CC BY
77
УДК 636.52/.58.085.16:619
ПРИМЕНЕНИЕ НАТРИЯ НУКЛЕИНАТА ДЛЯ ПОВЫШЕНИЯ ЭФФЕКТИВНОСТИ СПЕЦИФИЧЕСКОЙ ПРОФИЛАКТИКИ БОЛЕЗНЕЙ КУР
А.И. Василенко
Установлено, что применение натрия нуклеината в условиях производства в системе противоэпизоотических мероприятий против Ньюкаслской болезни, инфекционного бронхита кур способствует повышению эффективности специфической профилактики. При ревакцинациях введение натрия нуклеината до или во время иммунизации обусловило тенденцию к повышению титров антител (при вакцинации против Ньюкаслской болезни, главным образом в продуктивную фазу, а при вакцинации против инфекционного бронхита кур — в индуктивную фазу), а при первичной иммунизации на фоне вирусоносительства (ССЯ -76), вызвало тенденцию к снижению интенсивности образования антител. Ключевые слова: молодняк кур-несушек, кровь, иммунитет, биологически активный препарат.
Птица высокопродуктивных кроссов и линий более зависима от условий содержания и кормления проявляет повышенную чувствительность к возбудителям инфекционных болезней [1, с.12-15]. В последние два десятилетия ситуация с инфекционными заболеваниями в хозяйствах, специализирующихся на выращивании домашней птицы, кардинально изменилась. Благодаря глобализации отрасли на принципах открытых границ в список актуальных добавился ряд малоизвестных ранее вирусных заболеваний и, как следствие, перечень необходимых вакцин существенно расширился, что привело к перенасыщенности прививочного календаря. В итоге в настоящее время до 30-40 дней жизни цыпленка приходиться делать до 10 вакцинаций [2, с.13]. При этом на организм птиц воздействуют стрессовые факторы химического, физического, биологического, технологического и кормового происхождения, угнетающие иммунную реактивность организма. В этих условиях часто наблюдается ослабление или отсутствие иммунного ответа на различные антигены. В результате резко снижается эффективность проводимых вакцинаций птиц против различных инфекционных заболеваний [3, с.564-570]. В этих условиях возникает необходимость применения веществ, обладающих иммуностимулирующим действием.
Натрия нуклеинат - натриевая соль РНК, полученная из пищевых дрожжей Saccharomyces cerevisiae. Представляет собой смесь олигонуклеотидов из 4-х типов нуклеотидов, составляющих группы пуринов и пиримидинов [4, с.58]. Он является эффективным для неспецифической профилактики полиэтиологических респираторных заболеваний. Препарат усиливает миграцию стволовых клеток, активирует кооперацию Т- и В-лимфоцитов, стимулирует В-клеточную активность, синтез иммуноглобулинов, усиливает фагоцитарную активность нейтрофилов и моноцитов, оказывает детоксикационный эффект [5, с.111-117].
Целью настоящей работы являлся поиск наиболее эффективных методов использования натрия нуклеината для повышения уровня иммунного ответа при введении ассоциированной вакцины против Ньюкаслской болезни, инфекционного бронхита кур и синдрома снижения яйценоскости - 76.
Методы исследования. Научно - производственный опыт по оценке влияния выпаивания натрия нуклеината в различные сроки относительно введения ассоциированной вакцины против Ньюкаслской болезни, инфекционного бронхита кур и синдрома снижения яйценоскости - 76 на титр антител в крови у молодняка кур-несушек был проведен в условиях ОАО “Птицефабрика Снежка”.
Использовалась инактивированная эмульгированная вакцина против ньюкаслской болезни, инфекционного бронхита кур и синдрома снижения яйценоскости - 76, объемом 200 см3, СТО 00495527-0007-2005, серия 63, контроль 63, дата изготовления 02.2007 года; г. Владимир, ФГУ “ВНИИЗЖ”
Объектом исследования являлся молодняк кур-несушек кросса “Иза - Браун” со средней живой массой 1390 грамм. Предметом исследования был уровень специфических антител в сыворотке крови вакцинированного молодняка кур-несушек. Профилактическая вакцинация против болезни Ньюкасла осуществлялась в возрасте 15, 45 и 75 суток, для инфекционного бронхита кур в 1, 35, 80 суток. По принципу аналогов было сформировано 5 групп по 50 голов в каждой (первая - контрольная, вторая, третья, четвертая и пятая — опытные).
