CC BY
85
УДК 616-006:444:575.857-07
ПРЕДИКТИВНОЕ ЗНАЧЕНИЕ ТЕСТИРОВАНИЯ ПОЛИМОРФНОГО ЛОКУСА Arg72Pro 4 ЭКЗОНА АНТИОНКОГЕНА ТР53 У ПАЦИЕНТОВ С НЕХОДЖКИНСКИМИ ЛИМФОМАМИ
Елена Николаевна ВОРОПАЕВА1, Ольга Валерьевна БЕРЕЗИНА2, Виктор Сергеевич ОВЧИННИКОВ2, Михаил Иванович ВОЕВОДА1, Татьяна Ивановна ПОСПЕЛОВА2,
1 ФГБУ НИИ терапии СО РАМН
630089, г. Новосибирск, ул. Бориса Богаткова, 175/1
2 ГБОУ ВПО Новосибирский государственный медицинский университет Минздрава России
630091, г. Новосибирск, Красный пр., 52
Изучена частота генотипов полиморфизма Arg72Pro в 4-м экзоне гена ТР53, а также их ассоциация с показателями 5-летней выживаемости у пациентов с агрессивными и индолентными вариантами неходжкинс-ких лимфом (НХЛ). Выявлено статистически значимое (р = 0,040) снижение безрецидивной выживаемости в группе больных агрессивными НХЛ, имеющих генотип Arg/Arg (25 %), в сравнении с пациентами с генотипами Arg/Pro или Pro/Pro (68,8 %). Таким образом, тестирование полиморфизма Arg72Pro в 4-м экзоне гена ТР53 может иметь предиктивное значение для прогноза выживаемости пациентов с агрессивными вариантами неходжкинских лимфом.
Ключевые слова: неходжкинские лимфомы, генетический полиморфизм, ген TP53, прогноз, выживаемость.
Учитывая неуклонный рост заболеваемости и смертности от НХЛ во всем мире, несмотря на возрастающие материальные затраты в данной области, достигнутые успехи в диагностике, разработку новых препаратов и схем лечения [4], не вызывает сомнений, что в дальнейшем онкогематология будет нуждаться в анализе мо-лекулярно-генетических особенностей организма и опухолевых клеток для прогноза развития, профилактики и оптимального лечения опухолевых заболеваний крови.
Установлено, что практически все белок-ко-дирующие гены человека имеют в своей структуре молекулярные отличия (полиморфизмы), приводящие к синтезу белков с несколько измененными структурными и функциональными характеристиками. Их особенности определяют не только предрасположенность человека к тем или иным заболеваниям, но и характер их тече-
ния в случае развития патологии. Исследование генетических особенностей конкретных людей может быть полезным как для разработки эффективных мер профилактики, так и для выбора оптимальной стратегии лечения возникших у них заболеваний.
Предиктивная онкогематология представляет собой одно из направлений предиктивной медицины, которое позволяет выявлять людей с повышенной чувствительностью к тому или иному гемобластозу и разрабатывать на основании полученных данных эффективные программы индивидуальной профилактики и лечения.
Первостепенной задачей, необходимой для решения проблем предиктивной онкогематоло-гии, является проведение исследований, доказывающих диагностическую ценность тех или иных тестируемых генных полиморфизмов. Требуется выполнение эпидемиологических ис-
Воропаева Е.Н. - к.м.н., научный сотрудник лаборатории молекулярно-генетических исследований терапевтических заболеваний
Березина О.В. - ассистент кафедры терапии, гематологии и трансфузиологии, e-mail: [email protected]
Овчинников В.С. - клинический ординатор кафедры терапии, гематологии и трансфузиологии,
e-mail:[email protected]
Воевода М.И. - член-кор. РАМН, директор
Поспелова Т.И. - д.м.н., проф., главный гематолог и трансфузиолог г. Новосибирска, зав. кафедрой терапии, гематологии и трансфузиологии факультета повышения квалификации врачей
следований на общей популяции с длительным наблюдением над людьми с различными генотипами, а также на когортах пациентов с развившимся гемобластозом, что могло бы иметь решающее значение для оценки не только диагностической, но и прогностической ценности таких тестов.
