Повышение эффективности и снижение токсичности комбинации цисплатина и этопозида с помощью полисахаридов Tussilago farfara L Текст научной статьи по специальности «Фундаментальная медицина»



9B МАТЕРИАЛЫ КОНФЕРЕНЦИИ «ОТЕЧЕСТВЕННЫЕ ПРОТИВООПУХОЛЕВЫЕ ПРЕПАРАТЫ»

Терапевтический эффект оценивали по стандартным кри- 300, 350, 400, 450 и 500 мкг/мл (конечные дозы в лунках териям экспериментальной химиотерапии. на порядок ниже соответственно) определяли с помощью Результаты. Ормустин значительно и продолжительно МТТ-теста. После инкубации клеток с цисплатином (72 ч) ингибировал рост перевиваемых в далеко зашедшей стадии в каждую лунку добавляли 10 мкл МТТ (бромида 3-(4,5-ди-развития опухолей мышей. Наиболее чувствительными метилтиазол-2-ил)-2,5-дифенилтетразолия) (5 мг/мл) к действию препарата были меланомы. У мышей с мела- и планшеты дополнительно инкубировали в течение 4 ч. номой B16 (V, на начало лечения (8-е сутки) ® 1000 мм3) Далее из планшетов удаляли среду и в каждую лунку добав-Ормустин значительно и продолжительно (при оценке ляли по 150 мкл диметилсульфоксида для растворения по V, — на 52—88 %; при оценке по средней массе опухоли образовавшихся кристаллов формазана. С помощью риде-(на 21-е сутки) — на 48—58 %) ингибировал рост опухоли. ра для иммуноферментного анализа (ChemWell) определя-Наиболее сильное и длительное дозозависимое ингибиру- ли оптическую плотность при 505 нм. ющее действие Ормустин проявил при лечении мышей Результаты. Сравнительный анализ выживаемости опус меланомой B16-F10 (V, при начале лечения на 7-е сутки холевых клеток и клоногенных клеток эпендимомы показал, = 1000 мм3). Препарат дозозависимо вызвал значительную что при воздействии цисплатина в дозе 50 мкг/мл наблюда-регрессию опухоли (до полного исчезновения видимого ется высокая доля жизнеспособных клеток (63—64 %). подкожного узла у всех мышей в группе), однако затем рост По мере увеличения дозы цисплатина выживаемость клеток опухолей возобновился. У мышей с меланомой M3 (V на на- снижается в 2—3 раза. Эффективной дозой цисплатина для чало лечения (12-е сутки) = 1600 мм3) Ормустин также вы- опухолевых клеток эпендимомы является доза 100 мкг/мл, зывал замедление роста опухоли (на 52—61 %). При лече- а для клоногенных клеток — 100, 200 и 500 мкг/мл. нии животных с LLC (V, на 11-е сутки = 2000 мм3) Заключение. В клинической практике для оценки чув-Ормустин дозозависимо и длительно ингибировал рост ствительности клоногенных клеток эпендимомы целесо-карциномы (на 64—84 %). Наиболее устойчив к действию пре- образно использовать МТТ-тест с целью назначения парата был РЛ-67 (V при начале лечения (9-е сутки) = 900 мм3). химиотерапии больным после хирургического удаления Ормустин кратковременно ингибировал (на 50—72 %) рост опухоли головного мозга. РЛ-67. Заключение. Ормустин обладает высоким противоопухо- Е.А. Сафонова1, К.А. Лопатина1,2, А. М. Гурьев3, левым эффектом в отношении перевиваемых в далеко зашед- Е. П. Федорова1, Т. Г. Разина1 Е. П. Зуева1 шей стадии развития опухолей различного гистогенеза. ПОВЫШЕНИЕ ЭФФЕКТИВНОСТИ И СНИЖЕНИЕ Работа выполнена в рамках государственного контракта ТОКСИЧНОСТИ КОМБИНАЦИИ ЦИСПЛАТИНА № 13411.1008799.13.163 от 12.07.2013 «Доклинические исследования И ЭТОПОЗИДА С ПОМОЩЬЮ ПОЛИСАХАРИДОВ противоопухолевого лекарственного средства класса нитрозомочевин». TUSSILAGO FARFARA L. 1ФГБНУ«НИИФиРМ им. Е.Д. Гольдберга», Томск; К.Н. Саунина, Л.Н. Николаевич 2НИ ТГУ, Томск; ИСПОЛЬЗОВАНИЕ МТТ-ТЕСТА 3ГБОУ ВПО СибГМУ Минздрава России, Томск В ПРОГНОЗИРОВАНИИ Введение. Комбинация противоопухолевых препаратов ХИМИОЧУВСТВИТЕЛЬНОСТИ КЛОНОГЕННЫХ «цисплатин + этопозид» является стандартным режимом ОПУХОЛЕВЫХ КЛЕТОК ЭПЕНДИМОМЫ ЧЕЛОВЕКА химиотерапии для пациентов с мелкоклеточным раком лег-ГНУ «Институт физиологии НАНБеларуси», Минск, кого. Полисахариды Tussilago farfara L. (мать-и-мачехи Республика Беларусь обыкновенной) повышают эффективность и снижают ток-Введение. Роль гетерогенности опухоли в прогрессии сичность цитостатиков различного механизма действия при и лекарственной устойчивости злокачественных новоо- монотерапии (экспериментальные данные) и могут стать бразований практически не учитывается в клинической перспективными составляющими схем комбинированно-практике как прогностический (связанный с исходом за- го лечения опухолей. болевания) или предиктивный (предсказывающий непо- Цель исследования — изучение возможности снижения средственную эффективность химиотерапии) маркер. Хотя гематологической токсичности и повышения эффектив-вопрос о терапии гетерогенных новообразований остается ности комбинации цисплатина и этопозида с помощью открытым, одним из подходов, позволяющих преодолеть полисахаридов Tussilago farfara L. проблему внутриопухолевой неоднородности и оценки Материалы и методы. Использованы мыши-самки ли-индивидуальной чувствительности, является диагностика нии С57Bl/6 с перевитой внутримышечно карциномой чувствительности клоногенных клеток к лекарственным легких Льюис. Цисплатин и этопозид в дозах 2,5 и 5 мг/кг средствам. соответственно вводили внутрибрюшинно, 3-кратно Цель исследования — изучить чувствительность клоно- на 10, 12 и 14-е сутки после перевивки, последовательно генных клеток эпендимомы человека к цисплатину. через 10—20 мин. Полисахариды Tussilago farfara L. мыши Материалы и методы. Методом культивирования in vitro получали внутрибрюшинно, с 7-х суток после перевивки опу-были выделены опухолевые клетки из фрагмента ткани холи в дозе 20 мг/кг. Забор крови произведен на 1-е сутки эпендимомы (послеоперационный материал) в первичную после второго и третьего введения цитостатиков. Эффек-культуру, а затем методом клонирования in vitro была вы- тивность лечения оценивали, определяя массу опухоли, делена популяция опухолевых клоногенных клеток эпен- процент торможения ее роста, частоту метастазирования, димомы. Цитотоксичность цисплатина в дозах 50, 100, 200, количество и площадь метастазов в легких. Возможность

