CC BY
44
JOURNAL OF NEW MEDICAL TECHNOLOGIES - 2018 - V. 25, № 3 - P. 202-208
УДК: 611.441
ПРОЛИФЕРАТИВНАЯ И СЕКРЕТОРНАЯ АКТИВНОСТЬ ФОЛЛИКУЛЯРНЫХ ТИРОЦИТОВ ПРИ РАЗЛИЧНЫХ РЕЖИМАХ МЫШЕЧНОЙ ДЕЯТЕЛЬНОСТИ
А.В. ПАВЛОВ*, А.В. БЕЗДЕНЕЖНЫХ"
*ФГБОУ ВО «Ярославский государственный медицинский университет» Минздрава России, Революционная ул., д. 5, Ярославль, Ярославская обл., 150000, Россия, e-mail: pavlov@ysmu.ru **ФГБОУВО «Приволжский исследовательский медицинский университет» Минздрава России, пл. Минина и Пожарского, д. 10/1, Нижний Новгород, Нижегородская обл., 603005, Россия,
e-mail: natom311@gmail.com
Аннотация. На поперечных срезах правой доли щитовидной железы после иммуногистохимиче-ской окраски моноклональными антителами к ядерному антигену пролиферирующих клеток и поли-клональными антителами к антигену тиреоглобулина оценивалась пролиферативная и секреторная активность тироцитов. Об интенсивности выведения тиреоидных гормонов судили на основе подсчета резорбционных вакуолей. Исследовались животные в интактной группе (16 собак-самцов) и эксперименте (64 животных), у которых в результате индивидуально дозированной двигательной активности во время однократных и многократных тренировок (бег на ленте тредмилла) формировалось различное морфофункциональное состояние органа. В работе показано, что индекс пролиферативной активности всех групп экспериментальных животных ниже, чем в контроле, а индекс секреторной активности выше. При различной продолжительности бега происходит достоверное снижение общего количества резорбционных вакуолей для всех групп животных; увеличение количества тиреоглобулин-позитивных клеток всегда сопровождается увеличением количества резорбционных вакуолей. Выявлено, что физические нагрузки приводят к снижению пролиферативной активности тироцитов, увеличению синтеза тиреоглобулина и уменьшению количества резорбционных вакуолей, количество повторений нагрузок и продолжительность бега влияли на выраженность этих реакций.
Ключевые слова: щитовидная железа, иммуногистохимия, PCNA, пролиферация, тироглобулин, резорбционные вакуоли, двигательная активность, мышечные нагрузки.
Введение. Пролиферативная активность (ПА) тироцитов щитовидной железы (ЩЖ) является проявлением физиологической регенерации на клеточном уровне, при этом число клеток, находящихся в состоянии митотического деления в норме у взрослых особей невелико (12% в год или 4% ядер фолликулярных клеток не в стадии G0), а их локализация хаотична [3]. Изменения ПА происходят в регенерирующей железе [8], зависят от возраста [4] и сезонных влияний [5]. Резкое повышение пролиферации характерно для патологических состояний [15]. Мы не нашли научных публикаций, свидетельствующих о влиянии физических нагрузок на пролиферацию в ЩЖ. Известно, что пролиферация тироцитов контролируется центральными (ТТГ) и местными механизмами (факторы роста, цитокины), при этом, важно разграничивать физиологическую (регенерация) и патологическую (опухолевый рост) пролиферацию органа [10].
Существует более 60 маркеров визуализации и оценки ПА. Пролиферирующие клетки,
находящиеся на разных стадиях митотического цикла, определяют иммуногистохимически (Ki-67, PCNA, pl05, CDK-2, cdE) на сегодняшний день этот метод является наиболее информативным и достоверным [9]. При маркировке пулов клеток различных стадий «наибольшим диапазоном» [7] обладает ядерный антиген пролиферирующих клеток - PCNA (proliferating cell nuclear antigen) - белок массой 29 кДа. С его помощью определяют не только клетки, вступившие в митоз, но и клетки, находящиеся в процессе подготовки к делению, что позволяет оценить их пролиферативный потенциал.
