CC BY
23«Ыновацп в стоматологИ», № 1, 2015
ЕКСПЕРИМЕНТАЛЬНО-ТЕОРЕТИЧНИЙ РОЗД1Л
УДК 616.311.2-092.9:547
С. А. Шнайдер, д. мед. н.
Государственное учреждение «Институт стоматологии Национальной академии медицинских наук Украины»
ПРОТИВОВОСПАЛИТЕЛЬНАЯ И АНТИРЕЗОРБТИВНАЯ АКТИВНОСТЬ АНТИАГРЕГАНТА ДИПИРИДАМОЛА В УСЛОВИЯХ ЭКСПЕРИМЕНТА
В опытах на 28 белых крысах-самцах изучено защитное действие дипиридамола на состояние слизистой оболочки полости рта крыс в условиях сочетанного влияния токсиканта фторурацила и полифенольной недостаточности при разных сроках применения. Дипиридамол проявил пародонтопротекторные противовоспалительные свойства в тканях ротовой полости при длительном применении.
Ключевые слова: дипиридамол, токсикант, полифенольная недостаточность, перекисное окисление липи-дов, антиоксидантные ферменты, эластаза, десна, слизистая оболочка щеки.
С. А. Шнайдер
Державна установа «1нститут стоматологи Нацюнально! академи медичних наук Украши»
ПРОТИЗАПАЛЬНА ТА АНТИРЕЗОРБТИВНА АКТИВН1СТЬ АНТИАГРЕГАНТУ ДИП1РИДАМОЛУ В УМОВАХ ЕКСПЕРИМЕНТУ
В docnidax на 28 бших щурах-самцях вивчена захисна дiя дитридамолу на стан слизово! облонки ротово! порожнини в умовах сумкнго впливу токсиканту фторурацилу та полiфенольноi недостaтностi на ргзних строках його використання.
Дипiридaмол проявив парадонтопротекторш противозaпaльнi влaстивостi в тканинах ротовоi порожнини при довгостроковому використант.
Ключов1 слова: дитридамол, токсикант, полiфенольнa недостаттсть, перекисне окиснення лiпiдiв, анти-оксидaнтнi ферменти, еластаза, ясна, слизова оболонка щоки.
S. A. Schneider
State Establishment "The Institute of Stomatology of the National academy of medical science of Ukraine"
THE ANTIPHLOGISTIC AND ANTIRESORPTIVE ACTIVITY OF THE ANTIAGGREGANT DIPYRIDAMOLE IN CONDITIONS OF EXPERIMENT
The aim of study is the studing of the protective role of the dipyridamole on the condition of the tissue of the oral cavity of rats by topical application under the impact of general factors - toxicant fluorouracil and alimentary insufficiency ofpolyphenols.
Materials and methods. The experiment was carried out on 2-month-old 28 male rats. They were devided into 2 groups (14 rats per group). The first group was control, and the rats were given per os the 5% solution of fluorouracil at a dose 12,5 mg/kg body weight of rats by 5 times a week. The second group was given dipyridamole in the gel composition at a dose 0,5 mg/kg body weight of rats by 5 times a week under the influence of fluorouracil locally. Both groups of rats were kept on the ration without polyphenols. Half of the animals were taken out of the experiment on the 35th day, the other - on the 70th day.
Conclusions. Dipyridamole showed antiresorptive effects at local application. The reduction of content the maleic anhydride and activity of the elastase in the oral mucosa indicates on the antiinflammatory effects of the dipyridamole by its long-term use.
Key words: dipyridamole, toxicant, polyphenolic insufficiency, peroxide oxidation of lipids, antioxidant enzymes, elastase, gingival, mucous membrane of the cheek.
© Шнайдер С. А., 2015.
«1нновацп в стоматологи», № 1, 2015
Дипиридамол (курантил) - производное пиримидина, антиагрегантное, антиадгезивное, сосудорасширяющее средство. В механизме сосудорасширяющего действия дипиридамола (ДЛ) существенную роль играет усиление образования аденозина. ДЛ является конкурентным ингибитором аденозиндезаминазы — фермента, расщепляющего аденозин в эритроцитах, тромбоцитах, эндотелиальных клетках. Важной особенностью ДЛ является его способность тормозить агрегацию тромбоцитов, что связано с подавлением активности фосфодиэстеразы тромбоцитов, увеличением образования цАМФ, что препятствует образованию тромбов в сосудах [1]. По антиагре-гационной активности ДЛ близок к ацетилсалициловой кислоте, не оказывая, однако, ульцеро-генного действия [2].