Полиморфные локусы гена ТР53 широко тестируются в исследовательских проектах во всем мире при различных онкологических заболеваниях. Однонуклеотидный полиморфизм (ОНП) А^72Рго 4 экзона гена ТР53 характеризуется заменой в 72 кодоне основания G на основание С и приводит к аминокислотной замене в первичной структуре соответствующего белка аргинина на пролин. Следует отметить, что данный полиморфизм ассоциирован с риском развития не только солидных опухолей, но и НХЛ [3, 7].
Подавляющее большинство проведенных в настоящее время работ посвящены лишь риско-метрии НХЛ, и только некоторые из них проводят анализ связи генетического полиморфизма с особенностями клинического течения уже развившегося заболевания, чувствительностью злокачественных клеток к терапии и выживаемостью пациентов.
В отечественной и зарубежной литературе имеются сообщения, целью которых являлся анализ ассоциации отдельных полиморфизмов генов (например, метаболизма ксенобиотиков, хемокиновых рецепторов, фолатного обмена) [1, 2, 14] с особенностями течения отдельных вариантов лимфом.
Цель исследования - изучить ассоциации аллельных вариантов полиморфного локуса А^72Рго 4 экзона гена ТР53 у больных НХЛ с показателями общей, бессобытийной и безрецидивной выживаемости.
МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ
Группу исследования составили пациенты с В-клеточными индолентными (54 человека) (лимфоцитарная лимф ома из мелких клеток/ хронический лимфолейкоз, пролимфоцитар-ная, центроцитарная, лимфоплазмоцитарная, фолликулярная лимфома 1-го цитологического типа, маргинально-клеточная, МАЬТ-лимфома) и агрессивными (41 человек) (диффузная крупноклеточная, беркиттоподобная, плеоморфная, лимфобластная, центробластная, иммунобласт-ная, плазмобластная, анапластическая, фолликулярная 3-го цитологического типа) вариантами НХЛ, диагностированными в Городском гематологическом центре г. Новосибирска с 2004
по 2009 г. Средний возраст больных составил 53,2 ± 14,5 года, распределение по полу было следующее: 43 мужчины и 53 женщины. Срок наблюдения - от 2 до 65 мес. Генерализованные стадии заболевания (III-IV) были диагностированы у 75 пациентов (78,9 %), у 20 человек (21,1 %) - II стадия. В-симптомы отмечались у 68 (71,6 %) больных. Согласно Международному прогностическому индексу (IPI), в группе пациентов с агрессивными лимфомами 47 % больных были отнесены к неблагоприятной прогностической группе, т. е. имели 3-5 факторов риска ухудшения показателей пятилетней выживаемости, 0-2 фактора риска имели 53 % пациентов. При агрессивных лимфомах в качестве I линии терапии использовали программы R-СНОР и R-СНОЕР, протоколами II линии служили R-ESHAP, R-DHAP. При индолентных лимфомах применялись курсы R-СОР и R-FC. Количество курсов соответствовало 4-6 при II стадии и 6-8 при III и IV стадиях заболевания. Полные или частичные ремиссии были достигнуты у 53 из 95 (55,8 %) пациентов, в том числе у 24 из 41 (58,5 %) больных агрессивными и у
29 из 54 (53,7 %) - индолентными вариантами НХЛ.
Материалом для исследования служила ДНК, выделенная из мононуклеаров периферической крови больных до начала активной полихимиотерапии. Все пациенты подписывали информированное согласие на участие в исследовании в соответствии с требованиями этического комитета.
