CC BY
31
74
Оригинальные статьи
ПОЛИАКРИЛАТ ЗОЛОТА: ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОЕ ИЗУЧЕНИЕ ПРОТИВООПУХОЛЕВОЙ АКТИВНОСТИ
Л.А. Островская1, Д.Б. Корман1, Н.В. Блюхтерова1, М.М. фомина1, В.А. Рыкова1, А.К. Чигасова1,
Е.И. Некрасова1, К.А. Абзаева2, О.О. Рябая3, Ж.П. Бурмий4
и
1ФГБУНИнститут биохимической физики им. Н.М. Эмануэля РАН; Россия, 119334 Москва, ул. Косыгина, 4; 2ФГБУНИркутский институт химии им. А.Е. Фаворского СО РАН; Россия, 664033 Иркутск, ул. Фаворского, 1; 3ФГБУ«Национальный медицинский исследовательский центр онкологии им. Н.Н. Блохина» Минздрава России;
Россия, 115478 Москва, Каширское шоссе, 24; 4ФГБУНИнститут проблем технологии микроэлектроники и особо чистых материалов РАН; Россия, 142432Московская обл., Черноголовка, ул. Академика Осипьяна, 6
Контакты: Лариса Анатольевна Островская [email protected]
Введение. Изучение металлоорганических соединений в качестве потенциальных противоопухолевых препаратов является одним из весьма перспективных направлений исследований в области экспериментальной и клинической онкологии. Цель исследования — доклиническое изучение противоопухолевой активности препарата полиакрилата золота (аурумакрил), относящегося к новому для онкологии классу соединений металлополиакрилатов.
Материалы и методы. Противоопухолевая активность аурумакрила определялась по торможению роста солидных опухолей мышей (карцинома легких Льюис, аденокарцинома толстой кишки Акатол, аденокарцинома молочной железы Са-755). Цито-токсичность препарата оценивалась с использованием стандартного МТТ-теста в отношении клеточных культур опухолей человека (меланома Mel Мо, рак молочной железы MCF-7, рак легкого А549, аденокарцинома толстой кишки НСТ116). Влияние аурумакрила на пролиферацию опухолевых клеток MCF-7 изучено с использованием маркера клеточного деления (белок Ki-67). Фармакокинетика аурумакрила исследована путем измерения содержания золота в тканях опухоли (карцинома легких Льюис) и органов мышей (кровь, печень, почки, легкие, селезенка, мозг) с помощью метода масс-спектрометрии с индуктивно-связанной плазмой.
Результаты. Аурумакрил вызывает торможение развития солидных опухолей мышей на 80—90 % in vivo, гибель 60—90 % клеток опухолей человека in vitro, а также потерю репродуктивной способности клетками выжившей фракции линии MCF-7. Установлено распределение аурумакрила в организме животных опухоленосителей.
Заключение. Полученные данные о противоопухолевой активности, клеточных эффектах и фармакокинетике аурумакрила свидетельствуют о перспективности дальнейшего изучения препарата в качестве потенциального противоопухолевого средства.
Ключевые слова: полиакрилат золота (аурумакрил), экспериментальная противоопухолевая химиотерапия
Для цитирования: ОстровскаяЛ.А., Корман Д.Б., Блюхтерова Н.В. и др. Полиакрилат золота — экспериментальное изучение противоопухолевой активности. Российский биотерапевтический журнал 2020;19(4):74—85.
AURUM POLYACRYLATE: THE EXPERIMENTAL STUDY OF THE ANTITUMOR ACTIVITY
L.A. Ostrovskaya1, D.B. Korman1, N. V. Bluhterova1, M.M. Fomina1, V.A. Rikova1, A.K. Chigasova1, E.I. Nekrasova1,
K.A. Abzaeva2, O.O. Riabaya3, J.P. Burmiy4
'N.M. Emanuel Institute of Biochemical Physics, Russian Academy of Sciences; 4 Kosigin St., Moscow 119991, Russia; 2A.E. Favorsky Irkutsk Institute of Chemistry, Siberian Branch of the Russian Academy of Sciences;
1 Favorsky St., Irkutsk 664033, Russia; 3N.N. Blokhin National Medical Research Center of Oncology of the Ministry of Health of Russia; 24 Kashirskoe Shosse, Moscow 115478, Russia; 4Institute of Microelectronic Technology and Ultra-High-Purity Materials Russian Academy of Sciences; 6Academician Osipian St., Chernogolovka 142432, Russia
Introduction. The investigation of metal substituted organic compounds as potential antitumor drugs is one of the promising areas of research in experimental and clinical oncology.
Objective. The pre-clinical study of the original antitumor drug aurum polyacrylate (aurumacryl) which belongs to such new for oncology group of compounds as polyacrylates of metals was the aim of this work.
