CC BY
15УДК 619:618.19-002
Климов Н. Т., Паршин П. А., Зимников В. И., Ерин Д. А., Манжурина О. А., Чернышова И. С.
ПРОГНОЗИРОВАНИЕ ИСХОДА СУБКЛИНИЧЕСКОГО МАСТИТА У ЛАКТИРУЮЩИХ КОРОВ
Ключевые слова: коровы, субклинический мастит, спонтанное выздоровление, исход субклинического мастита
Резюме: Приведены данные по прогнозированию исхода субклинического мастита у лактиру-ющих коров. Определено, что из секрета молочной железы больных субклиническим маститом коров выделены в основном патогенные микроорганизмы (Staph. aureus, Str. agalactiae), условно-патогенная микрофлора (Ent. faecium) выделена лишь в ассоциации с патогенными возбудителями. Общая бактериальная обсемененность секрета пораженной четверти составляла от 3,36х102 до 6,50х104 КОЕ/мл (в среднем 4,15х103 КОЕ/мл). При переходе скрытого воспаления в клинически выраженное катаральное из секрета молочной железы выделены те же патогенные микроорганизмы (Staph. aureus, Str. agalactiae), но бактериальная обсемененность при этом возросла в 41,9 раза и составила 1,74х105 КОЕ/мл. У животных, у которых отмечено спонтанное выздоровление, в 80 % случаев выделена сапрофитная микрофлора (Ent. faecalis, Ent. aerogenes) и в 20 % - патогенный агалактийный стрептококк. При этом бактериальная обсемененность снизилась в среднем до 2,88х102 КОЕ/мл или в 14,4 раза. При хроническом течении воспалительного процесса в молочной железе при сохранении этиологической роли патогенных возбудителей уровень бактериальной обсемененности секрета вымени достоверно не изменился и составил в среднем 1,28 х104.
Введение
Эффективное ведение молочного скотоводства неразрывно связано с получением молока высокого санитарного качества. Воспаление молочной железы - мастит является основной причиной снижения удоев, санитарных и технологических качеств молока, преждевременной выбраковки животных. Наибольшую хозяйственно-экономическую проблему представляет субклинический мастит, встречающийся в 3-7 раз чаще, чем клинически выраженный, при этом скрытое воспаление может сохраняться в течение 1-2 лакта-ций, при отсутствии своевременного и эффективного лечения [1].
Для терапии и профилактики мастита в основном используются препараты, содержащие антибиотики и другие антимикробные средства, обладающие отрицательным действием на организм животных и качественный состав молока [2, 3, 4, 5].
На сегодняшний день нет единого мнения о сроках лечения субклинического мастита у коров. Одни авторы [5, 6] предлагают проводить лечение сразу после его диагностики, другие [7] - после двукратных цитологических и положительных результатов бактериологических исследований, третьи [8, 9] - во время запуска. В то
же время известно, что при отсутствии лечения субклинического мастита, у больных животных падает молочная продуктивность на 10-15 %, ухудшается качество и питательная ценность молока, которое становится небезопасным при употреблении его в пищу людям и молодняку сельскохозяйственных животных из-за содержания в нем патогенных микроорганизмов и их токсинов, не разрушающихся даже при термической обработке [7, 10]. Вместе с тем даже фронтальная обработка всех больных животных не дает ожидаемого эффекта вследствие недостаточно высокой терапевтической эффективности антибиотиков из-за образования лекарственно устойчивых штаммов микроорганизмов, вызывающих развитие воспалительного процесса [6, 11].
В связи с этим разработка способа прогнозирования исхода субклинического мастита у лактирующих коров при отсутствии терапевтического вмешательства является актуальным.
Материалы и методы исследований
Исследования проведены на 54-х больных субклиническим маститом коровах, находящихся на 2-3 месяце лактации. У всех включенных в опыт животных с ин-
тервалом 3-4 дня проводили обследование молочной железы (клинически и с диагностическим реактивом). По результатам этих исследований животные были разделены на три группы: 1) заболевшие клинически выраженным маститом, 2) животные, у которых наступило спонтанное выздоровление и третья группа - животные с хроническим течением воспалительного процесса. От 6-ти животных каждой группы получен биологический материал (кровь и секрет молочной железы) для лабораторного анализа до и в конце опыта.