ДЛ воздействует на метаболизм арахидоно-вой кислоты по циклооксигеназному пути — оказывает ингибирующее влияние на тромбоциты и способствует увеличению продукции про-стациклина — естественного антиагреганта и вазодилататора в организме [3].
В основе вазодилатирующих свойств ДЛ лежит аденозиновый механизм воздействия на а2-аденозиновые рецепторы гладкомышечных клеток, что приводит к быстрому расслаблению стенок сосудов [4].
В настоящее время накопилось достаточно данных о влиянии различных токсикантов на возникновение стоматологической патологии в условиях недостаточного поступления растительных полифенолов [5,6].
Цель исследования. Изучение защитной роли дипиридамола при местном применении на состояние тканей ротовой полости крыс в условиях воздействия общих факторов - токсиканта фторурацила и алиментарной полифенольной недостаточности.
Материалы и методы. Опыт проведен на 28 белых крысах-самцах 2-мес. возраста, которые были распределены по 14 животных в каждой методом случайной выборки. В 1-й группе (контрольной) крысы на фоне бесполифенольного рациона (БПР) [7] получали 5 раз в неделю per os 5 % раствор фторурацила —12,5 мг/кг массы тела крыс. 2-я группа получала местно в составе геля дипиридамол в дозе 0,5 мг/кг 5 раз в неделю при сочетанном влиянии фторурацила в условиях бесполифенольного рациона. Крысам наносили местно на слизистую оболочку полости рта гель —свежеприготовленный 7,5 % картофельный крахмал. Половина животных была выведена из эксперимента на 35-й день, другая — на 70-й день.
Таблица 1
Влияние дипиридамола на показатели резорбции костных структур пародонта крыс (М±т; p; рх)
Резорбция (%)
Группы Продолжительность воздействия
животных 35 дней 70 дней
Нижняя челюсть Верхняя челюсть Нижняя челюсть Верхняя челюсть
Контрольная(К) 33,3±0,8 23,3±0,8 35,5±0,7 23,5±0,8
К+ДЛ 27,8±1,1 р=0,003 17,4±1,1 р=0,001 31,9±1,4 р1=0,04 21,0±1,5
Прим еч ание : в табл.1-4 показатель достоверности р рассчитан относительно контрольной группы (35 дней опыта); р! — // — // — (70 дней опыта); р2 — показатели после 70 дней опыта относительно 35-дневного.
Крыс выводили из опыта путём тотального кровопускания из сердца, проводимого под тио-пенталовым наркозом (40 мг/кг). Предварительно отделив десну и слизистую оболочку щеки (СОЩ), вычленяли верхние и нижние челюсти для определения степени резорбции кости альвеолярного отростка [8]. Объектами биохимических исследований служили сыворотка крови, гомогенаты печени, десны и СОЩ крыс. Гомоге-наты получали путём центрифугирования в центрифуге РС-6 при 3000 об/мин при температуре +4°С в течение 15 мин.
Уровень процессов ПОЛ оценивали по содержанию малондиальдегида (МДА) тиобарби-
туровым методом [9]. В сыворотке крови, печени, десне и СОЩ крыс определяли активность анти-оксидантных ферментов: глутатион-пероксидазы (ГПО) [10], супероксиддисмутазы (СОД) [11]; эластазы [12].
Результаты экспериментов обрабатывали методами с определением 1- критериев достоверности различий по Стьюденту.
Результаты и обсуждение. Защитные эффекты дипиридамола изучали на фоне влияния фторурацила в условиях воспроизведенной по-лифенольной недостаточности. Продолжительность опытов составляла 35 и 70 дней.
Влияние дипиридамола на процессы резорб-
«Ыновацп в стоматологи», № 1, 2015
ции костных структур пародонта крыс представлены в табл. 1.
