CC BY
139
ДОКЛАДЫ АКАДЕМИИ НАУК РЕСПУБЛИКИ ТАДЖИКИСТАН _2015, том 58, №3_
ГАСТРОЭНТЕРОЛОГИЯ
УДК 615.322-036:616.34
Ш.Н.Шамсудинов, С.А.Авезов
ПРОТИВОВОСПАЛИТЕЛЬНОЕ СВОЙСТВО СУХОГО ЭКСТРАКТА ЗВЕРОБОЯ ПРОДЫРЯВЛЕННОГО
ГУ «Институт гастроэнтерологии» Министерства здравоохранения и социальной защиты населения Республики Таджикистан
(Представлено академиком АН Республики Таджикистан Г.К.Мироджовым 22.12.2014 г.)
Изучено противовоспалительное действие сухого экстракта зверобоя продырявленного в экспериментальных моделях. Установлено, что однократное внутрижелудочное введение сухого экстракта зверобоя продырявленного в дозе 20 мг/кг массы животным оказывало выраженное противовоспалительное действие. Экстракт понижал повышенную под действием ксилола проницаемость кожных капилляров, уменьшал прирост формалинового, гистаминового и серотонинового отека лапок белых крыс.
Ключевые слова: сухой экстракт зверобоя продырявленного - гистаминовый и серотониновый отёк.
Одним из самых широко используемых лекарственных растений как в народной, так и в научной медицине при различных заболеваниях является зверобой продырявленный (Hypericum perforatum L.). В последние годы возрос интерес к антрахиноновым пигментам зверобоя продырявленного - гиперицинам, так как у гиперицинсодержащих препаратов установлена противомикробная, противовирусная и антиканцерогенная активность. В то же время, несмотря на широко изученный спектр фармакологической активности зверобоя продырявленного, число выпускаемых промышленностью официальных препаратов из него весьма ограничено, а противомикробные средства «Има-нин» и «Новоиманин» сняты с производства [1-3].
На территории Республики Таджикистан имеется богатая сырьевая база зверобоя продырявленного - доступного источника для получения эффективных противовоспалительных препаратов. Это очень важно, так как в стране в настоящее время решается вопрос о расширении ассортимента собственного фармацевтического производства. Поэтому изучение новых фармакологических свойств экстракта зверобоя в условиях нашей республики является актуальной задачей.
Ранее нами было установлено гепатозащитное действие сухого экстракта зверобоя продырявленного при подостром токсическом поражении печени СС14 [4,5].
Целью данной работы явилось изучение влияния сухого экстракта зверобоя продырявленного на сосудистую проницаемость и асептические воспаления лапок белых крыс.
Адрес для корреспонденции: Шамсудинов Шабон Нажмудинович, Авезов Сайфулло Абдуллоевич. 734002, Республика Таджикистан, г. Душанбе, ул. Маяковского, 2, Институт гастроэнтерологии АМН МЗ РТ. E-mail: gastrotj@yandex.ru; saifullo_avezov@rambler.ru
Методы исследования
Опыты по определению реактивности капилляров кожи ставились на 45 белых мышах обоего пола массой 18-20 г по методике Ю.Н.Нуралиева с соавт. [6,7]. Животным внутрибрюшинно вводили раствор синьки Эванса из расчёта 50 мг/кг массы. Через 10 мин. на правую заднюю лапу наносили флогогенный агент ксилол в объёме 0.05 мл и регистрировали отрезок времени, в течение которого появлялось синее окрашивание лапки. Животные были распределены на следующие серии: 1 - контрольные, 2 и 3 серии - получавшие сухой экстракт зверобоя продырявленного соответственно в дозах 20 и 50 мг/кг массы за 60 мин до нанесения ксилола.
Сухой экстракт был получен способами экстрагирования из 70 и 40% этанола. Фракции извлечения сгущали под вакуумом на роторном испарителе до полного удаления растворителя. Для проведения экспериментов полученный экстракт растворяли в воде.