Результаты и обсуждение
Результаты иммунобиохимических исследований крови свидетельствуют о том, что переход субклинического мастита в клинически выраженное воспаление сопровождается дальнейшим угнетением защитных реакций организма, что проявлялось снижением содержания количества эритроцитов на 12,9 %, лейкоцитов - на 8,9 %, моноцитов - на 34,2 % (Р<0,05), сегмен-тоядерных нейтрофилов - на 25,3 %, бактерицидной активности сыворотки крови -на 11,7 % (Р<0,05), фагоцитарной активности лейкоцитов - на 34,6 % (Р<0,05), фагоцитарного индекса - на 18,7 %, фагоцитарного числа - на 36,1 % и повышением уровня циркулирующих иммунных комплексов - на 37,7 % (Р<0,05).
При сохранении воспалительной реакции в молочной железе на исходном уровне и длительной антигенной нагрузке у животных отмечено снижение количества лейкоцитов на 11,2 % (Р<0,05), возрастание содержания палочкоядерных нейтро-филов на 10,7 %, моноцитов на 7,3 %, свидетельствующих о высокой напряженности клеточного звена неспецифической резистентности организма на фоне понижения резервных возможностей гуморального звена, о чем свидетельствует снижение показателей лизоцимной активности сыворотки крови на 15,6 % (Р<0,05).
Процесс спонтанного выздоровления животных сопровождался нормализацией ряда показателей обмена веществ: снижением содержания лейкоцитов на 9,4%, в том числе эозинофилов - на 28,7 % (Р<0,001), палочкоядерных нейтрофилов -на 64,3 % (Р<0,01), моноцитов - на 56,1 % и -глобулиновой фракции белка - на 27,6 % (Р<0,05), при одновременном повышении содержания сегментоядерных нейтро-филов на 18,7 % (Р<0,05), свидетельствующем о снижении воспалительной реакции.
Кроме того, при спонтанном выздо-
ровлении коров,больных субклиническим маститом, отмечается рост бактерицидной активности сыворотки крови на 9,9 % (Р<0,05), фагоцитарного индекса - на 27,6 %и снижение лизоцимной активности сыворотки крови на 45,7 %, содержания циркулирующих иммунных комплексов на 20,9 % (Р<0,05), что отражает снижение антигенной нагрузки на организм.
Из секрета молочной железы больных субклиническим маститом коров в острой стадии воспаления выделены следующие микроорганизмы: Staph. aureus - 80,0 %, Str. agalactia - 20,0%, Ent. faecium - 20,0 %, при этом Ent. faecium выделен только в ассоциации со Staph. aureus. Бактериальная обсе-мененность молока при этом составила от 3,36х102 до 6,50х104 КОЕ/мл. Кроме того, в 20,0 % случаев выделены бифидо- и лакто-бактерий в титре 10-2.
От больных субклиническим маститом коров с хроническим течением воспаления выделены четыре видов микроорганизмов: Staph. aureus - 80,0 %, Str. agalactia
- 60,0 %, Ent. faecium - 20,0 %, Ent. faecalis
- 20,0 %. Кроме того, из одной пробы выделены дрожжеподобные грибы. Бактериальная обсемененность секрета молочной железы составила от 1,71 х103 до 6,35х105 КОЕ/мл. Энтеро- и бифидобактерии были выявлены в 40 % исследованных проб, лак-тобактерии - 20,0 % с титром от 10-2 до10-4.