Дипиридамол при сочетанном воздействии фторурацила и рациона, лишенного алиментарных полифенолов, снижал резорбцию кости альвеолярного отростка верхней и нижней челюстей крыс. При продолжительности опыта 35 дней снижение резорбции кости альвеолярного отростка на нижней челюсти составило 16,5 %; на верхней челюсти снижение резорбции составило 25,3 % (от 100 % в контрольной группе). При 70-
дневном местном применении дипиридамола резорбция костной ткани парадонта снижалась менее значительно: на нижней челюсти — на 10,1 %, на верхней — 10,6 %, по-видимому, вследствие усиления возрастной атрофии кости пародонта у этих животных.
Дипиридамол в созданных экспериментальных условиях существенно не повлиял на содержание МДА в сыворотке крови и изученных тканях крыс при 35-дневном применении (табл. 2).
Таблица 2
Влияние дипиридамола на содержание МДА в сыворотке крови (мкмоль/мл) и тканях крыс
(мкмоль/г) (М±т; р; рх; р2)
Группы животных Содержание МДА
35 дней 1 70 дней
Сыворотка крови
Контрольная (К) 3,85±0,13 3,84±0,19
К+ДЛ 3,60±0,26 4,40±0,54
Печень
Контрольная (К) 39,1±3,9 40,3±1,0
К+ДЛ 44,4±7,4 52,8±6,0 р1=0,06
Десна
Контрольная (К) 80,4±11,8 68,2±18,7
К+ДЛ 79,7±21,5 36,7±4,41 р2=0,07
Щека
Контрольная (К) 91,2±30,7 101±15,6
К+ДЛ 59,0±8,9 66,8±4,6 р1=0,05
Таблица 3
Влияние дипиридамола на активность антиоксидантных ферментов в сыворотке крови и тканях крыс
(М±т; р; рь р2)
Группы Активность
животных ГПО (мкат/мл; мкат/г) СОД (у.е.)
35 дней 70 дней 35 дней 70 дней
Сыворотка крови
Контрольная (К) 0,22±0,054 0,47±0,13 0,69±0,16 0,94±0,26
К+ДЛ 0,55±0,11 р=0,02 0,38±0,16 0,97±0,16 1,20±0,12
Печень
Контрольная (К) 24,0±4,27 29,1±10,6 0,31±0,032 0,094±0,024
К+ДЛ 40,2±6,80 р=0,06 26,8±4,84 0,31±0,052 0,044±0,015 р1=0,08
Десна
Контрольная (К) 33,4±6,90 93,5±15,9 0,59±0,15 0,33±0,069
К+ДЛ 106±14,1 128±17,9 0,47±0,12 0,58±0,12
р<0,001 р1=0,10
Щека
Контрольная (К) 121±11,9 75,0±9,42 0,59±0,082 0,45±0,080
К+ДЛ 54,8±6,64 р<0,001 62,6±2,24 0,58±0,071 0,57±0,067
«1нновацп в стоматологи», № 1, 2015
При длительном эксперименте (70 дней) под влиянием дипиридамола в слизистой оболочке щеки содержание МДА снижалось в 1,5 раза (р1=0,05). В десне этот показатель снижался в 2,2 раза по сравнению с группой крыс, получавших препарат в продолжение 35-дневного опыта (р2=0,07). В то же время препарат несколько увеличивал содержание МДА в печени животных по сравнению с контрольной группой при 70-дневном опыте (р1=0,06; табл. 2).
Исследования показали, что дипиридамол существенно снижал содержание МДА в слизистой оболочке десны и СОЩ крыс при длительном применении. Значительно (в 2,2 раза) снижалось содержание МДА в десне крыс при длительном опыте за 70 дней относительно 35-дневного эксперимента (р2=0,07; табл. 2).
В сыворотке крови и тканях крыс под влиянием дипиридамола наблюдались изменения активности ряда антиоксидантных ферментов. При 35-дневном опыте в сыворотке крови и печени выявлено увеличение активности глутатион-пероксидазы в 2,5 и в 1,7 раза, соответственно (р=0,02 и р=0,06; табл. 3).
