CC BY
39
ORIGINAL ARTICLE
© КОЛЛЕКТИВ АВТОРОВ, 2016 УДК 616.37-002.1-092:612.017.1]-078.33
Фирсова В.Г.1, Касатова Е.С.2, Луковникова Л.Б.2, Фомина С.Г.2, Новиков Д.В.2, Копылова Г.Е.2, ВаршавскаяЛ.В.3, Паршиков В.В.1-3, Евсегнеева И.В.4, Караулов А.В24, Новиков В.В.2
РАСТВОРИМЫЕ ФОРМЫ АНТИГЕНОВ CD95, CD25, CD54 И CD38 ПРИ ОСТРОМ ПАНКРЕАТИТЕ И ИХ ВОЗМОЖНОЕ КЛИНИЧЕСКОЕ ЗНАЧЕНИЕ
1ГБУЗ НО «Городская больница № 35», 603089, г. Нижний Новгород; 2ФГАОУ ВО «Национальный исследовательский Нижегородский государственный университет им. Н.И. Лобачевского», 603950, г Н. Новгород; 3ГБОУ ВПО «Нижегородская государственная медицинская академия» Министерства здравоохранения РФ, 603005, г Нижний Новгород; 4ГБОУ ВПО «Московский государственный медицинский университет им. И.М. Сеченова» Минздрава России, 119991, г. Москва
Растворимые формы мембранных антигенов - важные молекулярные факторы иммунной системы. Их роль в формировании воспалительного ответа, органной недостаточности (ОН) при остром панкреатите (ОП) раскрыта ограниченно. Проведено изучение сывороточного уровня растворимых форм антигенов CD95, CD25, CD54 и CD38 (sCD95, sCD25, sCD54 и sCD38) при различных вариантах течения ОП. Основную группу составили 37 пациентов с ОП: 28 с некротическим панкреатитом (НП) и 9 с интерстициальным панкреатитом (ИП). Контрольная группа -25 здоровых доноров. Для классификации ОП применяли пересмотренные критерии Атланты. Уровень sCD95, sCD25, sCD54 и sCD38 определяли иммуноферментным методом. Обнаружено, что в течение 1-4 сут у больных ИП и НП без развития ОН сывороточный уровень sCD95 не менялся. У пациентов с НП с ОН уровень sCD95 повышался. Формирование жидкостных скоплений сопровождалось повышением sCD95 на 5-18-е сутки. Сывороточный уровень sCD25 в течение 1-4 сут при ИП и НП без развития ОН был понижен; при НП с развитием ОН оказался статистически значимо выше, чем при ИП. Аналогичные результаты получены при оценке сывороточного уровня sCD38. Высокое содержание sCD54 определено при НП с развитием респираторного дистресс-синдрома.
К л ю ч е в ы е с л о в а: острый панкреатит; растворимые формы антигенов; системная воспалительная реакция;
органная недостаточность; апоптоз. Для цитирования. Фирсова В.Г., Касатова Е.С., Луковникова Л.Б., Фомина С.Г., Новиков Д.В., Копылова Г.Е., Варшавская Л.В., Паршиков В.В., Евсегнеева И.В., Караулов А.В., Новиков В.В. Растворимые формы антигенов CD95, CD25, CD54 и CD38 при остром панкреатите и их возможное клиническое значение. Иммунология. 2016; 37 (4): 219-223. DOI: 10.18821/0206-4952-2016-37-4-219-223
Firsova V.G.1, KasatovaE.S.2, LukovnikovaL.B.2, Fomina S.G.2, NovikovD.V.2, Kopylova G.E.2, VarshavskayaL.V.3, Parshikov V.V.1-3, Evsegneeva I.V.4, Karaulov A.V.2 4, Novikov V.V.2
SOLUBLE MEMBRANE ANTIGENS CD95, CD25, CD54, CD38 IN ACUTE PANCREATITIS AND THEIR POSSIBLE CLINICAL RELEVANCE
Soluble forms of membrane antigens are important molecular factors of the immune system. Their role in the pathogenesis of the systemic inflammatory response, organ dysfunction (OD) in acute pancreatitis (AP) poorly understood. The studying of the serum levels of the soluble forms of membrane antigens CD95, CD25, CD54 and CD38 (sCD95, sCD25, sCD54, sCD38) is carried out in AP of various severity. Level of soluble antigens detected in serum of 37 patients with OP: 28 with necrotizing pancreatitis (NP) and 9 with interstitial pancreatitis (IP). A control group consisted of 25 healthy donors. The revised Atlanta criteria applied for AP classification. Immune-enzyme assay have been use to determine the level of sCD95, sCD25, sCD54, sCD38. It revealed that within 1-4 days of IP and NP without OD the serum level of sCD95 did not change. At NP with OD the sCD95 level increased. The formation of necrotic fluid collections accompanied by sCD95 increase on 5-18 days. Serum level of sCD25 within the first 4 days of the disease was lower in IP and NP without OD. At NP with OD it was significantly higher, than at IP. Similar results received at an assessment of sCD38 serum level. The high level of sCD54 found in NP cases with adult respiratory distress syndrome development.
