CC BY
28
mation. Am. J. Physiol. Gastrointest. Liver Physiol. 2005; (6): G1328-38.
11. Perse M., Cerar A. Dextran sodium sulphate colitis mouse model: traps and tricks. J. Biomed. Biotechnol. 2012; ID718617: 13.
12. Smith P., Siddharth J., Pearson R., Holway N., Shaxted M., Butler M. et al. Host genetics and environmental factors regulate ecological succession of the mouse colon tissue-associated microbiota. PLoS One. 2012; 7 (1): 30 273.
13. Mennigen R., Nolte K., Rijcken E., Utech M., Loeffler B., Senninger N., Bruewer M. Probiotic mixture VSL#3 protects the epithelial barrier by maintaining tight junction protein expression and preventing apoptosis in a murine model of colitis. Am. J. Physiol. Gastrointest. Liver Physiol. 2009; 296 (5): G1140-9.
14. Kawada M., Arihiro A., Mizoguchi E. Insights from advances in research of chemically induced experimental models of human inflammatory bowel disease. World J. Gastroenterol. 2007; 42 (13): 5581-93.
15. Laroui H., Ingersoll S.A., Liu H.C., Baker M.T., Ayyadurai S., Cha-rania M.A. et al. Dextran Sodium Sulfate (DSS) induces colitis in mice by forming nano-lipocomplexes with medium-chain-length fatty acids in the colon. PLoS One. 2012; 7 (3): e32084.
ORIGINAL ARTICLE
16. Abdulaeva S.O., Khomyakova T.I., Simonova E.Yu., Tsvetkov I.S., Dobrynina M.T., Makarova O.V., Yatskovskiy A.N. Comparative morphological, bacteriological and immunological characteristics of severe ulcerative colitis induced by sodium dextran sulfate in Balb/c and C57BL/6 mice. Klinicheskaya i eksperimental'naya morfologi-ya. 2013; 4 (8): 27-33. (in Russian)
17. Yu T.Q., Saruta M., Avanesyan A., Fleshner R.F., Banham H.A., Papadakis A.K. Expression and functional characterization of FOX-P3CD4 regulatory T cells in ulcerative colitis. Inflamm. Bowel Dis. 2007; 13 (2): 191-9.
18. Smirnov V.S., Shubik V.M., Sosyukin A.E., Petlenko S.V. Immunodeficiency States. [Immunodefitsitnye sostoyaniya] / Eds prof. Smirnov V.S., prof. Freidlin I.S. St. Petersburg: Foliant; 2000: 293-330. (in Russian)
19. Yokoyama Y., Fukunaga K., Fukuda Y., Tozawa K., Kamikozuru K., Ohnishi K. et al. Demonstration of low-regulatory CD25High+CD4+ and high-pro-inflammatory CD28-CD4+ T-Cell subsets in patients with ulcerative colitis: modified by selective granulocyte and monocyte adsorption apheresis. Dig. Dis. Sci. 2007; 52 (10): 2725-31.
Поступила 05.02.16 Принята в печать 18.02.16
КЛИНИЧЕСКАЯ ИММУНОЛОГИЯ
© КОЛЛЕКТИВ АВТОРОВ, 2016
УДК 616.24-007.272-036.12-085.357-078.33
Караулов А.В.3, Макарова Е.В.1, Любавина Н.А.1, Варварина ПН.1, Кравченко Г.А.2, Евсегнеева И.В.3, Новиков В.В.2
РАСТВОРИМЫЕ ФОРМЫ МЕМБРАННЫХ ЛЕЙКОЦИТАРНЫХ АНТИГЕНОВ ПРИ КОРТИКОСТЕРОИДНОЙ ТЕРАПИИ ОБОСТРЕНИЙ ХРОНИЧЕСКОЙ ОБСТРУКТИВНОЙ БОЛЕЗНИ ЛЕГКИХ
1ГБОУ ВПО «Нижегородская государственная медицинская академия» Министерства здравоохранения Российской Федерации, 603005, г. Нижний Новгород, Россия; 2ФГАОУ ВО «Нижегородский государственный университет им. Н.И. Лобачевского», 603950, г. Нижний Новгород, Россия; 3ГБОУ ВПО «Первый Московский государственный медицинский университет им. И.М. Сеченова Министерства здравоохранения Российской Федерации», 119991, г Москва, Россия
Растворимые формы дифференцировочных молекул клеток иммунной системы принимают участие в патогенезе заболеваний органов дыхания. В настоящей работе исследовано содержание растворимых форм молекул CD50, CD54, CD38, CD25, CD8, CD95, HLA I, HLA-DR в сыворотке крови у больных с обострением хронической обструктивной болезни легких (ХОБЛ) до и после лечения глюкокортикоидами. Обнаружено снижение сывороточного уровня маркеров активации клеток иммунной системы (sCD8 и sCD38), молекул адгезии (sCD50 и sCD54), ингибитора апоптоза (sCD95) и sHLA I, sHLA-DR. Применение системных кортикостероидов при ХОБЛ усугубляет снижение сывороточного содержания sCD50, sCD54, sCD8, sCD95 и sHLA-DR. Выявлены корреляционные связи концентрации тестируемых молекул с длительностью и дозой применяемых в лечении системных глюкокортикои-дов. Ингаляционные глюкокортикоиды (небулизированный будесонид) демонстрируют противовоспалительную активность и не оказывают иммуносупрессивного действия.