№1 I том 15 I 2016 РОССИЙСКИЙ БИОТЕРАПЕВТИЧЕСКИЙ ЖУРНАЛ

МАТЕРИАЛЫ КОНФЕРЕНЦИИ «ОТЕЧЕСТВЕННЫЕ ПРОТИВООПУХОЛЕВЫЕ ПРЕПАРАТЫ»

99

снижения гематологической токсичности оценивали по показателям периферической крови. Статистическую обработку данных проводили с использованием непараметрических критериев Вилкоксона—Манна—Уитни (U) и углового преобразования Фишера (ф).

Результаты. При добавлении в схему полихимиотерапии «цисплатин + этопозид» полисахаридов Tussilago farfara L. значимо снижалась масса опухоли, торможение роста опухоли составило 36 % против 25 % в группе животных, получавших только цитостатики. На 1-е сутки после 2-кратного введения цитостатиков у животных, получавших дополнительно полисахариды, установлено увеличение количества тромбоцитов, эритроцитов и показателя гемоглобина по сравнению с этими значениями в группе полихимиотерапии. Если 2-кратное введение противоопухолевых препаратов достоверно не влияло на количество гранулоцитов в периферической крови животных, то добавление в схему лечения полисахаридов приводило к увеличению этого показателя до уровня контроля. На 1-е сутки после 3-кратного введения цитостатиков под влиянием полисахаридов зафиксировано увеличение общего количества лейкоцитов, количества тромбоцитов, эритроцитов, лимфоцитов и гранулоцитов и показателя гемоглобина относительно этих значений в группе животных, получавших только полихимиотерапию.

Заключение. Проведенные эксперименты доказывают целесообразность включения полисахаридов Tussilago farfara L. в схему цитостатического лечения «цисплатин + это-позид» в целях повышения ее эффективности и снижения гематологической токсичности.