Изменения тиреоглобулина в коллоиде фолликулов ЩЖ тесно коррелируют с фазами накопления и эвакуации тиреоидных гормонов [ll]. В физиологических условиях этапы синтеза, накопления и секреции тиреоидных гормонов протекают в тироцитах практически одновременно и сбалансированно. Увеличение количества тиреоглобулин-продуцирующих клеток или появление резорбционных вакуолей (РВ) являются отражением гиперфункции как ЩЖ в
целом, так и её отдельных структурно-функциональных единиц. Взаимоотношение пролиферативной активности, синтеза и резорбции тироглобулина весьма сложно и опосредуется целой группой регулирующих факторов ЩЖ [14].
Цель исследования - на основании анализа ядерного антигена пролиферирующих клеток и тиреоглобулин-продуцирующих клеток после иммуногистохимической маркировки и подсчета резорбционных вакуолей выяснить исходный уровень пролиферации и секреторной активности тироцитов щитовидной железы собак и его изменения при различных режимах двигательной активности.
Материалы и методы исследования. Животные (собаки-самцы, возраста от 1,5 до 2-х лет) содержались в виварии на стандартном рационе питания сроком не менее одного месяца, при этом фиксировалась продолжительность светового дня, температура окружающей среды. Исследования на животных проведены в соответствии с приказами Минвуза СССР № 742 от 13.11.84 «Об утверждении правил проведения работ с использованием экспериментальных животных» и № 48 от 23.01.85 «О контроле за проведением работ с использованием экспериментальных животных». Взятие материала осуществляли под внутривенным общим комбинированным наркозом (2% ромитар, «зо-летил-50») в стандартное время суток - 1012 часов.
Контрольная группа представлена 16 животными. Экспериментальные группы получали однократные и многократные нагрузки (бег на ленте тредмила со скоростью 15 км/час) при динамическом контроле частоты сердечных сокращений (ЧСС). В контрольной группе средняя ЧСС составила 125±6,92 уд/мин. Однократные нагрузки представлены тремя видами воздействий: тренирующего характера - 8 животных, время бега 27,76±4,67 мин, ЧСС 205±10,15 уд/мин; стартового характера - 11 собак, время бега 8,25±0,73 мин при ЧСС 201±13,47 уд/мин; предельными нагрузками - 12 животных 73,14±14,97 мин, ЧСС 191±6,41 уд/мин. Многократные воздействия были в виде циклов тренировок, каждый из которых состоял из тренирующих (первый этап) и стартовых нагрузок (второй этап) и представлены тремя группами. Первая группа (12 животных) - общее количество нагрузок 23,25±0,66 - после первого этапа тренирующих индивидуально дозированных дви-
гательных нагрузок (ИДДН) (время бега 45,64±1,83 мин, ЧСС 169±1,85 уд/мин) получала воздействия стартового характера (время бега 11,81±0,38 мин, ЧСС 168±3,30 уд/мин). Во второй группе (10 собак) - общее количество нагрузок 55,50+2,45 - тренирующими нагрузками и стартовыми ИДДН моделировали последовательно три цикла воздействий - время бега 64,02±3,4 мин и ЧСС 168±2,35 уд/мин (при стартовых нагрузках среднее время 10,4±0,27 мин, ЧСС 172±2,38 уд/мин). В третьей группе у 11 животных формировали четыре цикла (общее количество нагрузок 70,54±2,52), время бега составило 71,3±2,56 мин при средней ЧСС 173,59±2,56 уд/мин (среднее время бега при стартовых нагрузках 9,85±0,25 мин, ЧСС 183,33±2,57 уд/мин).
Для оценки пролиферативной и секреторной активности тироцитов с помощью моно- и поликлональных антител (Бако суЬошаЫоп, Швеция) на гистологических препаратах серийных поперечных срезов парафин-целлоидиновых блоков (фиксатор - 10% нейтральный формалин) толщиной 3 мкм, изготовленных с помощью роторного микротома (БЯМ-230Ь) из правой доли ЩЖ, в ядрах клеток определялся ядерный антиген пролиферирую-щих клеток (РСЫЛ, клон 01) и тиреоглобулин. Измерения проводили в 40 полях зрения (общее увеличение 600) по всей поверхности среза, в каждом из которых оценивали число РВ, общее количество клеток, РСЫЛ и ТГ маркированных, на основании этих данных вычисляли индекс пролиферативной активности (ИПА), индекс секреторной активности (ИСА), коэффициенты резорбции.