Из секрета молочной железы больных клинически выраженным катаральным маститом животных выделено три вида микроорганизмов: Staph. aureus - 60,0 %, Str. agalactia - 80,0 % и Ent. faecalis - 20,0 %. Кроме того, из одной пробы выделены дрожжеподобные грибы. Бактериальная обсемененность секрета молочной железы составляла от 2,8х103 до 6,24х105 КОЕ/ мл. Энтеробактерии выделены в 40,0 % проб, бифидобактерии - в 20,0 %, с титром 10-1 - 10-2, лактобактерии у данных животных не выделены.
Из секрета молочной железы животных, у которых наступило самовыздоровление, выделены три вида микроорганизмов Str. agalactiae в 20,0 % проб, Ent. faecalis - 60,0 %, Ent. aerogenes - в 20,0 % проб. Бактериальная обсемененность молока при этом она снизилась до 0,36х102 ^7,85х103 КОЕ/мл. Кроме того, в 60,0 % исследованных проб выявлен титр энтеробактерий, в 20,0 % - лакто- и бифидобактерий с титром 10-1 - 10-2.
Следовательно, при остром субклиническом мастите общая бактериальная об-семененность секрета пораженной чет-
верти молочной железы коров составляла в среднем 4,15 х 103 КОЕ/мл, при переходе в клинически выраженное воспаление - 1,74х105 КОЕ/мл, при спонтанном выздоровлении - 2,88х102 КОЕ/мл, у животных с хроническим течением воспаления уровень бактериальной обсемененности секрета вымени - 1,28 х104 КОЕ/мл.
Выводы и заключение
По результатам проведенных иссле-
дований установлено, что при возрастании бактериальной обсемененности молока лактирующих коров в десять и более раз при двукратном определении с интервалом в 7-10 дней, прогнозируется переход скрытого воспаления в клинически выраженное. При снижении в 10 и более раз -спонтанное выздоровление. При сохранении первоначального уровня обсемененно-сти - хроническое течение воспалительного процесса.
Библиографический список:
1. Париков В. А. Этиологические и патогенетические
аспекты мастита у коров, методы и средства его профилактики и терапии / В. А. Париков, В. И. Слободяник, Н. Т. Климов и др. // Эколого-адап-тационная стратегия здоровья и продуктивности животных в современных условиях: монография.
- Воронеж. - 2001. - С. 105-113.
2. Демидова Л. Д. Влияние лечения коров, больных
эндометритом, на санитарное качество молока / Л. Д. Демидова // Диагностика, терапия и профилактика акушерско-гинекологической патологии у животных: Сборник научных трудов. МВА.
- М. - 1994. - С. 117-120.
3. Ивашура А. И. Система мероприятий по борьбе с
маститами коров / А. И. Ивашура // - М.: Росагро-промиздат, 1991. - 240 с.
4. Krukowski H. Intramammary infections caused by
environmental pathogens in cows / H. Krukowski // Med. Weter. - 2005. - Vol. 62. - № 2. - Р. 189-192.
5. Олейник А. Мастит, мастит, мастит / А. Олейник
// Молочное и мясное скотоводство. - 2006. - № 7. - С. 26-29.
6. Шакиров О. Ф. Новая противомаститная програм-
ма от компании «Байер» / О. Ф. Шакиров // Молочное и мясное скотоводство. - 2007. - № 2. - С. 39-42.
7. Париков В. А. Разработка и совершенствование
методов диагностики, терапии и профилактики мастита у коров: дис. в форме научного доклада ... д-ра вет. наук / В. А. Париков. - Воронеж, 1990. - 52 с.
8. Новиков В. М. Профилактика мастита у коров /
В. М. Новиков // Ветеринария. - 1983. - № 5. - С. 51-52.
9. Филпот В. Н. Как победить мастит / В. Н. Филпот,
Ш. С. Никерсон // GEAFarm Technologies. 2012. -239 с.
10. Данкверт А. Пути улучшения качества молока / А. Данкверт, Л. Зернаева // Молочное и мясное скотоводство. - 2003. - № 8. - С. 2-7.
11. Шабунин С. В. Актуальные проблемы терапии и профилактики мастита у коров / С. В. Шабунин, Н. Т. Климов, А. Г, Нежданов, Л. И. Ефанова // Ветеринария. - 2011. - № 12. - С. 3-6.