Выявление ОНП Arg72Pro 4 экзона TP53 осуществлялось методом ПЦР/ПДРФ-анализа. На первом этапе амплифицировали фрагмент гена размером 396 пар нуклеотидов (п. н.), потенциально содержащий замену нуклеотида с использованием фланкирующих праймеров: F, 5/- TGG TAA GGA CAA GGG TTG G -3/; R, 5/-ACT GAC CGT GCA AGT CAC AG -3/. Условия ПЦР были следующие: 94 °C - 3 мин, затем
30 циклов: 94 °C - 15 с, 63 °C - 1 мин и 72 °C -1 мин, заключительный цикл 72 °C - 3 мин. На втором этапе использовали эндонуклеазу рестрикции BstFNI с сайтом распознавания CGtCG (разрезает продукт ПЦР при наличии аллеля G). 10 мкл каждого ампликона брали в реакцию гидролиза с 4 ед. акт. эндонуклеазы рестрикции BstFNI. Гидролиз проводили при 60 °C в течение 3 ч. Продукты рестрикции ампликона ферментом BstFNI были разделены в 3 % агарозном геле.
На электрофореграмме (рис. 1) представлены три генотипа: Arg/Arg, 231 + 165 п. н.; Arg/ Pro, 396 + 231 + 165 п. н.; Pro/Pro, 396 п. н.
Безрецидивная выживаемость (Kaplan-Meier)
0,9-
0,7-
0,5-
Я
Рис. 1. Электрофореграмма продуктов амплификации полиморфного варианта Arg72Pro, локализованного в 4-м экзоне гена ТР53: 1 — 396 п. н. (Pro/Pro); 2 - 231 + 165 п. н. (Arg/Arg); 3 -396 + 231 + 165 п. н. (Arg/Pro); М - ДНК-маркер молекулярного веса (100 п. н.)
При оценке статистической значимости различий между группами использовался точный критерий Фишера.
Многолетнюю выживаемость пациентов исследовали с помощью метода анализа цензури-рованных данных с использованием функции вероятности выживания Каплана - Майера. Для сравнения кривых выживаемости использовали непараметрический логранговый тест. При расчете общей выживаемости началом мониторинга считался момент постановки диагноза, событием - смерть от любой причины. При расчете безрецидивной выживаемости началом мониторинга считался момент окончания лечения с достижением ремиссии, событием - рецидив. При расчете бессобытийной выживаемости началом мониторинга считался момент постановки диагноза, событием - смерть от любой причины, прогрессирование заболевания на фоне терапии или рецидив лимфомы после достижения ремиссии. Следует отметить, что смертей пациентов от причин, не связанных с НХЛ, не было.
Различия между сравниваемыми параметрами считали статистически значимыми при р < 0,05.
0,3-
од
Генотипы Arg/Pro и Pro/Pro
о-----+
о завершенный случаи + незавершенный случай
Генотип Arg/Arg
0
400
—I-1-1—
800 1200 Дни
1600
2000
Рис. 2. Показатели 5-летней безрецидивной выживаемости в группе больных с агрессивными НХЛ в зависимости от генотипа по полиморфному варианту Arg72Pro 4 экзона гена ТР53
РЕЗУЛЬТАТЫ
Результаты анализа показателей 5-летней выживаемости в обследованной группе больных НХЛ представлены в табл. 1. Расчет частот генотипов полиморфизма Arg72Pro 4 экзона ТР53 показал, что 45 (47,3 %) пациентов имели гомозиготный Arg/Arg, 43 (45,3 %) - гетерозиготный Arg/Pro и 7 (7,4 %) - гомозиготный Pro/ Pro генотипы. Распределение частот генотипов по полиморфному варианту Arg72Pro гена TP53 у больных лимфомами соответствовало равновесию Харди-Вайнберга.
