Применение этония в качестве адъюванта антирабической вакцины Текст научной статьи по специальности «Ветеринарные науки»

ПРИМЕНЕНИЕ ЭТОНИЯ В КАЧЕСТВЕ АДЪЮВАНТА АНТИРАБИЧЕСКОЙ ВАКЦИНЫ

С.А. Дяченко, И.Н. Матвеева, В.М. Попова, С.В. Кузнецова

Аннотация. Предложено применение этония в качестве адъюванта для производства антигабической вакцины, обладающий высокими иммуностимулирующими свойствами.

Ключевые слова: адъюванты, вакцина, бешенство, иммуногенность.

Иммуногенность вакцин увеличивается с использованием в технологии их изготовления неспецифических стимуляторов иммунитета - адъювантов.

Известно применение в качестве адъювантов при изготовлении различных антигенов гидроокиси алюминия А1(ОН)3, веществ из группы сапонинов, а также масляных адъювантов (типа адъюванта Фрейнда и др.), которые обладают выраженными иммуностимулирующими свойствами, но имеют реактогенность для животных.

В Российской Федерации при изготовлении вакцин чаще всего используют импортный сапонин, изготовленный фирмой «Merck» Германия.

Целью настоящих исследований явилось поиск нового адъюванта, обладающего высокими иммуностимулирующими свойствами и способного заменить импортный препарат сапонин при изготовлении антира-бической вакцины.

Реагенты для культивирования клеток - сыворотку крупного рогатого скота, вирусологические питательные среды, растворы приобретали в ООО «БиолоТ». Инактивированную антирабическую вакцину готовили из вируса штамма «Щёлково-51», выращенного рол-лерным способом в культуре клеток ВНК-21с активностью 10 6,6 ТЦД50/см3. Вирус инактивировали р-пропиолактоном в концентрации 1:4000 в течение 2 ч при 37 0С. Полноту инактивации вируса бешенства контролировали в культуре клеток ВНК-21 по отсутствию фокусов флуоресценции через 48 ч после внесения в неё инактивированного вируса. В качестве поддерживающей среды использовали гидролизат лактальбумина на растворе Хэнкса. После изготовления вакцину подвергали контролю на стерильность, безвредность и иммуногенность. Реакцию нейтрализации вируса (флюоресцентный вируснейтрализующий тест - FAVN) и уровень антирабических вируснейтрализующих антител ВНА определяли в реакции нейтрализации вируса в культуре клеток ВНК-21 по методике, рекомендованной OIE (2012). Результаты реакции выражали в Международных единицах на см крови (МЕ/см3). Иммуно-генные свойства вакцинного вируса бешенства определяли методом NIH (Национальный институт здоровья, США) на белых беспородных мышах массой 11-12 г, иммунизированных внутрибрюшинно с последующим интрацеребральным заражением референтным штаммом CVS-11 (мозговой штамм). Иммуногенная активность вакцины должна быть не ниже 2,0 МЕ/мл.

Из одной партии инактивированного вируса бешенства штамм приготовили два образца препаратов с разными адъювантами: один- с сапонином, а второй - в комбинации с новым адъювантом этонием. Иммуногенная активность приготовленных вакцин, определённая объёмным методом NIH на белых мышах, составила 2,02 МЕ/см3 для сапонин-вакцины и 2,04 МЕ/см3 для вакцины с этонием (P< 0,05).

Иммуногенность вакцин изучали на белых мышах, двукратно иммунизированных с интервалом 21 сутки в дозе 0,1 см3. Средние геометрические титры антител у мышей, определённые методом FAVN, через 21 день

после первой иммунизации были 2,5 МЕ/см3 для сапонин-вакцины и 3,0 МЕ/см3 для этоний-вакцины. На 21 сутки после второй иммунизации данные показатели составили 3,3 МЕ/см3 и 3,6 МЕ/см3 соответственно.

Антигенную активность экспериментальных образцов вакцин с разными адъювантами изучали на беспородных щенках в сравнении с референтной вакциной. Сыворотку крови щенков исследовали на наличие ВНА методом FAVN (таблица 1).

Таблица 1 - Динамика вируснейтрализующих антител в сыворотке крови щенков после одно- и двукратной иммунизации разными антирабическими вакцинами

Таким образом, результаты исследований демонстрируют хорошие адъювантные свойства этония. Нельзя не отметить одновременно с вышеописанным свойством этония как адъюванта его фармакологическое действие: этоний обладает бактериостатическим (препятствующим размножению бактерий) и бактерицидным (уничтожающим бактерии) свойством. Этоний оказывает детоксицирующее действие на стафилококковый токсин, обладает местно-анестезирующей активностью, стимулирует заживление ран, трещин сосков вымени у коров, трофических гнойных язв. При этом адъювант не обладает онкогенными, аллергенными и токсическими свойствами, легко метаболизируется в организме животных. Применение известного препарата этоний в качестве адъюванта позволяет расширить ассортимент адъювантов для производства эффективных, безопасных и экономически целесообразных антирабических вакцин.

Выводы.

1. Предложено применение этония в качестве адъюванта для производства антирабической вакцины.

2. Новый адъювант обладает высокими иммуностимулирующими свойствами и способного заменить импортный препарат сапонин при изготовлении анти-рабической вакцины. При этом этоний не обладает он-когенными, аллергенными и токсическими свойствами, легко метаболизируется в организме животных.

Информация об авторах

Дяченко Сергей Александрович, аспирант ФГБНУ «Всероссийский научно-исследовательский и технологический институт биологической промышленности», тел.+79686306562.

Кузнецова Светлана Владимировна, ведущий научный сотрудник отдела молекулярной биологии и вирусологии, доктор биологических наук, профессор ФГБНУ «Всероссийский научно-исследовательский и технологический институт биологической промышленности», тел.+79164987282.

Матвеева Ирина Николаевна, заведующая отделом молекулярной биологии и вирусологии, доктор биологических наук, профессор ФГБНУ «Всероссийский научно-исследовательский и технологический институт биологической промышленности», тел.+79164987282.

№ группы Препарат Уровень вируснейтрализующих антител, МЕ/ см3 (M ± m)

до вакцинации на 21-е сутки после первой вакцинации на 21 -е сутки после второй вакцинации

1 референтная вакцина < 0,10 2,91 ± 0,25 5,30 ± 0,49

2 с сапонином < 0,10 3,34 ± 0,53 5,21 ± 0,51

3 с этонием < 0,10 3,44 ± 0,46 5,24 ± 0,40

4 контроль < 0,10 < 0,10 < 0,10

Попова Вера Михайловна, ведущий научный сотрудник тельский и технологический институт биологической про-отдела молекулярной биологии и вирусологии, доктор биоло- мышленности», тел.+79164987282. гических наук ФГБНУ «Всероссийский научно-исследова-

STUDY ETON ADJUVANTED RABIES VACCINE PRODUCTION S.A. Dyachenko, I.N. Matveeva, V.M. Popova, S.V. Kuznetsova

Abstract. Etoniya provides the use as an adjuvant for the production of anti-rabies vaccines. New adjuvant has immunostimulatory properties and can replace imported saponin preparation in the manufacture of antigens used for vaccines against infectious diseases in animals. In this adjuvant has not oncogenic, allergenic and toxic properties, is readily metabolized in animals.

Keywords: аdjuvants vaccine, rabies, immunogenicity.