К л ю ч е в ы е с л о в а: CD-aнтигены; растворимые формы мембранных молекул; обострение ХОБЛ; небулизированный будесонид; системные глюкокортикоиды. Для цитирования: Караулов А.В., Макарова Е.В., Любавина Н.А., Варварина Г.Н., Кравченко Г.А., Евсегнеева И.В., Новиков В.В. Растворимые формы мембранных лейкоцитарных антигенов при кортикостероидной терапии обострений хронической обструктивной болезни легких. Иммунология. 2016; 37 (3): 175-180. DOI: 10.18821/0206-49522016-37-3-175-180
Для корреспонденции: Караулов Александр Викторович, д-р мед. наук, член-корр. РАН, проф., зав. каф. клинической иммунологии и аллергологии ГБОУ ВПО «Первый Московский государственный медицинский университет им. И.М. Сеченова Министерства здравоохранения Российской Федерации», г. Москва, E-mail: [email protected]
ОРИГИНАЛЬНЫЕ СТАТЬИ
Karaulov A.V.3, Makarova E.V.1, Lyubavina N.A.1, Varvarina G.N.1, Kravchenko G.A.2, Evsegneeva I.V.3, Novikov V.V.2 SOLUBLE FORMS OF MEMBRANE LEUKOCYTE ANTIGENS DURING CORTICOSTEROID THERAPY OF ACUTE EXACERBATIONS OF CHRONIC OBSTRUCTIVE PULMONARY DISEASE
'Nizhny Novgorod State Medical Academy, Ministry of Health of Russian Federation; 2Lobachevsky State University of Nizhni Novgorod, National Research University; 3I.M. Sechenov First Moscow State Medical University, Ministry of Health of Russian Federation
Soluble forms of molecular differentiation of immune system cells are involved in the pathogenesis of diseases of the respiratory system. We have investigated the soluble forms of the molecules CD50, CD54, CD38, CD25, CD8, CD95, HLA I, HLA-DR in the serum of patients with exacerbation of chronic obstructive pulmonary disease before and after treatment with corticosteroids. Serum levels of immune cells activation markers (sCD8 and sCD38), adhesion molecules (sCD50 and sCD54), inhibitor of apoptosis (sCD95) and sHLA I, sHLA-DR were decreased. The use of systemic corticosteroids in COPD worsens decrease serum levels of sCD50, sCD54, sCD8, sCD95 and sHLA-DR. The inverse correlations between the concentrations of tested molecules and the duration and dose of systemic glucocorticoids were found. Inhaled glucocorticoids (nebulized budesonide) demonstrate anti-inflammatory activity and do not have immunosuppressive actions.
Keywords: CD antigens; soluble membrane molecules; exacerbation of COPD; nebulized budesonide; systemic glucocorticoids.
For citation: Karaulov A.V., Makarova E.V., Lyubavina N.A., Varvarina G.N., Kravchenko G.A., Evsegneeva I.V., Novikov V.V. Soluble forms of membrane leukocyte antigens during corticosteroid therapy of acute exacerbations of chronic obstructive pulmonary disease. Immunologiya. 2016; 37 (3): 175-180. DOI: 10.18821/0206-4952-2016-37-3-175-180
For correspondence: Karaulov Aleksandr V., Dr. med. Sci., corresponding member Russian Academy of Sciences, Professor, head. Dep. clinical immunology and Allergology " I.M. Sechenov First Moscow state medical University of Ministry of healthcare of the Russian Federation", Moscow, drkaraulov@mail.
Conflict of interest. The authors declare no conflict of interest.
Funding. Funding: the Study was performed as part of the project part of state task in the sphere of scientific activities (project no 20.223.2014/K)
Received 09.11.15 Accepted 18.02.16
Введение
Хроническое воспаление играет ключевую роль в патогенезе хронической обструктивной болезни легких (ХОБЛ) [1]. Преимущественная локализация, характер и активность воспаления определяют особенности течения и фенотип ХОБЛ, скорость ее прогрессирования, а также являются маркером адекватности терапии и важным прогностическим фактором. Воспалительная реакция при ХОБЛ - результат сложной кооперации клеток, среди которых большое значение имеют нейтрофилы, альвеолярные макрофаги и лимфоциты CD8+ (цитотоксические) [2].
В процессе созревания, дифференцировки и активации клеток на их поверхности появляются соответствующие дифференцировочные антигены [3-5]. В результате протео-литического шеддинга или альтернативного сплайсинга они могут образовывать растворимые формы ^-формы), которые обнаруживаются в сыворотке крови и других биологических жидкостях. Растворимые дифференцировочные молекулы, с одной стороны, отражают уровень мембранной экспрессии антигена, а с другой - обладают иммунорегуляторными функциями [6-8].
В период обострений ХОБЛ воспалительные процессы достигают максимальной выраженности. Обязательный компонент лечения обострений ХОБЛ - противовоспалительная терапия, включающая глюкокортикоиды (ГК). Влияние терапии системными и ингаляционными ГК на состояние иммунного ответа и системное воспаление при заболеваниях брон-холегочной системы в настоящее время является предметом активного изучения.
Цель настоящей работы - исследование изменений сывороточной концентрации растворимых форм молекул адгезии CD50, CD54, активационных молекул CD38, CD25, корецептора Т-клеточного рецептора CD8, молекул главного комплекса гистосовместимости НЬА I, HLA-DR и ингибитора апоптоза CD95 под влиянием терапии кортикостероидами местного и системного действия у больных с обострением ХОБЛ.
Материал и методы
Проведено обследование 61 пациента (14 женщин и 47 мужчин в возрасте 60±10 лет), находившегося на стационарном лечении в пульмонологическом отделении Городской клинической больницы № 10 Нижнего Новгорода по поводу обострения ХОБЛ. Степень тяжести бронхиальной обструкции соответствовала GOLD II у 36, GOLD III - у 25 больных. Средний индекс курения составил 33±11 пачка/лет.
В качестве противовоспалительной терапии 34 пациента (1-я группа) получали ГК местного действия (будесонид 2 мг 2 раза в сутки через небулайзер) и 27 пациентов (2-я группа) - системные кортикостероиды (преднизолон 90-120 мг 2 раза в сутки внутривенно). Курс кортикостероидной терапии составлял 7-14 дней. Кроме того, все пациенты получали бронходилатационную, муколитическую, антибактериальную терапию. Длительную кислородотерапию получали 8,8% больных 1-й группы и 14,8% больных 2-й группы.