В группе пациентов с НХЛ статистически значимой ассоциации изучаемого ОНП с показателями 5-летней общей, безрецидивной и бессобытийной выживаемости не получено, данные представлены в табл. 2. При раздельном анализе результатов терапии пациентов с агрессивными и индолентными вариантами НХЛ выявлено большее значение статуса ОНП Arg72Pro 4 экзона гена TP53 для 5-летней выживаемости больных агрессивными лимфомами (см. табл. 2, рис. 2): безрецидивная выживаемость в груп-
Таблица 1
Показатели 5-летней выживаемости больных НХЛ
5-летняя выживаемость Вариант НХЛ
Все (95 человек) Агрессивные (41 человек) Индолентные (54 человека) Р
n/N % n/N % n/N %
Общая 45/95 47,4 15/41 36,6 30/54 55,6 0,017
Безрецидивная 31/53 58,5 13/24 54,2 18/29 62,1 0,294
Бессобытийная 43/95 45,2 14/41 34,1 29/54 53,7 0,011
Примечание. р - достигнутый уровень значимости при сравнении 5-летней выживаемости в группах пациентов с агрессивными и индолентными вариантами НХЛ; здесь и в табл. 2 п - число выживших больных в течение 5 лет; N - общее число больных в группе.
Таблица 2
Показатели 5-летней выживаемости больных НХЛ в зависимости от генотипа Л^72Рго 4 экзона гена ТР53
Вариант НХЛ 5-летняя выживаемость
Общая Безрецидивная Бессобытийная
Генотип Р Генотип Р Генотип Р
Arg/Arg (45 человек) Arg/Pro и Pro/Pro (50 человек) Arg/Arg (26 человек) Arg/Pro и Pro/Pro (27 человек) Arg/Arg (45 человек) Arg/Pro и Pro/Pro (50 человек)
n/N % n/N % n/N % n/N % n/N % n %
Все (95 человек) 23/45 51,1 22/50 44,0 0,989 12/26 46,2 19/27 70,4 0,061 18/45 40,0 25/50 50,0 0,494
Индолентные (54 человек) 20/30 66,7 10/24 41,7 0,264 10/18 55,6 8/11 72,7 0,239 16/30 53,3 13/24 54,2 0,983
Агрессивные (41 человек) 3/15 20,0 12/26 46,2 0,094 2/8 25,0 11/16 68,8 0,040 2/15 13,3 12/26 46,2 0,066
Примечание. р - достигнутый уровень значимости при сравнении 5-летней выживаемости в группах индивидов с различными генотипами по полиморфному варианту А^72Рго 4 экзона гена ТР53 (точный критерий Фишера).
пе больных агрессивными НХЛ, имеющих генотип Аг§/Аг§, была статистически значимо (р = 0,040) ниже, чем у пациентов с генотипами А^/Рго и Рго/Рго. Статистически значимого ухудшения общей и бессобытийной выживаемости у гомозиготных пациентов (Аг§/Аг§) с агрессивными вариантами лимфом в сравнении с лицами с генотипами А^/Рго и Рго/Рго не выявлено (см. табл. 2). При этом ни один из генотипов А^72Рго 4 экзона антионкогена ТР53 не был ассоциирован с выживаемостью пациентов с индолентными вариантами НХЛ (см. табл. 2).
ОБСУЖДЕНИЕ
В проведенном нами ранее исследовании было показано повышение риска развития агрессивных вариантов НХЛ у носителей аллеля Рго ОНП А^72Рго 4 экзона антионкогена ТР53 в сравнении с популяционным контролем [3], которое позднее было подтверждено в исследовании корейских авторов [7].
В данной работе предпринята попытка определить прогностическую ценность тестирования однонуклеотидной замены А^72Рго 4 экзона антионкогена ТР53 при уже развившейся НХЛ. При анализе научной литературы было встречено сообщение Иаугапек й а1. об отсутствии ассоциации данного полиморфизма с прогнозом лимфомы Ходжкина и НХЗЛ [5]. Выполненный нами анализ также не показал статистически значимой ассоциации ОНП А^72Рго 4 экзона гена ТР53 с показателями 5-летней общей, безрецидивной и бессобытийной выживаемости.