Keywords: acute pancreatitis; soluble forms of membrane antigens; systemic inflammation response; organ dysfunction; apoptosis.
For citation: Firsova V.G., Kasatova E.S., Lukovnikova L.B., Fomina S.G., Novikov D.V., Kopylova G.E., Varshavskaya L.V., Parshikov V.V., Evsegneeva I.V., Karaulov A.V., Novikov V.V. Soluble membrane antigens CD95, CD25, CD54, CD38 in acute pancreatitis and their possible clinical relevance. Immunologiya. 2016; 37 (4): 219-223. DOI: 10.18821/0206-4952-201637-4-219-223
For correspondence: Karaulov Aleksandr Viktorovich, I.M. Sechenov First Moscow State Medical University, Member of Russian Academy of Medical Sciences, Professor and chairman Department of clinical Immunology and Allergology, E-mail: [email protected]
conflict of interest. The authors declare no conflict of interest.
Funding. The study was conducted with the support of the Russian Ministry of Education and Research as part of the state task to perform work in the field of scientific activities (design of the) - 2014/134 (2575).
Received 12.01.16 Accepted 18.02.16
Для корреспонденции: Караулов Александр Викторович, д-р мед. наук, чл.-корр. РАН, зав. каф. клинической иммунологии и аллергологии, E-mail: [email protected]
ОРИГИНАЛЬНЫЕ СТАТЬИ
введение
Острый панкреатит (ОП) характеризуется развитием системной воспалительной реакции. Важную роль в формировании тяжелых вариантов заболевания играет соотношение провоспалительных и антивоспалительных факторов. Преобладание первых на ранней стадии болезни приводит к возникновению распространенных зон некроза во многом за счет процессов вторичного повреждения, органной недостаточности (ОН) с высокой вероятностью неблагоприятного исхода [1]. С другой стороны, чрезмерно выраженный антивоспалительный ответ с последующим истощением иммунной системы считают одним из звеньев патогенеза гнойно-септических осложнений в позднюю фазу [2]. Молекулярные процессы, определяющие функционирование иммунной системы при ОП, раскрыты недостаточно. Растворимые формы мембранных антигенов участвуют на разных этапах иммунного ответа, развитие которого может меняться при нарушении их равновесного содержания в межклеточном пространстве и биологических жидкостях [3, 4]. В связи с этим указанные белки рассматривают как эндогенные им-мунорегуляторные молекулы, входящие в состав глобальной иммунологической сети [5]. Изменение уровня растворимых форм мембранных антигенов в сыворотке крови может свидетельствовать о вовлечении конкретных патогенетических путей, связанных с реализацией различных типов гибели клеток при ОП и возникновением органной дисфункции. Выявление молекулярных механизмов клеточного повреждения будет способствовать - с одной стороны, разработке таргет-ной терапии, с другой - установлению ранних предикторов развития тяжелых вариантов болезни.
Цель исследования - изучение содержания суммарных растворимых фракций мембранных антигенов CD95, CD25, CD54 и CD38 в сыворотке крови (sCD95, sCD25, sCD54, sCD38) при различных вариантах течения ОП.
Материал и методы
В исследование включены 37 пациентов с ОП (основная группа), в том числе 28 с некротическим панкреатитом (НП) и 9 с интерстициальным (ИП). Диагноз верифицировали на основании компьютерной томографии с внутривенным бо-люсным контрастированием, интраоперационных данных, при ретроспективном анализе клинического течения заболевания. Лиц с ранней полиорганной недостаточностью (сочетание сердечно-сосудистой, почечной, дыхательной недостаточности) было 7, моноорганной - 3, без ОН - 27. Стойкая ОН отмечена в 8 случаях, транзиторная - в 2. Инфицирование некроза наступило у 7 человек. Контрольную группу (КГ) составили 25 здоровых доноров. Для классификации ОП по фазам и тяжести применяли пересмотренные критерии Атланты [6]. Образцы крови забирали дважды в течение 1-4 сут заболевания. Динамику показателей оценивали также в сроки от 5 до 14 сут, позднее 14 сут. Для анализа использовали сыворотку крови, полученную методом отстаивания. Содержание sCD95, sCD25, sCD54 и sCD38 определяли с помощью имму-ноферментного анализа, основанного на применении моно-клональных антител серии ИКО и поликлональных антител к антигенам мононуклеарных клеток крови человека [7-9]. Сорбцию антител на твердую фазу проводили на разборных полистироловых планшетах (ВНИИ "Медполимер", Россия). В качестве пероксидазного субстрата использовали тетраме-тилбензидин (Sigma, Германия). Остановку ферментативной реакции осуществляли с помощью 5% раствора серной кислоты. Учет результатов иммуноферментного анализа проводили с использованием фотометра (Multiscan EX Thermo Fischer Scientific) при длинах волн 450 и 620 нм. Результаты измерений выражали в условных единицах (U/ml). При оценке динамики показателей учитывали изменения > 100 U/ml.
