CC BY
93
Журнал фундаментальной медицины и биологии оригинальные статьи
УДК 576.8:612.017.1
ПРОТИВОДИФТЕРИЙНЫЙ И ПРОТИВОСТОЛБНЯЧНЫЙ ИММУНИТЕТ У ДЕТЕЙ С АЛЛЕРГИЧЕСКИМИ ЗАБОЛЕВАНИЯМИ, ПРИВИТЫХ АКДС- И АДС-М-ПРЕПАРАТАМИ
Лабушкина А.В., Харсеева Г.Г., Мангутов Э.О.
Ростовский государственный медицинский университет Россия, 344022, Ростов-на-Дону, пер. Нихичеванский, 29
Реферат
Цель. Изучить напряженность противодифтерийного и противостолбнячного иммунитета и показатели аллергических и аутоиммунных реакций у детей с аллергическими заболеваниями в различные сроки после вакцинации.
Материалы и методы. Обследованы 151 непривитых и 152 привитых детей с аллергическими заболеваниями (атопическая бронхиальная астма, атопический дерматит, атопический ринит) в возрасте от 1-го до 15-ти лет, иммунизированные АКДС-вакциной и ревакцинированных АДС-М-анатоксином. Группу сравнения составили 160 практически здоровых детей того же возраста и с тем же вакцинальным анамнезом. Содержание антител к дифтерийному и столбнячному анатоксинам определяли с помощью реакции пассивной гемагглютинации. Определение антител к ДНК одноцепочечной, общего IgE и специфического IgE к дифтерийному и столбнячному анатоксинам проводили с использованием иммуноферментной тест-системы. Специфическую сенсибилизацию к вакцинам определяли в тесте дегрануляции базофилов.
Результаты. Иммунизация АКДС- и АДС-М-препаратами детей с аллергическими заболеваниями способствовала формированию у них напряженного антитоксического иммунитета к дифтерии и столбняку, не отличающегося от такового у практически здоровых детей.
Заключение. Вакцинация детей с аллергическими заболеваниями АКДС- и АДС-М-препаратами на фоне проводимой гипосенсибилизирующей терапии не приводит к повышению показателей аллергических и аутоиммунных реакций.
Ключевые слова: дети, аллергические заболевания, иммунитет, дифтерия, столбняк, аллергические реакции
ANTI-DIPHTHERIA AND ANTI-TETANUS IMMUNITY IN CHILDREN WITH ALLERGIC DISEASES, VACCINATED DTP - ADS-M-DRUGS
Labushkina A.V., Kharseeva G.G., Mangutov E.O.
Rostov state medical University 29 Nakhichevanskiy str., Rostov-on-Don, 344022, Russia [email protected]
Abstract
Purpose. To study tension of diphtheria and tetanus immunity and indicators of allergic and autoimmune reactions in children with allergic diseases at different times after vaccination.
Materials and methods. State of immunity was established at 151 children without vaccination and 152 vaccinated children with allergic diseases (bronchial asthma, atopic dermatitis, pollynosis) at age of 1-15 years, inoculated with adsorbed DPT vaccine and ADT-M toxoid. Comparative group consisted of 160 practically healthy children having the same age and vaccinal anamnesis. The content of antibodies to diphtheria and
оригинальные статьи Журнал фундаментальной медицины и биологии
tetanus toxoids were determined using the reaction of passive hemagglutination. Detection of antibodies to single-stranded DNA, total IgE and specific IgE to diphtheria and tetanus was performed using the enzyme immunoassay system. Specific sensitization to the vaccine was determined in the test degranulation of basophils.
Results. Revaccination with ADT-M toxoid at children with allergic diseases leads to formation among them the tense antitoxic immunity against diphtheria and tetanus, which have no difference in compare with practically healthy children.
Conclusion. Vaccination coupling with hyposensibilizing therapy at given contingent of examinated persons did not observe the clinical manifestation of side reactions and complications, but defined the factors of specific sensibilization to diphtheria and tetanus components of vaccines.
Keywords: children, allergic diseases, immunity, diphtheria, tetanus, allergic reactions.
Введение
Иммунизация против дифтерии и столбняка в Российской Федерации проводится с помощью дифтерийного и столбнячного анатоксинов, входящих в состав АКДС- и АДС-М-препаратов. В соответствии с Расширенной программой иммунизации, принятой ВОЗ для снижения заболеваемости, необходим охват прививками не менее 95% населения. Вакцинация детей первого года жизни и более старших возрастов является важнейшим шагом в создании коллективного иммунитета против этих инфекций [1-3].