Вместе с тем раздельный анализ пациентов с агрессивными и индолентными вариантами заболевания дал следующие результаты. Были получены данные о статистически значимом ухудшении безрецидивной выживаемости больных агрессивными НХЛ с генотипом А^/А^ (р = 0,048) в сравнении с лицами с генотипами А^/Рго и Рго/Рго. В доступных источниках данных о предиктивном значении А^72Рго 4 экзона антионкогена ТР53 на выживаемость пациентов с агрессивными вариантами лимфом нами не обнаружено.
Имеется ряд работ, посвященных исследованию ассоциации однонуклеотидной замены в 72 кодоне гена ТР53 с особенностями течения индолентных НХЛ. Так, в работе Wгench е! а1. проводилось наблюдение за пациентами с фолликулярной лимфомой. По данным авторов, А^72Рго 4 экзона гена ТР53 не оказывал эффекта на общую, безрецидивную выживаемость, выживаемость без прогрессирования и время до трансформации [15].
Аналогичные исследования были выполнены в отношении хронического лимфолейкоза. Последний, согласно классификации лимфоид-ных неоплазий ВОЗ, определен в нозологическую единицу «Хронический лимфолейкоз/лим-фома из малых лимфоцитов».
Лишь в исследовании А. Majid е! а1. было показано, что гомозиготность по аллелю Рго ассоциирована с меньшей общей выживаемостью пациентов с хроническим лимфолейкозом в сравнении с генотипом А^/А^ [11]. В трех других сообщениях ОНП А^72Рго 4 экзона гена ТР53 не был связан ни с чувствительностью к
терапии, ни с прогнозом заболевания [8-10]. Это согласуется с результатами настоящего исследования, свидетельствующего о том, что ни один из генотипов Arg72Pro 4 экзона антионкогена ТР53 не ассоциирован с выживаемостью пациентов с индолентными вариантами НХЛ.
Как известно, продукт гена ТР53 - белок р53 - имеет два основных эффекта: останавливает клеточный цикл и способствует репарации ДНК либо проявляет проапоптотическую активность. В свою очередь известно, что пролифера-тивная активность индолентных НХЛ низкая, а апоптоз в них заблокирован р53-независимыми механизмами. Ввиду этого вполне оправдано ожидать влияния дисфункции р53 на чувствительность опухолевых клеток к терапии и на прогноз выживаемости именно при агрессивных НХЛ, как и при любых других быстро делящихся опухолях.
Дело в том, что при описанной замене в 72 кодоне гена ТР53 происходят конформацион-ные изменения вторичной и третичной структур белка р53 за счет разрыва а-спиралей. В результате варианты белка р53, имеющие аминокислоту Arg или Pro, остаются функционально деятельными, но отличаются между собой по ряду биологических и биохимических свойств. Так, было показано, что Pro-вариант р53 активнее действует в направлении репаративных процессов ДНК.
Вместе с тем Arg- и Pro-варианты р53 участвуют в двух принципиально разных механизмах индукции апоптоза. Pro-вариант в большей степени активируется под действием физиологических сигналов, в частности, при взаимодействии цитотоксических лимфоцитов с клеткой-мишенью. В реализации второго пути в ответ на нефизиологические воздействия - повреждения ДНК, гипоксия, нехватка факторов роста - могут участвовать оба варианта, но Arg-вариант стимулирует апоптоз значительно лучше, что связано с большей его способностью проникать в митохондрии и связываться с MDM2 [12].
Ввиду этого логичным было бы ожидать ассоциации не генотипа Arg/Arg, а генотипа Pro/ Pro с ухудшением прогноза безрецидивной выживаемости при агрессивных НХЛ. Результаты проведенного исследования свидетельствуют об обратном, что может быть связано со следующими причинами.
Во-первых, проапоптотический потенциал каждой из форм модулируется многими факторами, например, цитокинами.