Всем пациентам проводили общеклиническое обследование, рентгенография грудной клетки, спирометрия с определением объема форсированного выдоха за 1 с (ОФВ1), общий анализ крови и мочи, биохимический анализ крови, микроскопический анализ мокроты с подсчетом количества нейтрофилов, пульсоксиметрия с измерением сатурации О2 (SpO2). Степень тяжести одышки определяли путем опроса с использованием модифицированного вопросника (mMRC), для интегральной оценки влияния ХОБЛ на жизнь пациента использовали САТ-тест [2, 9].
Содержание молекул sCD50, sCD54, sCD38, sCD25, sCD8, sCD95, sHLA I, sHLA-DR в сыворотке крови определяли им-муноферментным методом с использованием моноклональ-ных антител серии ИКО и поликлональных антител против антигенов мононуклеарных клеток периферической крови человека. Результаты представлены в условных единицах (U/ml). Образцы сыворотки крови пациентов сравнивали с образцами сыворотки 30 здоровых некурящих доноров, сопоставимых по полу и возрасту.
Статистический анализ проводили с использованием крите-
Таблица 1
сывороточное содержание растворимых дифференцировочных молекул и молекул гистосовместимости у больных ХОБЛ
Показатель Доноры, Me Больные ХОБЛ, р
[25p; 75p] Me [25p; 75p]
sCD54 суммарный 65 [62; 69] 60 [33; 69] 0,48
sCD54 олигомерный 155 [142; 235] 87 [78; 238] 0,0001
sCD50 354 [336; 368] 291 [227; 330] 0,0001
sCD38 суммарный 172 [144; 256] 123 [64; 197] 0,001
sCD38 олигомерный 257 [238; 269] 124 [60; 174] 0,0001
sCD25 400 [385; 420] 377 [104; 442] 0,28
sCD8 376 [351; 386] 346 [323; 416] 0,04
sCD95 суммарный 376 [350; 397] 314 [293; 401] 0,001
sCD95 олигомерный 250 [238; 260] 119 [50; 193] 0,001
sHLA I 991 [974; 1089] 776 [537; 1304] 0,01
sHLA-DR 100 [96; 107] 72 [55; 111] 0,01
рия Колмогорова-Смирнова, критерия Манна-Уитни, ранговой корреляции Спирмена, критерия Вилкоксона, парного критерия Стьюдента. Математическую обработку результатов осуществляли с помощью пакета статистических программ Statistica 6.0. При нормальном распределении величин результаты представлены в виде выборочного среднего и стандартного отклонения (М±£Ц), при распределении, отличном от нормального, - в виде медианы и процентилей Ме [0,25р; 0,75р].
результаты
Исходное содержание растворимых дифференцировочных антигенов лейкоцитов и молекул гистосовместимости в сыворотке крови больных с обострением ХОБЛ.
Исходно у больных с обострением ХОБЛ выявлено снижение сывороточного уровня растворимых молекул адгезии (sCD50 и олигомерной фракции sCD54), молекул, отражающих активацию иммунных клеток (sCD38, sCD8), ингибитора апоптоза (sCD95), а также растворимых молекул главного комплекса гистосовместимости I и II классов по сравнению со здоровыми донорами (табл. 1).
Кроме того, у больных ХОБЛ обнаружена прямая корреляционная связь между показателем бронхиальной проходимости ОФВ1 и содержанием антигенов sCD8, суммарного sCD54, ингибитора апоптоза sCD95, растворимых молекул главного комплекса гистосовместимости I класса (табл. 2).
Изменения клинических показателей и сывороточного содержания растворимых форм лейкоцитарных антигенов и молекул гистосовместимости под действием терапии. На фоне проведенного комплексного лечения в обеих группах отмечалось улучшение состояния обследуемых па-
Таблица 2
Зависимость между ОФв1 и сывороточным содержанием растворимых дифференцировочных молекул и молекул гистосов-местимости у больных ХОБЛ
Показатель Растворимые антигены r p
ОФВ1 sCD54 суммарный 0,6 0,02
sCD8 0,57 0,03
sCD95 суммарный 0,52 0,04
sCD95 олигомерный 0,43 0,04
sHLA I 0,47 0,01
ORIGINAL ARTICLE
циентов: уменьшились степень выраженности одышки (по модифицированному вопроснику mMRC и объективно), балл САТ-теста, продукция и гнойность мокроты. Кроме того, наблюдались нормализация SpO2 и прирост ОФВр снижение СОЭ (табл. 3). Значимых различий между больными, получавшими системные и ингаляционные ГК, не было.
При использовании системных ГК (СГК) отмечены тенденции к снижению количества лимфоцитов (с 2,5±0,9 109/л до 2±0,9 ■ 109/л; p = 0,07) и к повышению числа нейтрофи-лов (с 6±2,4 ■ 109/л до 7,2±1,5 ■ 109/л; р = 0,09), что вызвано особенностью действия этих препаратов (ускорением выхода нейтрофилов из костного мозга и перераспределением в сосудах с уменьшением краевого пула). Выявлена положительная корреляционная связь между количеством нейтрофиль-ных лейкоцитов периферической крови и дозой СГК (r = 0,4; p = 0,04), а также длительностью терапии СГК (r = 0,44; p = 0,03).
