CC BY
54
УДК 615.276:582.949.27
ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОЕ ИЗУЧЕНИЕ ПРОТИВОВОСПАЛИТЕЛЬНЫХ СВОЙСТВ МОДЕЛЬНЫХ СМЕСЕЙ ГУСТОГО ЭКСТРАКТА ШАЛФЕЯ ЛЕКАРСТВЕННОГО © Передерий Е.А., Юнусова И.А.
Луганский государственный медицинский университет им. Святителя Луки, Луганская Народная Республика, 91045, Луганск, кв. 50-летия Обороны Луганска, 1г
Резюме
Цель. Целью данного исследования стало изучение противовоспалительных свойств модельных смесей густого экстракта шалфея лекарственного.
Методика. Противовоспалительное действие изучали с помощью экспериментальной модели формалинового отека. Исследование проводили на 80 белых беспородных крысах-самках массой 260±10 г. Объектами исследования были выбраны модельные смеси, в состав которых входят густой экстракт шалфея лекарственного, лимонная и бензойная кислоты (образец 1), а также густой экстракт шалфея лекарственного и лактулоза (образец 2). Исследуемые образцы вводили разным группам крыс в дозах 5 мг/кг, 10 мг/кг, 25 мг/кг, в качестве препарата-сравнения использовали «Диклофенак» (Синтез АКОМП, Россия) в дозе 6,8 мг/кг. О развитии отека судили по увеличению объема лапы, который измеряли до введения препаратов и в динамике через 2, 4, 6, 24 ч. после введения флогогена с помощью механического онкометра по А.С. Захаревскому.
Результаты. Выводы о противовоспалительной активности исследуемых образцов делали по способности уменьшать отеки лап подопытных животных в сравнении с контрольными в процентном выражении. Наиболее выраженный антиэксудативный эффект исследуемых образцов наблюдался по истечению 6-24 ч. В данный период все образцы по своей противовоспалительной активности превзошли активность препарата сравнения «Диклофенак» в 1,4 раза. Особое внимание обратил на себя образец 1 в дозах 25 мг/кг и 10 мг/кг. Так, образец 1 в дозе 25 мг/кг проявлял стойкий высокий противовоспалительный эффект, который превосходил эффекты остальных образцов, на протяжении всего исследования. Образец 1 в дозе 10 мг/кг по истечению 24 ч. после введения флогогена вернул лапу крысы в исходный размер, при этом противовоспалительный эффект равнялся 100%.
Заключение. Проведенные исследования свидетельствуют о том, что исследуемые образцы проявляют выраженное антиэксудативное действе и влияют на течение воспалительного процесса.
Ключевые слова: антиэксудативное действие, препарат на основе густого экстракта шалфея лекарственного, суппозитории вагинальные, инфекционно - воспалительные гинекологические заболевания
EXPERIMENTAL STUDY OF THE ANTI-INFLAMMATORY PROPERTIES OF MODEL MIXTURES OF THICK SALVIA OFFICINALIS EXTRACT Perederii Ie.A., Yunusova I.A.
Lugansk State Medical University named after Saint Luke, 1g, kvartal 50-letija Oborony Luganska, 91045, Lugansk, Lugansk People's Republic
Abstract
Objective. The aim of this research was to study the anti-inflammatory properties of model mixtures of thick Salvia officinalis extract.
Methods. The anti-inflammatory effect was studied by means of experimental model of formalin-induced oedema. The study was carried out on 80 white outbred female rats weighing 260±10 grams. The objects of research were model mixtures containing a thick Salvia officinalis extract, citric and benzoic acids (Specimen 1), as well as thick Salvia officinalis extract and lactulose (specimen 2). The test specimens were administered to different rat groups at doses of 5 mg/kg, 10 mg/kg, 25 mg/kg, where "Diclofenac" (Sintez CKSMPA, Russia) at a dose of 6.8 mg/kg was a reference drug. The development of oedema was registered by the increase in the volume of the paw, which was measured before the administration of the drugs and in dynamics of 2, 4, 6, 24 hours after the administration of the phlogogen with the help of a mechanical oncometer according to A.S. Zakharevsky.