Во-вторых, интересен следующий факт: поскольку Arg-вариант p53 имеет более выраженный проапоптотический потенциал, L.L. Hsieh
et al. предполагают, что для реализации онко-генного потенциала клетки, содержащие Arg-вариант белка p53, должны приобрести соматическую мутацию гена ТР53 [6].
В работе M. Tada et al. проводился анализ 100 образцов опухолевой ткани от пациентов с раком легкого, имеющих мутации в гене ТР53. Было показано, что частота их выше при наличии у больного частого аллеля Arg гена ТР53 [13]. Описан феномен модулирующего влияния полиморфизма Arg72Pro на функцию белка р53 при реверсии его свойств в результате соматических мутаций. Мутантный белок р53 может связываться и ингибировать р73, который берет на себя функцию запуска программированной клеточной смерти при утрате активности р53. Обнаружено, что белковый продукт мутантного гена ТР53, кодирующий Arg в 72 кодоне 4 экзо-на, является более эффективным ингибитором р53-зависимого апоптоза в отличие от Pro-варианта. К сожалению, исследование мутационного статуса гена ТР53 в группе больных НХЛ нами не проводилось.
В-третьих, эффекты полиморфных вариантов потенциально зависят от конкурирующих моле-кулярно-генетических механизмов. Поскольку генетическая конституция человека складывается из множества взаимодействующих полиморфизмов, каждый из которых в отдельности обладает лишь весьма умеренным эффектом на фенотип опухоли, особый интерес представляет изучение комплекса имеющихся у человека генетических особенностей. Так, отмечена высокая степень сцепления между 4 экзоном и 3 и 6 интронами гена ТР53 [12], что обусловливает необходимость сочетанного анализа имеющихся в них полиморфных локусов.
Таким образом, необходимы дальнейшие исследования однонуклеотидных полиморфных вариантов гена ТР53 для установления их роли в лимфомогенезе. Однако уже сейчас можно говорить о перспективности предиктивного тестирования Arg72Pro 4 экзона антионкогена ТР53 с целью выделения лиц группы риска развития рецидива заболевания, нуждающихся в оптимизации подходов полихимиотерапии.
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ
1. Березина О.В., Вайнер А.С., Воропаева Е.Н. и др. Влияние однонуклеотидных замен в генах фолатного цикла на риск развития агрессивных неходжкинских лимфом // Сиб. мед. обозрение. 2011. (3). 22-26.
2. Воропаева Е.Н., Скворцова Н.В., Воевода М.И., Тарновский Р. В. Клиническое значение делеции гена CCR5 у больных неходжкинскими
злокачественными лимфомами // Бюл. СО РАМН. 2011. (2). 26-30.
3. Поспелова Т.И., Воропаева Е.Н., Воевода М. И., Березина О.В. Полиморфизм гена р53 как потенциальный маркер предрасположенности к развитию неходжкинских злокачественных лим-фом // Гематол. трансфузиол. 2010. 55. (1). 11-17.
4. Cerhan J.R. Host genetics in follicular lymphoma // Best Pract. Res. Clin. Haematol. 2011. 24. (2). 121-134.
5. Havranek O., Spacek M., Hubacek P. et al. No association between the TP53 codon 72 polymorphism and risk or prognosis of Hodgkin and non-Hodgkin lymphoma // Leuk. Res. 2011. 35. (8). 1117-1119.
6. Hsieh L.L., Huang T.H., Chen I.H. et al. p53 polymorphisms associated with mutations in and loss of heterozygosity of the p53 gene in male oral squamous cell carcinomas in Taiwan // Br. J. Cancer. 2005. 92. (1). 30-35.
7. Kim H.N., Yu L., Kim N.Y. et al. Association with TP53 codon 72 polymorphism and the risk of non-Hodgkin lymphoma // Am. J. Hematol. 2010. 85. (10). 822-824.
8. Kochethu G., Delgado J., Pepper C. et al. Two germ line polymorphisms of the tumour suppressor gene p53 may influence the biology of chronic lymphocytic leukaemia // Leuk. Res. 2006. 30. (9). 1113-1118.