Изменения растворимых дифференцировочных молекул у больных ХОБЛ в процессе лечения системными и ингаляционными ГК представлены на рисунке. В обеих группах отмечено снижение уровня sCD25 - растворимого рецептора интерлейкина-2. Однако, как видно из рисунка, СГК вызывали также снижение содержания олигомера sCD54, антигенов sCD50, sCD95, sHLA-DR и тенденцию к снижению олигомера sCD38, усугубляя существовавшие нарушения и оказывая выраженное супрессивное влияние на уровень растворимых антигенов иммунокомпетентных клеток. Выявлена также отрицательная корреляционная связь между снижением уровня sCD8 на фоне лечения и дозой СГК (R = -0,66; p = 0,01). Уменьшение сывороточных концентраций суммарного антигена sCD95, антигена sCD50 и молекул гистосовместимости sHLA-DR было связано с дозой (R1 = -0,7, pi = 0,02; R2 = -0,76, p2 = 0,01; R3 = -0,3, p3 = 0,03 соответственно) и длительностью лечения СГК (R1 = -0,68, pi = 0,04; R2 = -0,46, p2 = 0,02; R3 = -0,3, p3 = 0,03 соответственно).
Обсуждение
Сравнительное изучение эффективности и безопасности небулизированных и системных ГК при обострении ХОБЛ в течение последних 10-15 лет проводилось и зарубежными, и отечественными авторами [10-12]. На основании этих исследований небулизированный будесонид в настоящее время рекомендован при обострениях ХОБЛ в качестве альтернативы системным глюкокортикоидам [2, 9, 13]. Вместе с тем данных о влиянии ингаляционных ГК на маркеры системного воспаления и медиаторы иммунитета мало [14] или они противоречивы. В настоящей работе впервые проведено сравнительное исследование влияния ГК местного и системного действия на уровень растворимых молекул гистосовме-стимости и дифференцировочных антигенов клеток иммунной системы у больных c обострением ХОБЛ.
Таблица 3
Изменение клинических показателей в процессе лечения больных ХОБЛ
Клинический симптом До лечения После лечения р
Одышка, балл по mMRC 3,1±0,8 1,9±0,5 0,01
САТ-тест, балл 23,5±8,1 16,8±4,2 0,01
ОФВ1, % от должного 53,5±22,2 64,2±29,1 0,03
8р02, % 93,9±1,7 97,2±1,1 0,001
Нейтрофилы мокроты, в поле зрения 51,0±7,2 20,0±5,1 0,001
СОЭ, мм/ч 19,1±14,0 13,1±10,4 < 0,0001
ОРИГИНАЛЬНЫЕ СТАТЬИ
Исходный уровень 9 из 11 изученных растворимых молекул у обследованных нами пациентов был снижен по сравнению со здоровыми донорами. Выявленные корреляции между содержанием антигенов sCD8, sCD54 суммарного, sCD95, sHLA-I и ОФВ1 могут свидетельствовать об участии тестируемых молекул в генезе бронхообструктивных нарушений при ХОБЛ. Ранее было показано, что низкий уровень растворимых молекул клеток иммунной системы ассоциирован с тяжелым течением ХОБЛ, частыми обострениями, выраженными изменениями функции внешнего дыхания и является неблагоприятным прогностическим признаком [15].
В ходе иммунного ответа при антигенной и митогенной стимуляции лимфоцитов продуцируются мембранные белки, так называемые активационные антигены. Одним из известных активационных маркеров является антиген CD25 -маркер альфа-цепи рецептора интерлейкина-2, появление которой в составе рецептора ведет к 100-кратному повышению его аффинности к интерлейкину-2. Наличие полноценной функциональной системы интерлейкин-2/рецептор интерлейкина-2 (^2) является решающим моментом в запуске пролиферации Т-лимфоцитов и индукции иммунного ответа [16]. Содержание растворимых форм CD25 отражает уровень поверхностной экспрессии этого антигена и позволяет судить об интенсивности активации Т-лимфоцитов. У обследованных нами пациентов сывороточный уровень sCD25 исходно не был снижен и уменьшался при лечении как системными, так и ингаляционными ГК, что можно расценить как проявление противовоспалительного действия кортикостероидов. Угнетающее влияние кортикостероидов на содержание sCD25 наблюдалось ранее и у больных с обострением бронхиальной астмы [17, 18]. Снижение продукции интерлейкина-2 и его рецептора под действием ГК ведет к уменьшению ^2-зависимого фосфорилирования белков и подавлению пролиферации Т-лимфоцитов.
Сывороточные концентрации другой активационной и сигнальной молекулы - sCD38 антигена (суммарного и оли-гомера) - у обследованных пациентов еще до лечения находились на низком уровне. Молекула CD38 участвует в мобили-
х „
3 я
III
Ц I- 5 га I о а. л §
9-6 5
Н щ !С
III
1 З X
9 х ® * о Э о; о. о
5 О I х .о. £
60 л
50403020100
Ингаляционные глюкокортикоиды
Системные глюкокортикоиды
^ Ш X
¡г*
г ч
-10 -20 -30 -40 -50
¡2 II
м- ■«а- о ю ю ю ООО ООО со со со
'5 £ £
11
У
00 со ю со со см со □ ООО
оооо
ш со и со
I й-
1°
г ; &§ §
СЛ ОТ <<
ООН (О со (О со
Iй-
т 2
I а-
II У
00 со ю со со см со
аооо оооо
5 2
II
м- ^ о ю ю ю ааа
ООО____
со со со со со со со
1°
г ; &§ §
ЙЮ-1!1
сл от < <
ООН со со со со
Изменения концентрации растворимых дифференцировочных антигенов и молекул главного комплекса гистосовместимости при терапии глюкокортикоидами (% по отношению к исходному уровню).
зации внутриклеточного кальция в гладкомышечных клетках дыхательных путей, в развитии бронхиальной обструкции и формировании гиперреактивности бронхов. Известно, что дексаметазон снижает индуцированную провоспалитель-ными цитокинами (фактор некроза опухоли а) экспрессию CD38 на транскрипциональном уровне, ингибируя активность фактора транскрипции ОТ-кБ, и на посттранскрипцио-нальном уровне, влияя на стабильность транскриптов [19]. Кроме того, обнаруженные глюкокортикоид-чувствительные элементы в промоутерном регионе гена CD38 создают базис для стероидной регуляции экспрессии CD38 путем влияния на транскрипцию [20]. В нашем исследовании ГК локального действия не оказывали влияния на содержание растворимых форм CD38, однако под действием СГК была выявлена тенденция к снижению уровня его олигомерной фракции. Видимо, снижение мембранной экспрессии молекул CD38 под действием кортикостероидных гормонов сопровождается уменьшением сплайсинга и высвобождения растворимых форм.