DOI: 10.17650/1726-9784-2020-19-4-74-85
<cc)
Оригинальные статьи 75
Materials and methods. Aurumacryl antitumor activity was determined as the tumor growth inhibitory effect against some of the murine solid tumors (Lewis lung carcinoma, Acatol adenocarcinoma and Ca-755adenocarcinoma). Drug cytotoxic effect against some of the human tumor cells (Mel-Mo melanoma, A549 lung carcinoma, MCF-7 breast carcinoma, HCT116 colon adenocarcinoma) was evaluated with standard МТТ-test. The aurumacryl pharmacokinetics in tumor bearing mice (Lewis lung carcinoma) was studied. The inductively coupled plasma mass spectrometry method was used for the estimation of the aurum maintenance in the tested tissues (tumor, blood, kidneys, liver, lungs, spleen, brain). Results. The 80—90 % tumor growth inhibitory effect of aurumacryl against some solid tumors in mice had been revealed in vivo as well as the death of the 60—90 % human tumor cells of various origins in vitro. Beside this the strong decrease of the number of proliferating MCF-7 tumor cells had been shown. The distribution of aurumacryl in the body of the mice with the solid tumor had been revealed. Conclusion. On the base of the data obtained the further study of the aurumacryl as a potential antitumor agent seems rather promising. Key words: aurum polyacrylate (aurumacryl), experimental antitumor chemotherapy For citation: Ostrovskaya L.A., Korman D.B., Bluhterova N. V. et al. Aurum polyacrylate — the experimental study of the antitumor activity. Rossiyskiy bioterapevticheskiy zhurnal = Russian Journal of Biotherapy 2020;19(4):74—85. (In Russ.). Введение ные полиакриловой кислоты, синтезированные под Одним из весьма перспективных направлений руководством академика М.Г. Воронкова в Иркут-исследований в области биомедицинской химии, ском институте химии им. А.Е. Фаворского СО РАН экспериментальной и клинической онкологии при- [9, 10]. знано изучение металлоорганических соединений Проведенное экспериментальное исследование в качестве потенциальных противоопухолевых пре- зависимости «структура — эффект» в ряду более чем паратов [1]. Интерес к металлоорганическим соеди- 20 металлополиакрилатов, позволило впервые обна-нениям, особенно к структурам, содержащим благо- ружить противоопухолевую активность полимерных родные металлы, в значительной мере обусловлен комплексных соединений, содержащих благородные открытием высокой противоопухолевой активности металлы [9—12]. Наиболее эффективным среди прев ряду комплексных соединений платины, широко паратов этого ряда оказался полиакрилат золота применяющихся в современной химиотерапии опу- (аурумакрил), проявивший значительную противо-холей [2, 3]. опухолевую активность в отношении перевиваемых Исследования последних лет выявили значи- опухолей животных in vivo и стабильных клеточных тельную противоопухолевую активность металло- линий опухолей человека in vitro [13—15]. органических соединений, содержащих другой ме- В данной статье обобщены результаты экспери-талл платиновой группы — золото. Показано, что ментального доклинического исследования аурум-золотосодержащие соединения обладают высокой акрила в качестве потенциального противоопухоле-цитотоксической активностью в отношении ряда ста- вого агента, включающие оценку противоопухолевой бильных клеточных линий опухолей человека in vitro, и цитотоксической активности полиакрилата золота а также значимой противоопухолевой активностью в условиях in vivo и in vitro, изучение определенных в отношении опухолей животных in vivo [4—6]. Осо- аспектов механизма действия препарата и определе-бый интерес золотосодержащие вещества вызывают ние его фармакокинетики в организме животных в связи с тем, что предполагаемые мишени, на кото- опухоленосителей. рые направлено их действие (митохондриальная тио- Цель исследования — доклиническое изучение редоксин редуктаза), и механизмы этого действия противоопухолевой активности препарата полиакри-(повреждение митохондриальной мембраны), отли- лата золота (аурумакрил), относящегося к новому чают эти соединения от известных, клинически апро- для онкологии классу соединений металлополиакри-бированных лекарственных средств (ЛС). Характерные латов. химические свойства этих соединений, обусловленные наличием иона золота, определяют их особый Материалы и методы фармакологический профиль и механизмы дейст- Препарат. Исследуемое вещество с условным на-вия [7, 8]. званием аурумакрил представляет собой неполную Среди значительного многообразия изученных металлическую соль полиакриловой кислоты, содер-в последние годы металлоценов определенный инте- жащую ионы трехвалентного золота (массовая доля рес представляют металлопроизводные полиакрило- металла 8,03 мас. %). Общая формула (-CH2-вой кислоты, относящиеся к новой для онкологии CHCOOH—)n(—CH2CHCOOAuQ3H—)m, где n = 1263; группе соединений, ранее в этом направлении не изу- m = 124. Молекулярная масса 100—300 кДа. ИК-спект-чавшихся. В качестве потенциальных цитостатиков ры препарата содержат полосы поглощения карбок-нами впервые были исследованы металлопроизвод- сильной, карбоксилатной групп при 1720, 1570 см-1.