Статистическую обработку полученных результатов про-
водили непараметрическими методами, так как распределение в выборках отличалось от нормального. Для описания совокупностей использовали диапазон значений, медиану, интерквартильный размах (ИКР 25-75%). С целью сравнения показателей двух независимых групп применяли тесты Манна-Уитни (с указанием чисел U и Z, двустороннего точного р), более двух - Крускалла-Уоллиса (с указанием числа H и количества степеней свободы df). В выделенных временных интервалах учитывали все показатели, в том числе полученные при повторных измерениях (с указанием количества измерений n). Различия считали значимыми при p < 0,05.
результаты
При сравнении сывороточного уровня молекул sCD95 в течение 1-4 сут болезни у лиц с ИП, НП с группой контроля статистически значимых различий не обнаружено (n = 11, n2 = 31, n3 = 25; Н (df 2) = 3,85, р = 0,145). Отмечали тенденцию к более высоким показателям sCD95 при НП по сравнению с ИП, однако статистически значимых отличий выявлено не было (U = 115,0; Z = 1,58; p = 0,116). При НП в раннюю фазу сывороточный уровень молекул scD95 был статистически значимо выше у пациентов с развитием ОН (как поли-, так и моноорганной (U = 19,0; Z = -2,23; p = 0,025) (табл. 1).
В течение 5-14 сут уровень молекул sCD95 у пациентов с ИП, НП без развития органной недостаточности в раннюю фазу и с ее развитием статистически значимо не отличался (n1 = 7, n2 = 28, n3 = 13; Н (df 2) = 1,94, р = 0,378). Различия не наблюдались и в более поздние сроки. У 26 пациентов оценена динамика изменений уровня молекул sCD95: у 5 с ИП и у 21 с НП. Снижение сывороточного содержания молекул scD95 при ИП наблюдали у 2 пациентов, оперированных в одном случае по поводу острого калькулезного холецистита, осложненного холедохолитиазом (с 376 до 172 U/ml), в другом - ферментативного перитонита (с 2609 до 414 U/ml). У остальных лиц уровень scD95 не менялся. У больных со стойкой органной недостаточностью, умерших в раннюю фазу (4 человека), с одинаковой частотой отмечали снижение уровня scD95 и отсутствие динамики. Регресс органной недостаточности во всех случаях сопровождался снижением уровня scD95. При формировании жидкостных скоплений у 8 из 11 больных наблюдали повышение тестируемого показателя на 5-18-е сутки. У лиц с развитием инфицированного некроза на фоне проводимого консервативного лечения (3 человека) имело место снижение уровня молекул sCD95. Аналогично снижался данный показатель у пациентов (4 человека) с инфицированием после хирургического вмешательства, выполненного в раннюю фазу по поводу билиар-ного панкреатита, ферментативного перитонита и возникшего в одном случае как осложнение гастрэктомии.
Сывороточное содержание молекул sCD25 в течение 1-4 сут болезни у пациентов с ИП и НП имело статистически значимые отличия от контроля (n1 = 11, n2 = 31, n3 = 25; Н (df 2) = 10,53, р = 0,005). Попарное сравнение показало, что
Таблица 1
Сывороточный уровень молекул sCD95 в течение 1-4 сут заболевания острым панкреатитом (в U/ml)
Группа Диапазон значений Медиана ИКР
КГ (n = 25) 217,5-482,4 364,7 252,3-401,1
ИП (n = 11) 115,7-531,6 218,5 173,7-359,9
НП без ОН (n = 12) 112,4-854,7 324,7 265,8-422
НП с ОН (n2 = 8) 177,2-1086,2 857,7 411,6-916,9*
Примечание. * - различия статистически значимы в сравнении с контрольной группой (p < 0,05).
Таблица 2
Сывороточный уровень молекул sCD25 в течение 1-4 сут заболевания острым панкреатитом (в U/ml)
Группа Диапазон значений Медиана ИКР
КГ (n = 25) 160,4-884,5 369,2 260,9-412,6
ИП (n = 11) 109,4-304,9 175 142,6-220*
НП без ОН 78,7-603 222,9 152,5-354,9*
(n = 19)
НП с ОН 127,9-2125 477,6 213,9-591,3*,**
К = 12)_
Примечание. * - статистически значимые различия в сравнении с контрольной группой (p < 0,05); ** - статистически значимые различия в сравнении с пациентами c ИП (p < 0,05).