В то же время в последние годы наблюдается рост количества детей с хронической патологией, эффективность и безопасность вакцинации которых вызывает много вопросов [4]. Наиболее распространенными среди детей являются ^Е-опосредованные аллергические заболевания, которыми страдают от 10 до 30% детей [5]. Выявляемые у детей аллергические заболевания по своему гене-зу чаще являются атопическими, обусловленными генетической предрасположенностью к синтезу ^Е в ответ на попадание в организм аллергенов [6]. В то же время компоненты вакцинных препаратов, выступая в роли аллергенов, могут обусловливать недостаточность иммунного ответа и формирование иммунопатологических реакций у данной группы детей.
Исходя из этого, целью настоящего исследования явилось изучение напряженности противодифтерийного и противостолбнячного иммунитета и показателей аллергических и аутоиммунных реакций у детей с аллергическими заболеваниями в различные сроки после вакцинации.
Материалы и методы исследования
Обследованы 151 непривитых и 152 привитых детей с аллергическими заболеваниями (атопическая бронхиальная астма, атопический дерматит, ато-пический ринит), которые находились под наблюдением в лечебно-профилактическом учреждении здравоохранения. Дети с аллергическим заболеваниями были распределены на две группы в зависимости от вакцинального анамнеза. В первую группу включили детей, трехкратно вакцинированных и ревакцинированных АКДС-вакциной, а вторую группу составили дети, трехкратно вакцинированные и ревакцинированные АКДС-вакциной и вторично ревакцинированные АДС-М-анатоксином.
Дети с аллергическими заболеваниями прививались в период ремиссии на фоне гипосенсибили-зирующей терапии. Группу сравнения составили 160 практически здоровых детей, которые получили полный комплекс вакцинации АКДС-вакциной и были ревакцинированы АДС-М-анатоксином. Возраст детей варьировал от 1 до 15 лет. Всех детей обследовали в сроки 1,5-11 мес. и 1-5 лет после последней ревакцинации. Содержание антител к дифтерийному (ДА) и столбнячному (СА) анатоксинам определяли на основе реакции пассивной гемагглютинации (РПГА) тест-системой «Микроанализ-дифтерия, столбняк» производства НПК «Микроанализ», (Россия, Москва). Защитный титр противодифтерийных антител составлял 1:20, противостолбнячных — 1:10 [7]. Определение антител к ДНК одноцепочечной, общего IgE и специфического IgE к ДА и СА проводили с использованием иммуноферментной тест-системы (фирма «Вектор-Бест», Россия, г. Новосибирск). Для определения специфических IgE к ДА и СА планшеты «Dy-natech» сорбировали ДА в количестве 15-20 мкг/ мл в объеме 100 мкл, выдерживали их в течение 18-20 часов при температуре +4°С. Дальнейший ход иммуноферментного анализа осуществляли по общепринятой методике. Положительными считали образцы сыворотки, оптическая плотность которых была выше контроля на 0,1 ОЕ. Специфическую сенсибилизацию к вакцинам определяли в тесте дегрануляции базофилов (ТДБ) по методике Benveniste [8]. В качестве аллергенов использовали вакцинные препараты: ДА- и СА-анатоксины, АКДС-вакцину, АДС- и АДС-М-анатоксины. Оптимальной дозой для постановки ТДБ считали 25 мкл цельных вакцинных препаратов, для ДА — 10 Lf/мл, для СА - 10 ЕС/мл.
Статистическую обработку результатов проводили с использованием статистических пакетов «Microsoft Exel 2000» и «Statistica 6,0» для Windows XP с использованием параметрических и непараметрических методов статистики. При анализе полученных результатов определяли средние величины и стандартную ошибку (M+m). Достоверность полученных данных оценивали при уровне значимости p < 0,05.
Результаты исследования и их обсуждение
Изучение уровня напряженности противодифтерийного иммунитета у детей с аллергическими
Журнал фундаментальной медицины и биологии
оригинальные статьи
заболеваниями показало (табл. 1), что в первой группе в ранние сроки после вакцинации (1,5-11 мес.) из 47-и обследованных 91,5 ± 4,1% детей
были серопозитивны к дифтерии, а в более отдаленные сроки (1-5 лет) их количество снизилось до 82,5 ± 4,8%.
