CC BY
55
ГОСУДАРСТВЕННЫЕ ВЕТЕРИНАРНЫЕ УСЛУГИ В ЭЛЕКТРОННОМ ВИДЕ
Сабирьянов А.Ф.
Резюме
Деятельность Комитета ветеринарии Республики Марий Эл в целях реализации мероприятий по переходу на оказание государственных услуг в электронном виде свидетельствует об эффективном и качественном исполнении требований Федерального закона.
THE STATE VETERINARY SERVICES IN THE ELECTRONIC FORM
Сабирьянов A.F.
Summary
The Activities of The Committee of veterinary medicine of the republic of Mari El in order to implement the activities on transition to the provision of public services in electronic form testifies to the efficient and qualitative performance of the requirements of the federal law.
УДК:615.276.03.06:613.26:612.396.113+557.115.3
ПРИМЕНЕНИЕ РАСТИТЕЛЬНЫХ ФЕРМЕНТИРОВАННЫХ ПИЩЕВЫХ ВОЛОКОН И КОРОТКОЦЕПОЧЕЧНЫХ ЖИРНЫХ КИСЛОТ С ЦЕЛЬЮ УСТРАНЕНИЯ ПОБОЧНЫХ ЭФФЕКТОВ НЕСТЕРОИДНЫХ ПРОТИВОВОСПАЛИТЕЛЬНЫХ ПРЕПАРАТОВ
Самоделкин Е.И., Кульневская М.Н, Черанева М.В., Неклюдова В.В., Кузнецов В.Ф.*, Косарева П.В.*, Никитин С.В.*
ФГОУ ВПО «Пермская государственная сельскохозяйственная академия
им. акад. Д.Н. Прянишникова»
ФГОУ ВПО «Пермская государственная медицинская академия им. академика Е.А. Вагнера»*
Ключевые слова: Экспериментальная НПВП-(нестероидные
противовоспалительные препараты) гастропатия, гистология, экспрессия регуляторного протеина Ki-67.
Key words: Experimental non-steroid anti-inflammatory preparation -gastropathy, histology, regulatory protein Ki - 67 expression.
В настоящее время в РФ для применения животным доступно несколько препаратов из группы НПВП. Побочные действия и осложнения от применения нестероидных противовоспалительных препаратов (НПВП)
общеизвестны: снижение свертываемости крови, нарушение
фильтрационной функции почек, гастриты, язвы желудка и кишечника, желудочные и кишечные кровотечения. Нередки случаи гибели животных из-за некорректного применения данных препаратов (особенно диклофенака, индометацина и кеторолака) [1, 4]. Поэтому разработка способов предотвращения побочных эффектов при приеме НПВП в ветеринарной практике, основанная на подробном изучении патогенеза НПВП-гастропатии, весьма актуальна и обоснована.
Цель исследования. На оригинальной модели химического гастрита подобрать оптимальный режим применения и оценить эффективность использования ферментированных пищевых волокон и короткоцепочечных жирных кислот в составе БАД «Рекицен-РД с фруктоолигосахаридами» для профилактики развития НПВП-гастропатии.