4'2020 том 19 | vol. 19 РОССИЙСКИЙ БИОТЕРАПЕВТИЧЕСКИЙ ЖУРНАЛ | RUSSIAN JOURNAL OF BiOTHERAPY
76 Оригинальные статьи
Субстанция аурумакрила — стекловидные пластинки ген-положительная карцинома молочной железы желтого цвета, хорошо растворимые в воде [16]. В ус- (линия MCF-7), меланома (линия Mel Мо), эпите-ловиях in vivo аурумакрил вводился животным в вод- лиоидный рак легкого (линия А549), аденокарцино-ном растворе внутрибрюшинно (в/б) в суточной дозе ма толстой кишки (линия НСТ116), полученных из 20 мг/кг, ежедневно, 5-кратно, начиная со следующих банка опухолей ФГБУ «Национальный медицинский суток после перевивки опухоли. Оценка цитотокси- исследовательский центр онкологии им. Н.Н. Бло-ческого эффекта аурумакрила in vitro проведена при хина» Минздрава России. Цитотоксичность аурума-применении препарата в концентрациях 1,0; 0,250; крила оценивалась путем определения доли выживших 0,125 и 0,060 мг/мл. Диапазон исследовавшихся кон- клеток по отношению к контролю с использованием центраций аурумакрила был лимитирован раствори- стандартного МТТ-теста [17] в соответствии с ранее мостью препарата в воде. описанной методикой [18]. Лабораторные животные. Эксперименты прове- Изучение влияния аурумакрила на пролифера-дены на инбредных линейных мышах BDFt — гибри- цию опухолевых клеток проведено иммуноцитохи-ды первого поколения ft(C57Bl/6 х DBAj), а также мическим методом с использованием маркера кле-мышах линии Balb/c, массой 18—20 г, из разведения точного деления — белка Ki-67 в культуре клеток питомника «Филиал «Столбовая» ФГБУ «Научный карциномы молочной железы MCF-7. Этот белок, центр биомедицинских технологий Федерального как известно, присутствует в ядрах делящихся клеток, медико-биологического агентства». Животные, по- но отсутствует в покоящихся клетках [13, 14]. лученные из питомника, после адаптации к условиям фармакокинетика. Распределение аурумакрила вивария (температура воздуха: 22 ± 2 °С, влажность в организме животных-опухоленосителей (карцино-воздуха: 55 ± 10 %, рацион: экструдированный комби- ма легких Льюис) определялось путем измерения корм ПК-120—1, вода: ex libitum) и прохождения каран- содержания золота в тканях опухоли и органов (кровь, тина в течение 7 сут были разделены на группы, про- печень, почки, легкие, селезенка, мозг) мышей с по-маркированы и размещены в отдельные клетки. мощью метода масс-спектрометрии с индуктив-В каждой серии экспериментов формировалось не- но-связанной плазмой (МС-ИСП). Аурумакрил вво-обходимое количество групп мышей, включающих дился в дозе 100 мг/кг в/б однократно на 7-е сутки контрольных и подвергавшихся воздействию аурум- развития опухоли. Образцы биологического матери-акрила животных. Размер группы составлял 6 особей ала отбирались через 0,5; 1; 3; 4; 24 и 48 ч после вве-грызунов, при 8—10 животных в контроле. дения аурумакрила. Проводилось определение массы Модели опухолей животных. В качестве тест-си- извлеченных для исследования тканей, а также раз-стем служили солидные опухоли — карцинома легких деление крови на плазму и сыворотку путем цент-Льюис, аденокарцинома молочной железы Са-755 рифугирования в течение 10 мин при 3000 об/мин. (мыши BDFj), аденокарцинома толстой кишки Ака- Параллельно осуществлялись исследования кон-тол (мыши Balb/c). Перевивка опухолей осуществля- трольных животных, не получавших препарат [19]. лась в соответствии со стандартной методикой под Процедура МС-ИСП определения золота в биологи-кожу правого бока мышей измельченными фрагмен- ческих материалах проводилась в соответствии с ра-тами опухолевой ткани, содержащейся в 0,3 мл фи- нее описанной методикой [20]. зиологического раствора хлористого натрия [17]. Статистический анализ результатов. Статистиче- Оценка противоопухолевого эффекта in vivo. По- скую обработку полученных данных проводили с ис-казателями ростингибирующего эффекта препаратов пользованием пакета компьютерных программ служили различия в кинетике роста опухолей и сред- Statistica 6.0 и Statistica 8.0. Результаты представлены ней продолжительности жизни у леченых ( Т) и кон- как среднее из 12 индивидуальных измерений для трольных (С) животных. Коэффициент