Под действием дипиридамола активность данного фермента увеличивалась в десне в 3,2 раза (р<0,001). В слизистой оболочке щеки, напротив, активность глутатион-пероксидазы сни-
жалась в 2,2 раза (р<0,001) по сравнению с контрольной группой (35 дней опыта). При длительном применении дипиридамол увеличивал активность глутатион-пероксидазы в десне в 1,4 раза ( р > 0,05;табл. 3).
Дипиридамол существенно не изменял активность другого антиоксидантного фермента — СОД в сыворотке крови и слизистой оболочке полости рта крыс (35 дней опыта) (табл.3). Применявшийся длительно (70 дней) препарат вызвал увеличение в десне активности СОД в 1,8 раза (р!=0,10); в слизистой оболочке щеки при той же длительности эксперимента наблюдалось недостоверное увеличение активности этого фермента в 1,3 раза. В данных условиях опыта активность СОД снижалась в печени двое (р1=0,08) по сравнению с контролем, по-видимому, вследствие избыточного образования продуктов ПОЛ в данном объекте исследования (табл. 2).
Таким образом, дипиридамол, применявшийся на фоне введения фторурацила в условиях полифенольной недостаточности, активировал защитную антиоксидантную систему слизистой оболочки полости рта крыс.
Влияние дипиридамола на активность про-воспалительного фермента эластазы представлено в табл. 4.
Таблица 4
Влияние дипиридамола на активность эластазы в сыворотке крови (нкат/л) и тканях ротовой полости крыс (нкат/г) (М±m; р; р1; р2)
Группы животных Активность эластазы
35 дней | 70 дней
Сыворотка крови
Контрольная (К) 7,30±0,83 10,02±0,91
К+ДЛ 3,89±0,34 р=0,004 2,63±0,26 р1<0,001 р2=0,003
Десна
Контрольная (К) 1,24±0,19 2,81±0,42
К+ДЛ 1,28±0,20 0,93±0,16 р1<0,001
Щека
Контрольная (К) 1,31±0,17 1,83±0,41
К+ДЛ 1,09±0,16 1,17±0,12
Применение препарата за 35 дней эксперимента вызвало двукратное снижение активности эластазы в сыворотке крови (р=0,004). В то же время при 35-дневном опыте активность эласта-зы в слизистых десны и СОЩ крыс существенно не изменялась. При увеличении длительности опыта до 70 дней активность данного фермента в сыворотке крови снижалась в 3,8 раза по сравнению с контрольной группой (р!<0,001); в десне активность эластазы снижалась в 3 раза (р1<0,001), в слизистой оболочке щеки — в 1,6
раза (р>0,05; табл.4). При длительном применении препарата активность эластазы снижалась в 1,5 раза по сравнению с данными группы крыс после 35-дневного опыта (р2=0,003; табл.4).
Значительное снижение активности эластазы в сыворотке крови и слизистой оболочке десны свидетельствует о нормализации метаболических процессов в данных объектах исследования, а также о противовоспалительных эффектах дипи-ридамола, более существенных при длительных сроках его применения.
«1нновацп в стоматологи», № l, 20l5
В целом, проведенные исследования показали, что дипиридамол при местном применении проявил защитные пародонтопротекторные свойства в условиях общего действия токсиканта и алиментарной полифенольной недостаточности. Под влиянием дипиридамола в десне крыс снижалось содержание продуктов ПОЛ, что, по-видимому, связано с механизмом его действия, заключающемся в угнетении образования тром-боксанов и стимуляции высвобождения проста-циклина [13]. В свою очередь, при нормализации баланса эйкозаноидов в мембранах при физиологическом ферментативном окислении жирных кислот под воздействием препарата снижался уровень резорбции костных структур пародонта экспериментальных животных.
Выводы. 1. Дипиридамол при местном применении проявил антирезорбтивные эффекты. Он снижал резорбцию костной ткани пародонта крыс в среднем на 21 % при 35-дневном эксперименте и на 10,4 % при 70-дневном.
2. Снижение содержания продуктов ПОЛ и активности эластазы в слизистой оболочки полости рта свидетельствуют о противовоспалительных эффектах дипиридамола при его длительном применении (70 дней).
Список литературы
1. Машковский М. Д. Лекарственные средства. Ч. 1 / Машковский М. Д.. — М. : Медицина, 2004. — 469 с.