при ИП и НП без развития ранней ОН уровень sCD25 был ниже, чем в КГ (U = 26,0; Z = 3,82; p = 0,00003 и U = 148,0; Z = 2,12; p = 0,033 соответственно). При этом сывороточный уровень молекул sCD25 у лиц с НП и развитием органной недостаточности был статистически значимо выше, чем у пациентов с ИП (U = 27,0; Z = 2,4; p = 0,015) (табл. 2).
В течение 5-14 сут уровень sCD25 в сыворотке крови больных ИП, НП без органной недостаточности в раннюю фазу и с ее развитием статистически значимо не отличался (n = 7, n2 = 28, n3 = 13; Н (df 2) = 2,52, р = 0,283). В более поздние сроки различий также не обнаруживали. При оценке динамики изменений уровня молекул scD25 (5 больных с ИП и 21 - с НП) выявлено снижение уровня молекул sCD25 при ИП у 2 пациентов, оперированных в одном случае по поводу острого калькулезного холецистита, осложненного холедохолитиазом (с 304 до 127 U/ml), в другом - ферментативного перитонита (с 2318 до 259 U/ml). У остальных лиц уровень sCD25 сохранялся на одном уровне. Оценка изменений уровня scD25 при НП не выявила особенностей, связанных с характером клинического течения заболевания в виде прогрессирования или купирования органной недостаточности, развития жидкостных скоплений, наступления летального исхода. При развитии инфицирования некроза у 6 из 7 больных отмечено снижение сывороточного содержания молекул scD25.
При сравнении с нормой сывороточного уровня молекул sCD54 в течение 1-4 сут болезни у лиц с ИП и лиц с НП обнаружены статистически значимые различия (n1 = 8, n2 = 11, n3 = 15, n4 = 25; Н (df 3) = 10,73, р = 0,013). Выполнение попарного сравнения показало, что при ИП и НП без органной недостаточности уровень scD54 был ниже, чем в КГ (U = 34; Z = -2,77; p = 0,004 и U = 105; Z = -2,30; p = 0,020 соответственно). При НП с ранней органной недостаточностью статистически значимых различий с нормой не обнаружено. Отметим, что среди пациентов с НП высокий уровень молекул scD54 зарегистрирован у лиц с развитием в составе ранней ОН дыхательной недостаточности (141 и 276 U/ml). В обоих случаях патофизиологической основой возникновения последней стал
Таблица 3
Сывороточный уровень молекул sCD54 в течение 1-4 сут заболевания острым панкреатитом (в U/ml)
Группа Диапазон значений Медиана ИКР
КГ (n = 25) 23,7-191,6 61,2 39-71,9
ИП (n = 8) 18-62,5 29,4 24,7-36,2*
НП без ОН (n = 15) 20,5-97,5 29,5 22,9-59,2*
НП с ОН (n2 = 11) 18,7-141 75,9 41-89
* - статистически значимые различия в сравнении с контрольной группой (p < 0,05).
ORIGINAL ARTICLE
острый респираторный дистресс-синдром (ОРДС), подтвержденный при рентгенографии легких. У двух других больных с дыхательной недостаточностью уровень sCD54 составил 86,7 и 24 U/ml. При этом у них отсутствовали рентгенологические признаки ОРДС, а причиной дыхательных расстройств было высокое внутрибрюшное давление (18 и 19 мм рт. ст. соответственно). У остальных лиц с ранней органной недостаточностью уровни молекул scD54 не отличались от контрольной группы (табл. 3). У выжившего пациента с высоким содержанием молекул sCD54 оно затем снизилось на 100 U/ml к 13-м суткам, оставаясь повышенным и в позднюю фазу. В остальных случаях существенных изменений уровня sCD54 в течение болезни не отмечено.
Сывороточный уровень молекул sCD38 в течение 1-4 сут болезни в группах пациентов с ИП, НП с развитием ранней органной недостаточности, без органной недостаточности и КГ статистически значимо отличался (n1 = 10, n2 = 16, n3 = 11, n4 = 25; Н (df 3) = 19,82, р = 0,0002). Выполнение попарного сравнения показало, что при ИП и НП без органной недостаточности уровень молекул scD38 был ниже, чем в КГ (U = 25; Z = -3,65; p = 0,00008 и U = 67; Z = -3,55; p = 0,0002 соответственно). Сывороточное содержание молекул sCD38 у лиц с НП и развитием органной недостаточности было статистически значимо выше, чем у пациентов с ИП (U = 26,5; Z = 2,0; p = 0,042) (табл. 4).
