CC BY
10
9. Keith C Meyer. Pulmonary fibrosis, part I: epidemiology, pathogenesis, and diagnosis. Expert Review of Respiratory Medicine. 2017;11(5).
10. Mora AL, Bueno M, Rojas M. Mitochondria in the spotlight of aging and idiopathic pulmonary fibrosis. J Clin Invest. 2017 Feb 1;127(2):405-14. doi: 10.1172/JCI87440. Epub 2017 Feb 1.
11. Richeldi L, Collard HR, Jones MG. Idiopathic pulmonary fibrosis. Lancet. 2017 May 13;389(10082):1941-52. doi: 10.1016/S0140-6736(17)30866-8. Epub 2017 Mar 30.
12. Suzuki A, Kondoh Y. The clinical impact of major comorbidities on idiopathic pulmonary fibrosis. Respir Investig. 2017 Mar;55(2):94-103. doi: 10.1016/j.resinv.2016.11.004. Epub 2017 Jan 14.
13. Walkoff L1, White DB1, Chung JH2, Asante D3, Cox CW1. The Four Corners Sign: A Specific Imaging Feature in Differentiating Systemic Sclerosis-related Interstitial Lung Disease From Idiopathic Pulmonary Fibrosis.J Thorac Imaging. 2018 Jan 16. doi: 10.1097/RTI.0000000000000319. [Epub ahead of print]
♦
УДК 616.233-002-007.272-053.2-039.35:575.22 https://doi.org/10.26641/2307-0404.2018.1(part 1).127212
О.В. Кенс1, , ПОШУК МОЛЕКУЛЯРНО-ГЕНЕТИЧНОГО
O.3. Гнатшко^ ^ МАРКЕРА СХИЛЬНОСТ1
Н.СЛу^яненш ', до ПОВТОРНИХ ЕП1ЗОД1В ГОСТРОГО
ЬеРгтРавм ОБСТРУКТИВНОГО БРОНХ1ТУ В Д1ТЕЙ
ДУ «1нститут спадково' патологП НАМН Укра'ни»1
(дир. - проф. О.З. Гнатейко)
вул. Лисенка, 31а, Львiв, 79008, Укра'на
Львiвський нацюнальний медичний утверситет M. Данила Галицького 2
кафедра пропедевтики педiатрii та медично' генетики
(зав. - проф. О.Л. Личювська)
вул. Пекарська, 69, Львiв, 79010, Укра'та
КЗ «Обласна дитяча клшчна лжарня «Охматдит ЛОР» 3
вiддiлення nульмоно-алергологiчне
(зав. - В. I. Бергтравм)
вул. Лисенка, 31, Львiв, 79008, Укра'та
SI "Institute of hereditary pathology of the National academy of medical sciences of Ukraine" 1
Lysenko str., 31a, Lviv, 79008, Ukraine
Lviv National Medical University named after D. Halytskyi 2
Department of propedeutics of pediatrics and medical genetics
Pekarska str., 69, Lviv, 79010, Ukraine
Municipal Institution Regional Children's Clinical Hospital "OKHMATDYT" 3 Lysenko str., 31, Lviv, 79008, Ukraine e-mail: [email protected]
Ключовi слова: молекулярно-генетичне тестування, дiти, полiморфiзм С-33Т гена IL4, повторш етзоди гострого обструктивного бронхту
Key words: molecular genetic testing, children, IL4 gene C-33T polymorphism, repeated episodes of acute obstructive bronchitis
Реферат. Молекулярно-генетическое тестирование однонуклеотидного полиморфизма С-33Т гена IL4 у детей с повторными эпизодами острого обструктивного бронхита. Кенс Е.В., Гнатейко О.З., Лукьяненко Н.С., Бергтравм В.И. Проведено молекулярно-генетическое тестирование однонуклеотидного полиморфизма С-33Т гена IL4 35 детям с повторными эпизодами острого обструктивного бронхита и 35 детям с острым бронхитом. Доказано, что наличие у ребенка генотипа 33СТIL4 увеличивает риск возникновения повторных эпизодов острого обструктивного бронхита в 4 раза.
Abstract. Molecular-genetic testing of single-nucleotide polymorphism C-33T of IL4 gene in children with recurrent episodes of acute obstructive bronchitis. Kens O.V., Gnateyko O.Z., Lukyanenko N.S., Bergtravm V.I.