Results. Conclusions on the anti-inflammatory activity of the test specimens were drawn with the ability to reduce swelling of the experimental animals' paws in comparison with the control animals in percentage terms. The most pronounced anti-exudative effect of the specimens was observed after the expiration of 6-24 hours. In this period, all specimens with their anti-inflammatory activity exceeded the activity of the reference drug "Diclofenac" by 1.4 times. Particular attention was drawn to specimen 1 at doses of 25 mg/kg and 10 mg/kg. Thus, Specimen 1 at a dose of 25 mg/kg exhibited a persistent high anti-inflammatory effect that exceeded the effects of the other specimens throughout the research. Specimen 1 at a dose of 10 mg/kg after 24 hours after the administration of the phlogogen returned the rat's paw to its initial size, meanwhile the anti-inflammatory effect was equal to 100%.
Conclusions. The conducted researches indicated that the investigated specimens show the expressed anti-exudative action and influence the course of the inflammatory process.
Keywords: anti-exudative action, drug on the basis of thick Salvia officinalis, vaginal suppositories, infectious and inflammatory gynaecological diseases
Введение
Сегодня особое внимание уделяется лечению инфекционно-воспалительных гинекологических заболеваний, которые негативно отражаются на репродуктивном здоровье и качестве жизни женщин. Здоровье гениталий и репродуктивной системы женщин в значительной мере зависит от нормального микробиоценоза влагалища. Под влиянием эндогенных и экзогенных факторов происходит нарушение баланса нормальной микрофлоры влагалища, которое характеризуется снижением количества лактобактерий или их отсутствием, присоединением патогенных и условно-патогенных флор. Дисбиоз влагалища проявляется развитием бактериального вагиноза. Это частое инфекционное заболевание влагалища, которое встречается у 21-33% женщин репродуктивного возраста. На фоне бактериального вагиноза, без должного лечения, чаще всего развивается вагинит, при котором женщину беспокоят боль, жжение и зуд во влагалище, а также желтоватые, неприятно пахнущие выделения из влагалища [1].
В схемах лечения данных патологий назначают противомикробные и противовоспалительные препараты перорально, местно, а также в тяжелых случаях - инъекционно. Однако полноценное излечение гинекологических инфекционно-воспалительных заболеваний нельзя достичь без применения интравагинальных лекарственных средств, обладающих противовоспалительной, противомикробной и противогрибковой активностью [5]. Местная терапия имеет ряд преимуществ: простота и удобство применения, минимальный риск развития нежелательных реакций, возможность применения у больных с экстрагенитальной патологией, в частности при острых вульвитах, вагинитах и цервицитах [4]. В связи с этим разработка новых противомикробных и противовоспалительных лекарственных препаратов для местного применения и сегодня является актуальной задачей. Таким образом, целью данного исследования стало изучение противовоспалительных свойств модельных смесей густого экстракта шалфея лекарственного.
Методика
Противовоспалительное действие изучали с помощью экспериментальной модели формалинового отека [7]. Исследование проводили на 80 белых беспородных крысах-самках массой 260±10 г. В ходе работы были соблюдены правила качественной лабораторной практики при проведении доклинических исследований в РФ (Приказ Министерства здравоохранения и социального развития Российской Федерации от 23 августа 2010 г. №708н), а также правила и Международные рекомендации Европейской конвенции по защите позвоночных животных, используемых при экспериментальных исследованиях (1997). Объектами исследования были выбраны модельные смеси, в состав которых входят густой экстракт шалфея лекарственного, лимонная и бензойная кислоты (образец 1), а также густой экстракт шалфея лекарственного и лактулоза (образец 2). Густой экстракт шалфея лекарственного для исследования готовили, ссылаясь на методику, разработанную группой ученых НФаУ (г. Харьков) и ЛГМУ (г. Луганск) [3]. В качестве источника растительного сырья был использован шалфей лекарственный, произрастающий в условиях Донбасса, собранный и высушенный согласно требованиям ГФ [8].