торможения каждого экспериментального животного. Оценка роста опухоли (ТРО, %) определялся из соотношения достоверности различий между сравниваемыми па-ТРО = (РС — РТ)/РС (%), где РС и РТ — средняя масса раметрами проведена помощью t-критерия Стьюден-опухоли мышей в группах контрольных (С) и леченых та. Различия признаются достоверными при условии, (Т) животных. Изменение средней продолжительности что вычисленные значения t превышают значения жизни (Дх, %) определялось как Дт = (тС — тТ)/тС (%), критерия Стьюдента t01 для определенных уровней где тС и тТ — средняя продолжительность жизни мы- значимости (p <0,01) при заданном числе степеней шей в группах контрольных (С) и леченых ( Т) живот- свободы /[17]. ных [11, 12]. Культуры клеток. Для сравнительной оценки ци- Результаты исследования тотоксического эффекта аурумакрила in vitro в отно- Противоопухолевая активность аурумакрила in vivo шении клеток опухолей человека различного генеза Противоопухолевая активность аурумакрила уста-использованы 4 линии клеточных культур: эстро- новлена на моделях солидных опухолей мышей —
РОССИЙСКИЙ БИОТЕРАПЕВТИЧЕСКИЙ ЖУРНАЛ | RUSSiAN JOURNAL OF BiOTHERAPY 4'2020 том 19 | vol. 19
Оригинальные статьи 77
карциноме легких Льюис, аденокарциноме толстой кишки Акатол, аденокарциноме молочной железы Са-755, при ежедневном введении препарата в суточной дозе 20 мг/кг в/б, 5-кратно, начиная со следующих суток после перевивки опухоли.
Отметим, что применявшаяся суточная доза препарата в 5 раз меньше максимально переносимой дозы аурумакрила, равной при его однократном в/б введении 100 мг/кг, в то время как срединная летальная доза (LD50) аурумакрила для мышей составляет 150 мг/кг.
Как видно из представленных на рис. 1 и в табл. 1 данных, аурумакрил тормозит развитие всех 3 изученных солидных опухолей мышей - карциномы легких Льюис, аденокарциномы Акатол и аденокар-циномы Са-755 — на 80-90 %. При этом средняя продолжительность жизни животных с аденокарци-номой Са-755 увеличивается на 31 % по сравнению с контролем.
Эффективность аурумакрила in vitro
Исследование эффектов аурумакрила в условиях in vitro включало сравнительную оценку цитотоксиче-ского эффекта аурумакрила в отношении клеток опухолей человека различного генеза (меланома Mel Мо, рак молочной железы MCF-7, рак легкого А549, аде-нокарцинома толстой кишки НСТ116), а также изучение его влияния на кинетику клеточной пролиферации выжившей фракции опухолевых клеток MCF-7.
Установлено, что аурумакрил обладает цитоток-сическим действием на опухолевые клетки, вызывая их гибель, выраженность которой зависит от времени воздействия препарата, его концентрации и природы опухолевых клеток.
Выживаемость опухолевых клеток в зависимости от концентрации аурумакрила охарактеризована данными, представленными на рис. 2 и демонстрирующими, что аурумакрил оказывает дозозависимое ци-тотоксическое действие на клетки всех изученных опухолей — даже в сравнительно небольших концентрациях. При применении препарата в наиболее высокой из изученных концентраций, равной 0,25 мг/мл, доля погибших клеток составляет 63— 92 %, изменяясь в этих пределах в зависимости от типа культур опухолевых клеток.
Полученные данные позволяют дифференцировать клетки опухолей человека различной природы по чувствительности к препарату аурумакрил. Так, наибольшую чувствительность к действию аурума-крила проявляют клетки меланомы Mel Мо — доля погибших клеток составила более 90 %. Максимальная гибель клеток рака легкого А549 и рака молочной железы MCF-7 составляет 74 %. Наименьшей чувствительностью к аурумакрилу обладают клетки рака толстой кишки НСТ116, гибель которых отмечена на уровне 63 % (табл. 2).
Расчетные значения концентрации аурумакрила, вызывающей гибель 50 % опухолевых клеток (ИК50) (см. табл. 2), показывают, что цитотоксичность ауру-макрила наиболее выражена в отношении клеток рака легкого А549, меланомы Mel Мо и молочной железы MCF-7. Для этих клеточных культур показатель ИК50 изменяется в пределах от 60 до 80 мкг/мл. Существенно меньшую цитотоксичность аурумакрил проявляет в отношении клеток рака толстой кишки НСТ116, ИК50 для данной линии клеток составляет 180 мкг/мл.