The molecular genetic testing of the IL4 gene of a single nucleotide polymorphism C-33T was performed in 35 children with recurrent episodes of acute obstructive bronchitis and 35 children with acute bronchitis. It has been proved that the presence of a child's genotype 33СТIL4 increases the risk of recurrent acute obstructive bronchitis by 4 times.
У структурi захворюваност дтей вщ 0 до 14 роюв захворювання оргашв дихання посщають перше мюце та становлять 62,0-65,0%. За останш десять роюв частота патологи бронхолегенево! системи в дтей збшьшилася в 3,6 разу, пере-важно за рахунок гострих та рецидивуючих запальних захворювань верхшх та нижшх дихальних шляхiв [2].
Разом з високим рiвнем захворюваносп на гос^ ресшраторш захворювання (ГРЗ), у дтей, що часто хвордать, наявна висока частота гострого обструктивного бронх^у (ГОБ), який, за даними рiзних авторiв, виникае в 10,0-30,0% дггей, що значно ускладнюе процес лшування таких дтей в амбулаторних умовах. Чимало па-щенпв ще! групи вимагають стацюнарного лшу-вання, що у свою чергу е не лише економiчно не-вигiдним для держави, а i стресовою ситуацiею як для дитини, так i И батьюв [3].
У випадках повторних (2-3 рази та бшьше протягом року) епiзодiв бронхiту з бронхо-обструктивним синдромом (БОС) мова йде про повторш етзоди ГОБ [1].
На цей час вщомо, що в межах кожно! по-пуляци в iндивiдуумiв iснують спадковi варiацi! в послщовност ДНК, так званi полiморфiзми, якi зустрiчаються в людському геномi з частотою 1 на 1000 пар основ. Незважаючи на таку роз-повсюдженiсть, лише невелика частина з них е функцюнально значущою, тобто призводить до змiни продукци бiлкiв, у тому числi цитоюшв, тим самим визначаючи iндивiдуальну вщповщь органiзму на пошкоджуючi фактори.
Ген 1Ь4 часто називають «критичним цитокь ном запалення». Протизапальний цитокiн, вш активуе гуморальний iмунiтет, контролюе прол> ферацiю та диференцiацiю В-клiтин i Т-хелперiв, посилюе вироблення iмуноглобулiну Е, що може провокувати розвиток алерпчних реакцiй та запалення дихальних шлях1в. Крiм того, вiн шдвищуе цитоюнетичну активнiсть макрофагiв, сприяе м^ацп у вогнище запалення нейтрофiлiв, посилюе продукщю колонiестимулюючих факторiв [6].
Найбшьш функцiональнi значення мають по-лiморфiзми С-590Т, С-33Т гена 1Ь4. У рядi до-слiджень показана асощащя цих полiморфiзмiв з розвитком ряду захворювань, таких як атотчна бронхiальна астма, хронiчне обструктивне захворювання легешв [5, 7].
Ц даш говорять про те, що ген 1Ь4 вiдiграе важливу роль у розвитку запально! реакци будь-якого генезу, а також бере безпосередню участь в регуляци iмунно! вщповщ. Саме тому до-слiдження полiморфних варiантiв цього гена е надзвичайно важливим у дiтей з частими ГРЗ та повторними ешзодами ГОБ.
Отже, проблема виявлення дтей з повторними ешзодами гострого обструктивного брон-хггу i пiдвищеним ризиком формування в них бронхiально! астми е актуальною та перспективною. Впровадження методiв ранньо! дiагно-стики дозволить проводити своечасш лiкування i профiлактику ГОБ, що сприятиме зменшенню захворюваностi дiтей.
Мета - пошук молекулярно-генетичного маркера, асоцiйованого з тдвищеною схильнiстю дiтей до повторних епiзодiв гострого обструктивного бронх^у.
МАТЕР1АЛИ ТА МЕТОДИ ДОСЛ1ДЖЕНЬ
Обстежено 59 дггей у вiцi вщ 2 до 8 рокiв з повторними ешзодами ГОБ (1-ГОБ) та 35 дтей такого ж вiку, яю хворiли на гострий бронхiт (ГБ) не частше 1-2 разiв на рш i склали групу порiвняння (11-ГБК). Всi дiти знаходилися на ста-цiонарному лiкуваннi в пульмоно-алерголопч-ному вщцшенш КЗ ЛОР ЛОДКЛ «ОХМАТДИТ». Молекулярно-генетичне дослiдження провели 35 дгам з повторними епiзодами ГОБ (1-ГОБ), його результати порiвнювали з даними 35-ти дтей з ГБ (11-ГБК).