Предварительно животных разделили на восемь групп: 1 группа - контрольная патология. Животным опытных групп (2-7) за 1 ч. до начала эксперимента вводили соответствующие образцы: 2 группа -образец 1 в дозе 5 мг/кг, 3 группа - образец 1 в дозе 10 мг/кг, 4 группа -образец 1 в дозе 25 мг/кг, 5 группа - образец 2 в дозе 5 мг/кг, 6 группа - образец 2 в дозе 10 мг/кг, 7 группа - образец 2 в дозе 25 мг/кг. 8-й группе животные за 1 ч. до начала эксперимента вводили препарат сравнения «Диклофенак» (Синтез АКОМП, Россия) в дозе 6,8 мг/кг. Используемые дозы в исследовании вводили в пересчёте с учётом используемых в экспериментальной фармакологии коэффициентов видовой стойкости Ю Р. Рыболовлева [6].
Экссудативное воспаление моделировали путем субплантарного введения в заднюю лапу крысы 0,1 мл 2% раствора формалина. Исследуемые препараты вводили внутрижелудочно за 1 ч. до инъекции формалина. Контрольные животные получали эквивалентное количество воды.
О развитии отёка судили по увеличению объема лапы, который измеряли до введения препаратов и в динамике через 2, 4, 6, 24 ч. после введения флогогена с помощью механического онкометра по А.С. Захаревскому [2]. Процент угнетения воспаления рассчитывали по формуле:
(Ук -
уенвтеняя еткгигтяииг = -—- ?<
, где: Vk - объём лапки в контроле минус исходный объем этой лапки до отека; Vo- объём лапки которая отекла в опыте минус исходный объем этой лапки.
Статистическую обработку полученных данных проводили с использованием программы «81ай8йса 6.0». Определяли среднее арифметическое (М), среднее квадратическое отклонение (о), среднюю ошибку средней арифметической (т). Для определения достоверности отличий вычисляли доверительный коэффициент 1>критерий Стьюдента и определяли по табличным данным величину вероятности (р). Различия между сравниваемыми параметрами считали достоверными при р<0,05.
Результаты исследования и их обсуждение
Выводы о противовоспалительной активности исследуемых образцов делали по способности уменьшать отеки лап подопытных животных в сравнении с контрольными в процентном выражении. Результаты расчетов представлены в таблице.
Таблица. Результаты изучения противовоспалительной активности исследуемых образцов на
модели формалинового ^ воспаления
Группы животных, п=8 Доза, мг/кг Исходный объём лапки, у. е. Объём лапки, у. е.
Через 2 ч. Через 4 ч. Через 6 ч. Через 24 ч.
Контроль - 18,75±0,56 23,25±0,72 24,25±0,63 26,63±0,4 26,5±0,49
Образец 1 5 20,5±0,9 24,63±0,9 24,0±0,99 22,88±0,74* 21,63±1,01*
10 20,75±0,48* 24,5±1,07 23,25±0,78 22,4±0,75* 20,75±0,56*
25 20,25±0,48 21,5±0,76 21,75±0,44* 21,5±0,53* 21,0±0,53*
Образец 2 5 20,0±0,81 22,6±0,49 22,0±0,53* 21,63±0,64* 20,88±0,96*
10 19,38±0,75 23,0±0,64 23,13±0,68 21,6±0,4* 20,0±0,7*
25 19,13±0,37 21,25±0,69 21,75±0,39* 21,63±0,6* 20,0±0,35*
Диклофенак 6,8 20,0±0,49 22,75±0,6 23,0±0,83 23,88±1,02* 21,75±0,86*
Примечание: * - достоверно по отношению к контролю р<0,05
Из таблицы видно, что образцы 1 и 2 проявляют антиэксудативное действие на модели формалинового воспаления во всех исследуемых дозах. Противовоспалительный эффект через 2 ч. после введения флогогена был наиболее выраженный у образца 1 в дозе 25 мг/кг и составил 72,2%. образец 2 в дозе 25 мг/кг также проявил заметный противовоспалительный эффект, который составил 52,9%. Остальные образцы на данном этапе уменьшили отек лап крыс менее чем на 50%.