ГК также вызывают апоптоз незрелых или активированных Т- и В-лимфоцитов. Среди различных моделей клеточной гибели Fas/CD95-опосредованный апоптоз имеет большую биологическую значимость для иммунной системы и является регуляторным механизмом, препятствующим накоплению эф-фекторных клеток и неконтролируемой продукции цитокинов. Растворимые формы Fas-белка (sCD95) блокируют апоптоз, связываясь с Fas-лигандом на поверхности клеток; олигомер-ные формы sCD95 действуют цитотоксически [21, 22]. В проведенном нами исследовании назначение ингаляционных ГК не меняло содержания модулятора апоптоза, но применение преднизолона приводило к снижению концентрации как суммарной, так и олигомерной фракций sCD95. Низкий уровень ингибитора апоптоза способствует усилению запрограммированной гибели иммунокомпетентных клеток. Одним из путей реализации иммунодепрессивных эффектов кортикостероидов является контроль абсолютного количества лимфоидных клеток и их субпопуляций, который обеспечивается активацией Fas/CD95-зависимого апоптоза. Снижение абсолютного количества лимфоцитов под действием преднизолона у обследованных нами пациентов находилось в рамках статистической тенденции, что может быть связано как с недостаточно большим объемом наблюдений, так и с преимущественным влиянием ГК на определенные субпопуляции лимфоцитов. Как мы видели, уменьшение концентрации модулятора апоптоза sCD95 при назначении преднизолона сопровождалось одновременным снижением уровня активационных молекул антигена sCD25, тенденцией к снижению sCD38, а также уменьшением содержания маркера цитотоксических Т-лимфоцитов sCD8 и молекул гистосовместимости sHLA-DR. Другие авторы тоже регистрируют ингибирующее влияние кортикостероидов на число активированных CD8+ лимфоцитов при ХОБЛ [23].
Сывороточная концентрация растворимых молекул главного комплекса гистосовместимости I класса после лечения СГК увеличивалась, хотя и оставалась ниже нормальных значений.
Молекулы межклеточной адгезии (1САМ) - 1САМ-1 (CD54) и 1САМ-3 (CD50) - обеспечивают плотную адгезию лейкоцитов к эндотелию и создают условия для их миграции через сосудистую стенку в легкие при ХОБЛ [24, 25]. При назначении не-булизированного будесонида содержание растворимых молекул адгезии в сыворотке крови не изменялось, а при подключении СГК выявлено дальнейшее снижение содержания растворимых форм олигомера CD54 и антигена CD50, что, вероятно, связано с ингибированием мембранной экспрессии этих антигенов. Полученные результаты согласуются с данными современной литературы, которые показали снижение мембранной экспрессии молекул адгезии под воздействием СГК [26], которое ведет к нарушению процессов клеточной адгезии и миграции у больных ХОБЛ и к угнетению иммунного ответа. Ранее в эксперименте на мышах с ХОБЛ/эмфиземой легких было показано, что зна-
чительное снижение мембранной экспрессии ICAM-1 эпителием дыхательных путей сопровождается нарушением легочного клиренса Haemophilus influenza, одного из наиболее частых бактериальных возбудителей ХОБЛ [27]. В клинической практике хорошо известно, что интенсивная кортикостероидная терапия у больных ХОБЛ с тяжелой сопутствующей патологией способна привести к активации оппортунистических инфекций, которые могут стать причиной летального исхода [28]. Индуцированные ГК нарушения адгезии могут быть ответственны и за перераспределение нейтрофилов в сосудах: уменьшение краевого стояния нейтрофилов с ослаблением их транспозиции через сосудистую стенку и миграции в ткани и увеличение циркулирующего пула, которое приводит к появлению нейтро-фильного лейкоцитоза в общем анализе крови.
Нами также было установлено, что уменьшение уровня ряда растворимых молекул носит дозозависимый характер, о чем свидетельствуют обнаруженные корреляции между снижением антигенов sCD8, sCD95 суммарного, sCD50, sHLA-DR и дозой, а также длительностью терапии системными кортикостероидами. В этой связи актуальны современные стратегии, направленные на сокращение сроков системной глюкокортикоидной терапии и снижение кумулятивной дозы при неосложненном обострении ХОБЛ для уменьшения числа нежелательных явлений [29].
Собственные наблюдения и литературные данные показывают, что глюкокортикоиды изменяют не только число, но и активность клеток, участвующих в иммунном ответе, влияя на рецепторы и сигнальные молекулы лейкоцитов. Это одна из важнейших сторон противовоспалительного и иммуносупрессив-ного действия глюкокортикоидов. Подавление воспалительной реакции при обострении ХОБЛ имеет огромное клиническое значение. Однако иммуносупрессивный и противовоспалительный эффекты глюкокортикоидов трудно разделить, поскольку оба они связаны с подавлением функции лейкоцитов [30]. Согласно нашим данным и результатам других исследователей, ингаляционные ГК обладают высокой противовоспалительной активностью при обострении ХОБЛ [14]. В проведенном нами исследовании противовоспалительная активность небулизиро-ванного будесонида проявлялась улучшением клинической симптоматики и снижением содержания растворимого рецептора к IL2. Отсутствие изменений со стороны других изученных растворимых молекул в системной циркуляции, видимо, связано с преимущественно локальным действием ингаляционных ГК. В отличие от ингаляционных ГК системные оказывали угнетающее действие на исходно сниженные показатели растворимых антигенов лейкоцитов, усугубляя существующие нарушения. Снижение сывороточного уровня растворимых форм молекул адгезии, модулятора апоптоза, маркеров активации лимфоцитов может отражать уменьшение их мембранной экспрессии, что ведет к нарушению взаимодействия клеток и угнетению иммунного ответа под влиянием СГК. Это особенно неблагоприятно для иммунокомпрометированных пациентов, а также для больных с фенотипом ХОБЛ с частыми обострениями, требующими назначения системных ГК.