В последующие 5-14 сут уровень молекул sCD38 в сыворотке крови пациентов с ИП, НП без органной недостаточности в раннюю фазу и с ее развитием статистически значимо не отличался (nl = 7, n2 = 27, n3 = 13; Н (df 2) = 1,59, р = 0,449). У 26 пациентов оценена динамика изменений уровня молекул sCD38. В группе больных с ИП (n = 5) снижение уровня отмечено у пациента, оперированного по поводу ферментативного перитонита (с 283 до 65 U/ml). У других лиц уровень sCD38 в течение госпитализации оставался ниже нормы. При НП сывороточное содержание молекул sCD38 практически не изменялось или отмечали его снижение, при этом не было установлено четкой связи с развитием или регрессом органной недостаточности, формированием жидкостных скоплений, инфицированием некроза, наступлением летального исхода.
Обсуждение
Развитие тяжелого ОП подразумевает реализацию таких механизмов, которые приводят не только к местным выраженным деструктивным изменениям в поджелудочной железе, но и к вовлечению других органов и систем организма с возникновением их дисфункции. Очевидно, что патогенез ОН очень сложен. Растворимые формы мембранных антигенов являются его составляющими за счет участия данных белков в регуляции межклеточных взаимодействий, результатом которых может быть активация или подавление функции клетки вплоть до инициации ее гибели путем апоптоза [5].
Молекула Fas (CD95) - трансмембранный протеин, при связывании с которым соответствующего лиганда (FasL) запускается процесс апоптоза. Растворимая форма Fas (scD95) ин-
Таблица 4
Сывороточный уровень молекул sCD38 в течение 1-4 сут заболевания острым панкреатитом (в U/ml)
Группа Диапазон значений Медиана ИКР
КГ (n = 25) 50-540,6 205 86,5-389,9
ИП (n = 10) 27,7-98,4 57,9 42,5-63,5*
НП без ОН 43-177,9 64,4 50,4-96,5*
(n = 16)
НП с ОН (n2 = 11) 12,3-562,5 171 57,9-242,7*, **
* - статистически значимые различия в сравнении с контрольной группой (p < 0,05).
ОРИГИНАЛЬНЫЕ СТАТЬИ
гибирует Fas-опосредованный механизм этого типа клеточной смерти [10, 11]. Нарушение апоптоза в органах и тканях рассматривают как один из факторов, влияющих на развитие органной недостаточности [12]. Подавлению апоптоза в поджелудочной железе отводят важную роль в патогенезе органной недостаточности. Этот вид программированной гибели клетки в отличие от некроза не приводит к индукции воспалительной реакции и поэтому рассматривается как относительно благоприятный ответ панкреатоцита на повреждение [13, 14]. В эксперименте преобладание некроза над апоптозом вызывает более тяжелое течение заболевания [15, 16]. Существует тесная связь в регуляции апоптоза и некроза, их взаимозаменяемость, опосредованная действием одних и тех же молекулярных компонентов. Изменения регуляторных белков приводят к сдвигу в сторону преимущественной реализации того или иного вида клеточной смерти [17]. Другой патогенетический аспект связан с участием нейтрофилов. Срыв нормального апоптоза нейтрофилов приводит к удлинению срока их жизни и пролонгированному повреждающему действию за счет продукции ими активных форм кислорода, эластазы и других протеолитических ферментов [18]. Кроме того, цитокины, вырабатываемые нейтрофилами, снижают активность белка р53 и прерывают апоптоз в местах аккумуляции лейкоцитов в поджелудочной железе на уровне каспазы 2 [19]. В исследованных группах пациентов высокие уровни молекул sCD95 выявлены у лиц с тяжелым ОП. Это указывает на роль нарушения процессов Fas-опосредованного апоптоза в прогрессировании органной недостаточности при данной патологии. Косвенно об этом свидетельствует также снижение концентрации scD95, наблюдаемое при ее регрессе. Вероятно, патогенез ОН включает в себя и другие механизмы. Поэтому у некоторых пациентов, несмотря на наличие признаков тяжелого ОП, нами не было обнаружено повышения уровня sCD95. Результаты согласуются с данными, полученными авторами двух других исследований растворимой формы Fas при ОП [20, 21]. Ранее аналогичное повышение уровня scD95 обнаружено также у больных с полиорганной недостаточностью при перитоните [22]. Участие молекул sCD95 в воспалительной реакции в раннюю фазу ОП, как следует из полученных нами данных, не определяющее в развитии интерстициальной или некротической форм заболевания. На это указывает отсутствие значимых различий данного показателя в соответствующих группах больных. Подъем уровня sCD95 в позднюю фазу НП может отражать реакцию иммунной системы на скопление панкреатического сока и воспалительного экссудата в забрюшинной клетчатке. Не исключено участие этого растворимого белка во взаимодействии нейтрофилов, лимфоцитов, фибробластов в процессе отграничения жидкостных скоплений.
