CC BY
49
СБОРНИК ТЕЗИСОВ
239-240
время до максимума ответа . Оба фрагмента в дозах 100 нг/мл или выше увеличивали амплитуду ответа и продукцию АФК, вызванную 1 мкМ fMLF в изолированных нейтрофилах . Под действием пептида M105—117 (500 нг/мл) уменьшалось время до максимума ответа на fMLF
Заключение. Исследованные рекомбинантные фрагменты белков коронавируса SARS—Cov—2 оказывают потенцирующее действие на кинетику генерации АФК фагоцитами в цельной крови человека . Вероятно, это связано с прямым взаимодействием пептидов с клетками, а не с компонентами плазмы, так как их действие на изолированные клетки в общих чертах повторилось . Усиленная генерация АФК нейтро-филами в ответ на рецептор—опосредованные стимулы может вносить вклад в окислительный стресс при заболевании COVID-19 .
239 ОПЫТ ПРИМЕНЕНИЯ АУТОПРОБИОТИКОВ У БОЛЬНЫХ С МЕТАБОЛИЧЕСКИМИ НАРУШЕНИЯМИ
КОТРОВА А.Д., ШИШКИН А.Н., КОТЫЛЕВА М.П., ПЧЕЛИН И.Ю., ХУДЯКОВА Н.В., ГЛАДЫШЕВ Н.С., ЕРМОЛЕНКО Е.И.
СПбГУ, ФГБНУ "ИЭМ", Санкт-Петербург, Россия
Цель. Оценка влияния приема аутопробиотиков (анаэробного консорциума бактерий) на состав кишечной микро-биоты у пациентов с метаболическим синдромом (МС) .
Материал и методы. Для работы были отобраны 38 человек с МС согласно критериям российского кардиологического общества 2017 года Пациенты помимо основной терапии принимали персонифицированный пищевой продукт (ауто-пробиотик), приготовленный путем анаэробного культивирования фекалий пациентов . Полученный аутопробиотик пациенты принимали 10 дней, 2 раза в день по 50 мл, независимо от приема пищи . Кал пациенты сдавали до начала приема ау-топробиотика и после . Лабораторное исследование фекалий для оценки микробиоты толстой кишки до и после приема ау-топробиотика проводилось в ФГБНУ "Институт экспериментальной медицины" методом ПЦР-РВ, а также с помощью секвенирования гена 16S рРНК.
Результаты. При сравнительной оценке состава кишечной микробиоты толстой кишки пациентов до и после вмешательства по данным ПЦР-РВ отмечено статистически значимое уменьшение представительства бактерий рода Enterobacter spp., Acinetobacter spp., атипичной Escherichia coli при увеличении представительства Bacteroides thetaiotaomicron. При сравнительной оценке состава кишечной микробиоты толстой кишки пациентов до и после приема аутопробиотика по данным секве-нирования гена 16S рРНК отмечалось относительно меньшее представительство Bacteroidetes и Verrucomicrobia при увеличении представительства Firmicutes после приема аутопробиоти-ка, а также уменьшение представительства Proteobacteria .
Заключение. 1. Уменьшение представительства бактерий, относящихся к филуму Proteobacteria, а также большая представленность Bacteroides thetaiotamicron после курса ауто-пробиотика отражает положительное влияние анаэробного консорциума на состав микробиоты кишечника у пациентов с МС . 2 .Дальнейшее изучение влияния аутопробиотика на микробиоту кишечника, показатели липидного и углеводного обмена на большей когорте больных с более длительным курсом приема аутопробиотика является перспективным направлением для формирования комплексной терапии МС с применением аутопробиотиков Исследование выполнено при финансовой поддержке РФФИ в рамках научного проекта № 20-315-90106 .
240 ПРИМЕНЕНИЕ ПРЕПАРАТА ДИКИРОГЕН ДЛЯ ЛЕЧЕНИЯ ЖЕНЩИН С НАЛИЧИЕМ АКНЕ
ОРЛОВ Е.Н., ЛАВАЧИНСКАЯА.В.