1) Индекс пролиферативной активности (ИПА) количественная оценка уровеня пролиферации клеток, то есть число антиген-позитивных клеток от общего числа клеток, выраженное в процентах.
2) Индекс секреторной активности (ИСА) тироцитов рассчитывался как соотношение окрашенных тиреоглобулин-позитивных (ТГ+) клеток к общему количеству проанализированных клеток (%).
5) Общее количество РВ на препарате (ОКРВ) позволяло рассчитать коэффициенты соотношений РВ и общего количества клеток (ОКРВ/ОКК), соотношений общего количества РВ и количества тиреоглобулин-позитивных клеток (ОКРВ/ТГ+).
JOURNAL OF NEW MEDICAL TECHNOLOGIES - 2018 - V. 25, № 3 - P. 202-208
В программе «AnalystSoft Inc., StatPlus, версия 6 (www.analystsoft.com)» получали данные описательной статистики, оценивали нормальность распределения, проводили сравнение показателей разных групп (t-критерий Стью-дента и линейный коэффициент корреляции r-Пирсона).
Результаты и их обсуждение. Клетка в стадии пролиферации (различные стадии митоза) обладает крупным округлым ядром, содержащим ядрышки хроматина. При положительной иммуногистохимической реакции на PCNA ядро окрашивалось в коричневый цвет, видимый на светооптическом уровне (рис. 1).
Таблица 1
Показатели пролиферативной и секреторной активности у животных различных групп, X + S-
Группа\ Показатель PCNA+, клеток ИПА, % ТГ+, клеток ИСА, %
Контроль (п=16) 1,10±0,06 2,26±0,12 153±6,16 11,74±0,52
Однократные нагрузки Тренирующие (п=8) 1,05±0,08 2,27±0,18 117±10,99# 12,45±0,65
Стартовые (п=11) 0,91±0,07# 1,86±0,14# 143±8,59 12,54±0,67
Предельные (п=12) 0,88±0,05* 1,54±0,10* 150±6,97 11,10±0,47
Многократные нагрузки Многократные 1 (п=12) 0,77±0,05* 1,59±0,11* 121±13,02# 13,77±0,79#
Многократные 2 (п=10) 0,57±0,05* 1,16±0,11* 138±6,10 12,11±0,30
Многократные 3 (П=11) 0,68±0,04* 1,26±0,07* 139±10,80 12,34±0,39
Примечание: * - p<0,01 в отношении контроля; # - p<0,05 в отношении контроля; PCNA+ - клетки содержащие ядерный антиген пролиферирующих клеток, ИПА - индекс пролиферативной активности, ТГ+ тиреоглобулин-позитивные клетки, ИСА - индекс секреторной активности
Рис. 1. Тироциты после иммуногистохимической окраски PCNA, гематоксилин-эозин. Увеличение 630
Рис. 2. Иммуногистохимическая окраска на тиреоглобулин, гематоксилин. Увеличение 630. (1) - ядро фолликулярного тироцита; (2) - ядро тироцита в стадии пролиферации; (3) - резорбционная вакуоль, (4) - тироцит в стадии секреции, (5) -коллоид в полости фолликула
ИПА всех групп экспериментальных животных ниже, чем в контроле (табл. 1). При этом в группе животных с однократными тренирующими нагрузками (оптимальное функционирование кардиореспира-торной системы) его изменения незначительны, в группах с однократными стартовыми нагрузками (кратковременный бег) уменьшены на 17,70%, а предельные нагрузки (продолжительный бег) приводят к резкому снижению 31,85%. При тренирующих нагрузках ИПА достоверно отличается (р<0,01) в группах предельные нагрузки (бег до отказа) и всех группах с многократными нагрузками 1, 2, 3; при стартовых нагрузках (р<0,01) и предельных нагрузках (р<0,05) отличия выявлены в отношении групп многократные 2 и 3. Многократные продолжительные тренирующие нагрузки оказывают существенное влияние на функциональное состояние клеток, уменьшая пролиферацию в группах «многократные 2» (общее количество нагрузок 55,50+2,45) на 48,67% и «многократные 3» на 44,25% (общее количество нагрузок 70,54±2,52), в тоже время сочетание тренирующих и стартовых нагрузок формирует менее выраженное снижение в группе «многократные 1» (общее количество нагрузок 23,25±0,66) - на 29,65%. При многократных тренировках показатели группы многократные 1 достоверно отличаются
(р<0,01) от значений групп многократные 2 и многократные 3, отличия между группами многократные 2 и 3 не выявлены (р=0,45). Проведенный корреляционный анализ выявил достоверные положительные взаимосвязи (р<0,05) общего количества клеток, количества РСЫЛ-позитивных клеток.
