,032 5,76
2 3 1,467 0,0010 0,032 95 3,18 0,101 6,90
Выводы. В ходе работы была разработана методика количественного определения ибупрофена в пероральном пролонгированном геле методом дифференциальной спектрофотометрии, для разработки методики теста «Растворение».
ЛИТЕРАТУРА
1. Мубаракшина О. А. Актуальность применения нестероидных противовоспалительных средств для лечения лихорадки у детей // ВСП. 2010. № 2 С. 156—160.
2. Антипова Ю.В., Бахрушина Е.О. Разработка состава и технологии получения перорального геля ибупрофена с использованием экструзии горячего расплава // Сборник материалов Всероссийской научно-практической студенческой конференции с международным участием «Медицинская весна-2016». 2016. С. 586—587.
3. Прозорова Н.А., Вдовина Г.П., Ярыгина Т.И. Разработка и валидация методик анализа лекарственного препарата ибупрофен капсулы 200 мг // Здоровье. 2012. Т. 4. №. 4. С. 16.
4. Fini A. et al. Fast dispersible/slow releasing ibupro-fen tablets // European journal of pharmaceutics and bio-pharmaceutics. 2008. Vol. 69. No. 1. С. 335—341.
5. Уильямс В., Уильямс С. Физическая химия для биологов. М.: Мир, 1976.
6. UV Analytical Method Suitability for Investigation of BCS Class 2 Biowaivers: Ibuprofen Case // Dissolution Technologies. 2013. February. P. 44—47.
The Journal of scientific articles "Health and Education Millennium", 2016. Vol. 18. No 5
—--
DEVELOPMENT OF ASSAY METHOD
FOR ORAL IBUPROFEN GEL WITH MODIFIED RELEASE
Y.V. Antipova, E. O. Bakhrushina, M.N. Anurova
I.M. Sechenov First Moscow state medical university Moscow, Russia
Annotation. Ibuprofen assay method is essential for development dissolution test of new dosage form — oral gel. Direct spectrophotometry is impossible because of recipients are optically active. The paper offers differential spectrophotometry assay at 220 ± 2 nm. Method was validated in terms of linearity and repeatability.
Key words: UV-specrophotometry, differential spectrophotometry, Ibuprofen, oral gel with modified release, Ibuprofen assay.
REFERENCES
1. Mubarakshina O.A. Aktual'nost' primenenija neste-roidnyh protivovospalitel'nyh sredstv dlja lechenija lihoradki u detej. VSP, 2010, no. 2, pp. 156—160.
2. Antipova Ju.V., Bakhrushina E.O. Razrabotka so-stava i tehnologii poluchenija peroral'nogo gelja ibuprofena s ispol'zovaniem jekstruzii gorjachego rasplava. Sbornik materialov Vserossijskoj nauchno-prakticheskoj studen-cheskoj konferencii s mezhdunarodnym uchastiem «Medi-cinskaja vesna-2016», 2016, pp. 586—587.
3. Prozorova N.A., Vdovina G.P., Jarygina T.I. Razrabotka i validacija metodik analiza lekarstvennogo preparata ibuprofen kapsuly 200 mg. Zdorov'e, 2012, vol. 4, no. 4, p. 16.
4. Fini A. et al. Fast dispersible/slow releasing ibuprofen tablets. European journal of pharmaceutics and bio-pharmaceutics, 2008, vol. 69, no.. 1, pp. 335—341.
5. Uil'jams V., Uil'jams S. Fizicheskaja himija dlja biologov. Moscow, Mir, 1976.
6. UV Analytical Method Suitability for Investigation of BCS Class 2 Biowaivers: Ibuprofen Case. Dissolution Technologies, 2013, february, pp. 44—47.