Растворимая форма молекулы CD25 (альфа-цепь рецептора IL-2) связывает IL-2, продуцируемый Т-лимфоцитами, и таким образом участвует в подавлении воспаления [3, 4]. Низкий уровень scD25 при легком и средней тяжести ОП может быть связан с его усиленным потреблением в осуществлении адекватного противовоспалительного ответа. Напротив, при НП с развитием органной недостаточности этого не наблюдается, а уровень молекул scD25 не отличается от нормы. Результаты, полученные нами, не противоречат данным работы по изучению уровня scD25 у лиц с сепсисом непанкреатического генеза. В указанном исследовании выявлено повышение уровня scD25 в раннюю фазу развития синдрома системной воспалительной реакции при бактериемии, что связано с развитием в последующем тяжелой иммуносупрес-сии и органной недостаточности [23]. Патогенетический механизм возникновения последних связывают в этом случае с высокой избирательной устойчивостью CD25+ субпопуляции лимфоцитов к апоптозу при развитии системной воспалительной реакции и высвобождению ими sCD25 [24]. Схожие закономерности прослеживаются и в изменениях уровня другого растворимого антигена - sCD38. Его мембранную фор-
му обнаруживают на поверхности многих клеток иммунной системы, включая CD4+-, CD8+-, В-лимфоциты, натуральные киллеры, моноциты, а также на панкреатических р-клетках. Этот мембранный белок участвует в передаче сигнала внутрь клетки, процессах клеточной адгезии, катализирует синтез циклической АДФ-рибозы. Растворимая форма белка CD38 блокирует межклеточные адгезивные взаимодействия, опосредованные мембранной формой данного белка [4, 8, 25]. Снижение уровня sCD38 при ИП и НП без развития органной недостаточности может отражать его усиленное связывание, которое приводит к ограничению процессов клеточной адгезии и вторичного воспалительного повреждения. Однако точные молекулярные механизмы изменения концентрации растворимых антигенов при ОП пока остаются неизвестными. Динамика показателей носит разнонаправленный характер даже в клинически сходных случаях, что подразумевает скорее всего наличие разных путей, уровней регуляции этих процессов.
CD54 (1САМ-1) - мембранный белок, участвующий в адгезии многих клеток. В ранее проведенных исследованиях показана важная роль этого белка в патогенезе тяжелого ОП, связанного с развитием легочного повреждения. В частности, обнаружена повышенная экспрессия CD54 в поджелудочной железе и легких [26, 27]. Уровень sCD54 предложено использовать в качестве предиктора тяжелого ОП [28, 29]. Результаты проведенного нами исследования согласуются с данными этих материалов и указывают на участие молекулы sCD54 в генезе дыхательной недостаточности, обусловленной развитием ОРДС. При этом большее значение имеет выявление повышения уровня sCD54, отсутствие которого не исключает возможность развития респираторных расстройств, вызванных другими причинами. Инфицирование некроза или не влияло на динамику показателей растворимых форм мембранных антигенов (sCD54, sCD38), или приводило к снижению их уровня (sCD95, sCD25). Все пациенты с инфицированием некроза до оперативного вмешательства получали несколько курсов антибиотиков. Показано угнетающее влияние антибиотикотерапии на содержание растворимых дифференцировочных молекул, что связано с иммуно-супрессивным действием антибиотиков [30]. Это может быть причиной снижения у отдельных пациентов уровня растворимых дифференцировочных молекул.
Заключение
Результаты исследования свидетельствуют об изменении уровней sCD95, sCD25, sCD54 и sCD38 при разных вариантах течения ОП. В частности, при тяжелых формах заболевания отмечают увеличение сывороточного содержания молекул sCD95 и sCD54, которые потенцируют развитие воспаления и ранней органной недостаточности, а при легких и средней тяжести - снижение sCD25 и sCD38. Высокие уровни молекул sCD95 у пациентов с тяжелым ОП указывают на роль нарушения процессов Fas-опосредованного апоптоза в прогрессировании органной недостаточности при данной патологии. У больных с НП высокий уровень молекул sCD54 зарегистрирован в случаях развития в составе ранней органной недостаточности дыхательной недостаточности, патофизиологической основой возникновения которой стал острый респираторный дистресс-синдром.
Исследование проведено при поддержке Министерства образования и науки России в рамках государственного задания по выполнению работ в области научной деятельности (проектная часть) - 2014/134 (2575).
Авторы заявляют об отсутствии конфликта интересов.