Функциональная активность ЩЖ определяется уровнем секреции тироцитов как свободной, так и связанной (тиреоглобулин) форм гормона. На светооптическом уровне иммуно-гистохимическая реакция на тиреоглобулин представлена гранулами секрета в цитоплазме клеток и коллоидом в просвете фолликула, окрашенными в коричневый цвет (рис. 2). Изменение плотности коллоида при увеличении секреторной активности на уровне фолликула, сопровождается увеличением количества ре-зорбционных вакуолей.
Среднее количество проанализированных клеток в исследованных группах составило 1148±59 кл. Количество тиреоглобулин-позитивных (ТГ+) клеток в экспериментальных группах было ниже, чем в контроле (табл. 1). Статистически достоверные отличия (p<0,05) выявлены в группах с однократными тренирующими и первой группой с многократными нагрузками. Следует отметить, что при этом ИСА всех экспериментальных групп, за исключением группы с предельными нагрузками был
недостоверно выше, чем в контроле.
При ИДДН различной продолжительности происходит достоверное снижение общего количества резорбционных вакуолей для всех групп животных, за исключением группы с предельными нагрузками (табл. 2). Так, при однократных тренирующих нагрузках это снижение максимально (63,20%), при стартовых менее выражено (44,90%), при предельных нагрузках показатели близки к контролю. Повторяющиеся многократные воздействия имеют практически сходную картину и в группах 1, 2 и 3 их уменьшение составляет 48,41%, 47,92% и 49,92% соответственно. Максимальная длительность бега вызывает увеличение резорбции коллоида, в то время как кратковременные воздействия (тренирующие и стартовые) не позволяют среагировать системе. Повторяющиеся многократные воздействия (во всех группах) позволяют системе сформировать баланс между продукцией и резорбцией коллоида. Это снижение выявлено и для коэффициентов отношения количества резорбционных вакуолей к общему числу проанализированных клеток и к тиреоглобулин-позитивным клеткам.
Выявлено изменение количества достоверных корреляционных связей между показателями, отражающими секреторную и резорбционную активность. Двигательная активность, как при однократных, так и повторяющихся многократных циклических нагрузках приводит к формированию связи, не характерной для контроля, когда на фоне увеличения общего количества клеток растет и количество ТГ+ клеток (р<0,05, от г=0,66 до г=0,93). В группе с предельными нагрузками эта зависимость статистически не достоверна. Во всех группах выявлена положительная линейная зависимость между количеством резорбционных вакуолей (ОКРВ) и числом тиреоглобулин-продуцирующих (ТГ+) клеток (р<0,05, от г=0,60 до г=0,91). Таким образом, увеличение тиреогло-булин-позитивных клеток при ИДДН всегда сопровождается и увеличением количества ре-зорбционных вакуолей.
Заключение. Физические нагрузки оказывают целостное воздействие на организм экспериментальных животных [2], предъявляя повышенные требования, в том числе, к эндок-
Таблица 2
Показатели резорбционной активности и её интенсивности у животных различных групп, X + Sx
Группа\Показатель ОКРВ, шт. ОКРВ/ОКК, усл.ед. ОКРВ/ТГ+, усл.ед.