Таблица 1
Напряженность иммунитета к дифтерии и столбняку у детей, привитых АКДС- и АДС-М-препаратами
Группа детей Срок после прививки Всего детей Антитела к ДА Антитела к СА
Количество серопозитивных (%±т) СГТ Количество серопозитивных (%±т) СГТ
1 ая 1,5-11 мес. 47 43 91,5 ± 4,1 1:89,3 (54,5-146,6) 45 95,7±3,0 1:186,2 (113,5-305,5)
1-5 лет 63 52 82,5 ± 4,8 1:85,7 (55,8-131,5) 59 93,7±3,1 1:128,8 (91,0-182,4)
2 ая 1,5-11 мес. 21 21 100% 1:501,2 (288,4-870,9) 21 100% 1:1000 (616,6-1621,8)
1-5 лет 21 16 90,5 ± 6,4% 1:165,9 (95,5-288,4) 21 100% 1:676,1 (416,9-1096,5)
Контроль 1,5-11 мес. 61 58 95,1 ± 2,8% 1:467,7 (331,1-660,7) 61 100% 1:1862,1 (1479,1-2344,2)
1-5 лет 99 94 94,9 ± 2,2% 1:199,5 (158,5-251,2) 99 100% 1:977,2 (812,8-1174,9)
Примечание. ДА и СА - дифтерийный и столбнячный анатоксин соответственно; СГТ - средняя геометрическая титра
Во второй группе обследованных через 1,5-11 месяца после прививки все дети были серопозитив-ны, однако в более поздние сроки количество их снизилось до 90,5 ± 6,4%. Полученные данные не отличались от анализируемых показателей у детей группы контроля.
При изучении уровня противодифтерийного антитоксина было установлено, что средняя геометрическая его титра (СГТ) с течением времени достоверно не изменялась в первой группе обследованных и снижалась после прививки во второй группе обследованных и у детей группы контроля. Однако СГТ у детей трехкратно вакцинированных и ревакцинированных АКДС-вакциной была значительно ниже (1:89,3 через 1,5-11 мес. и 1:85,7 через 1-5 лет после вакцинации), чем у получивших полный курс вакцинации и ревакцинации тем же препаратом и ревакцинированных АДС-М-анатоксином как в ранние (1:501,2), так и поздние (1:165,9) сроки после вакцинации, и не отличалась от аналогичного показателя у практически здоровых детей (1:467,7 через 1,5-11 мес. и 1:199,5 через 1-5 лет).
При изучении противостолбнячного поствакцинального иммунитета установлено, что его уровень был выше, чем противодифтерийного среди детей, страдающих аллергическими заболеваниями, а также и практически здоровых детей. Дети второй группы и практически здоровые дети независимо от сроков после вакцинации были серопозитивны к столбняку. Однако в первой группе обследованных количество серопозитивных составило 95,7 ± 3,0% через 1,5-11 месяца и снизилось до 93,7 ± 3,1% обследованных через 1-5 лет после вакцина-
ции. Уровень противостолбнячного антитоксина, также как и противодифтерийного, имел тенденцию к снижению у всех обследованных уже через год после прививки. При этом СГТ противостолбнячных антитоксических антител увеличивалась с каждым последующим введением анатоксина как в ранние сроки после вакцинации (1,5-11 мес.), так и в поздние сроки (1-5 лет).
Обнаруженные закономерности формирования противодифтерийного и противостолбнячного иммунитета свидетельствовали об одинаковой эффективности вакцинации детей с аллергическими заболеваниями и практически здоровых детей.
Как известно, вакцинация не безразлична как для практически здоровых детей, так, особенно, и для детей с измененной реактивностью ввиду наличия в вакцинных препаратах аллергенных субстанций [9]. Вакцинальные аллергены могут способствовать развитию побочных реакций и осложнений в ответ на их введение, сопровождающееся неполноценным антительным ответом в результате переключения синтеза антител на ^Е. Таким образом, целесообразным явилось изучение содержания ^Е у детей с аллергическими заболеваниями после прививки.
Результаты исследования показали (табл. 2), что в ранние сроки после прививки (1,5-11 мес.) число детей с аллергическими заболеваниями, имевших повышенный уровень общего ^Е (33,3-42,6 % обследованных), не зависело от количества вводимых доз и вида вакцинного препарата и не отличалось от аналогичного показателя у здоровых детей. При этом средний уровень общего ^Е (33,3 ± 4,9 МЕ/ мл) у здоровых детей был ниже, чем у обследованных с аллергическими заболеваниями независимо
оригинальные статьи Журнал фундаментальной медицины и биологии
от прививочного анамнеза. В более поздние после при определении числа детей с повышенным уров вакцинации сроки (1-5 лет) достоверных изменений нем общего ^Е не наблюдали.