Методика исследования. Неинбредные белые крысы были взяты в эксперимент в количестве 120 животных. НПВП-гастропатию моделировали по оригинальной методике («Способ моделирования гастропатии», положительное решение от 04.02.2011г. о выдаче патента на изобретение по заявке № 2009145268/14 от 12.11.2009). В соответствии с задачей исследования сформированы следующие экспериментальные группы:
1 - контрольная группа - интактные животные, n=15;
2 - животные, получавшие в течение 21 дня per os смесь 5% раствора
аскорбиновой кислоты с нестероидным противовоспалительным
препаратом Найз® и последующую экспериментальную терапию БАД «Рекицен-РД® с фруктоолигосахаридами» в течение 28 дней, n=15;
3 - животные, получавшие в течение 21 дня per os смесь 5% раствора
аскорбиновой кислоты с нестероидным противовоспалительным
препаратом Найз® и последующую экспериментальную терапию
препаратом Омез® в сочетании с БАД «Рекицен-РД® с фруктоолигосахаридами» в течение 28 дней, n=15;
4 - животные, получавшие в течение 21 дня per os смесь 5% раствора
аскорбиновой кислоты с нестероидным противовоспалительным
препаратом Кетофен и последующую экспериментальную терапию
препаратом Омез® в течение 28 дней, n=15;
5 - животные, получавшие в течение 21 дня per os смесь 5% раствора
аскорбиновой кислоты с нестероидным противовоспалительным
препаратом Кетофен и последующую экспериментальную терапию
препаратом Фамотидин в течение 28 дней, n=15;
6 - животные, получавшие в течение 21 дня per os смесь 5% раствора
аскорбиновой кислоты с препаратом Кетофен и последующую
экспериментальную терапию БАД «Рекицен-РД® с
фруктоолигосахаридами» в течение 28 дней, n=15;
7 - животные, получавшие в течение 21 дня per os смесь 5% раствора
аскорбиновой кислоты с препаратом Кетофен и последующую экспериментальную терапию препаратом Омез® в сочетании с БАД «Рекицен-РД® с фруктоолигосахаридами» в течение 28 дней, n=15;
8 - животные, получавшие в течение 21 дня per os смесь 5% раствора аскорбиновой кислоты с препаратом Кетофен и последующую экспериментальную терапию препаратом Омез® в сочетании с БАД «Рекицен-РД® с фруктоолигосахаридами» в течение 7 дней, а затем -только БАД в течение 21 дня, n=15.
Экспериментальные исследования выполнены в соответствии с «Правилами проведения работ с использованием экспериментальных животных» (Приложение к приказу Министерства здравоохранения СССР от 12.08.1977 г. N 755) и «Европейской конвенцией о защите позвоночных животных, используемых для экспериментов или в иных научных целях» от 18 марта 1986 г. в Центральной научно-исследовательской лаборатории ГОУ ВПО «Пермская государственная медицинская академия имени академика Е.А. Вагнера Росздрава».
Забор гистологического материала осуществляли на 22-й день эксперимента. Желудок забирали целиком, выдерживали в изотоническом растворе NaCl в течение 30 минут, затем фиксировали в 10% забуференном по Лилли формалине (рН-7,2) в расправленном состоянии и наколотым на пробку. Для проведения гистологического исследования забирали образцы в пищеводном, кардиальном, фундальном и пилорическом отделах. Гистологические препараты готовили по стандартным методикам с заливкой в гистамикс, окрашивали гематоксилином, эозином и пикрофуксином по ван Гизону.
Для выявления пролиферативной активности в слизистой оболочке желудка (СОЖ) использовали моноклональные антитела к регуляторному протеину Ki-67 (Rabbit Monoclonal Antibody to Human Ki-67), для идентификации муцина - моноклональные антитела к муцину 5АС (Monoclonal Mouse Antibody to Mucin 5AC / Gastric Mucin, Clone 45M1, Isotype IgG1, kappa), для идентификации клеток, находящихся в состоянии апоптоза - по уровню экспрессии проапоптотического белка Fas ligand (Polyclonal Rabbit Antibody to Fas Ligand), а также полный диагностический набор компании Diagnostic BioSystems (USA), предназначенный для проведения экспериментальных исследований.
Оценка интенсивности пероксидазной метки и определение индекса пролиферации на основе экспрессии регуляторного протеина Ki-67 проводились полуколичественным методом - учитывалось число позитивных на 100 учтенных ядер (при учете 500-1000 клеток) [3]. Гибель клеток в форме апоптоза в покровно-ямочном эпителии СОЖ определяли по индексу апоптоза (!АПТ) по формуле: !АПТ (%) = N (число апоптозных клеток, позитивных к Fas Ligand)/N1 (общее число клеток)*100 [2].
Результаты исследований подвергнуты статистической обработке с
применением программного пакета ВюБ1а1;.