ИНХС РАН, КДЦ "Премиум клиник-2", Москва, Россия
Цель. Целью исследования является практическое изучения эффективности применения препарата дикироген для лечения акне и снижения андрогенизации организма . Количество пациентов с наличием акне, как следствие проявления гиперандрогении продолжает увеличиваться и создает серьёзную проблему: снижает качество жизни . Патогенетическим фактором возникновения акне является гиперсекреция сальных желез, находящихся под воздействием андрогенов . Эффективными гормональными препаратами для лечения акне являются комбинированные оральные контрацептивы с антиандрогенными свойствами . Однако низкая комплаентность мешает широкому использованию . Применение препаратов из других групп — ретиноидов, эффективно, но весьма токсично и больше подходит для лечения тяжелых форм акне — узелково—кистозных, с риском образования рубцов . Назначение антибиотиков дает кратковременный эффект, чаще не более одного месяца Одним из современных и перспективных методов негормонального лечения акне является применение препарата дикироген, основным действующим веществом которого является вита-миноподобные вещества (витамины групп В8), миоинизитол и Б-хироинизитол . Применение инозитолов показало высокую эффективность более 70% при лечении СПКЯ . Поэтому применение препарата дикироген для лечения акне является актуальным
Материал и методы. Для исследования было отобрано 26 женщин в возрасте 20 — 40 лет с наличием акне и достоверными лабораторными признаками яичниковой формы гиперандрогении . Форму гиперандрогении устанавливали по уровню экскреции стероидных гормонов в суточной моче Определение проводили методом газовой хроматографии Диагноз — яичниковая форма гиперандрогении ставился для этих пациенток в том случае, если были превышены нормы экскреции главных метаболитов андрогенов — андростерона и этиохоланолона В случае повышения уровней экскреции надпочечниковых стероидов таких как дегидроэпиандросте-рона и 11—производных стероидов делался вывод о смешанной или надпочечниковой гиперандрогении . Такие пациенты для дальнейшего исследования не брались При осмотре пациенток производился подсчет воспалительных элементов угревой сыпи на лице — папулы, пустулы и узлы Для определения степени тяжести течения акне использовали дерматологический индекс акне (ДИА) . Лёгкая степень <5 элементов, 6—10 средняя степень тяжести, 10—15 элементов — тяжелая степень тяжести акне . Так 12 пациенток имели лёгкую степень, 8 — среднюю и 6 тяжелую . Всем пациенткам назначали препарат дикироген по 1 саше 2 раза в день на протяжении 3 месяцев После повторного обследования, в случае необходимости, лечение продолжали еще 3 месяца
Результаты. Спустя 3 месяца после проведенного лечения было отмечено снижение ДИА у всех пациенток с легкой, средней и тяжелой степенью тяжести Причем у двух пациенток с легкой степенью акне исчезли полностью и дальнейшее лечение не понадобилось ДИА до лечения составлял соответственно 4,6+/-0,8; 7,1+/-1,9; 12,4+/-2,7 (р<0,5) . После трех месячной терапии, ДИА составил: 4,1+/-0,7; 6,6+/-1,7; 11,2+/—2,3 (р<0,5) соответственно . Исследование уровня экскреции андростерона в суточной моче показало снижение у пациенток с легкой степенью с 15,7+/-2,2 мкМоль/24часа до 14,9+/-1,2 мкМоль/24 часа (р<0,05), со средней степенью с 16,3+/-2,7 мкМоль/24часа до 15,7+/-1,7 мкМоль/24 часа (р<0,05) и тяжелой с 17,3+/-3,1 мкМоль/24часа до 15,5+/-2,4 мкМоль/24 часа (р<0,05) . После дальнейшей терапии в общей сложности до 6 месяцев уровень андростерона продолжал снижаться, однако, достигнув верхних границ нормы, снижение остановилось Так экскреция андростерона у пациенток во всех трех группах составляла 14,8+/—0,6 мкМоль/ме-сяца, ДИА спустя 6 месяцев после начала лечения составил 3,9+/-0,8; 5,7+/-1,6 и 8,6+/-2,4 (р<0,5) соответственно .