б
4,5 4 3,5 3 2,5 2 1,5 1
0,5
7 9 11 13 15 17 19 21 Время развития опухоли,сутки / Days postimplant, days
5 4,5 4 3,5 3 2,5 2 1,5 1
0,5 0
6 11 16 21 26 Время развития опухоли, сутки / Days postimplant, days
5 7 9 11 13 15 Время развития опухоли, сутки / Days postimplant, days
Рис. 1. Противоопухолевая активность аурумакрила на моделях карциномы легких Льюис (а), аденокарциномы Акатол (б), аденокарциномы Са-755 (в): 1 — контроль, 2 — аурумакрил, 20 мг/кг/сутки, в/б, 1-5-е сутки после перевивки опухоли
Fig. 1. Aurumacryl antitumor activity against Lewis lung carcinoma (a), Acatol adenocarcinoma (б) and Ca-755 adenocarcinoma (в): 1 — control, 2 — aurumacryl, 20 mg/kg/day, intraperitoneally (i/p), 1—5 days postimplant
а
в
7
0
0
4'2020 ТОМ 19 I VOL. 19
78
Оригинальные статьи
Таблица 1. Противоопухолевая активность аурумакрила на моделях солидных опухолей мышей (введение препарата в суточной дозе 20мг/кг, 1-5-е сутки развития опухоли, в/б)
Table 1. Antitumor activity of aurumacryl against the murine solid tumor models (intraperitoneal injection at a daily dose of 20 mg/kg, from day 1 to 5 post implantation)
Время оценки эффекта (сут) Средняя масса опухоли (г) Торможение Критерий Стьюдента
Штамм опухоли The mean tumor weight (g) роста опухоли (ТРО, %)
щц The time of the effect evaluation (day) Леченые мыши Контрольные мыши Чая- 11
Карцинома легких Льюис Lewis lung carcinoma 21 0,8 ± 0,1 3,8 ± 0,5 80 t = 21,4 >t01 = 4,44
Аденокарцинома Акатол Acatol adenocarcinoma 27 0,5 ± 0,1 4,7 ± 0,6 90 t = 24,7 >t01 = 4,44
Аденокарцинома Са-755 Ca-755 adenocarcinoma 15 1,2 ± 0,2 5,2 ± 0,5 77* t = 28,5 > t01 = 4,44
*На модели аденокарциномы Са-755увеличение средней продолжительности жизни леченых животных составляет 31 % по сравнению с контролем. Средняя продолжительность жизни мышей в группах леченых и контрольных животных составляет 35,2 ± 6,8 и 26,8 ± 7,2 сут соответственно.
* The mean life span of treated animals with Ca- 755 adenocarcinoma was extended by 31 % compared with the control. The mean life span of mice in groups of treated and control animals was 35.2 ± 6.8 and 26.8 ± 7.2 days, respectively.
100
80 -
£
ш S
§ г
ф о
s 01
3 г
\o S
5 с
о a
с is
a
60
40
20 -
100 n
80
£
Ш s
§ г
ф о
s 01
3 г
\o S
5 с
о a
с is
a
60
40
20
0,1 0,2 Концентрация, мг/мл / Concentration, mg/ml
0,1 0,2 Концентрация, мг/мл / Concentration, mg/ml
0,3
100
80
Ё s § г
ф о и
3
о
с
60
& 40-
20
100 -I
и
3 э
о
с
80
60
40
20
0,1 0,2 Концентрация, мг/мл / Concentration, mg/ml
0,1 0,2 Концентрация, мг/мл / Concentration, mg/ml
Рис. 2. Изменение доли погибших клеток в зависимости от концентрации аурумакрила для ряда клеточных культур опухолей человека: а — меланома Mel Мо; б — рак легкого А549; в — рак молочной железы MCF-7; г — аденокарцинома толстой кишки НСТ116 Fig. 2. Variation in the percentage of died cells vs. aurumacryl concentration in cell cultures of human tumors: a — Mel-Mo melanoma; б — A549 lung carcinoma; в — MCF-7 breast; г — HCT116 colon adenocarcinoma
РОССИЙСКИЙ БИОТЕРАПЕВТИЧЕСКИЙ ЖУРНАЛ I RUSSiAN JOURNAL OF BiOTHERAPY
4'2020 ТОМ 19 I VOL. 19
б
а
0
0
0
в
г
0
0
Таблица 2. Цитотоксический эффект аурумакрила для клеток ряда опухолей человека in vitro
Table 2. The aurumacryl cytotoxic effect against some human tumor cells in vitro
Клеточная линия опухоли человека Максимальная доля погибших клеток (%) * (мкг/мл)
The maximal IC5.,
Human tumor cell line percentage of died cells (%) * Hg/mL
Рак легкого А549 А549 lung carcinoma 74 60
Меланома Mel Mo Mel-Mo Melanoma 92 80
Рак молочной железы MCF-7 MCF-7 breast carcinoma 74 90
Рак толстой кишки HCT116 HCT116 colon adenocarcinoma 63 180
* Концентрация аурумакрила — 250 мкг/мл. *Autvmactyl concentration — 250/jg/mL. Примечание. ИК50 — концентрация аурумакрила, вызывающая гибель 50 % опухолевых клеток (расчетные значения).
