CC BY
156
УДК 615.275
Л.Н. Шантанова А.Г. Мондодоев А.А. Торопова М.П. Николаев 2
ФАРМАКОЛОГИЧЕСКАЯ АКТИВНОСТЬ СУХОГО ЭКСТРАКТА САБЕЛЬНИКА БОЛОТНОГО
1 Институт общей и экспериментальной биологии СО РАН, Улан-Удэ 2 Городская клиническая больница скорой медицинской помощи им. В.В. Ангапова, Улан-Удэ
Сухой экстракт сабельника болотного оказывает диуретическое, антиэкссудативное и противовоспалительное действие, обладает, выраженными, антиоксидантными свойствами. Ключевые слова: сабельник болотный, диуретическое и противовоспалительное действие
PHARMACOLOGIC ACTIVITIES OF DRY EXTRACT OF COMARUM PALUSTREL.
L.N. Shantanova A.G. Mondodoev A.A. Toropova M.P. Nikolaev 2
11nstitute of General and Exrerimental Biology SB RAS, Ulan-Ude
2 City Clinical Hospital of Ambulance named after V.V. Angapov, Ulan-Ude
The dry extract from Comarum. palustre L. has diuretic, anti-exudative and anti-inflammatory effects; it has marked, anti-oxidant properties.
Key words: Comarum palustre L., diuretic and anti-inflammatory effects
Актуальность поиска путей повышения эффективности фармакотерапии заболеваний почек определяется их широкой распространенностью и наблюдающейся тенденцией к росту нефрологической патологии в общей структуре заболеваемости. По статистическим данным за 1995 — 2005 гг. в России количество больных с заболеваниями органов мочевыделительной системы увеличилось почти вдвое [4, 9]. В некоторых странах заболеваемость хроническими формами нефропатий приобрела эпидемиоподобный характер, что определяет высокую медико-социальную значимость данной проблемы (Шило, 2004). При этом, с каждым годом растет число больных с тяжелыми формами нефропатий, нуждающихся в таких дорогостоящих мероприятиях как гемодиализ и трансплантация почек. По данным литературы известно, что в европейских странах и США расходы на проведение гемодиализа составляют до 2 % от общего бюджета системы здравоохранения (Collins et al., 2000).
Помимо широкой распространенности нозологических форм заболеваний почек, поражения их встречаются при многих патологических состояниях: интоксикациях, заболеваниях печени, сахарном диабете, коллагенозах и других системных заболеваниях [2, 3, 10]. При этом, несмотря на использование современных методов лечения, заболевания почек в 1,5 % случаев приводят к развитию острой почечной недостаточности, при которой летальность достигает 40 — 50 % (Шишкин, 2005). Фармакотерапия и фармакопрофилактика заболеваний почек требует осторожного подхода ввиду снижения функциональной состоятельности почек при их повреждениях, и сама медикаментозная терапия может явиться причиной развития рецидивов заболевания. В этой связи основным требованием к нефропротекторным
средствам является отсутствие токсичности и нежелательных побочных явлений при их применении.
Учитывая широкое распространение заболеваний почек, их прогрессирующее течение, приводящее к развитию почечной недостаточности, тяжелый медико-социальный прогноз, недостаточное количество нефропротекторных препаратов, актуальной задачей остается разработка и внедрение новых эффективных и безвредных лекарственных средств, предназначенных для профилактики и лечения заболеваний почек.
В народной медицине для лечения заболеваний почек используются галеновые препараты из сабельника болотного (Comarum palustre L.). Растение широко распространено в тундровой и лесной зонах Евразии и Северной Америки, что обеспечивает его достаточную сырьевую базу. В народной медицине это растение широко используется в виде отвара, спиртовой и водной настойки, мазей, которые обладают: потогонным, мочегонным, жаропонижающим, противовоспалительным, болеутоляющим, гипотензивным, антибактериальным, антигистаминным, ранозаживляющим, кровоостанавливающим, противоопухолевым действием, а также нормализующим обменные процессы. В современной практической медицине из-за недостаточной изученности препараты из сабельника болотного используются только в качестве наружного средства. Нами, совместно с сотрудниками ВИЛАР был разработан способ получения сухого экстракта из корней и корневищ сабельника болотного [7].
Целью данной работы явилось определение диуретической, противовоспалительной и анти-оксидантной активности сухого экстракта сабельника болотного и его этилацетатной, бутанольной и водной фракций.
МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ
Опыты проведены на белых крысах-самцах линии Wistar массой 160 — 180 г. Влияние экстракта сабельника болотного на диуретическую функцию изучали при однократном введении внутрижелу-дочно животным опытных групп водных растворов экстракта сабельника в дозе 25мг/кг, 50 мг/ кг и 100мг/кг и его фракций в дозе 100 мг/ кг, за 30 минут до водной нагрузки, составляющей 2,5 % от массы тела [1]. Контрольной группе вводили эк-виобъемное количество дистиллированной воды. Учитывали объем мочи за 4 часа и определяли скорость диуреза. Оценивали антиэкссудативную активность экстракта сабельника болотного и его фракций на модели формалинового отека по методу Стрельникова Ю.В. (1960) [8]. Отек вызывали субплантарным введением в заднюю лапку крысы
0,1 мл 3,0 % раствора формалина. Водные растворы экстракта сабельника и его фракций вводили внутрижелудочно в дозе 100 мг/кг за 3 часа до введения флогогенного агента и через 5 и 18 часов после инициации воспалительного процесса. Через 24 часа после введения формалина оценивали выраженность отека весовым методом по разнице масс здоровой и отечной лапки, ампутированных на уровне тарзокруральных суставов у крыс, дека-питированных под эфирным наркозом. Выраженность антиокислительных свойств экстракта оценивали способом in vitro. Содержание продуктов ПОЛ в пробах определяли путем постановки ТБК-теста по методике Г.И. Клебанова (1988) [5]. Для численной оценки эффектов изучаемого средства рассчитывали величину антиокислительной активности. Результаты исследования являются средней арифметической 4 — 5 измерений.
Статистическую обработку полученных данных проводили с использованием t-критерия Стьюдента.
РЕЗУЛЬТАТЫ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ
В серии предварительных экспериментов была определена острая токсичность испытуемого экстракта, которая составила 370 мг/кг при внутрибрюшинном введении белым крысам, что позволяет отнести исследуемое средство к группе практически нетоксичных веществ по классификации К.К. Сидорова (1973) [6].
В результате проведенных исследований было установлено, что экстракт сабельника болотного обладает наиболее выраженным диуретическим эффектом при его введении животным в дозе 100 мг/кг, увеличивая образование мочи на 27,8 % у крыс опытной группы по сравнению с аналогичными данными в контроле. При введении экстракта в дозе 50 мг/кг наблюдался менее выраженный диуретический эффект. Введение дозы 25 мг/кг не оказывает влияния на скорость диуреза. При оценке диуретической активности указанных фракций экстракта сабельника болотного было установлено, что его этилацетатная фракция обладает наиболее выраженным диуретическим эффектом, увеличивая образование мочи на 31 % по сравнению с данными у животных контрольной группы. Бутанольная и водная фракции экстракта сабельника оказывали менее выраженный диуретический эффект. Полученные данные представлены в таблицах 1, 2.
Таким образом, из данных, приведенных в таблицах 1 и 2 следует, что диуретическая активность экстракта сабельника обеспечивается в большей степени биологически активными веществами, содержащимися в его этилацетатной фракции.
В следующей серии экспериментов определяли влияние экстракта и его фракций на экссудативную фазу воспалительного процесса. В результате проведенных исследований было
Таблица 1
Влияние экстракта сабельника болотного на скорость диуреза у белых крыс
Группы животных n Скорость диуреза, мкл / 100 г / ч Увеличение диуреза, %
Контрольная 6 190,7 ± 10,26 -
25 мг/кг 6 186,3 ± 12,65 -
50 мг/кг 6 217,9 ± 14,20 14,2 %
100 мг/кг 6 243,7 ± 9,27* 27,8 %
Примечание: * - здесь и далее значения достоверно отличающееся от контроля при Р < 0,05.
Таблица 2
Влияние этилацетатной, бутанольной, водной фракций сухого экстракта сабельника болотного
на скорость диуреза у белых крыс
Группы животных n Скорость диуреза, мкл / 100 г / ч Увеличение диуреза, %
Контрольная 6 201,5 ± 26,1 -
Этилацетатная 7 292,5 ± 23,2* 31
Бутанольная 6 271,2 ± 34,1 26
Водная 6 261,5 ± 14,3 29
Таблица 3
Влияние экстракта сабельника болотного на экссудативную фазу воспаления при формалиновом отеке у крыс
Группы животных N Разница масс лапок, мг % угнетения отека
Контрольная 6 129,4 ± 9,34 -
25 мг/ кг 6 130,6 ± 10,43 -
50 мг/кг 6 95,0 ±6,34 26,6
100 мг/кг 6 82,0 ± 7,62 36,7
Таблица 4
Влияние этилацетатной, бутанольной и водной фракций сухого экстракта сабельника болотного на экссудативную фазу воспаления при формалиновом отеке у крыс
Группы животных N Разница масс лапок, мг % угнетения отека
Контрольная 7 169 ± 21,1 -
Этилацетатная 6 112 ± 19,2* 33,7
Бутанольная 6 136 ± 19,7 19,5
Водная 6 157 ± 26,0 7,1
установлено, что экстракт сабельника и его этилацетатная фракция оказывают наиболее выраженный антиэкссудативный эффект при их введении животным в дозе 100 мг/ кг, угнетая развитие отека на 36,7 % и 33,7% соответственно по сравнению с данными у крыс контрольной группы. Бутанольная и водная фракции экстракта оказывали однонаправленный, менее выраженный эффект. Результаты исследований представлены в таблицах 3, 4.