Заключение. Таким образом, экспериментально продемонстрировано, что препарат дикироген обладает эффективностью при лечении акне и показан пациентам, которым применение контрацептивов с антиандрогенной активно-
241-243
СБОРНИК ТЕЗИСОВ
стью по медицинским показателям является нежелательным . Дикироген купирует андрогенизацию организма, что наглядно демонстрирует снижение уровня суточной экскреции анд-ростерона . Такая регрессия при лечении 6 месяцев не продолжается долго, а достигнув верхних границ нормы останавливается . Настоящее исследование предварительно и основано на небольшой выборке . Работа продолжается и выводы будут сделаны на основе большего количестве пациентов
241 РАЗРАБОТКА МЕТОДА МАСС-СПЕКТРОМЕТРИЧЕСКОГО ОПРЕДЕЛЕНИЯ КОНЦЕНТРАЦИИ ФЕНАЗЕПАМА И 3-ОКСИ-ФЕНАЗЕПАМА
КУЗЬМИН И. И., КОНСТАНТИНОВА А. С., МИРОШНИЧЕНКО И.И.
ООО "ЛАБИНВЕСТ", ФГБНУ НЦПЗ, Москва, Россия
Цель. Целью настоящего исследования является разработка высокочувствительной методики количественного определения феназепама (ФЕН) и его активного метаболита 3-окси-феназепама (3ОФ) в биологических образцах, основанной на тандемной хромато-масс-спектрометрии .
Материал и методы. Анализ биопроб проводили на жидкостном хроматографе (Thermo Scientific Dionex, США), совмещенном с трёхквадрупольным масс-спектрометром TSQ Quantiva (Thermo Scientific, США) . Разделение проводилось на колонке Hypersil GOLD (50 мм x 2,1 мм; 1,9 мкм) (Thermo Scientific) с обращённой фазой С18 в режиме градиентного элюирования Для извлечения компонентов из биологического материала (сыворотка/плазма крови) использовали жидкостную экстракцию с твердофазной поддержкой
Результаты. Проведен подбор условий хроматографиче-ского разделения и оптимизированы условия масс-спектро-метрического детектирования . Детектор фиксировал следующие значения MRM-переходов: 349^184 (ФЕН), 366,7^322 (3ОФ), 268^116 (метопролол — внутренний стандарт (ВС)) . Калибровочные кривые линейны в диапазоне концентраций 5-1000 нг/мл и описываются уравнениями зависимости Х от концентрации: C = -23,4+85,15*X (ФЕН), С=2,25+41,8*Х (3ОФ), где Х — отношение площадей пиков искомого аналита и ВС . Времена удерживания компонентов: 4,8±0,2 мин для 3ОФ и 6,2±0,3 мин для ФЕН . Предел обнаружения целевых веществ в этих условиях составлял 5 нг/мл
Заключение. Таким образом, разработана высокочувствительная методика определения феназепама (ФЕН) и его активного метаболита 3-окси-феназепама (3ОФ) в плазме/ сыворотке крови . Данная методика была успешно апробирована при проведении терапевтического лекарственного мониторинга ФЕН у 102 пациентов, страдающих синдромом отмены алкоголя
242 РАЗРАБОТКА ТРЕБОВАНИЙ К КАЧЕСТВУ И ПРОЦЕДУРЕ АТТЕСТАЦИИ СТАНДАРТНОГО ОБРАЗЦА ОЦЕНКИ ПОДЛИННОСТИ СТРУКТУРЫ МОЛЕКУЛЫ РЕКОМБИНАНТНОГО ИНТЕРФЕРОНА БЕТА-1В
ГОЛОЩАПОВА Е.О.
ФГБУ "НЦЭСМП" Минздрава России, Москва, Россия
Цель. Разработка требований к качеству кандидата в стандартный образец интерферона бета-1Ь (для оценки подлинности структуры) и требований к процедуре его аттестации .