Note. IC50 — the aurumacryl concentration that causes 50 % tumor cell death (calculated values).
Влияние аурумакрила на кинетику клеточной пролиферации выжившей фракции опухолевых клеток МСР-7 иллюстрируют данные, представленные на рис. 3 и 4. Как видно из рисунков, интенсивность пролиферации выжившей фракции опухолевых клеток претерпевает под влиянием аурумакрила значительные изменения по сравнению с контролем, наиболее выраженные при применении препарата в самой высокой из изученных доз — 1 мг/мл.
Показано, что препарат вызывает накопление клеток, находящихся в фазе пролиферативного покоя G0. Доля «покоящихся» клеток через 24 ч инкубации возрастает с 40 %, наблюдающихся в контроле, до 93 %, регистрируемых на этот срок при воздействии препарата в концентрации 1 мг / мл (см. рис. 3). Наряду с этим, среди выживших клеток наблюдается уменьшение под влиянием аурумакрила доли делящихся клеток. Так, после инкубации опухолевых клеток с препаратом в концентрации 1 мг/мл на протяжении 24 ч доля делящихся клеток уменьшается с 60 %, регистрируемых в это время в контроле, до 7 % (см. рис. 4).
Приведенные данные свидетельствуют о том, что аурумакрил обладает выраженным цитотоксиче-ским и цитостатическим действием, вызывая как гибель клеток, так и значительные изменения интенсивности клеточной пролиферации выжившей
Рис. 3. Влияние аурумакрила на кинетику изменения доли покоящихся клеток MCF7:1 — контроль; 2 — аурумакрил, 1 мг/мл Fig. 3. Kinetics of the alteration of the MCF7 "rest" (G0) cells number under action of aurumacryl: 1 — control; 2 — aurumacryl, 1 mg/ml
80
0 -1-1-1-1-11 5 9 13 17 21 Время, ч / Time, h
Рис. 4. Влияние аурумакрила на кинетику изменения доли делящихся клеток MCF7:1 — контроль; 2 — аурумакрил, 1 мг/мл Fig. 4. Kinetics of the alteration of the MCF7proliferative cells number under action of aurumacryl: 1 — control; 2 — aurumacryl, 1 mg/ml
фракции опухолевых клеток, что подтверждается снижением доли делящихся клеток.
Фармакокинетика аурумакрила
Исследование фармакокинетики новых ЛС является, как известно, обязательным этапом их изучения, имеющим важное значение для разработки оптимальных схем и режимов применения препаратов, а также для понимания механизмов их действия.
Фармакокинетические кривые, характеризующие распределение аурумакрила в организме животных с карциномой легких Льюис, представлены на рис. 5.
Анализ приведенных зависимостей свидетельствует о том, что препарат после в/б внесосудистого введения обнаруживается через 30 мин в кровяном русле, в опухоли и в исследуемых органах (печень, почки,
80 Оригинальные статьи
ж
10 20 30 40 Время, ч / Time, h
50
10 20 30 40 Время, ч / Time, h
50
10 20 30 40 Время, ч / Time, h
50
0,5
0 10 20 Время, ч / Time, h
Рис. 5. Кинетика изменения содержания золота в крови (а), опухоли (б), печени (в), почках (г), легких (д), селезенке (е) и мозге (ж) мышей после однократного введения аурумакрила в дозе 100 мг/кг, в/б на 7-е сутки развития опухоли (карцинома легких Льюис) Fig. 5. The kinetics of change in the gold content in (a) blood plasma, (б) tumor, (в) liver, (г) kidney, (д) lungs, (е) spleen, and (ж) brain in mice with Lewis lung carcinoma after a single intraperitoneal injection of aurumacryl at a dose of 100 mg/kg on 7th day
легкие, селезенка) животных, где детектируется на протяжении всего периода наблюдения в течение 48 ч.
Отметим, что концентрация золота в исследовавшихся тканях у контрольных мышей, не получавших аурумакрил, составляет менее 0,006 мкг/г.
Максимальная концентрация золота (С ), как видно из представленных данных (см. рис. 5, табл. 3), наблюдается в плазме крови через 3 ч после в/б введения аурумакрила (кривая 1), в опухоли и в легких — через 4 ч (кривые 2 и 5 соответственно), в печени, почках, селезенке и в мозге — через 24 ч после применения препарата (кривые 3, 4, 6, 7 соответственно).