References:
1. Parikov V A. Etiologicheskie i patogeneticheskie aspektyi mastita u korov, metodyi i sredstva ego profilaktiki i terapii [Etiological and pathogenetic aspects of mastitis in cows, methods and means of its prevention and therapy] / V A. Parikov, V I. Slobodyanik, N. T. Klimov i dr. // Ekologo-adaptatsionnaya strategiya zdorovya i produktivnosti zhivotnyih v sovremennyih usloviyah: monografiya. - Voronezh. - 2001. - S. 105-113.
2. Demidova L. D. Vliyanie lecheniya korov, bolnyih endometritom, na sanitarnoe kachestvo moloka [Influence of treatment of cows with endometritis on the sanitary quality of milk] / L. D. Demidova // Diagnostika, terapiya i profilaktika akushersko-ginekologicheskoy patologii u zhivotnyih: Sbornik nauchnyih trudov. MVA. - M. - 1994. - S. 117-120.
3. Ivashura A. I. Sistema meropriyatiy po borbe s mastitami korov [System of measures to combat mastitis of cows] / A. I. Ivashura // - M.: Rosagropromizdat, 1991. - 240 s.
4. Vide supra.
5. Oleynik A. Mastit, mastit, mastit [Mastitis, mastitis,
mastitis] / A. Oleynik // Molochnoe i myasnoe skotovodstvo. - 2006. - # 7. - S. 26-29.
6. Shakirov O. IF Novaya protivomastitnaya programma
ot kompanii «Bayer» [New anti-mastitis program from the company «Bayer»] / O. F Shakirov // Molochnoe i myasnoe skotovodstvo. - 2007. - # 2. - S. 39-42.
7. Parikov V. A. Razrabotka i sovershenstvovanie metodov diagnostiki, terapii i profilaktiki mastita u korov [Development and improvement of methods for diagnosis, therapy and prevention of mastitis in cows]: dis. v forme nauchnogo doklada ... d-ra vet. nauk / V. A. Parikov. - Voronezh, 1990. - 52 s.
8. Novikov V M. Profilaktika mastita u korov [Prevention
of mastitis in cows] / V. M. Novikov // Veterinariya. -1983. - # 5. - S. 51-52.
9. Filpot V N. Kak pobedit mastit [How to defeat mastitis] / V N. Filpot, Sh. S. Nikerson // GEAFarm Technologies. 2012. - 239 s.
10. Dankvert A. Puti uluchsheniya kachestva moloka [Ways to improve the quality of milk] / A. Dankvert, L. Zernaeva // Molochnoe i myasnoe skotovodstvo. -2003. - # 8. - S. 2-7.
11. Shabunin S. V. Aktualnyie problemyi terapii i profilaktiki mastita u korov [Actual problems of therapy and prevention of mastitis in cows] / S. V. Shabunin, N. T. Klimov, A. G, Nezhdanov, L. I. Efanova // Veterinariya. - 2011. - # 12. - S. 3-6.
Klimov N. T., Parshin P. A., Zimnikov V. I., Erin D. A., Manzhurina O. A., Chernyshova I. S.
THE FORECASTING OF THE OUTCOME OF SUBCLINICAL MASTITIS IN DAIRING COWS
Key Words: cows, subclinical mastitis, spontaneous recovery, outcome of subclinical mastitis.