Заключение
Исследование растворимых форм лейкоцитарных антигенов у пациентов с обострением ХОБЛ позволяет оценить состояние иммунитета на тонком молекулярном уровне и провести мониторинг иммунологических нарушений на фоне терапии. У больных ХОБЛ выявлен сниженный сывороточный уровень антигенов scD50, scD54, scD8, scD38, scD95 и молекул ги-стосовместимости sHLA I и sHLA-DR, что может свидетельствовать об угнетении клеточного звена иммунной системы. Применение преднизолона при обострении ХОБЛ усугубляет существующие изменения сывороточных антигенов scD50, sCD54, sCD8, sCD95 и sHLA-DR, оказывая тем самым супрессивное действие на клеточный иммунитет и межклеточную адгезию, которое носит дозозависимый характер. Небулизирован-
ORIGINAL ARTICLE
ный будесонид обладает противовоспалительной активностью и при этом не оказывает системного иммуносупрессивного действия, представляя тем самым эффективную и безопасную альтернативу системным кортикостероидам.
Исследование выполнено в рамках проектной части государственного задания в сфере научной деятельности (проект № 20.223.2014/К).
Авторы заявляют об отсутствии конфликта интересов.
литература
1. Chung K.F, Adcock I.M. Multifaceted mechanisms in COPD: inflammation, immunity, and tissue repair and destruction. Eur. Respir. J. 2008; : 1334-56.
2. Глобальная стратегия диагностики, лечения и профилактики хронической обструктивной болезни легких (пересмотр 2011): Пер. с англ. под ред. А.С. Белевского. М.: Атмосфера; 2012.
3. Мейл Д. и др. Иммунология: Пер. с англ. М.: Логосфера; 2007.
4. Новиков В.В., Караулов А.В., Барышников А.Ю. Растворимые формы мембранных белков клеток иммунной системы. М.: МИА; 2008.
5. Новиков В.В, Евсегнеева И.В. Новые дифференцировочные антигены человека, утвержденные на VII Международном ворк-шопе. Российский биотерапевтический журнал. 2003; (3): 1-4.
6. Lebedev M.Yu., Sholkina M.N., Vilkov S.A., Egorova N.I., Novikov V.V., Baryshnikov A.Yu. Serum levels of different forms of soluble CD38 antigen in burned patients. Burns. 2004; 30 (6): 552-6.
7. Вишневская Т.В., Масалова О.В., Шкурко Т.В., Евсегнеева И.В., Птицына Ю.С., Кравченко Г.А. и др. Растворимые формы дифференцировочных антигенов в сыворотке крови больных гепатитом С. Медицинская иммунология. 2005; 7 (1): 33-40.
8. Lebedev M.Ju., Vilkov S.A., Sholkina M.N., Krizhanova M.A., Novikov V.V., Vyasmina E.S., Baryshnikov A.Yu. Peripheral blood lymphocytes immunophenotype and serum concentration of soluble HLA class I in burn patients. Burns. 2003; 29 (2): 123-8.
9. Чучалин А.Г., Авдеев С.Н., Айсанов З.Р., Белевский А.С., Ле-щенко И.В., Мещерякова Н.Н. и др. Федеральные клинические рекомендации по диагностике и лечению хронической обструктивной болезни легких. Пульмонология. 2014; (3): 15-54.
10. Maltais F., Ostinelli J., Bourbeau J., Tonnel A.B., Jacquemet N., Had-don J. et al. Comparison of nebulized budesonide and oral prednisolone with placebo in the treatment of acute exacerbations of chronic obstructive pulmonary disease: a randomized controlled trial. Am. J. Respir. Crit. Care Med.. 2002; 165 (5): 698-703.
11. Авдеев С.Н., Суточникова О.А., Белевский А.С., Чучалин А.Г. Небулизированный будесонид (суспензия Пульмикорта) при тяжелом обострении ХОБЛ. Пульмонология. 2003; 5: 81-8.
12. Gunen H., Hacievliyagil S.S., Yetkin O., Gulbas G., Mutlu G.L., In E. The role of nebulised budesonide in the treatment of exacerbations of COPD. Eur. Respir. J. 2007; 29 (4): 660-7.
13. Global Strategy for Diagnosis, Management, and Prevention of COPD. Updated 2015. [В Интернете] [cited 2015 Jul 01]. Available from: <http://goldcopd.com/>
14. Sun X., He Z., Zhang J., Deng J., Bai J., Li M., Zhong X. Compare the efficacy of inhaled budesonide and systemic methylprednisolone on systemic inflammation of AECOPD. Pulm. Pharmacol. Ther. 2015; 31: 111-6.
15. Любавина Н.А., Макарова Е.В., Меньков Н.В., Майорова Л.В., Шония М.Л., Преснякова Н.Б. и др. Особенности клинического течения хронической обструктивной болезни легких в зависимости от продолжительности курения и состояния иммунного ответа пациентов. Пульмонология. 2013; (4): 52-5.
16. Любавина Н.А., Варварина Г.Н., Макарова Е.В., Меньков Н.В., Преснякова Н.Б., Караулов А.В., Новиков В.В. Влияние стандартной патогенетической терапии на сывороточный уровень молекул sCD38, sCD25 и sCD95 у больных бронхиальной астмой смешанного типа. Иммунология. 2011; 32 (5): 267-9.
17. Sahid El-Radhi A., Hogg C.L., Bungre J.K., Bush A., Corrigan C.J. Effect of oral glucocorticoid treatment on serum inflammatory markers in acute asthma. Arch. Dis. Child. 2000; 83 (2): 158-62.