Значения минимальной концентрации золота (С ), регистрируемые спустя 48 ч после введения препарата, дают представление о длительности пребывания аурумакрила в исследуемых тканях и позволяют качественно сопоставить скорости выведения из них препарата. Показатель СтП для различных органов и опухоли возрастает в следующей последовательности: плазма крови—легкие—селезенка—опу-
холь—печень—почки, что свидетельствует об увеличении в указанной последовательности времени нахождения препарата в исследовавшихся тканях (см. рис. 5, табл. 3).
Кумулятивный фармакокинетический показатель, позволяющий оценить биодоступность тканей различных органов и опухоли для аурумакрила, — площадь под фармакокинетической кривой — охарактеризован данными, представленными в табл. 3. В соответствии со значениями этого интегрального показателя, возрастание содержания золота в различных тканях происходит в такой последовательности: мозг — плазма крови — легкие — селезенка — опухоль — печень — почки.
Обращает на себя внимание тот факт, что в ткани мозга аурумакрил обнаруживается в крайне низких концентрациях, на порядок меньших, чем концентрации препарата, регистрируемые в плазме крови (см. рис. 5, табл. 3). Столь низкое содержание золота в тканях мозга свидетельствует об отсутствии способности
б
а
в
г
0
0
0
Таблица 3. Фармакокинетические параметры распределения аурумакрила в организме животных с карциномой легких Льюис (введение препарата в/б в дозе 100 мг/кг)
Table 3. The pharmacokinetic parameters of aurumacryl distribution in the body of mice with Lewis lung carcinoma (intraperitoneal injection at a dose of 100 mg/kg)
Пробы тканей С (мкг/г) max v ' T (ч) max v ' Cmin* (мкг/г) S (мкг/г x ч) Коэффициент ОБ (ОБ = So /£)
Tissue samples С ,^g/g max' ® T , h max С *, ^g/g min ' ® S, ^g/g x h RB factor (RB = So/SK)
Плазма крови Blood plasma 15,6 3 0,9 88,1 -
Опухоль Tumor 13,6 4 9,2 522,8 5,93
Печень Liver 14,5 24 13,0 602,2 6,83
Почки Kidneys 129,0 24 90,0 5099,0 57,87
Легкие Lungs 14,0 4 3,5 372,6 4,23
Селезенка Spleen 13,1 24 7,2 452,1 5,13
Мозг Brain 0,36 24 - 6,8 0,08
*Указаны минимальные значения концентрации золота, зарегистрированные через 48 ч после введения аурумакрила. *The minimum values of gold concentration recorded 48 h after aurumacryl administration.
Примечание. С , С . — значения максимальной и минимальной концентрации золота соответственно; T — показа* max mm ' r ' 7 max
тель времени достижения максимальной концентрации золота; S — площадь под фармакокинетической кривой; ОБ = Sg/Sii — коэффициент относительной биодоступности аурумакрила, где So и S]c — площади под фармакокинетиче-скими кривыми для исследуемых органов (либо опухоли) и крови соответственно.
Note. Cmax, Cm.n — the maximum and the minimum concentrations ofgold, respectively; Tmax — the time of the maximum gold concentration achievement; S — the area under the pharmacokinetic curve; RB = Sa /Sb — the relative bioavailability factor of tissues of various organs and tumors for aurumacryl, which is defined as the ratio between the areas under the curves for the organ under examination or the tumor (SJ and blood (Sb).
у препарата преодолевать гематоэнцефалический барьер.
Таким образом, представленные данные свидетельствуют о преимущественном накоплении препарата в почках при относительно равномерном распределении аурумакрила между тканями опухоли, печени, легких и селезенки.
Коэффициент относительной биодоступности тканей различных органов и опухоли для аурумакрила (ОБ = Sо/Sк), определяемый как соотношение показателей площадей под кривыми (см. рис. 5) для исследуемого органа или опухоли и крови ^к), также свидетельствует о преимущественном накоплении аурумакрила в почках. Величина коэффициента ОБ для почек на порядок выше, чем значения этого показателя для всех других исследовавшихся органов (печень, легкие, селезенка) и для опухоли (см. табл. 3). Обнаруженная высокая биодоступность почек к аурумакрилу указывает на определенную тропность препарата к тканям почек и позволяет предположить, что почки, возможно, являются потенциальной мишенью, как для противоопухолевого, так и для токсического действия препарата.