Для предотвращения развития поствакцинальных осложнений, повышения напряженности и продолжительности иммунитета у молодняка кур-несушек во время последней ревакцинации
против указанных заболеваний (в возрасте 105 суток) использовали препарат натрия нуклеинат. Его (в дозе 0,004 г на 1 кг живой массы) выпаивали птице опытных групп по следующей схеме: курам второй опытной группы препарат выпаивали одновременно с вакцинацией; - третьей опытной группы вводили препарат за трое суток до вакцинации; - четвертой группы выпаивание проведено через трое суток после вакцинации; - пятой опытной группы вводили препарат двукратно в половинной дозировке за шесть и за трое суток до вакцинации соответственно (в дозе
0,002 г на 1 кг живой массы) Пробы крови брали из подкрыловой вены за 7 суток перед вакцинацией, через 7 и 21 сутки после неё. Уровень антител определяли в межобластной Брянской ветеринарной лаборатории реакцией торможения гемагглютинации (болезнь Ньюкасла) [6], - иммуноферментным анализом (синдром снижения яйценоскости - 76 и инфекционный бронхит кур).
Полученные цифровые данные обработаны методом вариационной статистики. Для выявления статистически значимых различий использован критерий Стьюдента по Н. А. Плохинскому [7]. В качестве значений физиологической нормы принимали интервалы соответствующих показателей [8;6].
Результаты исследований и их обсуждение. Болезнь Ньюкасла - высоко контагиозная вирусная инфекция, главным образом куриных, характеризующаяся пневмонией, энцефалитом, множественными точечными кровоизлияниями и поражением внутренних органов. Возбудитель — РНК-содержащий вирус из рода парамиксовирусов семейства Paramyxoviridae. Наносит громадный экономический ущерб и относится к особо опасным инфекциям. Установлено, что вирулентные штаммы способны бессимптомно существовать в организме птицы в течение 70 дней. С увеличением продолжительности вирусоносительства латентная форма инфекции переходит в клинически выраженную [9, с.32-33]. Смертность от болезни достигает 98 %.
Полученные результаты свидетельствуют о том, что предшествующие иммунизации молодняка кур-несушек против болезни Ньюкасла в возрасте 15, 45 и 75 суток способствовали сохранению к 98-суточному возрасту относительно высокого титра специфических антител в сыворотке крови (96,00±14,31). Однако при таком уровне в крови антител возможно появление птиц в стаде, неустойчивых к заражению [8].
Через 7 суток после четвертой иммунизации, проведенной в 105-суточном возрасте, титры антител в крови кур против возбудителя болезни Ньюкасла (таблица 1) увеличились в среднем в 4 раза по сравнению с исходным у птиц всех подопытных групп. При этом отмечалась тенденция к более высоким значениям этого показателя, по сравнению с контролем, у кур 2 и 5 групп, на 15,38 и 7,69 % соответственно, получивших натрия нуклеинат одновременно с иммунизацией и двукратно в половинной дозировке за 6 и 3 дня до иммунизации. У птиц, получавших натрия нуклеинат только за 3 дня до иммунизации в полной дозе и после иммунизации, напротив, отмечена тенденция к более низкому титру антител 7,69 и 15,38% соответственно по сравнению с контролем.
