CC BY
7
«(ИНФЕКЦИИ И ИНФЕКЦИОННАЯ БЕЗОПАСНОСТЬ В ГЕМАТОЛОГИИ И СЛУЖБЕ КРОВИ»
Санкт-Петербург 13-14 ноября 2014 г.
систему успешно апробировали с использованием клеточной модели гриппозной инфекции.
Выводы. На основе мультиплексной ПЦР в режиме реального времени разработана система, позволяющая проводить высокочувствительный одновременный количественный анализ мРНК 1Ь-1р, 1Ь-2, 1Ь-4, 1Ь-6, 1Ь-10,
1Ь-12Р, 1Ь-18, №N-7 и ТОТ-а человека. Было показано, что разработанная тест-система позволяет получать стабильные хорошо воспроизводимые результаты и удовлетворяет всем необходимым требованиям для проведения анализа уровня экспрессии с использованием ДДО; метода.
Полухина О. В.1, Суворова Т.Н.2
1 ФГБУ«Россиискии научный центррадиологии и хирургических технологии»МинздраваРоссии, Санкт-Петербург;
2 ФГБВОУВПО «Военно-медицинская академия имени С.М. Кирова»МО РФ, Санкт-Петербург
РАЗНООБРАЗИЕ СПЕКТРА ВОЗБУДИТЕЛЕЙ ИНФЕКЦИОННЫХ ОСЛОЖНЕНИЙ У ИММУНОКОМПРОМЕТИРОВАННЫХ ПАЦИЕНТОВ СПЕЦИАЛИЗИРОВАННОГО ХИРУРГИЧЕСКОГО СТАЦИОНАРА
Введение. Проблема микробиологического мониторинга у иммунокомпрометированных больных является предметом изучения на протяжении нескольких десятилетий. Нарушения иммунитета способствуют расширению спектра возможных возбудителей инфекционных осложнений у этой категории пациентов.
Цель: изучить видовой состав, выявить спектр основных патогенов у иммунокомпрометированных пациентов специализированного хирургического стационара федерального уровня.
Материалы и методы. В период с 2006 по 2012 гг. исследовали 8100 образцов клинического материала от 3543 больных. Использовали бактериологические методы исследования, идентификацию возбудителей проводили с помощью бактериологического анализатора Уйек-2 (биоМерьё, Франция). Клиническую значимость изолятов определяли в соответствии с нормативными документами.
Результаты. Среди выделенных в клинически значимом титре 4033 изолятов были идентифицированы представители 54 родов и 139 видов. Преобладали представители семейства ЕйегоЬа^епасеае: было выделено 1667 штаммов, что составило 41,33% от всех выделенных изолятов. Доля энтеробактерий колебалась от 22,32% в отделяемом дыхательных путей до 44,18% в пробах мочи. Частота выделения энтеробактерий из проб мочи превышала этот показатель для других видов исследованного материала (р<0,05) и не различалась при исследовании проб крови, фрагментов катетеров, раневого отделяемого. Были идентифицированы представители 17 родов, среди них преоб-
ладали бактерии рода Escherichia, Klebsiella, Enterobacter. Кроме того, были выделены представители родов Proteus, Citrobacter, Morganella, Serratia, Providencia, а среди редко встречающихся — Raoultella, Pantoea, Pasteurella, Ewingella, Kluyvera, Yokenella. Доля грамположительных бактерий (п= 1371, 33,99%) в разных видах материала колебалось от 22,32% в отделяемом дыхательных путей до 42,72% в пробах мочи. При этом каталазаположительные бактерии чаще выделялись из крови (24,55 %), фрагментов катетеров (24,24%), отделяемого дыхательных путей (18,64%), а каталазаотрицательные — из проб мочи (24,8%) и раневого отделяемого (16,92%). Среди представителей 14 родов преобладали бактерии рода Enterococcus и Staphylococcus. Кроме того, были выделены представители родов Streptococcus, Kocuria, Aerococcus, Atopobium, Micrococcus и Arcanobacterium. Доля неферментирующих грамотрицательных бактерий составила 14,55% (п=587), при этом частота их выделения из отделяемого дыхательных путей достигала 40,11% и превышала этот показатель для других видов исследованного материала (р< 0,05). Были идентифицированы представители 13 родов, преобладали бактерии рода Pseudomonas, Acinetobacter, Stenotrophomonas. Кроме того, были выделены бактерии родов Sphingomonas, Burkholderia, Aeromonas, Alcaligenes, Brevundimonas, Rhizobium, Achromobacter, Actinobacillus, Chryseomonas, Sphingobacterium. Доля микромицетов составила 9,92% от всех выделенных изолятов и колебалась от 5,41% в пробах мочи и до 21,21% в смывах фрагментов венозных катетеров. Среди них были идентифицированы представители
ВЕСТНИК ГЕМАТОЛОГИИтом X, № 4, 2014
шести родов. Возбудителями инфекций в 97,2 % случаев являлись С. albicans, С. glabrata, С. krusei, С. parapsilosis, С. guilliermondii и Т. asahii. С. albicans выделялись вдвое чаще, чем прочие представители этого рода. Среди реже встречающихся можно отметить микромицеты С. ciferrii, С. famata, С. lipolytica, Т. haemulonii, М. furfur. Доля анаэробных бактерий в спектре выделенных возбудителей не превышала 1 %.