Контроль (п=16) 26,50±2,51 2,01±0,17 16,97±1,35
Однократные нагрузки Тренирующие (п=8) 9,75±1,93* 0,97±0,13* 7,78±1,13*
Стартовые (п=11) 14,6±2,20* 1,20±0,14* 9,66±1,16*
Предельные (п=12) 27,07±1,99 2,00±0,15 17,94±0,91
Многократные нагрузки Многократные 1 (п=12) 13,67±2,84* 1,19±0,19* 9,52±1,74*
Многократные 2 (п=10) 13,80±1,60* 1,16±0,10* 9,69±0,93*
Многократные 3 (п=11) 13,27±2,11* 1,05±0,15* 8,73±1,22*
Примечание: р<0,05 * - в отношении контроля; ОКРВ - общее количество РВ в препарате, коэффициенты соотношений с общем количеством клеток -ОКРВ/ОКК, количеством тиреоглобулин-позитивных клеток -
ОКРВ/ТГ+
ринной системе. Нами показано, что пролифе-ративная активность тироцитов напрямую зависит от характера физической нагрузки, её кратности, продолжительности бега и отражает состояние репаративных процессов в тироци-тах. Однократные тренирующие нагрузки вызывают незначительное уменьшение ИПА, в то время как при кратковременных стартовых и предельных нагрузках снижение более выражено, несмотря на различия в продолжительности времени бега в 10 раз. Можно предположить, что информационная составляющая кратковременных недостаточных и долговременных избыточных однократных воздействий однонаправлено влияют на пролиферацию ти-роцитов. Многократные тренирующие воздействия (от одного до трех месяцев) характеризовались наибольшим снижением ИПА, что вероятно служило отражением снижения восстановительных ресурсов железы. Применение стартовых нагрузок на фоне цикла тренирующих воздействий (многократные 1) стимулировали пролиферацию тироцитов,
Известен эффект сложных, в том числе, и опосредованных влияний тиреоглобулина на пролиферацию тиреоидных клеток [12,13] по данным литературы количество тиреоглобу-лин-продуцирующих клеток в условиях стресса уменьшается [6]. Нами показано, что физические нагрузки приводят к росту индекса секреторной активности тироцитов, но снижению ИПА. Наиболее вероятными механизмами наблюдаемого снижения пролиферативной активности тироцитов при разных режимах физической нагрузки могут являться развитие конкурентных взаимоотношений внутриклеточных путей, обеспечивающих метаболизм
тиреоидиных гормонов и синтетических процессов, связанных с подготовкой клетки к делению [8], а также тормозящий эффект на пролиферацию повышенного уровня катехоламинов в условиях развития стрессовой реакции [11]. Корреляционным анализом подтверждено, что увеличение тиреоглобулин-позитивных клеток при ИДДН всегда сопровождается увеличением количества резорбционных вакуолей.
Традиционно образование РВ в ЩЖ связывают с «аварийным» способом экскреции коллоида, характерным для желез с невысокой активностью фолликулярного эпителия [1]. Количество РВ при всех видах ИДДН достоверно снижено, причины этого, по нашему мнению, различны и отражают реакцию ЩЖ на параметры бега. Возможно, при тренирующих и стартовых нагрузках преобладает физиологическая резорбция (увеличение количества микроворсинок и эндоцитоз на клеточном уровне), а при предельных нагрузках включаются механизмы активного захвата тиреоглобулина в связи, с чем количество вакуолей незначительно превышают показатели контроля.
При многократных воздействиях количество вакуолей определяется сформировавшимся балансом между синтезом и резорбцией тире-оглобулина.
Таким образом, индивидуально дозированные двигательные нагрузки снижают пролифе-ративную активность тироцитов, интенсифицируют процессы, связанные с синтезом тире-оглобулина, но приводят к уменьшению общего количества резорбционных вакуолей, при этом количество повторений нагрузок и продолжительность бега влияли на выраженность этих реакций.
PROLIFERATIVE AND SECRETORIAL ACTIVITY OF FOLLICULAR THYROCYTES IN VARIOUS MODES
OF MOTOR ACTIVITY
A.V. PAVLOV*, A.V. BEZDENEZHNYKH**
'Yaroslavl State Medical University of the Ministry of Health of Russia, Revolutionary Str., 5, Yaroslavl, Yaroslavl
region, 150000, Russia, e-mail: pavlov@ysmu.ru ''Volga Medical Research University, Minin and Pozharsky Square, 10/1, Nizhny Novgorod, Nizhny Novgorod region, 603005, Russia, e-mail: natom311@gmail.com
Abstract. In the transverse sections of the right lobe of the thyroid gland, after immune-histochemical staining with monoclonal antibodies to the nuclear antigen of proliferating cells and polyclonal antibodies to the thyroglobulin antigen, the proliferative activity and secretory activity of thyrocytes were evaluated. The intensity of excretion of thyroid hormones was judged on the basis of counting the number of resorption vacuoles. Animals were studied in an intact group (16 male dogs) and experiment (64 animals), which as a result of individually dosed motor activity during single and multiple training (running on the tread-
JOURNAL OF NEW MEDICAL TECHNOLOGIES - 2018 - V. 25, № 3 - P. 202-208
mill), formed a different morphofunctional state of the organ. The work shows that the index of proliferative activity of all groups of experimental animals is lower than in the control, and the index of secretory activity is higher. A significant reduction in the total number of resorption vacuoles for all experimental animals occurs. Аn increase in the number of thyroglobulin-positive cells is always accompanied by an increase in the number of resorption vacuoles. It was found that physical loads lead to a decrease in proliferative activity of thyrocytes, an increase in the synthesis of thyroglobulin and a decrease of number of resorption vacuoles, the number of repetitions of loads and the duration of running influenced the severity of these reactions.