9. Lahiri O., Harris S., Packham G., Howell M. p53 pathway gene single nucleotide polymorphisms
and chronic lymphocytic leukemia // Cancer Genet. Cytogenet. 2007. 179. (1). 36-44.
10. Majid A., Richards T., Dusanjh P. et al. TP53 codon 72 polymorphism in patients with chronic lymphocytic leukaemia: identification of a subgroup with mutated IGHV genes and poor clinical outcome // Br. J. Haematol. 2011. 153. 529-540.
11. Mitra S., Misra C., Singh R.K. et al. Association of specific genotype and haplotype of p53 gene with cervical cancer in India // J. Clin. Pathol. 2005. 58. 26-31.
12. Sturm I., Bosanquet A.G., Hummel M. et al. TP53 codonon 72 polymorphic variants of p53 are not related to drug resistance and disease prognosis // BMC Cancer. 2005. 5. 105.
13. Tada M., Furuuchi K., Kaneda M. et al. Inactivate the remaining p53 allele or the alternate p73? Preferential selection of the Arg72 polymorphism in cancers with recessive p53 mutants but not transdominant mutants // Cancerogenesis. 2001. 22. (3). 515-517.
14. Weiner A.S., Beresina O.V., Voronina E.N. et al. Polymorphisms in folate-metadolizing genes and risk of non-Hodgkin's lymphoma // Leuk. Res. 2011. 35. 508-515.
15. Wrench D., Waters R., Carlotti E. et al. Clinical relevance of MDM2 SNP 309 and TP53 Arg-72Pro in follicular lymphoma // Haematol. 2009. 94. (1). 148-150.
PREDICTIVE IMPORTANCE OF TESTING OF POLYMORPHIC LOCI ARG72PRO EXON 4 ANTIONCOGENE TP53 IN PATIENTS WITH NON-HODGKING LYMPHOMAS
Elena Nikolaevna VOROPAEVA1, Ol'ga Valer'evna BEREZINA2, Viktor Sergeevich OVCHINNIKOV2, Mikhail Ivanovich VOEVODA1, Tatyana Ivanovna POSPELOVA2
1 Institute of Internal Medicine SB RAMS 630089, Novosibirsk, Boris Bogatkov str., 175/12
2 Novosibirsk State Medical University Minzdrava Russia 630009, Novosibirsk, Krasnyi av., 52
The frequency of Arg72Pro exon 4 antioncogene ТР53 genotypes, as well as their association with the 5-year survival in patients with aggressive and indolent non-Hodgkin's lymphoma (NHL) variants was studied. The statistically significant (p = 0.040) reduction in disease-free survival in patients with aggressive NHL and the Arg/Arg genotype (25 %) when compared with Arg/Pro and Pro/Pro patients (68,8 %) has been revealed. Thus, the testing of single nucleotide polymorphism Arg72Pro in exon 4 gene ТР53 may have a predictive importance for prognosis of survival of patients with aggressive non-Hodgkin's lymphoma.
Key words: non-Hodgkin's lymphoma, genetic polymorphism, ТР53, prognosis, survival.