Таблица 2
Содержание общего 1§Е и специфических 1§Е у детей с аллергическими заболеваниями в различные
сроки после вакцинации
Контингент обследованных Сроки после прививки Всего обследованных Количество положительных результатов
М+т (МЕ/мл) Количество лиц с уровнем выше нормы (%+т) ДА-^Е СА-^Е
1 группа 1,5-11 мес. 47 85,5+27,7 20 42,6+7,2 7 14,9+5,2 5 10,6+4,5
1-5 лет 63 160,6+33,8 25 39,7+6,1 3 4,8+2,7 2 3,2+2,2
2 группа 1,5-11 мес. 21 102,0+36,3 7 33,3+10,3 5 23,8+9,3 1 4,8+4,7
1-5 лет 21 146,0+53,4 6 28,6+9,9 5 23,8+9,3 0
Непривитые - 151 121,0+17,6 63 41,7+4,0 5 3,3+1,5 3 2,0+1,1
Здоровые дети 1,5-2 мес. 20 33,3+4,9 6 30,0+10,3 3 15,0+7,9 0
Как в ранние, так и в поздние сроки после проведения вакцинации АКДС- и АДС-М-препаратами, содержание общего ^Е и его средний уровень у привитых детей с аллергическими заболеваниями не отличались от таковых у непривитых с той же патологией. Полученные результаты свидетельствовали о том, что повышенный уровень общего ^Е у детей с аллергическими заболеваниями обусловлен не вакцинацией, а иными причинами.
При определении специфической сенсибилизации к вакцинным препаратам у детей с аллергическими заболеваниями было установлено, что специфический ^Е к ДА обнаруживали чаще, чем к СА. Аналогичные результаты были получены и при обследовании здоровых детей. Однако уровень специфической сенсибилизации к дифтерийному и столбнячному компонентам вакцин был выше у детей с аллергической патологией в анамнезе, чем у
здоровых. У непривитых детей с аллергическими заболеваниями специфический ^Е к ДА и СА обнаружили только у 5 и 3 пациентов соответственно из 151 обследованного.
Учитывая, что вакцины могут вызывать в организме привитых аллергические реакции как немедленного, так и замедленного или смешанного типов [2, 6, 12], специфическую сенсибилизацию к АКДС- и АДС-М-препаратам определяли и в ТДБ, позволяющем выявлять как анафилактический, так и клеточный тип реакций [8]. Результаты исследований показали (табл. 3), что у детей с аллергическими заболеваниями специфическую сенсибилизацию к вакцинным препаратам и их компонентам обнаруживали значительно чаще (10,6-50,8 % пациентов), чем у непривитых детей с той же патологией (1,3-2,6% пациентов).
Таблица 3
Показатели специфической сенсибилизации к вакцинам в тесте дегрануляции базофилов у детей
с аллергическими заболеваниями
Контингент обследованных Сроки после прививки Всего обследованных Количество положительных результатов с препаратами (%+т)
ДА СА АКДС АДС АДС-М
1 группа 1,5-11 мес. 47 13 27,7+6,5 5 10,6+4,5 20 42,6+7,2 15 31,9+6,8 13 27,7+6,5
1-5 лет 63 19 30,2+5,8 11 17,5+4,8 32 50,8+6,3 27 42,9+6,2 22 34,9+6,0
2 группа 1,5-11 мес. 21 5 23,8+9,3 3 14,3+7,6 8 38,1+10,6 5 23,8+9,3 5 23,8+9,3
1-5 лет 21 5 23,8+9,3 5 23,8+9,3 10 47,6+10,9 9 42,6+10,8 9 42,6+10,8
Непривитые - 151 3 2,0+1,1 2 1,3+0,9 4 2,6+1,3 2 1,3+0,9 2 1,3+0,9
Журнал фундаментальной медицины и биологии
оригинальные статьи
При анализе значений ТДБ с вакцинами прослеживалась тенденция к более частому выявлению сенсибилизации к АКДС-вакцине и ее дифтерийному компоненту, что соответствовало результатам обнаружения специфического ^Е к ДА и СА.
Учитывая общность патогенетических механизмов формирования аллергических и аутоиммунных процессов [10, 11], у детей с аллергическими заболеваниями, привитых АКДС- и АДС-М-препаратами, в сыворотке крови изучали показатели как аллергических, так и аутоиммунных реакций.