Результаты исследований. Ни в одной из групп во время эксперимента не зафиксировано гибели животных. При проведении гистологических исследований СОЖ животных с НПВП-гастропатией, получавших комплекс пищевых волокон и короткоцепочечных жирных кислот БАД «Рекицен-РД® с фруктоолигосахаридами», дистрофические изменения эпителиоцитов отмечались лишь в 20% случаев (п=3) у животных, получавших Кетофен, и у 13,33% животных(п=2), получавших Найз, но сохранялись сосудистые расстройства и утолщение собственной и мышечной пластинок СОЖ. Количество париетальных клеток в фундальных железах желудка оставалось увеличенным, но изменения по сравнению с контрольной группой были недостоверны. В фундальных железах желудка выявлялось увеличенное по сравнению с контролем количество ЕС-клеток (табл.). При использовании диеты, обогащенной пищевыми волокнами и короткоцепочечными жирными кислотами, мы наблюдали восстановление у животных с НПВП-гастропатией нормального зонального распределения муцинов. При применении у животных с НПВП-гастропатией Рекицена-РД количество О-клеток, так же как и энтерохромаффинных ЕС-клеток, оставалось увеличенным, хотя некоторая тенденция к уменьшению их количества все же наблюдалось. 1АПТ в эпителии СОЖ у животных данной экспериментальной группы составил 5,88 ± 0,67, ИП = 14,28 ± 2,35.
При совместном использовании Омеза и Рекицена-РД у животных с НПВП-гастропатией применяли 2 схемы: схема №1: сочетанное
применение Омез® и БАД «Рекицен-РД® с фруктоолигосахаридами» в течение 21 дня; схема №2: одновременно в течение 7 дней Омез и Рекицен-РД, после чего продолжали давать животным только Рекицен-РД в течение еще 14 дней. Гистологическое исследование СОЖ животных, получавших комбинированную терапию, выявило эпителий типичного строения, без патологических изменений. Сосудистых расстройств и дистрофических изменений не обнаружено. Количество париетальных клеток в фундальных железах желудка в группе, получавшей схему №2, не было увеличенным по сравнению с контролем, а в группе, получавшей схему №1, их количество, так же, как и в группе, получавшей только Омез, было уменьшено по сравнению с интактными животными. У животных, получавших схему №1, выявлялось статистически значимое увеличение по сравнению с контролем количества ЕС-клеток, у животных, получавших схему №2 - не отличалось от контроля. При использовании диеты, обогащенной пищевыми волокнами и короткоцепочечными жирными кислотами в сочетании с Омепразолом, мы наблюдали восстановление у животных с НПВП-гастропатией нормального зонального распределения муцинов. У животных, получавших схему №1, количество О-клеток, так же как и энтерохромаффинных ЕС-клеток, оставалось увеличенным по
сравнению с интактными животными (р<0,05); 1АПТ - 8,15 ± 0,33, ИП -21,32 ± 1,47; у получавших схему №2 количество О-клеток не отличалось от количества таковых в группе контроля. 1АПТ - 4,82 ± 0,53, ИП - 12,33 ± 1,42.
Количество аргентаффинных ЕС-клеток и количество О-клеток, вырабатывающих гастрин, в эпителии СОЖ экспериментальных животных
(на тестовой площади 0,042 мм )
Экспериментальная группа Количество аргентаффинных ЕС-клеток, М±т Количество С-клеток, М±т
Интактные животные 0,64±0,075 8,945±1,003
Моделирование НПВП-гастропатии, Найз, большая доза 3,31±0,126* 10,6±0,733*
Моделирование НПВП-гастропатии, Найз, малая доза 0,72±0,213 7,917±0,980
Моделирование НПВП-гастропатии, Кетофен, большая доза 5,68±0,542* 11,10±0,767*