Данные, приведенные в таблицах 3 и 4 свидетельствуют, что сухой экстракт сабельника болотного обладает противовоспалительной активностью за счет биологически активных веществ, содержащихся, в основном, в его этилацетатной фракции.
Определение антиоксидантной активности (АОА) суммарного сухого экстракта сабельника болотного показало, что данный показатель составляет 23,00 (г/л)-1, этилацетатной фракции — 25,00 (г/л)—1, бутанольной фракции — 3,23 (г/л) — 1, водной — 1,26 (г/л)-1, что сопоставимо с данными препаратов сравнения: рутина и аскорбиновой кислоты. Полученные данные свидетельствуют, что наиболее выраженными антиоксидантными свойствами обладают этилацетатная фракция и суммарный сухой экстракт сабельника болотного.
Таким образом, сочетание диуретической, противовоспалительной и антиоксидантной активности у экстракта сабельника болотного, обеспеченного в основном биологически активными веществами, содержащимися в его этилацетатной фракции, аргументирует перспективность внедрения его в клиническую практику в качестве нового эффективного и безопасного нефро-протекторного средства при патологиях почек, сопровождаемых снижением их диуретической функции, развитием воспалительной реакции и активацией процессов перекисного окисления липидов.
ЛИТЕРАТУРА
1. Берхин Е.Б. Методы экспериментального исследования почек и водно-солевого обмена / Е.Б. Берхин, Ю.И. Иванов. — Барнаул, 1972. — 156 с.
2. Бурневич Э.З. Гепаторенальный синдром / Э.З. Бурневич, Е.В. Наместников, Т.Н. Лопаткина // Тер. архив. - 2002. - № 6. - С. 76-80.
3. Ермоленко В.М. Острая почечная недостаточность / В.М. Ермоленко // Нефрология. - М., 2000. - С. 596-658.
4. Здоровье населения России и деятельность учреждений здравоохранения в 2007 г. Статистические материалы. - М., 2008.
5. Клебанов Г.И., Бабенкова И.В., Тесел-кин Ю.О. и др. // Лаб. дело. - 1988. - № 5. -С. 59-62.
6. Сидоров К.К. О классификации токсичности ядов при парентеральных способах введения / К.К. Сидоров // Токсикология новых промышленных химических веществ. - М., 1973. -С. 47-51.
7. Способ получения средства, обладающего диуретической и противовоспалительной активностью: Патент № 2318531 от А61К36/73 (2006.01) А61К125/00 (2006.01) В0Ю11/02 (2006.01) А61Р13/00 (2006.01) / Азаркова А.Ф., Быков В.А., Даргаева Т.Д., Жукова О.Л., Николаева Г.Г., Николаев С.М., Попова Н.А., Сокольская Т.А., Стихин В.А.; Заявитель и патентообладатель Государственное учреждение Всероссийский научно-исследовательский институт лекарственных и ароматических растений Российской академии сельскохозяйственных наук Щи); Заявка 2006127837/15, 02.08.2006. Опубл. 10.03.2008 Бюл. № 7.
8. Стрельников Ю.Е. Сравнительная характеристика противовоспалительного действия некоторых пиримидиновых производных / Ю.Е. Стрельников // Фармакология и токсикология. - 1960. -№ 6. - С. 526-531.
9. Шилов Е.М. Иммунодепрессивная терапия активных форм нефрита (клиникоэкспериментальное исследование): Дис. ... докт. мед. наук / Е.М. Шилов. — М., 1994.
10. Parving H.H. Diabetic nephropathy / H.H. Parving, R. Osterby, E. Ritz // The kidney / B.M. Brenner et al. — Philadelphia, 2000. — P. 1731 -1773.
Сведения об авторах
Шантанова Лариса Николаевна - Институт общей и экспериментальной биологии СО РАН, заведующая лабораторией безопасности биологически активных веществ; 8 302 43 37 13, 8 914 988 9500.
Мондодоев Александр Гаврилович - Институт общей и экспериментальной биологии СО РАН, в.н.с. лаборатории экспериментальной фармакологии; 8. 302 43 37 13, 8 914 843 0601.
Торопова Анюта Алексеевна - Институт общей и экспериментальной биологии СО РАН, м.н.с. лаборатории безопасности биологически активных веществ, 8 302 43 37 13.
Николаев Михаил Петрович - Городская клиническая больница скорой медицинской помощи им. В.В. Ангапова, врач.