Abstract: Data on the prognosition of the outcome of subclinical mastitis in dairyng cows are given. Mainly pathogenic microorganisms (Staph. Aureus, Str. Agalactiae) were isolated from the secret of the mammary gland of cows with subclinical mastitis. Conditionally pathogenic microflora (Ent. Faecium) was isolated only in association with pathogenic ones. The total bacterial contamination of the secret of the affected quarter of the udder ranged from 3.36x102 to 6.50x 104 CFU/ml (average 4.15x103 CFU/ ml). When the latent inflammation passed to the clinically catarrhal inflamantion of the mammary gland, the same pathogenic microorganisms (Staph aureus, Str. Agalactiae) were isolated, but the bacterial contamination increased 41.9 times to 1.74x105 CFU/ml.In animals with spontaneous recovery, saprophytic microflora (Ent. Faecalis, Ent. Aerogenes) was isolated in 80 % of cases and pathogenic agalac-tic streptococcus in 20 %. At the same time, bacterial contamination decreased on average to 2.88x102 CFU / ml, or 14.4 times. In the chronic form of the inflammatory process in the mammary gland the level of bacterial contamination of the milk did not change significantly and averaged 1.28 x104.
Сведения об авторах:
Климов Николай Тимофеевич, доктор вет. наук, главный научный сотрудник лаборатории болезней органов воспроизводства и молочной железы ГНУ «Всероссийский научно-исследовательский ветеринарный институт патологии, фармакологии и терапии» Российской академии сельскохозяйственных наук; д. 114-б, ул. Ломоносова, г. Воронеж, Россия, 394087; e-mail: vetklimov@gmail.com
Паршин Павел Андреевич, доктор вет. наук, заведующий отделом фармакологии ГНУ «Всероссийский научно-исследовательский ветеринарный институт патологии, фармакологии и терапии» Российской академии сельскохозяйственных наук; д. 114-б, ул. Ломоносова, г. Воронеж, Россия, 394087; e-mail: doctor.57@mail.ru
Зимников Виталий Иванович, канд. вет. наук, старший научный сотрудник лаборатории болезней органов воспроизводства и молочной железы ГНУ «Всероссийский научно-исследовательский ветеринарный институт патологии, фармакологии и терапии» Российской академии сельскохозяйственных наук; д. 114-б, ул. Ломоносова, г. Воронеж, Россия, 394087; e-mail: vnivipat@mail.ru
Ерин Денис Александрович, канд. вет. наук, старший научный сотрудник лаборатории болезней органов воспроизводства и молочной железы ГНУ «Всероссийский научно-исследовательский ветеринарный институт патологии, фармакологии и терапии» Российской академии сельскохозяйственных наук; д. 114-б, ул. Ломоносова, г. Воронеж, Россия, 394087; e-mail: vnivipat@mail.ru
Манжурина Ольга Алексеевна, канд. вет. наук, заведующая лабораторией диагностики инфекционных и инвазионных болезней ГНУ «Всероссийский научно-исследовательский ветеринарный институт патологии, фармакологии и терапии» Российской академии сельскохозяйственных наук; д. 114-б, ул. Ломоносова, г. Воронеж, Россия, 394087; e-mail: vnivipat@mail.ru
Чернышова Ирина Сергеевна, младший научный сотрудник лаборатории диагностики инфекционных и инвазионных болезней ГНУ «Всероссийский научно-исследовательский ветеринарный институт патологии, фармакологии и терапии» Российской академии сельскохозяйственных наук; д. 114-б, ул. Ломоносова, г. Воронеж, Россия, 394087; e-mail: vnivipat@mail.ru
Author affiliation:
Klimov Nikolai Timofeevich, D. Sc. in Veterinary Medicine, Chief Researcher of the Laboratory of Diseases of the Reproductive Organs and Breast of State Scientific Institution 'All-Russian Veterinary Research Institute of Pathology, Pharmacology and Therapy" of the Russian Academy of Agricultural Sciences; house 114-b, Lomonosov str., Voronezh city, Russia, 394087; e-mail: vetklimov@gmail.com
Parshin Pavel Andreevich, D. Sc. in Veterinary Medicine, Head of the Department of Pharmacology of State Scientific Institution 'All-Russian Veterinary Research Institute of Pathology, Pharmacology and Therapy" of the Russian Academy of Agricultural Sciences; house 114-b, Lomonosov str., Voronezh city, Russia, 394087; e-mail: doctor.57@mail.ru