2. Харкевич Д. А. Фармакология / Харкевич Д. А. -М. : Медицина, 2003. — 317 с.
3. http://altermed.sml.by.
4. Ghaffari S. Detection and management of coronary artery disease in patients with rheumatologic disorders / S. Ghaffari // Rheum. Dis. Clin. North. Am. — 1999. — 25(3). — P. 657 - 668.
5. Роль растительных полифенолов в формировании общей и местной резистентности к патогенным факторам у крыс / О. Н. Воскресенский, Е. К. Ткаченко, И. Н. Моисеев [и др.] / Матерiали амп. «Рослинш полфеноли та неспеци-фiчна резистенттсть, Одеса, 4-5 жовтня 2006р. // Вюник стоматологи. — 2006. — Спецвипуск. — С. 10 - 11.
6. Влияние фторурацила на морфофункциональное состояние СОПР при разном уровне поступления растительных полифенолов / О. Н. Воскресенский, И. Н. Моисеев, Е. К. Ткаченко [и др.] // Вюник стоматологи. — 2007. — №6. — С. 12 - 16.
7. Прохончуков А. А. Руководство по терапевтической стоматологии / А. А. Прохончуков, Н. К. Жижина. — М. : Медицина, 1967. — 572 с.
8. Николаева А. В. Влияние некоторых нейротропных средств на состояние тканей при раздражении верхнего шейного симпатического узла: автореф. дис. на соискан. уч. степени канд. мед. наук : спец. 14.00.21 «Стоматология» / А. В. Николаева. - Харьков, 1967. - 29 с.
9. Стальная И. Д. Метод определения малонового ди-альдегида с помощью тиобарбитуровой кислоты / И. Д. Стальная, Т. Г. Гаришвили. — М. : Медицина. — 1977 — С. 66 - 68.
10. Патент 922637 СССР, МКИ 01 33/48. Способ определения активности глутатионпероксидазы в биологических тканях / В. А. Пахомова, Н. П. Козлянина, Г. Н. Крюкова. — Опубл. 25.04.82, Бюл. №15.
11. Чевари С. Роль супероксиддисмутазы в окислительных процессах клетки и метод определения её в биологическом материале / С. Чевари, И. Чаба, Й. Секей // Лаб. дело — 1985. — №11. — С.678-681.
12. Visser L. The use of p-nitrophenol-N-butyl-oxycarbonyl-a-alanylilate as substrate for elastase / L. Visser, E. R. Blout // Biochem. Biophys. Acta. — 1972. — Vol. 268. — №1. — P. 275-280.
13. Воскресенский О. Н. Роль перекисного окисления липидов в патогенезе пародонтита / О. Н. Воскресенский, Е. К. Ткаченко // Стоматология. — 1991. — №4. — С.5-10.
Поступила 26.01.15
УДК (616.314.17-008.1.001.57+599.323.4):(678.746.47+582.374)
А. В. Николаева, к. мед. н.
Государственное учреждение «Институт стоматологии Национальной академии медицинских наук Украины»
ВЛИЯНИЕ ПРЕПАРАТА ПОЛИФЕНОЛОВ ТРАВЫ ХВОЩА ПОЛЕВОГО НА СТРУКТУРНО-ФУНКЦИОНАЛЬНОЕ СОСТОЯНИЕ МЕЖКЛЕТОЧНОГО МАТРИКСА ПАРОДОНТА КРЫС В УСЛОВИЯХ МОДЕЛИРОВАНИЯ ПАРОДОНТИТА
В опытах на 20 белых крысах-самках изучено влияние препарата полифенолов из травы Хвоща полевого (ПФХв) на состояние межклеточного матрикса пародонта крыс в условиях моделирования пародонтита с помощью поддесневого введения лидазы. Препарат оказал положительное влияние на метаболизм межклеточного матрикса пародонта соединительной ткани крыс. Он на 50 % увеличивал уровень гликозаминоглика-нов в кости альвеолярного отростка; улучшал состояние коллагена в десне, однако не в полной мере восстанавливал уровень гликопротеинов межклеточного матрикса. Препарат проявил противовоспалительное дей-
© Николаева А. В., 2015.