Key words: thyroid gland, immune-histochemistry, PCNA, proliferation, thyroglobulin, resorption vacuoles, motor activity, muscular load.
Литература
1. Агеенко К.И., Горбачев А.Л., Шуберт Э.Е. Особенности гистоструктур щитовидной железы у жителей г. Магадана // Фундаментальные исследования. 2011. № 9. С. 191-195.
References
1. Ageenko KI, Gorbachev AL, SHubert EHE. Oso-bennosti gistostruktur shchitovidnoj zhelezy u zhite-lej g. Magadana [Features histostructure thyroid gland in residents of Magadan]. Fundamental'nye issledovaniya. 2011;9:191-5. Russian.
2. Бирюкова О.В., Стельникова И.Г. Работоспособность при двигательных нагрузках и гипокинезии: монография. Н. Новгород: НижГМА, 2011. 176 с.
3. Быков В.Л. Щитовидная железа. Руководство по гистологии: учебное пособие для студ. мед. вузов и фак.: в 2-х т. / ред. Р.К. Данилов, В.Л. Быков. СПб.: СпецЛит, 2001. Т.2. С. 453-476.
4. Быков В.Л. Гистофизиология щитовидной железы в постнатальном онтогенезе // Арх. анат. 1979. Т. 86, № 3. С. 80-94.
5. Глумова В.А. Щитовидная железа. Структурные основы адаптации и компенсации нарушенных функций / ред. Д.С. Саркисов. М.: Медицина, 1987. С. 320-328.
2. Biryukova OV, Stel'nikova IG. Rabotosposobnost' pri dvigatel'nyh nagruzkah i gipokinezii: monografiya [Performance under motor loads and hypokinesia: monograph]. N. Novgorod: NizhGMA; 2011. Russian.
3. Быков ВЛ. Щитовидная железа. Руководство по гистологии: учебное пособие для студ. мед. вузов и фак.: в 2-х т. Ред. Р.К. Данилов, В.Л. Быков [Thyroid. Guide to histology: a study guide for a student. honey. universities and FAK.: in 2 t. Red. R. K. Danilov, V. L. Bykov]. СПб.: СпецЛит; 2001. Vol.2. Russian.
4. Bykov VL. Gistofiziologiya shchitovidnoj zhelezy v postnatal'nom ontogeneze [Histophysiology of the thyroid gland in postnatal ontogenesis]. Arh. anat. 1979;86(3):80-94. Russian.
5. Glumova VA. SHCHitovidnaya zheleza. Strukturnye osnovy adaptacii i kompensacii narushennyh funkcij. red. D.S. Sarkisov [Thyroid. Structural basis of adaptation and compensation of disturbed functions. ed. D. S. Sarkisov]. Moscow: Medicina; 1987. Russian.
6. Дегтярь Ю.В., Смирнова Т.С., Шараевская М.В., Капитонов М.Ю. Иммуногистохимическая характеристика щитовидной железы при хроническом стрессе // Вестник Волгоградского государственного медицинского университета. 2008. Т. 28, № 4. С. 51-54.
6. Degtyar' YUV, Smirnova TS, SHaraevskaya MV, Kapitonov MYU. Immunogistohimicheckaya harakte-ristika shchitovidnoj zhelezy pri hronicheskom stresse [Immunohistochemical characteristics of the thyroid gland in chronic stress]. Vestnik Volgogradskogo gosudarstvennogo medicinskogo universiteta. 2008;28(4):51-4. Russian.
7. Лекции по общей патологической анатомии. Учебное пособие / ред. М.А. Пальцев. М.: ММА, 2003. 254 с.