Таблица 1
Влияние натрия нуклеината на напряженность иммунного ответа при иммунизации против
Ньюкаслской болезни
Группа rp II Титры антител
Через 7 суток после иммунизации (112 суточные куры) Через 21 сутки после иммунизации (126 суточные куры)
% к 1 группе % к 1 группе
1 (n=5) 332,80±76,80 100,00 1792,00±686,92 100,00
2 (n=5) 384,00±73,90 □ 115,38 3328,00±768,00 □ 185,71
3 (n=5) 307,20±86,81 92,31 3328,00±768,00 □ 185,71
4 (n=5) 281,60±62,71 84,62 2457,60±409,60 □ 137,14
5 (n=5) 358,40±62,71 □ 107,69 2662,40±614,40 □ 148,57
Примечание: □ - Р< 0,05 по сравнению с предыдущим периодом исследования;
* - Р< 0,05 по сравнению с контрольной группой;
*- величина, обратная максимальному разведению сыворотки, которое вызывает специфическую реакцию.
Следовательно, введение натрия нуклеината курам-несушкам во время иммунизации (2 группа) и дважды (за 6 и 3 дня) до иммунизации в половинной дозировке до иммунизации (5
группа) способствовали более активному синтезу антител, воздействуя, очевидно, в основном на индуктивную фазу антителогенеза. Подтверждением этому служит более низкий уровень антител у птиц 4 группы, получавших препарат после окончания индуктивной фазы, по сравнению с курами 2 и 5 групп на 30,76 и 23,07% (р>0,05)соответственно.
Через 21 сутки после иммунизации количество антител против болезни Ньюкасла в сыворотке крови молодняка кур-несушек контрольной группы увеличилось в 5,38 раз по сравнению с предыдущим периодом исследования. У птиц опытных групп, по разным схемам получавшим натрия нуклеинат, интенсивность повышения специфических антител в период от 7 до 21 суток после иммунизации была существенно выше, чем в контроле (в 8,67, 10,83, 8,73, 7,43 раз соответственно во второй, третьей, четвертой и пятой группах).
Таким образом, натрия нуклеинат, введенный курам-несушкам во время иммунизации и за 3 суток до иммунизации вызывал тенденцию к более выраженной стимуляции иммунных механизмов организма в продуктивную фазу иммунного ответа у молодняка кур-несушек, что обусловило у них достаточно высокий, устойчивый и относительно однородный синтез антител.
Синдром снижения яйценоскости 76 - вирусная болезнь кур-несушек, характеризующаяся размягчением, отсутствием или депигментацией скорлупы яиц и сопровождающаяся значительным снижением яйценоскости [1, с.12-15]. Заболевание птиц, вызываемое выведенным в 1976 году ДНК-содержащим вирусом, который относится к семейству Adenoviridae, и наносит значительный экономический ущерб птицеводству [10, с.72-115].
Птицу до 105-суточного возраста не подвергали иммунизации против этого заболевания. Перед началом опыта в крови у птицы в исследованный период к синдрому снижения яйценоскости - 76 были обнаружены антитела (469,47±41,66), что указывает на предшествующий контакт птицы с этим вирусом.
Через 7 суток после иммунизации обратные титры антител против синдрома снижения яйценоскости - 76 увеличились в среднем в 20 раз по сравнению с исходным периодом исследования (табл. 2). Из приведенных данных видно, что уровень антител к вирусу ССЯ-76 через 7 суток после иммунизации у молодняка кур-несушек неоднородный: от 1:5978,60 до 1:16836,00. Отмечалась тенденция к достоверно значимому повышению уровня титров антител в контрольной группе в 35,86 раз, в опытных группах в - 18,77, 12,73, 26,18, 14,34 раз
соответственно по сравнению с доиммунизационным периодом. При этом наиболее выраженное повышение уровня антител в крови отмечено у кур первой и четвертой групп, а наименьшее - у третьей группы. Следовательно, введение птице натрия нуклеината до иммунизации и во время нее вызвало замедление синтеза специфических антител к антигенам вакцины против ССЯ - 76 через 7 суток после иммунизации.