18. Kang B.N., Jude J.A., Panettieri R.A., Jr., Walseth T.F., Kannan M.S. Glucocorticoid regulation of CD38 expression in human airway smooth muscle cells: role of dual specificity phosphatase 1. Am. J. Physiol. Lung Cell. Mol. Physiol. 2008; 295 (1): L186-L1.
19. Tirumurugaan K.G., Kang B.N., Panettieri R.A., Foster D.N., Walseth T.F., Kannan M.S. Regulation of the cd38 promoter in hu-
ОРИГИНАЛЬНЫЕ СТАТЬИ
man airway smooth muscle cells by TNF-a and dexamethasone. Re-spir. Res. 2008; 9: 26.
20. Proussakova O.V. et al. Oligomerisation of soluble Fas antigen induced its cytotoxity. J. Biol. Chem. 2003; 278: 36 236-41.
21. Ptisyna Y.S., Bornyakova L.A., Baryshnikov A.Y., Martynova T.G., Kryzhanova M.A., Novikov V.V. A soluble form of FAS/APO-1 (CD95) antigen in the serum of viral hepatitis patients. Int. J. Im-munorehabil. 1999; 14: 110.
22. Zhu X., Gadgil A.S., Givelber R., George M.P., Stoner M.W., Sci-urba F.C., Duncan S.R. Peripheral T cell functions correlate with the severity of chronic obstructive pulmonary disease. J. Immunol. 2009; 182 (5): 3270-7.
23. Blidberg K., Palmberg L., James A., Billing B., Henriksson E., Lantz A. et al. Adhesion molecules in subjects with COPD and healthy non-smokers: a cross sectional parallel group study. Respir. Res. 2013; 14 (1): 47. Available from: <http://respiratory-research.com/ content/14/1/47>
24. Новиков В.В., Бабаев А.А., Кравченко Г.А., Манакова Э.А., Па-шина Л.А., Марных С.А., Караулов А.В. Растворимые ассоциа-ты молекул адгезии CD54 и CD18 в сыворотке крови человека. Иммунология. 2008; 29 (4): 220-3.
25. Gorska-Ciebiada M. et al. Intercellular adhesion molecule 1 and tumor necrosis factor alpha in asthma and persistent allergic rhinitis: relationship with disease severity. Ann. Allergy Asthma Immunol. 2006; 97 (1): 66-72.
26. Pang B., Hong W., West-Barnette S.L., Kock N.D., Swords W.E. Diminished IcAM-1 expression and impaired pulmonary clearance of nontypeable haemophilus influenzae in a mouse model of chronic obstructive pulmonary disease/emphysema. Infect. and Immun. 2008; 76 (11): 4959-67.
27. Hagiya H., Miyake T., Kokumai Y., Murase T., Kuroe Y., Nojima H. et al. Co-infection with invasive pulmonary aspergillosis and Pneumocystis jirovecii pneumonia after corticosteroid therapy. J. Infect. Chemother. 2013; 19 (2): 342-7.
28. Leuppi J.D., Schuetz P., Bingisser R., Bodmer M., Briel M., Drescher T. et al. Short-term vs conventional glucocorticoid therapy in acute exacerbations of chronic obstructive pulmonary disease. The REDUCE randomized clinical trial (therapy). J.A.M.A. 2013; 309; 2223-31.
29. Franchimont D. Overview of the actions of glucocorticoids on the immune response: A good model to characterize new pathways of immunosuppression for new treatment strategies. In: Charmandari E., Chrousos G., Kino T., Eds. Glucocorticoid Action: Basic and Clinical Implications. (Ann. N. Y. Acad. Sci. Vol. 1024). New York; 2004: 124-37.
references
1. Chung K.F, Adcock I.M. Multifaceted mechanisms in COPD: inflammation, immunity, and tissue repair and destruction. Eur. Respir. J. 2008; : 1334-56.
2. Global Strategy for the Diagnosis, Treatment and Prevention of Chronic Obstructive Pulmonary Disease (Revised 2011). [Global'naya strategiya diagnostiki, lecheniya i profilaktiki khronicheskoy obstruk-tivnoy bolezni legkikh (peresmotr 2011) : Transl. from Engl. pod red. A.S. Belevskogo. Moscow: Atmosfera; 2012. (in Russian)
3. Meyl D. et al. Immunology. [Immunologiya]: Transl. from Engl. Moscow: Logosfera. 2007. (in Russian)
4. Novikov V.V., Karaulov A.V., Baryshnikov A.Yu. Soluble forms of membrane proteins of cells of the immune system. [Rastvorimye formy membrannykh belkov kletok immunnoy sistemy]. Moscow: MIA; 2008. (in Russian)
5. Novikov V.V, Evsegneeva I.V. New differentiation antigens of man, approved at the VII International workshop. Rossiyskiy bioterape-vticheskiy zhurnal. 2003; (3): 1-4. (in Russian)
6. Lebedev M.Yu., Sholkina M.N., Vilkov S.A., Egorova N.I., Novikov V.V., Baryshnikov A.Yu. Serum levels of different forms of soluble CD38 antigen in burned patients. Burns. 2004; 30 (6): 552-6.
7. Vishnevskaya T.V., Masalova O.V., Shkurko T.V., Evsegneeva I.V., Ptitsina Yu.S., Kravchenko G.A. et al. Soluble forms of differentiation antigens in the serum of patients with hepatitis C. Meditsinskaya immunologiya. 2005; 7 (1): 33-40. (in Russian)
8. Lebedev M.Ju., Vilkov S.A., Sholkina M.N., Krizhanova M.A., Novikov V.V., Vyasmina E.S., Baryshnikov A.Yu. Peripheral blood lymphocytes immunophenotype and serum concentration of soluble HLA class I in burn patients. Burns. 2003; 29 (2): 123-8.