Zimnikov Vitaliy Ivanovich, Ph. D. in Veterinary Medicine, Senior Researcher of the Laboratory of Diseases of the Reproductive Organs and Breast of State Scientific Institution 'All-Russian Veterinary Research Institute of Pathology, Pharmacology and Therapy" of the
Russian Academy of Agricultural Sciences; house 114-b, Lomonosov str., Voronezh city, Russia, 394087; e-mail: vnivipat@mail.ru
Erin Denis Aleksandrovich, Ph. D. in Veterinary Medicine, Senior Researcher of the Laboratory of Diseases of the Reproductive Organs and Breast of State Scientific Institution 'All-Russian Veterinary Research Institute of Pathology, Pharmacology and Therapy" of the Russian Academy of Agricultural Sciences; house 114-b, Lomonosov str., Voronezh city, Russia, 394087; e-mail: vnivipat@mail.ru
Manzhurina Olga Alekseevna, Ph. D. in Veterinary Medicine, Head of the Laboratory of Diagnostics of Infectious and Invasive Diseases of State Scientific Institution 'All-Russian Veterinary Research Institute of Pathology, Pharmacology and Therapy" of the Russian Academy of Agricultural Sciences; house 114-b, Lomonosov str., Voronezh city, Russia, 394087; e-mail: vnivipat@mail.ru
Chernyshova Irina Sergeevna, Junior Researcher of the Laboratory of Diagnostics of Infectious and Invasive Diseases of State Scientific Institution 'All-Russian Veterinary Research Institute of Pathology, Pharmacology and Therapy" of the Russian Academy of Agricultural Sciences; house 114-b, Lomonosov str., Voronezh city, Russia, 394087; e-mail: vnivipat@mail.ru
УДК: 636.07
Бондаренко Н. Н., Меренкова Н. В., Пахомов А. В., Огурева Г. И.
ОПРЕДЕЛЕНИЕ ВИДОВОЙ ПРИНАДЛЕЖНОСТИ МЯСА С ПОМОЩЬЮ МЕТОДА ДНК-ДИАГНОСТИКИ
Ключевые слова: определение видовой принадлежности, ВЕТФАКТОР «СВИНИНА-КУРИЦА-ФАКТОР», тестовые системы идентификации, ДНК-диагностика.
Резюме: Целью исследования являлось изучение влияния биологических и физико-химических факторов, возникающих при хранении и термической обработке мяса, на эффективность определенных методов и тестовых систем идентификации. Авторами изучено влияние биологических и физико-химических факторов на точность определение видовой принадлежности, основанной на тест-системе ВЕТФАКТОР «СВИНИНА-КУРИЦА-ФАКТОР». Биологические и химико-физические факторы в значительной степени влияют на точность определения видовой принадлежности мяса, как ориентировочных методов исследования: органолептические показатели жира и мяса, точка плавления и застывания жира исследуемого мяса, йодное число, плотность, коэффициент преломления, наличие (качественная реакция) и концентрация гликогена в мышечной ткани, так и довольно точных методов: реакция преципитации (при наличии гипериммунных сывороток) и особенности анатомического строения костей скелета (при их наличии). В связи с этим было проведено исследование влияния биологических и физико-химических факторов, возникающих при хранении и термической обработке мяса, на точность определения видовой принадлежности мяса с помощью метода ДНК-диагностики. Выявлено, что влияние биологических и физико-химических факторов, возникающих при хранении и термической обработке мяса, не сказывается на эффективности определения видовой принадлежности с помощью тест-системы ВЕТФАКТОР «СВИНИНА-КУРИЦА-ФАКТОР».
Введение
Повышение защиты рынка от опасных и контрафактных продуктов является одной из основных целей проводимой реформы технического регулирования. В связи с этим разработка эффективных методов и систем тестирования для идентификации мяса способствует исключению тор-
говли некачественными и фальсифицированными продуктами, которая создает серьезную угрозу для общественного здравоохранения [1, 2]. Идентификация использует различные методы, основанные на ор-ганолептических показателях, биохимические, гистологические исследования [3] и довольно специфические тестовые си-