Влияние сухого экстракта зверобоя продырявленного на формалиновый отёк лапок изучалось на 36 белых крысах обоего пола массой 180-220 г. Величину отёка измеряли онкометрическим методом через 3, 6, 24, 48, 72 и 96 часов после субплантарной инъекции 0.1 мл 2.5%-ного раствора формалина. Нарастание отёка вычисляли в процентах к исходной величине. Животные были распределены на 3 группы: 1 - контрольные, получавшие физиологический раствор в дозе 2 мл/кг; 2 и 3 - леченные - получавшие сухой экстракт зверобоя продырявленного соответственно в дозах 20 и 50 мг/кг массы за 60 мин до инъекции флогогенного агента и повторно через каждые 12 часов на всём протяжении эксперимента.
Кроме того, был изучен характер действия сухого экстракта зверобоя продырявленного на течение гистаминового и серотонинового отёка лапок у белых крыс. Эксперименты проводились на 60 белых крысах обоего пола весом 170-210 г, которые были распределены на следующие серии: 1 -контрольные, получавшие физиологический раствор №С1 в дозе 2 мл/кг за 60 мин. до субплантарной инъекции 0.1 мл 0.1%-ного раствора гистамина; 2 - животные, получавшие внутрижелудочно по этой же схеме сухой экстракт зверобоя продырявленного в дозе 20 мг/кг; 3 - контрольные, получавшие серотонин, введённый субплантарно в объёме 0.1мл 0.1%-ного раствора; 4 - получавшие сухой экстракт зверобоя продырявленного в дозе 20 мг/кг массы за 60 мин до инъекции серотонина.
Результаты исследования и их обсуждение
Результаты исследования представлены в табл. 1-3. Как видно из табл. 1, предварительное внутрижелудочное введение сухого экстракта зверобоя продырявленного в дозах 20 и 50 мг/кг массы вызывало статистически достоверное (Р<0.05) понижение повышенной под действием ксилола проницаемости кожных капилляров. Время окрашивания лапки у животных, получивших настой, удлинялось от 6.0±0.43 (20 мг/кг) до 7.0±0.45 (50 мг/кг) против 5.0±0.41 мин у контрольной серии.
При формалиновом отёке сухой экстракт зверобоя продырявленного также оказывал выраженное антифлогогенное действие (табл. 2). Максимальное нарастание воспалительного отёка наблюдалось через 24 часа после введения формалина, когда обьём лапки контрольных крыс увеличивался на 74±8.0%. Экстракт в дозе 20 мг/кг на пике воспалительного процесса уменьшал прирост объёма воспаленной лапки на 26%, а в дозе 50 мг/кг - на 33% по отношению к контрольной серии (Р<0.05). Статистически достоверное уменьшение (Р<0.01-0.05) объёма лапок также наблюдалось через 48, 72, и 96 ч от начало инъекций формалина. Восстановление исходного объёма лапок крыс,
получавших сухой экстракт зверобоя продырявленного, отмечалось на 5-6 сутки против 7-8 суток у контрольных животных.