Таблица 2
Влияние натрия нуклеината на напряженность иммунного ответа при иммунизации против
синдрома снижения яйценоскости - 76
Группа rp II Титры антител
Через 7 суток после иммунизации (112 суточные куры) Через 21 сутки после иммунизации (126 суточные куры)
% к 1 группе % к 1 группе
1 (n=5) 16836,00±2906,75 □ 100,00 18329,60±1172,01 100,00
2 (n=5) 8812,00±2966,58 □ 52,34 12721,00±913,63 * 69,40
3 (n=5) 5978,60±1951,39 □ 35,51 14339,40±2477,92 □ 78,23
4 (n=5) 12290,00±4456,47 □ 73,00 15144,40±2174,60 82,62
5 (n=5) 6734,25±4796,16 40,00 10578,20±1171,84 57,71
Через 21 сутки после иммунизации количество антител против ССЯ-76 в сыворотке крови молодняка кур-несушек контрольной группы незначительно увеличилось по сравнению с предыдущим периодом исследования. У птиц опытных групп по сравнению с предыдущим периодом исследования отмечалась тенденция к более интенсивному увеличению специфических титров антител в 1,44, 2,40, 1,23 и 1,57 раз соответственно, достоверное увеличение наблюдалось в третьей группе, однако их уровень не превышал аналогичного показателя у контрольной группы птиц.
Таким образом, применение иммуномодулятора натрия нуклеината не оказало существенного воздействия на уровень антител к вирусу ССЯ - 76.
Инфекционный бронхит кур является наиболее распростаненной и опасной болезнью,
наносящей значительный экономический ущерб птицеводческим хозяйствам. Возбудитель болезни - РНК-содержащий вирус, представленный большим количеством антигенных серотипов. На территории России наибольшее распространение имеют штаммы серотипа Массачусетс [11, с.24-27].
Он вызывает острое, высококонтагиозное респираторное заболевание у цыплят, снижение яйценоскости и поражение почек у взрослой птицы [12, с.169].
Иммунизация молодняка кур-несушек всех опытных и контрольной группы против инфекционного бронхита кур проводились в 1, 35 и 80-дневном возрасте, что привело к накоплению специфических антител у всех групп птицы (2581,40±438,13) ко времени четвертой иммунизации в 105-суточном возрасте.
Через 7 суток после четвертой иммунизации, проведенной в 105-суточном возрасте, по сравнению с предыдущим периодом, в крови у птицы всех групп отмечена незначительная тенденция к увеличению уровня специфических антител к антигенам возбудителя инфекционного бронхита кур (таблица 3).
У молодняка кур, получивших натрия нуклеинат за 3 дня до иммунизации (3 группа) и в половинной дозе двукратно до иммунизации (5 группа) это увеличение было более выражено по отношению к контрольной группе на 26,27 и 5,98 % соответственно. Это свидетельствует о воздействии натрия нуклеината в основном на индуктивную фазу антителогенеза и более активном синтезе антител к антигенам возбудителя инфекционного бронхита кур.
Через 21 сутки после иммунизации количество антител против возбудителя инфекционного бронхита кур в сыворотке крови птицы достоверно увеличилось в среднем в 3 раза, в контрольной группе в - 3,94 раза, в опытных: 3,27, 2,13 3,17 и 3,11% соответственно.
Таблица 3
Влияние натрия нуклеината на напряженность иммунного ответа при иммунизации против
ИБК
Группа rp II Титры антител
Через 7 суток после иммунизации (112 суточные куры) Через 21 сутки после иммунизации (126 суточные куры)
% к 1 группе % к 1 группе
1 (n=5) 2864,00±364,31 100,00 11279,50±2015,33 □ 100,00
2 (n=5) 2555,50±905,43 89,23 8363,00±1517,15 □ 74,14
3 (n=5) 3616,25±1182,61 126,27 7685,40±989,05 □ 68,14
4 (n=5) 2680,50±933,17 93,59 8495,5±1648,90 □ 75,32
5 (n=5) 3035,25±1491,19 105,98 9437,40±1533,54 □ 83,67
Следовательно, использование натрия нуклеината до иммунизации способствовало развитию тенденции к повышению уровня специфических антител к возбудителю инфекционного бронхита кур в первые 7 суток после нее.