По истечению 4-х ч. после введения подопытным животным флогогена объем лапок крыс в контрольной группе увеличился на 29,3%. Изменения значений противовоспалительной активности образцов 1 и 2 в дозах 25 мг/кг на данном этапе оказались незначительны и
сохранились на таком же уровне, как и в первые часы. Заметно увеличилась антиэксудативная активность образцов 1 и 2 в дозах 5 мг/кг и составила 54,5% и 63,6% соответственно.
Наиболее выраженный антиэксудативный эффект исследуемых препаратов наблюдается по истечении 6-24 ч. В этот период все образцы по своей противовоспалительной активности превзошли активность препарата сравнения «Диклофенак» в 1,4 раза.
Проведя сравнительный анализ исследуемых препаратов и референс-препарата «Диклофенак», можно сделать вывод о том, что наиболее выраженная противовоспалительная активность наблюдалась у образца 1 в дозе 25 мг/кг со 2-го часа и до 24 часов наблюдения в сравнении с контрольной группой. Стоит отметить эффект образца 1 в дозе 10 мг/кг, при применении которого отмечается возврат к исходному значению объема лапки по истечению 24 ч. после введения флогогена.
Известно, что субплантарное введение формалина вызывает развитие пролиферативного воспаления лап крыс [9], которое развивается в результате повреждения клеток, что провоцирует выделение эндогенных медиаторов (гистамина, серотонина, ПГ и брадикинина) [10]. Такое формалининдуцированное повреждение тканей лап животного приводит к развитию хронической и локализованной воспалительной боли. Согласно анализу литературных данных в среднем максимальное развитие отека лапок крыс при введении раствора формалина возникает через 4 ч. после введения флогогена. Однако эти данные разнятся у некоторых авторов исследовательских работ. Согласно данным S.P. Archana (2013) максимальный отек в ходе изучения анальгетического и противовоспалительного действия различных экстрактов флемингии развивался на 5-й час исследования. Автор G.P. Yoganandam (2010) в своей работе указал, что при исследовании максимальный отёк развивался на 3 и 4 ч. исследования, а в работах O.M. Shaaban (2013), S.A.F. Rostom (2009) по истечении 4-х часов. В ходе собственных исследований было выявлено, что максимальный отёк лап крыс при моделировании формалинового воспаления развивался на 6-й час после введения флогогена и составлял 142% от исходного объема лапки.
Выводы
1. Проведенные исследования свидетельствуют о том, что исследуемые модельные смеси проявляют выраженное антиэксудативное действе и влияют на течение воспалительного процесса.
2. Экспериментальные данные показывают, что образец 1 и образец 2 превосходят препарат -сравнения «Диклофенак» по антиэксудативной активности.
3. Полученные результаты определяют актуальность дальнейшего углубленного исследования данных образцов с целью выбора наиболее перспективного состава лекарственного средства для лечения воспалительных заболеваний женских половых органов.
Литература (references)
1. Ворошилина Е.С. Видовой состав вагинальных лактобактерий у женщин репродуктивного возраста с дисбиозом влагалища // Уральский медицинский журнал. - 2011. - №13. - С. 75-78. [Voroshilina E.S. Ural'skii meditsinskii zhurnal. Ural Medical Journal. - 2011. - N13. - P. 75-78. (in Russian)]
2. Захаревский А.С. Влияние некоторых производных индола на нервную систему: автореф. дис. ... канд. мед наук / Захаревский А.С. - Минск, 1969. - 78-80 с. [Zakharevskii A.S. Vliyanie nekotorykh proizvodnykh indola na nervnuyu sistemu (kand. dis.). Infuence of some indole derivatives nervous system (Author's Abstract of Candidate Thesis). - Minsk, 1969. - P. 78-80. (in Belarus)]
3. Кошовий О.М., Передерш £.О., Кухтенко О.С. и др. Споаб одержання засобу з антимжробною актившстю з щнеоловмюно! рослинно! сировини // Патент Укра!ни на винахщ №89924 Украша. Опублжовано 10.03.2010, Бюлетень №5. - 6 с. [Koshovyi O.M., Perederii Ie.O., Kukhtenko O.S. i dr. Sposib oderzhannya zasobu z antymikrobnoyu aktyvnistyu z tsineolovmisnoyi roslynnoyi syrovyny. Method for obtaining of biologically active agents with antimicrobic activity from cineol-containing plant raw material. Patent of Ukraine for invention N89924. Publication 10.03.2010. Bulletin N5. - 6 p. (in Ukrainian)]
4. Перламутров Ю.Н., Чернова Н.И. Пути повышения эффективности терапии микст-инфекций гениталий у женщин репродуктивного возраста // Медико-социальные проблемы семьи. - 2012. - №1. - С. 1-3.