Выводы. 1. Клинические изоляты, в том числе и редко встречающиеся, были выделены в клинически значимом титре и могли принимать участие в развитии инфекционных ослож-
нений, утяжеляя состояние иммунокомпроме-тированных больных. 2. Идентификация с помощью автоматического анализатора позволила нам сократить срок исследования до 48 часов. 3. Быстрая и точная видовая идентификация возбудителей необходима для назначения рациональной антибиотикотерапии, поскольку каждый из них может обладать собственными факторами патогенности и механизмами устойчивости к антимикробным препаратам. 4. Необходимо развитие и совершенствование методов подтверждения клинической значимости микроорганизмов.
ПопцовА. Л.1, ПарамоновИ.В.1'2
ФГБУ«Российскии медицинский научно-производственный центр «Росплазма» Федералъногомедико-биологического агентства», г. Киров
ФГБУН «Кировский научно-исследовательский институт гематологии и переливания крови Федеральногомедико-биологического агентства», г. Киров
ОБНАРУЖЕНИЕ ДОЗ ПЛАЗМЫ ДЛЯ ФРАКЦИОНИРОВАНИЯ С ВЫСОКИМ УРОВНЕМ КОНЦЕНТРАЦИИ ДНК ПАРВОВИРУСА В19
Исследование выполнено при финансовой поддержке РФФИ в рамках научного проекта № 14-04-31292 «Исследование факторов биобезопасности препаратов крови».
Введение. Решение проблемы обеспечения инфекционной безопасности препаратов крови — одна из самых важных задач производственной трансфузиологии на современном этапе. Среди выделенных возбудителей особое положение занимает парвовирус В19 (В19У). В зависимости от состояния организма человека В19У вызывает различные по тяжести заболевания. В трансфузиологической практике вирус в основном передается через плазму и ее дериваты. Наиболее значимым фактором передачи являются препараты плазменных факторов свертывания крови VIII и IX. Показано, что высокая концентрация ДНК В19У (106МЕ/мл и более) независимо от имеющегося уровня нейтрализующих антител (^О-антитела к В19У) в плазме делает процесс нейтрализации возбудителя, как правило, не эффективным, а образующиеся иммунные комплексы нестабильными, что приводит к инфекционности таких доз плазмы. Установлено, что без должных профилактических мер до 56-100% партий препаратов фактора VIII будут контаминированы ДНК В19У. С начала 2000-х годов на отраслевом международном уровне введено добровольное тестирование плазмы для фракционирования на наличие ДНК
B19V. Позднее, данное требование было законодательно закреплено на территории Евросоюза и в США. В настоящее время в России обследование плазмы доноров на ДНК B19V не проводится, но как показали ранее проведенные исследования, проблема профилактики гемотранс-миссивной передачи парвовирусной инфекции
Цель Определение доли образцов плазмы доноров с высоким титром вирусной ДНК B19V (> 106 ME/мл), потенциально опасных в плане контаминации конечных продуктов в процессе производства препаратов крови.
Материалы и методы. В исследование были включены образцы плазмы для фракционирования, отобранные в период с января 2012 по август 2014 года в плазмоцентрах ФГБУ РМНПЦ «Росплазма» ФМБА России. Выявление ДНК B19V проводили методом полимеразной цепной реакции (ПЦР) в режиме реального времени с помощью коммерческого набора реагентов cobas TaqScreen DPX Test (Roche Diagnostics, США). Образцы тестировали в мини-пулах, состоящих из 96 образцов. Статистическую обработку данных проводили с использованием прикладных программ MS Excel 2007.
Результаты. В 2012-2014гг. доля образцов плазмы для фракционирования с концентрацией ДНК B19V 106МЕ/мл и более составила 0,0020,006% (2012 г.— 0,002% (2/96134), 2013 г.—