Таблица 1
Влияние сухого экстракта зверобоя продырявленного на проницаемость кожных капилляров у белых мышей
Время появления краски после нанесения ксилола
Серия опытов и доза Число мышей в серии В минутах Р< %
Контрольные - физ. раствор 2 мл/кг 15 5.0±0.41 100
Сухой экстракт зверобоя продырявленного - 20 мг/кг 15 6.0±0.43 0.05 144
Сухой экстракт зверобоя продырявленного - 50 мг/кг 15 7.0±0.45 0.05 120
Таблица 2
Влияние сухого экстракта зверобоя продырявленного на динамику течения формалинового отека лапок у белых крыс
Варианты опытов и доза Прирост обьёма лапок в процентах к исходному после субплантарного введения формалина, через, ч
3 6 24 48 72 96
Контрольные - физ. раствор 2 мл/кг 43±6.4 60±6.4 74±8.0 69±7.3 54±5.8 36±5.4
Сухой экстракт зверобоя продырявленного - 20 мг/кг 35±5.1 P<0.05 43±5.3 P<0.05 48±6.4 P<0.05 40±70 P<0.05 28±5.4 P<0.05 16+4.3 P<0.05
Сухой экстракт зверобоя продырявленного - 50 мг/кг 25±4.6 P<0.05 39±5.2 P<0.05 41±6.8 P<0.05 34±5.8 P<0.05 24±5.1 P<0.05 13±4.6 P<0.05
Противовоспалительное действие сухого экстракта зверобоя продырявленного хорошо проявлялось также и в отношении гистаминового и серотонинового отёка лапок у белых крыс (табл. 3). Экстракт в дозе 20 мг/кг, введённый за 60 мин до субплантарной инъекции гистамина, во все сроки исследования вызывал статистически достоверное (Р<0.05) уменьшение объёма воспалённой лапки. Идентичное уменьшение отёка наблюдалось также у крыс с серотониновым воспалением, лечённым сухим экстрактом зверобоя продырявленного.
Таблица 3
Влияние экстракта зверобоя на динамику течения гистаминового
и серотонинового отёка лапок у белых крыс
Серия опытов и дозы Число крыс в серии Прирост объёма лапок в процентах к исходному после введения флогогенных агентов, через, ч
0.5 1.5 3 6
Гистамин 0.1 мг + физ. раствор 2 мл/кг 8 56±6.0 52±5.8 47±5.5 35±5.8
Гистамин 0.1 мг + экстракт зверобоя продырявленного 50 мг/кг 8 30±5.4 P<0.01 21±5.2 P<0.01 17±5.0 P<0.01 10±4.3 P<0.01
Серотонин 0.01 мг + физ. раствор 2 мг/кг 8 62±6.4 53±6.0 44±5.5 30±5.2
Серотонин 0.1 мг + экстракт зверобоя продырявленного 50 мг/кг 8 37±5.4 P<0.05 21±5.2 P<0.05 16±4.3 P<0.05 10.2±4.0 P<0.05
Полученные результаты позволяют считать, что механизм противовоспалительного действия сухого экстракта зверобоя продырявленного в основном проявляется за счёт понижения проницаемости капилляров и уменьшения флогогенного эффекта гистамина и серотонина.
Зверобой в своём составе содержит флавоноиды (1.7-2.5%), дубильные вещества (10.6-11.2), эфирное масло (0.2-0.3%), аскорбиновую кислоту (0.1-0.2%) и другие фармакологически активные вещества [8,9]. В настоящее время доказано, что флавоноиды оказывают положительный эффект на экссудативную и пролиферативную фазы воспалительного процесса путём тормозящего влияния на окислительное фосфорилирование и подавления активности фермента гиалуронидазы [10], а также стабилизирующего действия на мембраны тучных клеток, что препятствуют высвобождению гиста-мина и серотонина [1,2,11,12]. Эффективность экстракта зверобоя продырявленного при формалиновом отёке лапок у белых крыс свидетельствует о положительном влиянии препарата на обе фазы воспалительного процесса.
Механизм противовоспалительного эффекта различных видов зверобоя, на наш взгляд, связан с высоким содержанием в их составе флавоноидов дубильных веществ, эфирных масел и витамина С, которые обладают активным противовоспалительным и антиоксидантным действием.
Таким образом, результаты проведённых экспериментов свидетельствуют о проявлении активного противовоспалительного и капилляроукрепляющего действия сухого экстракта зверобоя продырявленного. Полученные данные позволяют рекомендовать это доступное средство для лечения ряда заболеваний, в патогенезе которых ведущим считается воспалительный процесс.
Поступило 29.12.2014 г.