Voropaeva E.N. — candidate of medical sciences, researcher of laboratory for molecular genetic researches of therapeutic diseases
Berezina O.V. — assistant of the chair for therapy, hematology and blood transfusiology, e-mail: [email protected] Ovchinnikov V.S. — clinical resident of the chair for therapy, hematology and blood transfusiology, [email protected] Voevoda M.I. — corresponding member of RAMS, director
Pospelova T.I. — doctor of medical sciences, professor, head of the chair for therapy, hematology and transfusiology, e-mail: [email protected]
КЛИНИЧЕСКАЯ МЕДИЦИНА
УДК 615.15-006.04:616-018.74
МОЛЕКУЛЯРНО-БИОЛОГИЧЕСКИЕ МЕХАНИЗМЫ РАЗВИТИЯ ЭНДОТЕЛИАЛЬНОЙ ДИСФУНКЦИИ У БОЛЬНЫХ ДИФФУЗНЫМИ В-КРУПНОКЛЕТОЧНЫМИ ЛИМФОМАМИ
Владимир Дмитриевич КОПТЕВ1, Дондок Дамдинович ЦЫРЕНДОРЖИЕВ23, Наталия Валерьевна СКВОРЦОВА2, Ольга Борисовна СЕРЕГИНА2, Юлия Владимировна ДОЛГУШИНА2
1 ФГБО ВПО Новосибирский государственный университет
630090, г. Новосибирск, ул. Пирогова, 2
2 ГБОУ ВПО Новосибирский государственный медицинский университет Минздрава России
630091, г. Новосибирск, Красный пр., 52
3 ФГБУ НИИ клинической иммунологии СО РАМН 630099, г. Новосибирск, ул. Ядринцевская, 14
Проведено исследование функционального состояния эндотелия сосудов, а также сывороточного уровня TNF-a и 1Ь-4 у 30 больных диффузными В-крупноклеточными лимфомами (ДВККЛ) до и после полихимиотерапии (ПХТ). В сыворотке крови больных ДВККЛ до ПХТ выявлено преобладание факторов вазо-констрикции (фактора Виллебранда и эндотелина-1) над стабильными метаболитами вазодилататора оксида азота, а также провоспалительного цитокина TNF-a над 1Ь-4, что свидетельствует о наличии цитокинового дисбаланса и эндотелиальной дисфункции уже в дебюте развития заболевания. После курсов ПХТ содержание фактора Виллебранда и эндотелина-1, а также TNF-a и 1Ь-4 в сыворотке крови больных снижалось, а оксида азота - повышалось, при этом не достигая уровня соответствующих факторов и медиаторов у здоровых доноров. Результаты исследования свидетельствуют о формировании эндотелиальной дисфункции при ДВККЛ, требующей проведения дальнейших реабилитационных мероприятий для улучшения качества жизни больных.
Ключевые слова: диффузные В-крупноклеточные лимфомы, эндотелиальная дисфункция, эндотелин-1, оксид азота, фактор фон Виллебранда, провоспалительные и противовоспалительные цитокины.
В последние десятилетия заболеваемость гемобластозами продолжает неуклонно возрастать [6, 8]. Последние достижения клинической онкологии позволили увеличить количество и продолжительность ремиссий, а также повысить качество жизни больных гемобластозами [18, 21]. Существенные прорывы в онкогемато-логии связаны как с улучшением диагностики опухолей крови на основании молекулярно-био-логических методов верификации опухолевых клонов, так и с широким внедрением в повседневную практику высокоспециализированных многокомпонентных схем полихимиотерапии (ПХТ) [14]. Вместе с тем отсутствие строгой селективности цитостатических препаратов определяет их токсическое действие на нормаль-
ные быстропролиферирующие ткани организма, в том числе на эндотелий сосудов [15].
В научной литературе достаточно широко представлены данные о структурных и функциональных изменениях эндотелия сосудов при таких патологических процессах, как артериальная гипертензия, ишемическая болезнь сердца, инсульт, сахарный диабет, ревматоидный артрит, гестозы, синдром Рейно, системные вас-кулиты и др. [1, 7, 9, 16, 17, 19]. Однако мы не встретили работ, посвященных исследованию функционального состояния эндотелия при ге-мобластозах, в частности, при таких распространенных заболеваниях, как лимфома Ходжкина и неходжкинские злокачественные лимфомы.
Коптев В.Д. - доцент кафедры, e-mail: [email protected]
Цырендоржиев Д.Д. - д.м.н., проф.
Скворцова Н.В. - к.м.н., e-mail: [email protected]
Серегина О.Б. - аспирант
Долгушина Ю.В. - аспирант