7. Лекции по общей патологической анатомии. Учебное пособие. ред. М.А. Пальцев [Lectures on General pathological anatomy. Textbook. red. M. A. Fingers]. Мoscow: ММА; 2003. Russian.
8. Павлов А.В. Пролиферативная и функциональ- 8. Pavlov AV. Proliferativnaya i funkcional'naya
JOURNAL OF NEW MEDICAL TECHNOLOGIES - 2018 - V. 25, № 3 - P. 202-208
ная активность паратироцитов и парафоллику-лярных (С-) клеток в регенерирующих околощитовидных и щитовидной железах: автореф....д-ра мед. наук. М., 1990. 42 с.
aktivnost' paratirocitov i parafollikulyarnyh (C-) kle-tok v regeneriruyushchih okoloshchitovidnyh i shchitovidnoj zhelezah [Proliferative and functional activity of parathyrocytes and parafollicular (C-) cells in regenerating parathyroid and thyroid glands] [dissertation]. Moscow (Moscow region); 1990. Russian.
9. Теоретические основы и практическое применение методов иммуногистохимии: руководство. // Под ред. Д. Э. Коржевского. 2-е изд., испр. и доп. СПб.: СпецЛит, 2014. 119 с.
9. Teoreticheskie osnovy i prakticheskoe primene-nie metodov immunogistohimii: rukovodstvo. Pod red. D. EH. Korzhevskogo. 2-e izd., ispr. i dop [9. Theoretical basis and practical application of immu-nohistochemistry methods: manual. Ed. by D. E. Korzhevsky. 2nd ed., ISPR. and DOP]. SPb.: SpecLit; 2014. Russian.
10. Хмельницкая Н.М. Щитовидная железа. Руководство по гистологии: учебное пособие для студ. мед. вузов и фак. / ред Р.К. Данилов. 2-е изд., испр. и доп. СПб.: СпецЛит, 2010. Т. 1. С. 703-710.
11. Boron W.F., Boulpaep E.L. The Thyroid Gland. Medical Physiology E-Book. Elsevier Health Sciences, 2017. P. 2463-2485.
12. Fayet G., Hovsépian S. Isolation of a normal human thyroid cell line: hormonal requirement for thyroglobulin regulation // Thyroid. 2002. Vol. 12, № 7. P. 539-546.
10. Hmel'nickaya NM. SHCHitovidnaya zheleza. Ru-kovodstvo po gistologii: uchebnoe posobie dlya stud. med. vuzov i fak. red R.K. Danilov. 2-e izd., ispr. i dop [Thyroid. Guide to histology: a study guide for a student. honey. universities and FAK. red R. K. Danilov. 2nd edition, revised and update]. SPb.: SpecLit; 2010. Vol. 1. Russian.
11. Boron WF, Boulpaep EL. The Thyroid Gland. Medical Physiology E-Book. Elsevier Health Sciences; 2017.
12. Fayet G, Hovsepian S. Isolation of a normal human thyroid cell line: hormonal requirement for thyroglobulin regulation. Thyroid. 2002;12(7):539-46.
13. Hayashi M., Shimonaka M., Matsui K. Proliferative effects of bovine and porcine thyroglobulins on thyroid epithelial cells // Endocr J. 2009. Vol. 56, № 3. P. 509-519.
13. Hayashi M, Shimonaka M, Matsui K. Prolifera-tive effects of bovine and porcine thyroglobulins on thyroid epithelial cells. Endocr J. 2009;56(3):509-19.
14. Jameson J.L., De Groot L.J., de Kretser D.M. Thyroid Regulatory Factors. Endocrinology: Adult and Pediatric. Elsevier Health Sciences, 2016. P. 12971321.
14. Jameson JL, De Groot LJ, de Kretser DM. Thyroid Regulatory Factors. Endocrinology: Adult and Pedia-tric. Elsevier Health Sciences; 2016.
15. Waligorska-Stachura J. Survivin DEx3 as a bio-marker of thyroid cancers: A study at the mRNA and protein level // Oncol. Lett. 2017. Vol. 13, № 4. P. 2437-2441.
15. Waligorska-Stachura J. Survivin DEx3 as a bio-marker of thyroid cancers: A study at the mRNA and protein level. Oncol. Lett. 2017;13(4):2437-41.