При рассмотрении содержания антител к ДНК одноцепочечной (денатурированной) в сыворотке крови детей с аллергическими заболеваниями (табл. 4) было установлено, что повышенное их содержа-
ние наблюдали у 42,9-66,0% обследованных независимо от сроков после вакцинации, вида и кратности вводимого препарата. Полученные данные не отличались от аналогичных показателей у непривитых детей с аллергической патологией (54,0 + 7,0%). В то же время у здоровых детей, привитых согласно календарю прививок, антитела к ДНК одноцепо-чечной (денатурированной) определяли достоверно реже (у 10,0 + 9,5% обследованных).
При изучении уровня антител к ДНК денатурированной установили, что у привитых детей с аллергическими заболеваниями их количество варьировало в пределах от 33,6 до 45,5 ЕД/мл и достоверно не отличалось от такового у непривитых детей с той же патологией (33,5+1,9 ЕД/мл), а также не зависело от сроков после вакцинации и кратности введения вакцины.
Таблица 4
Содержание антител к ДНК одноцепочечной у детей с аллергическими заболеваниями в различные
сроки после вакцинации
ДНК
Контингент обследованных Сроки после прививки Всего обследованных M+m (ЕД/мл) Количество лиц с уровнем выше нормы (%+m)
1 группа 1,5-11 мес. 47 34,6+2,6 31 66,0+6,9
1-5 лет 63 37,2+2,9 33 52,4+6,3
2 группа 1,5-11 мес. 21 45,5+5,7 13 61,9+10,6
1-5 лет 21 33,6+4,9 9 42,9+10,8
Не привитые - 50 33,5+1,9 27 54,0+7,0
Здоровые дети 1,5-2 мес. 10 23,6+2,5 1 10,0+ 9,5
Выводы
1. Обнаруженные закономерности формирования противодифтерийного и противостолбнячного иммунитета свидетельствовуют об одинаковой эффективности вакцинации детей с аллергическими заболеваниями и здоровых детей.
2. Вакцинация детей с аллергическими заболеваниями АКДС- и АДС-М-препаратами на фоне проводимой гипосенсибилизирую-щей терапии не приводит к повышению показателей аллергических и аутоиммунных реакций.
ЛИТЕРАТУРА
1. Харсеева Г.Г., Лабушкина А.В., Москаленко Е.П., Бабаянц А.А. Вакцинация против дифтерии и столбняка детей с аллергическими заболеваниями. Эпидемиология и вакцино-профилактика. 2010; 1 (50): 63-66.
2. Харсеева Г.Г., Алутина Э.Л., Гасретова Т.Д., Дятлов И.А., Лабушкина А.В., Миронов А.Ю. и др. Дифтерия: микробиологические и иммунологические аспекты. М.: Практическая медицина; 2014.
3. Харсеева Г.Г., Квасов А.Р., Алутина Э.Л., Митрофанова Т.В., Москаленко Е.П., Никонова Н.Т. Состояние иммунитета к дифтерии у населения Ростова-на-Дону и Ростовской области в последние годы. Журнал микробиологии, эпидемиологии и иммунобиологии. 2009; 6: 80-83.
4. Лакоткина Е.А., Харит С.М., Черняева Т.В., Костинов М.П., Шамшева О.В., Тарасова А.А. Вакцинация детей с нарушенным состоянием здоровья. М.; 2013.
5. Шахова Н.В., Камалтынова Е.М., Лобанов Ю.Ф. Распространенность астмоподобных симптомов и аллергических
заболеваний среди детей дошкольного возраста и факторы риска их развития. Российский аллергологический журнал. 2017; 1: 41-46.
6. Белая книга WAO по аллергии 2011-2012: резюме. На русском языке под редакцией Р.И. Сепиашвили, Т.А. Славянской. - М: Медицина-Здоровье; 2011.
7. Профилактика дифтерии: СП 3.1.2.3109-13. М., 2013.
8. Benveniste J. The human basophil degranulation test as an in vitro method for the diagnosis of allergies. Clin Allergy. 1981; 11: 1-11.
9. Шамшева О.В., Учайкин В.Ф., Медуницын Н.В. Клиническая вакцинология. М.; 2016.
10. Долгих В.Т. Основы иммунопатологии. Ростов н/Д: Феникс; 2007.
11. Стефани Д. В., Вельтищев Ю. Е. Клиническая иммунология и иммунопатология детского возраста: Руководство для врачей. М.: Медицина; 1996.