ЛИТЕРАТУРА
1. Айзенман Б.Е., Дербенцева Н.А. Антимикробные препараты из зверобоя. - Киев: Наукова думка, 1976, 270 с.
2. Нуралиев Ю.Н., Авезов С.А. - Поиск фармакологических средств для профилактики и ранней терапии нарушений, вызванных экстремальными факторами. - Л.: 1986, с. 127-133.
3. Зайчикова С.Г., Барабанов Е.И. - Химия природных соединений, 1980, №5, с. 718-719.
4. Нуралиев Ю.Н., Авезов С.А., Исамова М.Б. - Результаты и перспективы научных исследований в области создания лекарственных средств из растительного сырья. Мат-лы Всес. науч. конф. - М.: 1985, с. 182-184.
5. Нуралиев Ю.Н., Медник Г.Л. - Бюллетень экспресс биологии и медицины, 1970, №8, с. 119-120.
6. Гордиенко А.Д. Гепатопротекторный механизм действия флавоноидов. - Фармация, 1990, №2, с. 75-78.
7. Зайцева, М.М. Влияние зверобоя обыкновенного на ЖКТ. - Здравоохранение Белоруссии, 1966, №5, с.23-25.
8. Nahrstedt A., Butterweck V. Biologically active and other chemical constituents of the herb of Hypericum perforatum L. - Pharmacopsychiatry, 1997, v.30 (Suppl. 2), рр. 129-134.
9. Klemow K.M., Bartlow A., Crawford J. et all. Chapter 11: Medical Attributes of St. John's Wort (Hypericum perforatum). - Herbal Medicine Biomolecular and Clinical Aspects, 2011, RC Press.
10. Kim S.J., Um J.Y., Lee J.Y. Anti-inflammatory activity of hyperoside through the suppression of nuclear factor-кВ activation in mouse peritoneal macrophages. - Am. J. Chin. Med., 2011, v.39, рр.171-181.
11. Hoban Claire L., Byard Roger W., Musgrave Ian F. A comparison of patterns of spontaneous adverse drug reaction reporting with St. John's Wort and fluoxetine during the period 2000-2013. - Clinical and Experimental Pharmacology and Physiology. Retrieved 7 June 2015. 1440-1681.12424.
12. Chua L.S. A review on plant-based rutin extraction methods and its pharmacological activities. - J. Ethnopharmacol., 2013, v.150(3), pp.805-817.
Ш.Н.Шамсудинов, С.А.Авезов
ХОСИЯТИ ЗИДДИИЛТИ^ОБИИ ЧОЙКАХДКИ HYPERICUM PERFORA TUM L.
МД "Пажух^ишгохи гастроэнтералогия"-и Вазорати тандурусти ва хцфзи ицтимоии ахолии Цум^урии Тоцикистон
Тачрибах,ои дар мушу калламушх,ои озмоишй гузаронидашуда нишон доданд, ки хокаи чойкахдк ба микдори 20 мг/кг кобилияти нуфуспазирии капилярх,ои пустро кам карда, афзоиши варами формалинй, гистаминй ва серотонинии панчаи пои калламушх,оро паст менамояд.
Калима^ои калиди: хокаи хушки чойка^ак - илтиуоби серотонинй ва гистаминй.
Sh.N.Shamsudinov, S.A.Avezov ANTI-INFLAMMATORY EFFECT OF DRY EXTRACT OF HYPERICUM PERFORATUM L.
Institute of Gastroenterology of the Ministry of Health and Social Protection of the Republic of Tajikistan The anti-inflammatory effect of dry extract of Hypericum perforatum L in experimental models of inflammation is studied. It was found that a intragastric administration of dry extract of Hypericum perforatum at a dose of 20 mg/kg body weight has a marked antiinflamation effect. The extract is lowered under the influence of an increased permeability of skin capillaries, reduced growth of formalin, histamine and serotonin edema legs of white rats.
Key words: dry extract of Hypericum perforatum L. - histamine and serotonin edema.