Матерiалом для дослiдження служила ДНК, видшена з лейкоцитiв перифершно! кровi пащен-тiв. Специфiчнiсть продукпв ПЛР та аналiз рест-риктних фрагментiв проводився шляхом електро-форезу в 2-3% агарозному гелi протягом 30-40 хви-лин при напрузi 100 V. Електрофореграма
сканувалась на ультрафюлетовому трансшю-мшаторг Отримаш сигнали порiвнювались з маркерами довжин i на ochobî цього детекту-вались poзмipи отриманих фpaгментiв [4]. Зпдно з вимогами з бюетики "Про проведення лабора-торних дослщжень бioлoгiчнoгo матерГалу", вiд бaтькiв кожно1 дитини отримана письмова згода на дослщження бioмaтеpiaлу.
Клiнiчнa частина роботи виконувалась на бaзi пульмoнo-aлеpгoлoгiчнoгo вщдшення КЗ ЛОР ЛОДКЛ «ОХМАТДИТ», молекулярно-генетичне дoслiдження виконане в Деpжaвнiй устaнoвi «1нститут спадково1 пaтoлoгiï НАМН Украши» (директор - д. мед. н., проф. О.З. Гнатейко).
Результати статистично обробили на персональному кoмп'ютеpi з використанням програм Microsoft Excel 7,0 та з обчисленням значень се-
pедньoï apифметичнoï (М), помилки сеpедньoï apифметичнoï (m), кpитеpiю Стьюдента (t), ступеня вipoгiднoстi (p), критерда Пipсoнa (х2) та вщношення шaнсiв (OR). Статистично значу-щими вважали вiдмiннoстi при р<0,01 та p<0,05.
РЕЗУЛЬТАТИ ТА ÏX ОБГОВОРЕННЯ
Пopiвнювaнi групи дiтей не мали вщмш-ностей у poзпoдiлi за вшом та статтю. У двох групах дiтей була приблизно однакова кшьюсть хлoпчикiв та дiвчaтoк (58,0% та 42,0%), вшом вiд двох до восьми роюв.
Пopiвняльний aнaлiз клiнiчнoгo стану обсте-жених дГтей з повторними епiзoдaми ГОБ та дГтей з ГБ за даними ктшчного, pентгенoлoгiч-ного огляду та лабораторними показниками по-даний у таблиц 1.
Таблиця 1
Пор1вняльний аналп кл1н1чного стану д1тей 2-8 рок1в з повторними еп1зодами гострого обструктивного бронхггу з даними д1тей групи пор1вняння з гострим бронх1том
Клшчш прояви Частота кл1тчних та лабораториях ирояв1в у групах датей
1-ГОБ II-ГБК
n=59 q n=35 q
Блздтсть шк1рних покривш 39 0,66* 7 0,20
Зниження сатураци 36 0,61* — —
Аускультативн1 зм1ни 54 0,92* 5 0,14
Коробковий перкуторний звук 51 0,86* — —
Рентгенолог1чн1 ознаки бронхпу 44 0,75* 10 0,29
Лейкоцитоз 16 0,27 12 0,34
Еозиноф1л1я 31 0,53* 4 0,11
Л1мфоцитоз 34 0,58** 9 0,26
Пpимiтки: * — вipoгiднa piзниця показника мГж даними дiтей з повторними ешзодами ГОБ та дiтей групи пopiвняння; р<0,01, ** -вipoгiднa piзниця показника мiж даними дггей з повторними епiзoдaми ГОБ та дггей групи пopiвняння, р<0,05, q — частота вiдхилення параметра вщ норми чи вiд референтного значення.
Проведене дослщження показало, що в дггей з повторними епiзoдaми ГОБ достовГрно високою була частота ктшчних проявГв гiпooксигенaцiï: блщють шюрних покривГв, зниження сатураци, аускультативних (таких як сухГ свистячГ хрипи) та перкуторних змш у легенях, рентгенолопчних ознак обструктивного брониту, еозинофши та лГмфоцитозу в загальному аналГзГ кровГ, порГв-няно з даними дГтей з ГБ (табл. 1).
На наступному етат роботи проводилося молекулярно-генетичне дослщження полГморф-ного локусу С-33Т гена IL4 у дГтей з повторними ешзодами ГОБ порГвняно з даними дГтей з ГБ. Отримаш результати представлено в таблищ 2.