Моделирование НПВП-гастропатии, Кетофен, малая доза 1, 19±0,158* 6,4±0,991
Моделирование НПВП-гастропатии, Найз, экспериментальная терапия Омепразолом 2,95±0,043* 10,50±0,859*
Моделирование НПВП-гастропатии, Кетофен, экспериментальная терапия Омепразолом 4,48±0,225* 11,3±1,592*
Моделирование НПВП-гастропатии, Найз, экспериментальная терапия Фамотидином 2,95±0,012 9,10±1,312
Моделирование НПВП-гастропатии, Кетофен, экспериментальная терапия Фамотидином 2,56±0,043 10,4±1,213*
Моделирование НПВП-гастропатии, Найз, экспериментальная терапия БАД «Рекицен-РД® с фруктоолигосахаридами» 2,675±0,846* 9,24±1,399
Моделирование НПВП-гастропатии, Кетофен, экспериментальная терапия БАД «Рекицен-РД® с фруктоолигосахаридами» 1,98±0,877 10,2±1,009*
* р<0,05 по сравнению с интактными животными
Выводы. 1. Комплекс ферментированных пищевых волокон и короткоцепочечных жирных кислот «Рекицен-РД® с
фруктоолигосахаридами» оказывает нормализующее влияние на процессы слизеобразования и защищает эпителиоциты СОЖ как от повреждающего действия самих НПВП, так и от повышенной активности кислотнопептического фактора, вызванной приемом НПВП, но не способствует уменьшению повышенной секреции соляной кислоты и повышенной секреции пищеварительных ферментов. 2. Схема с коротким курсом антисекреторных средств и последующий продолжительный прием БАД
«Рекицен-РД® с фруктоолигосахаридами» является оптимальной в плане профилактики гастродуоденальных осложнений при проведении противовоспалительной терапии.
ЛИТЕРАТУРА: 1. Дроздов В.Н. Гастропатии, вызванные
нестероидными противовоспалительными препаратами: патогенез,
профилактика и лечение / В.Н. Дроздов // Consilium medicum. - 2005. - Т. 7. - № 1. 2. Осадчук М.А. Хронический гастрит с функциональной диспепсией: патогенетические особенности клинических проявлений / М.А. Осадчук, А.Л. Пахомова, И.М. Кветной // Рос. журн. гастроэнтерол., гепатол., колопроктол. - 2002. - № 5. - С. 35-39. 3. Петров С.В., Иммуногистохимическая диагностика опухолей человека: Руководство для врачей-морфологов / С.В. Петров, А.П. Киясов. - Казань, 1998. - 165 с. 4. Sharkey M. Wilmot Advice to Dog Owners Whose Pets Take NSAID / M. Sharkey, M. Brown, L. // FDA Veterinarian Newsletter. - 2006. - Vol. XXI, № I. - P. 1255-1258.
ПРИМЕНЕНИЕ РАСТИТЕЛЬНЫХ ФЕРМЕНТИРОВАННЫХ ПИЩЕВЫХ ВОЛОКОН
И КОРОТКОЦЕПОЧЕЧНЫХ ЖИРНЫХ КИСЛОТ С ЦЕЛЬЮ УСТРАНЕНИЯ ПОБОЧНЫХ ЭФФЕКТОВ НЕСТЕРОИДНЫХ ПРОТИВОВОСПАЛИТЕЛЬНЫХ
ПРЕПАРАТОВ
Самоделкин Е.И., Кульневская М.Н, Черанева М.В., Неклюдова В.В., Кузнецов В.Ф., Косарева П.В., Никитин С.В.
Резюме
На оригинальной модели НПВП-гастропатии у экспериментальных животных апробированы новые способы лечения Омезом® и
Фамотидином® и профилактики НПВП-гастропатии комплексом
ферментированных пищевых волокон и короткоцепочечных жирных кислот «Рекицен-РД® с фруктоолигосахаридами».
THE USE OF NATURAL ENZYME DIGESTIVE FIBERS AND SHORT-CHAIN ACIDSTO DECREASE NON-STEROID ANTI-INFLAMMATORY PREPARATION SIDE
EFFECTS
Samodelkin E.I., Kulnevskaya M.N., Cheraneva M.V., Nekludova V.V., Kuznetsov V.F., Kosareva P.V., Nikitin S.V.
Summary
New methods of therapy with preparations - Omez® and Famotidin® and prevention of non-steroid anti-inflammatory preparation - gastropathy with the complex of enzyme digestive fibers and short-chain acids «Rekitsen-RD® with fructo-oligosaccharides» were tested on the original model of non-steroid antiinflammatory preparation - gastropathy in experimental animals.