ЛИТЕРАТУРА
2. Булава Г.В., Абакумов М.М., Боровкова Н.В., Хватов В.Б., Годков М.А. Оценка тяжести иммунных расстройств и прогнози-
рование развития гнойно-септических осложнений у пациентов с неотложной хирургической патологией. Вестник хирургии им И.И. Грекова. 2009; 168 (3): 10-6.
4. Новиков В.В., Евсегнеева И.В., Караулов А.В., Барышников А.Ю. Растворимые формы мембранных антигенов клеток иммунной системы при социально значимых инфекциях. Сообщение 2. Исследование их роли при вирусных инфекциях. Российский биотерапевтический журнал. 2005; 4 (3): 131-45.
8. Пегов Р.Г., Алясова А.В., Новиков В.В., Барышников А.Ю. Содержание растворимой формы молекул HLA I класса в сыворотке крови больных раком легкого. Клин. лаб. диагн. 2009; (2): 38-9.
9. Уткин О.В., Новиков В.В. Регуляция апоптоза с помощью альтернативного сплайсинга матричной РНК. Российский биотерапевтический журнал. 2007; 6 (2): 13-20.
30. Любавина Н.А., Варварина Г.Н., Макарова Е.В., Меньков Н.В., Беляева Е.В., Ермолина Г.Б. и др. Сывороточное содержание растворимых антигенов адгезии как маркер прогрессирования хронической обструктивной болезни легких. Современные технологии в медицине. 2011; (1): 67-71.
REFERENCES
1. Zhang X.P., Tian H.; Pathogenesis of pancreatic encephalopathy in severe acute pancreatitis. Hepatobiliary Pancreat Dis Int. 2007; 6
(2): 134-40.
2. Bulava G.V., Abakumov M.M., Borovkova N.V., Khvatov V.B., Godkov M.A. Assessment of the severity of immune disorders and prediction of the development of septic complications in patients with acute surgical pathology. Vestnik khirurgii im I.I. Grekova. 2009; 168
(3): 10-6. (in Russian)
3. Banks P.A., Bollen T.L., Dervenis C., Gooszen H.G., Johnson C.D., Sarr M.G. et al. Acute Pancreatitis Classification Working Group. Classification of acute pancreatitis-2012: revision of the Atlanta classification and definitions by international consensus. Gut. 2013; 62 (1): 102-11.
4. Novikov V. V., Evsegneeva I.V., Karaulov A.V., Baryshnikov A.Yu. Soluble forms of membrane antigens of immune system cells at socially significant infections. Message 2. Research of their role at viral infections. Rossiyskiy bioterapevticheskiy zhurnal. 2005; 4 (3): 131-45. (in Russian)
5. Novikov V.V., Egorova N.I., Kurnikov G.Y., Evsegneeva I.V., Karaulov A.V., Baryshnikov A.Y. Serum levels of soluble HLA and IL-2R molecules in patients with urogenital chlamydia infection. Adv. Exp. Med Biol. 2007; (601): 285-9.
6. Lebedev M.Yu., Sholkina M.N., Vilkov S.A., Egorova N.I., Novikov V.V., Baryshnikov A.Yu. Serum levels of different forms of soluble CD38 antigen in burned patients. Burns. 2004; 30 (6): 552-6.
7. Lebedev M.Yu., Vilkov S.A., Sholkina M.N., Krizhanova M.A., Novikov V.V., Vyasmina E.S. et al. Peripheral blood lymphocytes immunophenotype and serum concentration of soluble HLA class I in burn patients. Burns. 2003; 29 (2): 123-8.
8. Pegov R. G., Alyasova A.V., Novikov V.V., Baryshnikov A.Yu. The maintenance of a soluble form of molecules of HLA class I in serum of blood of patients with cancer of a lung. Klin. lab. diagn. 2009; (2): 38-9. (in Russian)
9. Utkin O.V., Novikov V.V. Regulation of apoptosis by means of an alternative splicing ofmessenger RNA.Rossiyskiy bioterapevticheskiy zhurnal. 2007; 6 (2): 13-20. (in Russian)
10. Paunel-Gorgulu A., Flohe S., Scholz M., Windolf J., Logters T. Increased serum soluble Fas after major trauma is associated with delayed neutrophil apoptosis and development of sepsis. Crit. Care. 2011; 15 (1): R20. doi: 10.1186/cc9965.
11. Domagala-Kulawik J., Urbankowski T., Safianowska A. S Fas in bronchoalveolar lavage fluid of patients with sarcoidosis in relation to cigarette smoking. Hum. Immunol. 2013; 74 (7): 858-60. doi: 10.1016/j.humimm.2013.04.015.
12. Papathanassoglou E.D., Moynihan J.A., Vermillion D.L., McDermott
ORIGINAL ARTICLE
M.P., Ackerman M.H. Soluble fas levels correlate with multiple organ dysfunction severity, survival and nitrate levels, but not with cellular apoptotic markers in critically ill patients. Shock. 2000; 14 (2): 107-12.