Зареестровано достовГрно вищу частоту генотипу 33СТ у дГтей з повторними ешзодами ГОБ порГвняно з даними дГтей з ГБ (63,0% проти 29,0% в грут порГвняння, р<0,01).
Встановлено достовiрно вищу частоту генотипу СС у д^ей з ГБ ropiBHHTO з даними д^ей з повторними епiзодами ГОБ (51,0% проти 26,0% у грут дтей з повторними епiзодами ГОБ, р<0,05).
Проведене дослiдження показало, що наяв-нiсть у дитини генотипу 33СТ IL4 асоцшована зi схильшстю до розвитку повторних епiзодiв ГОБ у дтей та збiльшуe ризик 'х виникнення в 4 рази (OR 4,23, 95% CI 1,55 - 11,55).
Таблиця 2
Анал1з розподшу генотишв за пол1морфним локусом C-33T гена IL4
Генотипи I-ГОБ, n=35 11-ГБК, n=35 X2 P OR, 95% CI
n % n %
CC 9 26,0** 18 51,0 4,88 <0,05 0,89 (0,34-2,32)
CT 22 63,0* 10 29,0 8,29 <0,01 4,23 (1,55-11,55)
TT 4 11,0 7 20,0 0,97 >0,05 0,52 (0,14-1,95)
Прим1тки: * - в1рогщна р1зниця показника м1ж даними дггей з повторними ГОБ та дггей групи пор1вняння, р < 0,01, ** р1зниця показника м1ж даними дггей з повторними ешзодами ГОБ та дггей групи пор1вняння, р < 0,05.
ыропдна
П1ДСУМОК
У дiтей з повторними ешзодами гострого обструктивного бронх^ порiвняно з даними дiтей з гострим бронх^ом дiагностована до-стовiрно вища частота таких клiнiчниx проявiв, як блщють, наявнiсть xрипiв при аускультаци, коробковий перкуторний звук, зниження сату-раци О2, еозинофiлiя та лiмфоцитоз, рентгеноло-
гiчнi ознаки бронxiту. Доведено, що наявшсть у дитини генотипу 33СТ гена IL4 збшьшуе ризик виникнення повторних епiзодiв гострого обструктивного бронх^у в 4 рази. А носшство генотипу 33СС у дггей е протективним по вiдношенню до повторних епiзодiв гострого обструктивного бронх^у.
СПИСОК Л1ТЕРАТУРИ
1. Жукова О.В. Распределение расходов на фармакотерапию острого обструктивного бронхита у детей в реальной клинической практике с учетом фармакоэкономических исследований / О.В. Жукова, С.В. Кононова, Т.М. Конюшкина // Фарматека. - 2013. - № 18. - С. 29-33.
2. Захворювання оргашв дихання в практищ а-мейного лжаря / В.М. Ждан, Л.1. Гурша, М.Ю. Баба-нiна [та 1н.]. - Кшв; Полтава, 2008. -3 с.
3. Маланичева Т.Г. Терапия рецидивирующих бронхитов у детей с частыми респираторными заболеваниями, имеющих нарушения микробиоценоза носоглотки / Т.Г. Маланичева, А.М. Закирова, А.Г. Овчинникова // Лечащий врач. - 2014. - №. 9. - С. 26-29.
4. Trajkov D. Association of cytokine gene polymorphisms with chronic obstructive pulmonary disease in Macedonians / D. Trajkov, J. Mirkovska-Stojkovikj,
A. Petlichkovski // Iran. J. Allergy, Asthma Immunol. -2009. - Vol. 8, N 1. - P. 31-42.
5. Immunological parameters and gene polymorphisms (C-590T IL4, C-597A IL10) in severe bronchial asthma in children from the Krasnoyarsk region, west Siberia / M. Smolnikova, S. Smirnova, M. Freidin [et al.] // Inter. J. Circumpolar Health. - 2013. - Vol. 72. - P. 72-78.
6. Relationship between polymorphisms in IL4 and asthma in Japanese women: the Kyushu Okinawa Maternal and Child Health Study / Y. Miyake, K. Tanaka, M. Arakawa [et al.] // J. Investigational Allergol. Clin. Immunol. - 2013. - Vol. 23, N 4. - P. 242-247.
7. Yang H. J. Association between the interleukin-4 gene C-589T and C-33T polymorphisms and asthma risk: a meta-analysis / H. J. Yang // Arch. Med. Res. - 2013. -Vol. 44. - P. 127-135.