9. Chuchalin A.G., Avdeev S.N., Aysanov Z.R., Belevskiy A.S., Lesh-chenko I.V., Meshcheryakova N.N. et al. Federal clinical recommendations on diagnostics and treatment of chronic obstructive pulmonary disease. Pul'monologiya. 2014; (3): 15-54. (in Russian)
10. Maltais F., Ostinelli J., Bourbeau J., Tonnel A.B., Jacquemet N., Had-don J. et al. Comparison of nebulized budesonide and oral prednisolone with placebo in the treatment of acute exacerbations of chronic obstructive pulmonary disease: a randomized controlled trial. Am. J. Respir. Crit. Care Med. 2002; 165 (5): 698-703.
11. Avdeev S.N., Sutochnikova O.A., Belevskiy A.S., Chuchalin A.G. Abolitionary budesonide (Pulmicort suspension) for severe exacerbation of COPD. Pul'monologiya. 2003; (5): 81-8. (in Russian)
12. Gunen H., Hacievliyagil S.S., Yetkin O., Gulbas G., Mutlu G.L., In E. The role of nebulised budesonide in the treatment of exacerbations of COPD. Eur. Respir. J. 2007; 29 (4): 660-7.
13. Global Strategy for Diagnosis, Management, and Prevention of COPD. Updated 2015. [В Интернете] [cited 2015 Jul 01]. Available from: <http://goldcopd.com/>
14. Sun X., He Z., Zhang J., Deng J., Bai J., Li M., Zhong X. Compare the efficacy of inhaled budesonide and systemic methylprednisolone on systemic inflammation of AECOPD. Pulm. Pharmacol. Ther. 2015; 31: 111-6.
15. Lyubavina N.A., Makarova E.V., Men'kov N.V., Mayorova L.V., Shoniya M.L., Presnyakova N.B. et al. Pul'monologiya. 2013; 4: 52-5. (in Russian)
16. Lyubavina N.A, Varvarina G.N., Makarova E.V., Men'kov N.V., Presnyakova N.B., Karaulov A.V., Novikov V.V. Abolitionary budesonide (Pulmicort suspension) for severe exacerbation of COPD. Immunologiya. 2011; (5): 267-9. (in Russian)
17. Sahid El-Radhi A., Hogg C.L., Bungre J.K., Bush A., Corrigan C.J. Effect of oral glucocorticoid treatment on serum inflammatory markers in acute asthma. Arch. Dis. Child. 2000; 83 (2): 158-62.
18. Kang B.N., Jude J.A., Panettieri R.A., Jr., Walseth T.F., Kannan M.S. Glucocorticoid regulation of CD38 expression in human airway smooth muscle cells: role of dual specificity phosphatase 1. Am. J. Physiol. Lung Cell. Mol. Physiol. 2008; 295 (1): L186-L1.
19. Tirumurugaan K.G., Kang B.N., Panettieri R.A., Foster D.N., Walseth T.F., Kannan M.S. Regulation of the cd38 promoter in human airway smooth muscle cells by TNF-a and dexamethasone. Re-spir. Res. 2008; 9: 26.
20. Proussakova O.V. et al. Oligomerisation of soluble Fas antigen induced its cytotoxity. J. Biol. Chem. 2003; 278: 36 236-41.
21. Ptisyna Y.S., Bornyakova L.A., Baryshnikov A.Y., Martynova T.G., Kryzhanova M.A., Novikov V.V. A soluble form of FAS/APO-1 (CD95) antigen in the serum of viral hepatitis patients. Int. J. Im-munorehabil. 1999; 14: 110.
22. Zhu X., Gadgil A.S., Givelber R., George M.P., Stoner M.W., Sci-urba F.C., Duncan S.R. Peripheral T cell functions correlate with the severity of chronic obstructive pulmonary disease. J. Immunol. 2009; 182 (5): 3270-7.
23. Blidberg K., Palmberg L., James A., Billing B., Henriksson E., Lantz A. et al. Adhesion molecules in subjects with COPD and healthy non-smokers: a cross sectional parallel group study. Respir. Res. 2013; 14 (1): 47. Available from: <http://respiratory-research.com/ content/14/1/47>
24. Novikov V.V., Babaev A.A., Kravchenko G.A., Manakova E.A., Pa-shina L.A., Marnykh S.A., Karaulov A.V. Immunologiya. 2008; 29 (4): 220-3. (in Russian)
25. Gorska-Ciebiada M. et al. Intercellular adhesion molecule 1 and tumor necrosis factor alpha in asthma and persistent allergic rhinitis: relationship with disease severity. Ann. Allergy Asthma Immunol. 2006; 97 (1): 66-72.
26. Pang B., Hong W., West-Barnette S.L., Kock N.D., Swords W.E. Diminished ICAM-1 expression and impaired pulmonary clearance of nontypeable haemophilus influenzae in a mouse model of chronic obstructive pulmonary disease/emphysema. Infect. and Immun. 2008; 76 (11): 4959-67.
27. Hagiya H., Miyake T., Kokumai Y., Murase T., Kuroe Y., Nojima H. et al. Co-infection with invasive pulmonary aspergillosis and Pneumocystis jirovecii pneumonia after corticosteroid therapy. J. Infect. Chemother. 2013; 19 (2): 342-7.
28. Leuppi J.D., Schuetz P., Bingisser R., Bodmer M., Briel M., Drescher T. et al. Short-term vs conventional glucocorticoid therapy in acute exacerbations of chronic obstructive pulmonary disease. The REDUCE randomized clinical trial (therapy). J.A.M.A. 2013; 309; 2223-31.
29. Franchimont D. Overview of the actions of glucocorticoids on the immune response: A good model to characterize new pathways of immunosuppression for new treatment strategies. In: Charmandari E., Chrousos G., Kino T., Eds. Glucocorticoid Action: Basic and Clinical Implications. (Ann. N. Y. Acad. Sci. Vol. 1024). New York; 2004: 124-37.
Поступила 09.11.15 Принята в печать 18.02.16