Вывод. Применение натрия нуклеината в условиях производства в системе противоэпизоотических мероприятий против Ньюкаслской болезни, инфекционного бронхита кур способствует повышению эффективности специфической профилактики. При ревакцинациях введение натрия нуклеината до или во время иммунизации обусловило тенденцию к повышению титров антител (при вакцинации против Ньюкаслской болезни, главным образом в продуктивную фазу, а при вакцинации против инфекционного бронхита кур — в индуктивную фазу), а при первичной иммунизации на фоне вирусоносительства (ССЯ -76), тенденцию к снижению интенсивности образования антител.
In studying the effect of sodium nucleinate watering at different times on the introduction of associated vaccine against Newcastle disease, infectious bronchitis and reductions in egg production (Egg Drop) Syndrome - 76 in the antibody titer in the blood of young hens found that the use of sodium nucleinate in a production environment in the system of anti-epizootic measures against Newcastle disease, infectious bronchitis enhances the effectiveness of specific prevention. With the introduction of sodium nucleinate revaccination before or during the time of immunization caused a tendency to increase in antibody titers (after vaccination against Newcastle disease, mainly in the productive phase, and during vaccination against infectious bronchitis - the inductive phase), and for primary immunization against the virus infection (EDS 76), caused a downward trend in the intensity of antibody formation. The key words: young hens, blood, immunity, biologically active drug
Список литературы
1. Хохлачев О.Ф., Терюханов А.Б. Ассоциированное течение инфекционного бронхита и синдрома снижения яйценоскости// Ветеринария, 2005. № 11.
2. Дубовой А.С., Джавадов Э.Д., Полежаев Ф.И. Иммунитет у птицы, привитой поливалентной инактивированной эмульсинвакциной “Авикрон”// Ветеринария, 2005. № 4.
3. Красочко П.А., Гласкович Л.А., Гласкович М.А., Голушко В.М. Естественная резистентность цыплят - бройлеров при введении в рацион препарата “Биофлор”//Научные основы производства ветеринарных биологических препаратов. Щелково, 2005.
4. Земсков, В.М. Иммунобиологическая активность мононуклеотидов/ Земсков В.М., Родионов С.В., Храмцов А.В., Барсуков А.А., Пактин В.И., Земсков А.М., Фрейдлин С.М., Артеменко Н.К., Микстайс У.Я.// Журнал микробиология, эпидемиология и иммунология. 1988. № 2.
5. Беседнова Н.Н., Леонова Г.Н., Запорожец Т.С. Иммунокорректоры в комплексном лечении вирусных инфекций//Микробиология, эпидемиология и иммунология, 2006. № 3.
6. Сюрин В.Н. и др. Диагностика вирусных болезней животных: Справочник /В.Н. Сюрин, Р.В. Белоусова, Н.В. Фомина. М.: Агропроиздат, 1991. 528 с.
7. Плохинский Н.А. Биометрия. Из-во Сибирского отделения АН СССР, Новосибирск, 1961. 362 с.
8. И.А. Болотников. Иммунопрофилактика инфекционных болезней птиц. М.: Россельхозиздат, 1982. 186 с.
9. Старов С. Болезнь Ньюкасла: ее формы, проявления и диагностика// Животноводство России, 2002. № 2.
10. Бакулин В.А. Синдром снижения яйценоскости - 76 // Патоморфогенез и
диффиренциальная диагностика болезни Гамборо, аденовирусные инфекции и другие иммунодепрессивные болезни птиц. - Санкт-Петербург, Ломоносов. 1998. Т. 1 и 2.
11. Борисов А., Фролов С., Хлыбова Т., Борисов В., Ирза В. Инфекционный бронхит кур// Птицеводство, 2001. № 6.
12. Родина В.П., Глазков С. Специфическая профилактика инфекционного бронхита кур в ОАО птицефабрике “Атемарская” Республики Мордовия// Современные научно-практические достижения в ветеринарии. Киров, 2010.
Об авторе
Василенко А.И. -
The use of sodium nukleinat TO IMPROVE EFFICIENCY OF SPECIFIC DISEASE PREVENTION of hens
A.I. Vasilenko
Keywords: young hens, blood, immunity, biologically active drug