REFERENCES
1. Zhukova OV, Kononova SV, Konyushkina TM. [Distribution of expenses for pharmacotherapy of acute obstructive bronchitis in children in real clinical practice, taking into account pharmacoeconomic studies]. Farma-teka. 2013;18:29-33. Russian.
2. Zhdan VM, Gurina LI, Babanina Myu, et al. [Diseases of the respiratory organs in the practice of a family doctor]. Poltava. 2008;3. Ukrainian.
3. Malanicheva TG, Zakirova AM, Ovchinniko-va AG. [Therapy of recurrent bronchitis in children with
frequent respiratory diseases, with disturbances in the microbiocenosis of the nasopharynx]. Lechashchiy vrach. 2014;9:26-29. Russian.
4. Trajkov D, Mirkovska-Stojkovikj J, Petlichkovski F. Association of cytokine gene polymorphisms with chronic obstructive pulmonary disease in Macedonians. Iran J Allergy Asthma Immunol. 2009;8(1):31-42.
5. Smolnikova M, Smirnova S, Freidin M and other. Immunological parameters and gene polymorphisms (C-590T IL4, C-597A IL10) in severe bronchial asthma in
children from the Krasnoyarsk region, west Siberia. Int J Circumpolar Health. 2013;72:72-78.
6. Miyake Y, Tanaka K, Arakawa M and other. Relationship between polymorphisms in IL4 and asthma in Japanese women: the Kyushu Okinawa Maternal and Child Health Study. J Investig Allergol Clin Immunol. 2013;23(4):242-7.
7. Yang HJ. Association between the interleukin-4 gene C-589T and C-33T polymorphisms and asthma risk: a meta-analysis. Med Res Arch. 2013;44:127-35.
♦
УДК 618.11-008.6-092.9:547.993:661.693 https://doi.org/10.26641/2307-0404.2018.1(part 1).127240
ПPOТEKТИBHИЙ ЕФЕ^Г ЦИТPAТУ TEPMAHTO ОТИ EHДOТOKСИH-IHДУKOBAHIЙ OBAPIAЛЬHIЙ ДИСФУЖЦП В МИШЕЙ P.I. Янчй 1
1нститут фiзiологiï iм. О.О.Богомольця HAH У^ати 1 вул. Богомольця, 4, Кшв, 01024, У^а'та TOB «Нанотехнологп i наноматеpiали» 2 вул. Казимиpа Малевича, 84, Кшв, 03150, У^аша Bogomoletz Institute of Physiology of NAS of Ukraine 1
Bogomoletz str., 4, Kyiv, 01024, Ukraine"Nanomaterials andNanotechnologies" LTD 2 Kazimir Malevich str., 84, Kyiv, 03150, Ukraine e-mail: [email protected]
Kлючoвi става: цитpат геpманiю, лiпополiсаxаpид, ооцити, клтини гpанульози, ушкодження ДНК, апоптоз, не^оз
Key words: germanium citrate, lipopolysaccharide, oocytes, granulosa cells, DNA damage, apoptosis, necrosis
Peфeрат. Прoтeктивный эффeкт цитрата германия при эндoтoкcин-индуцирoваннoй (шарма, imioíí дисфункции у мышеи. ^ндрацкая ЕА., Грушка КГ., Kаплунeнкo BX., Павлoвич С.И., Срибна B.A., Янчий P.E.
Известно, что эндотоксин гpаммнегативныx бактеpий - липополисаxаpид (ЛПС) вызывает наpушение pеnpо-дуктивной функции у женщин. Oваpиальную дисфункцию ^и эндотоксемии воспpоизводили введением ЛПС самкам мышей (3 мг/кг) и исследовали возможное пpотективное действие цитpата геpмания (Ge), полученного с помощью нанотехнологии. Введение ЛПС пpиводило чеpез 24 часа к патологическим изменениям в яичниках: угнетению мейотического созpевания ооцитов in vitro, повpеждению ДНК в клетках гpанулезы (по оценке методом ДНК-комет) и снижению их жизнеспособности за счет усиления как не^оза, так и апо-птоза. Пpедобpаботка мышей цитpатом Ge (100 мкг/кг, внутpибpюшинно дважды: за 24 и 1 час до ЛПС) эффективно снижала генотоксический стpесс и клеточную гибель. Инъекции цитpата Ge в условиях действия
О.А. Кондрацька 1, Н.Г. Грушка 1,
B.Г. Каплуненко 2,
C.I. Павлович 1, В. О. Срiбна 1,