[Perlamutrov Yu.N., Chernova N.I. Mediko-sotsial'nye problemy sem'i. Medical and Social Problems of Family. - 2012. - N1. - P. 1-3. (in Russian)]
5. Прилепская Е.А., Зайцев А.В., Тупикина Н.В. Роль междисциплинарного подхода в лечении инфекций нижних мочевых путей // Медицинские аспекты здоровья женщины. - 2015. - №1. - С. 26-33. [Prilepskaya E.A., Zaitsev A.V., Tupikina N.V. Meditsinskie aspekty zdorov'ya zhenshchiny. Medical aspects of women's health. - 2015. - N1. - P. 26-33. (in Russian)]
6. Рыболовлев Ю.Р., Рыболовлев Р.С. Дозирование веществ для млекопитающих по константам биологической активности // Доклады АН СССР. - 1979. - Т.247, №6. - С. 1513-1516. [Rybolovlev Yu.R., Rybolovlev R.S. Doklady AN SSSR. Reports of Academy of Sciences of the USSR. - 1979. - V.247, N6. - P. 1513-1516. (in Russian)]
7. Хабриев Р.У. Руководство по экспериментальному (доклиническому) изучению новых фармакологических веществ / Под ред. Р. У. Хабриева. - М.; Медицина, 2005. - 832 с. [Khabriev R.U. Rukovodstvo po eksperimental'nomu (doklinicheskomu) izucheniyu novykh farmakologicheskikh veshchestv / Pod red. R.U. Khabrieva. Guidelines for experimental (preclinical) study of new pharmacological substances / Ed R.U. Khabriev. - Moscow: Medicine, 2005. - 832 p. (in Russian)]
8. Шалфея лекарственного листья. ФС. 2.5.0051.15. // Государственная фармакопея Российской Федерации. Взамен ГФ XI, вып. 2, ст. 22 (изм. № 1 от 25.06.1997). [Shalfeya lekarstvennogo list'ya. FS. 2.5.0051.15. Gosudarstvennaya farmakopeya Rossiiskoi Federatsii. Salvia officinalis leaves. FS.2.5.0051.15. State Pharmacopoeia of the Russian Federation. Instead GF XI, V.2, P. 22 (N1 ot 25.06.1997) (in Russian)]
9. Raval N.D., Ravishankar B., Ashok B.K. Anti-inflammatory effect of Chandrashura (Lepidium sativum Linn.) an experimental study // Ayu. - 2013. - V.3(4). - P. 302-304
10. Sachan S., Singh M.P. Anti-inflammatory activity of quercetin in acute, sub-acute and chronic phases of inflammation in animal models // Journal of Chemical and Pharmaceutical Research. - 2013. - V.5(7). - P. 152155.
Информация об авторах
Передерий Евгений Алексеевич - кандидат фармацевтических наук, доцент, заведующий кафедрой технологии лекарств, организации и экономики фармации ГУ ЛНР «Луганский государственный медицинский университет имени Святителя Луки», ЛНР. E-mail: stadies@gmail.com
Юнусова Инна Алексеевна - аспирант кафедры технологии лекарств, организации и экономики фармации ГУ ЛНР «Луганский государственный медицинский университет имени Святителя Луки», ЛНР. E-mail: i.a.tokovaya@gmail.com