А.В. Семейкин1, Е.Н. Карева1, Т.А. Федотчева1, А.С. Лунина1, В.М. Ржезников2, Н.Л. Шимановский1 АНТИПРОЛИФЕРАТИВНОЕ ДЕЙСТВИЕ ОТЕЧЕСТВЕННОГО ПРОГЕСТИНА БУТЕРОЛА НА КЛЕТКИ ОПУХОЛИ ШЕЙКИ МАТКИ HELA 1ГБОУ ВПО «РНИМУ им. Н.И. Пирогова» Минздрава России, Москва; 2ФГБУ ЭНЦМинздрава России, Москва

Введение. Прогестины широко применяют для терапии рака эндометрия (медроксипрогестерон, мегестрол) и профилактики гормонозависимых гиперплазий тканей репродуктивного тракта женщины (медроксипрогесторон, прогестерон). Известные механизмы их действия включают подавление экспрессии эстрогеновых рецепторов (преимущественно типа а) в ткани-мишени. Недостаточная эффективность делает актуальным расширение спектра существующих препаратов этого класса.

Цель исследования — изучить влияние нового отечественного лиганда рецепторов прогестерона, 17а-ацетокси-3р-бутаноилокси-6-метил-прегна-4,6-диен-20-она (бутерола) и препаратов сравнения — прогестерона (Р4) и медрокси-прогестерона ацетата (МПА) на жизнеспособность клеток рака шейки матки HeLa и экспрессию в них гена эстроге-нового рецептора типа а (ERa).

Материалы и методы. Исследуемые соединения вносили в лунки плоскодонного 96-луночного планшета (Costar) с культурой HeLa до конечных концентраций 10-7—10-5 М при сроке инкубации 7 сут. Пролиферацию клеток культу-

ры оценивали при помощи МТТ-теста на планшетном фотометре «Униплан» («Пикон», Россия). Экспрессию мРНК ERa в клетках после инкубации в течение 7 сут оценивали методом полимеразной цепной реакции в реальном времени с использованием амплификатора фирмы BioRad (США). Данные обрабатывали с использованием программ Microsoft Office Excel 2007 и GraphPad Prizm 5.0.

Результаты. Максимальное подавление пролиферации клеток культуры HeLa наблюдалось в присутствии бутерола (38,5—52,1 %). Бутерол достоверно (в среднем на 15,0— 26,1 %) превосходил по антипролиферативной активности Р4 и МПА во всех концентрациях (p < 0,05). Суммируя данные по действию соединений во всех изученных концентрациях (10-7-10-5 М), был построен ряд исследуемых веществ по убыванию антипролиферативной активности: бутерол > Р4 = МПА. Все соединения в концентрации 10-6 М вызывали снижение экспрессии гена ERa в клетках HeLa на 83,4—98,6 % (р = 0,05). Бутерол вызывал весьма значительное подавление экспрессии гена ЕRa (в среднем на 83,4 % относительно контроля), однако оно было достоверно меньше (в среднем на 10,3 %), чем аналогичный показатель для препаратов сравнения (МПА — на 94,1 %, Р4 — на 93,3 %), что указывает на возможность опосредования его цитостатического эффекта также влиянием на другие факторы роста и апоптоза.

Заключение. Отечественный прогестин бутерол превосходит прогестерон и МПА по антипролиферативной активности на клетках рака шейки матки человека и является перспективным соединением для дальнейшего изучения с целью получения нового эффективного препарата для гормонотерапии гиперпластических процессов тканей-мишеней репродуктивного тракта женщины.

A.В. Сергеев1, Ю.М. Букреев1, И.М. Лученко1,

B.В. Решетникова1, Н.Ю. Соколов2, И.Ж. Шубина1 ПЕРСПЕКТИВЫ СОЗДАНИЯ НОВОГО ПОКОЛЕНИЯ СРЕДСТВ ХИМИОПРОФИЛАКТИКИ РАКА

ФГБУ «РОНЦим. Н.Н. Блохина» Минздрава России, Москва; 2ФГУ«ГВКГим. Н.Н. Бурденко» Минобороны России, Москва

Введение. Предупреждение возникновения злокачественных новообразований является приоритетным направлением онкологии, и разработке средств химиопро-филактики рака (ХПР) уделяют все больше внимания. Полиеновые соединения (ПС) — ретиноиды, каротиноиды, убихинон и др. — обладают антиканцерогенными, антимутагенными и другими свойствами, которые позволяют рассматривать их в качестве потенциальных средств ХПР.

Цель исследования — изучение возможности создания средств ХПР на основе ПС, растительных экстрактов и микроэлементов.

Материалы и методы. Использованы ранее разработанные нами препараты: Каскатол (КС), Каскорутол, Коэн-зим Q-10 плюс (КК) и др. Экстракты шиповника, эхинацеи и других растений получены по специальной технологии. Использованы органические соединения Мg, Zn и других элементов. Иммунологические методы оценки гуморального и клеточного иммунитета описаны нами ранее.

Результаты. Разработаны новые препараты Биоэнер-готоник 01-03 (БЭ-1) и БЭ 01-05 (БЭ-2) на основе экс-

№1 I том 15 I 2016

РОССИЙСКИЙ БИОТЕРАПЕВТИЧЕСКИЙ ЖУРНАЛ