13. Bhatia M. Apoptosis of pancreatic acinar cells in acute pancreatitis: is it good or bad? J. CellMol. Med 2004; 8 (3): 402-9.
14. Weng T.I., Wu H.Y., Chen B.L., Liu S.H. Honokiol attenuates the severity of acute pancreatitis and associated lung injury via acceleration of acinar cell apoptosis. Shock. 2012; 37 (5): 478-84.
15. Kaiser A.M., Saluja A.K., Sengupta A., Saluja M., Steer M.L. Relationship between severity, necrosis, and apoptosis in five models of experimental acute pancreatitis. Am. J. Physiol. 1995; 269 (5, Pt 1): 1295-304.
16. Thrower E.C., Gorelick F.S., Husainb S.Z. Molecular and cellular mechanisms of pancreatic injury. Curr. Opin. Gastroenterol. 2010; 26 (5): 484-9.
17. Wang J., Chen G., Gong H., Huang W., Long D., Tang W. Amelioration of experimental acute pancreatitis with dachengqi decoction via regulation of necrosis-apoptosis switch in the pancreatic acinar cell. PLoS One. 2012; 7 (7): e40160.
18. Jimenez M.F., Watson R.W., Parodo J., Evans D., Foster D., Steinberg M. et al. Dysregulated expression of neutrophil apoptosis in the systemic inflammatory response syndrome. Arch. Surg. 1997; 132 (12): 1263-9.
19. Nakamura Y., Do J.H., Yuan J., Odinokova I.V., Mareninova O., Gukovskaya A.S. et al. Inflammatory cells regulate p53 and caspases in acute pancreatitis. Am. J. Physiol. Gastrointest. Liver Physiol. 2010; 298 (1): G92-100.
20. Endo S., Inoue Y., Fujino Y., Yamada Y., Sato N., Wakabayashi G. et al. Soluble Fas and soluble Fas L levels in patients with acute pancreatitis. Res. Commun. Mol. Pathol. Pharmacol. 2000; 108 (3-4): 179-86.
21. Uehara S., Gothoh K., Handa H., Tomita H., Tomita Y. Immune function in patients with acute pancreatitis. J. Gastroenterol. Hepatol. 2003; 18 (4): 363-70.
22. Kitamura M., Endo S., Sato N., Yaegashi Y., Suxzuki Y., Kojika N. et al. Soluble Fas and soluble FasL in multiple organ dysfunction syndrome complicating diffuse peritonitis. Res. Commun. Mol. Pathol. Pharmacol. 2004; 115-6: 235-42.
23. Matera G., Puccio R., Giancotti A., Quirino A., Pulicari M.C., Zicca E. et al. Impact of interleukin-10, soluble CD25 and interferon-y on the prognosis and early diagnosis of bacteremic systemic inflammatory response syndrome: a prospective observational study. Crit. Care. 2013; 17 (2): R64. doi: 10.1186/cc12596.
24. Monneret G., Venet F., Pachot A., Lepape A. Monitoring immune dysfunctions in the septic patient: a new skin for the old ceremony. Mol. Med 2008; 14 (1-2): 64-78.
25. Malavasi F., Deaglio S., Ferrero E., Funaro A., Sancho J., Ausiello C.M. et al. CD38 and CD157 as receptors of the immune system: a bridge between innate and adaptive immunity. Mol. Med. 2006; 12 (11-12): 334-41.
26. Sun W., Watanabe Y., Wang Z.Q. Expression and significance of ICAM-1 and its counter receptors LFA-1 and Mac-1 in experimental acute pancreatitis of rats. World J. Gastroenterol. 2006; 12 (31): 5005-9.
27. Zhang X., Wu D., Jiang X. Icam-1 and acute pancreatitis complicated by acute lung injury. JOP. 2009; 10 (1): 8-14.
28. Folch-Puy E. Markers of severity in acute pancreatitis. Med. Clin. (Barc). 2007; 128 (11): 417-8.
29. Zhu H.H., Jiang L.L. Serum inter-cellular adhesion molecule 1 is an early marker of diagnosis and prediction of severe acute pancreatitis. World J. Gastroenterol. 2012; 18 (20): 2554-60.
30. Lyubavina N.A., Varvarina G.N., Makarova E.V., Men'kov N.V., Be-lyaeva E.V., Ermolina G.B. et al. Serous content of adhesion soluble antigen as a marker of the chronic obstructive pulmonary disease progressing. Sovremennye tekhnologii v meditsine. 2011; (1): 67-71. (in Russian)
Поступила 12.01.16 Принята в печать 18.02.16