Материал и методы. Рекомбинантный интерферон бета-1Ь .
Результаты. Сформулированы требования к кандидату в стандартный образец В качестве кандидата может быть рассмотрена субстанция, удовлетворяющая следующим условиям: — отсутствие вспомогательных веществ белковой или
иной природы, потенциально влияющих на профиль пептидной карты; — стабильность, что достигается путем смещения значений рН в область кислых значений и последующей ли-офилизации; — соответствие требованиям спецификации на субстанцию за исключением направленно меняемых показателей (формы выпуска, рН); — дополнительная характеристика структуры молекулы кандидата в стандартный образец методами, обеспечивающими подтверждение не менее 99% аминокислотной последовательности . Сформулированы требования к процедуре аттестации: — наличие методики пептидного картирования, обладающей достаточной специфичностью для выявления значимых структурных отличий молекулы интерферона бета-1Ь; — обоснованный выбор основных (характеристических) пиков, включая анализ аминокислотной последовательности основных пептидов с последующим покрытием исходной последовательности молекулы интерферона бета-1Ь; — аттестованная характеристика стандартного образца должна быть получена в условиях воспроизводимости и определена в виде диапазонов времен удерживания основных (характеристических) пиков .
Заключение. Разработаны требования к качеству кандидата в стандартный образец интерферона бета-1Ь (для оценки подлинности структуры) и требования к процедуре его аттестации
243 РОЛЬ АКТИВНЫХ МЕТАБОЛИТОВ ПСИХОТРОПНЫХ ПРЕПАРАТОВ В ТЕРАПИИ ПСИХИЧЕСКИХ РАССТРОЙСТВ
КУЗЬМИН И.И., МИРОШНИЧЕНКО И.И.
ФГБНУ НЦПЗ, Москва, Россия
Цель. Измерение концентрации нейролептиков и их активных метаболитов для оптимизации фармакотерапии психических заболеваний
Материал и методы. Определение содержания концентрации арипипразола (АРИ), клозапина (КЛО), рисперидона (РИС) венлафаксина (ВЛФ), феназепама (ФЕН) и их метаболитов дегидроарипипразола (ДГА), норклозапина (НОР), 9-оксирисперидона (9-ОР), О-десметилвенлафаксина (ОДВ) и метаболита 3-окси-феназепама (3-ОФ) соответственно проводили методом тандемной хроматомасс-спектоме-трии Анализ образцов проводили на приборе TSQ Quantiva (Thermo Scientific) (США) с источником ионизации электрораспыления при атмосферном давлении. Предел количественного определения для анализируемых веществ находится в диапазоне 1-5 нг/мл .
Результаты. Степень метаболизма оценивали по отношению концентрации метаболита препарата к исходному веществу (MPR): интенсивный 9-ОР/РИС = 2,1 (шизофрения, n=45); ОДВ/ВЛФ = 1,254 (депрессия, n=25); незначительный АРИ/ДГА = 0 . 29 (шизофрения, n=19); 3-ОФ/ФЕН = 0,25 (алкоголизм, n=102); НОР/КЛО = 0,23 (шизофрения, n=67) . Здесь и далее приведены значения медианы (n — количество пациентов) Полученные величины стационарной концентрации РИС без учета метаболита находились у 56% субъектов в субтерапевтическом (L), 38% в терапевтическом (N, 20-60 нг/мл) и 6% в условно токсическом (T) диапазоне, тогда как значения 9-ОР+РИС распределились следующим образом: 15% (L), 67% (N) и 18% (T). Аналогично для ВЛФ величины стационарной концентрации без учета метаболита: у 43% субъектов в L, 49% в N (100-400 нг/мл) и 8% в T диапазоне; значения ОДВ+ВЛФ: 20% (L), 68% (N) и 12% (T).
Заключение. Общее фармакологическое действие препарата зависит от суммы концентраций в крови исходного вещества и его метаболита, т е общей активной части, поэтому мониторинг концентраций только исходного соединения может приводить к ошибочным интерпретациям . В особенности это характерно для препаратов с MPR более 1 .