При рассмотрении данных, характеризующих биодоступность аурумакрила для опухоли, следует
отметить, что препарат после внесосудистого в/б введения обнаруживается в подкожно развивающейся опухоли практически одновременно с поступлением вещества в кровь, регистрируется в максимальной концентрации через 3 ч и сохраняется в тканях опухоли в концентрации, близкой к максимальной, на протяжении всего периода наблюдения, в течение 48 ч (см. рис. 5, табл. 3).
Как уже упоминалось ранее, показатель относительной биодоступности опухоли к аурумакрилу находится примерно на том же уровне, что и для других исследовавшихся органов (за исключением почек с наиболее высоким индексом ОБ и мозга, имеющего самый низкий коэффициент ОБ). Однако коэффициент ОБ опухоли, равный 5,93, численно несколько превышает значения ОБ, установленные для селезенки (5,13) и легких (4,23), но уступает величине ОБ, регистрируемой для печени (6,83) (см. табл. 3).
Установленная величина коэффициента ОБ опухоли для аурумакрила, равная 5,93, соответствует известным значениям этого показателя для ряда других противоопухолевых препаратов, которые изменяются в пределах от 1,6 до 10,5 [19].
Таким образом, изучение распределения потенциального противоопухолевого препарата аурумакрил
82 Оригинальные статьи
в организме животных-опухоленосителей (карцино- ганизме, выявление активных метаболитов и путей ма легких Льюис) позволило установить, что аурума- их взаимодействия с биомакромолекулами. крил после в/б введения поступает в кровяное русло, Известно, что полиакрилат золота, будучи эф-исследуемые органы (печень, почки, легкие, селезен- фективным гемостатиком, обладает высокой специ-ка) и опухоль, где обнаруживается на протяжении фичностью взаимодействия с молекулой альбумина, всего периода наблюдения в течение 48 ч. образуя при этом интерполимерный комплекс [21]. Можно полагать, что и в организме животных-опу-Обсуждение результатов холеносителей аурумакрил после поступления в кро-Проведенные исследования позволили устано- вяное русло связывается с альбуминами сыворотки вить, что аурумакрил эффективно, на 80—90 %, ин- крови и в виде комплекса с альбумином попадает гибирует развитие солидных опухолей мышей (кар- в ткани органов и опухоли, где происходит дальней-цинома легких Льюис, аденокарцинома Акатол, шее взаимодействие этого комплекса с внутрикле-аденокарцинома Са-755) in vivo, а также вызывает точными макромолекулами. Очевидно, что процессы гибель от 60 до 90 % клеток опухолей человека раз- биодеградации и метаболизма аурумакрила должны личного генеза (меланома Mel Мо, рак молочной быть предметом специальных исследований. железы MCF-7, рак легкого А549, аденокарцинома Остаются пока невыясненными возможные мо-толстой кишки НСТ116) in vitro. лекулярные мишени и механизмы противоопухо-Обнаруженные в работе клеточные эффекты ау- левого действия аурумакрила, что необходимо для румакрила свидетельствуют не только о весьма зна- позиционирования препарата в соответствии с совре-чительном цитотоксическом эффекте аурумакрила, менными подходами к противоопухолевой химио-но демонстрируют также угнетающее влияние пре- терапии. парата на пролиферативную активность выжившей Согласно существующим представлениям, биофракции опухолевых клеток, что указывает на выра- мишенями для золотосодержащих препаратов могут женное цитостатическое действие препарата. Кине- служить белки, участвующие в регуляции клеточной тика пролиферации выжившей фракции опухолевых пролиферации опухолевых клеток, в развитии про-клеток MCF-7 претерпевает существенные измене- цессов апоптоза и ангиогенеза [6—8]. ния, выражающиеся в преимущественном накопле- Показано, в частности, на ряде моделей стабильных нии клеток (93 %) в фазе пролиферативного покоя G0 клеточных линий опухолей человека высокоспеци-и в значительном уменьшении доли (7 %) делящихся фичное ингибирование под влиянием препаратов клеток. Полученные данные могут быть расценены золота такого фермента семейства пиридиннуклеотид как свидетельство утраты выжившими клетками ре- оксиредуктазы, как митохондриальная тиоредоксин-продуктивной способности после воздействия аурум- редуктаза, имеющая в активном центре селен, ко-акрила. торый высокочувствителен к действию тяжелых ме-Исследование фармакокинетики аурумакрила таллов. Результатом такого взаимодействия является позволило установить, что аурумакрил после в/б вве- повреждение митохондриальной мембраны, выход дения мышам с развивающейся подкожно карцино- в цитозоль цитохрома c и индукция апоптоза [22, 23]. мой легких Льюис всасывается из брюшной полости Обнаружено также модулирование препаратами и попадает в кровяное русло животных. В исследо- золота активности протеосом и уменьшение содер-вавшихся органах (печень, почки, легкие, селезенка) жания антиапоптотических белков, что приводит и в опухоли золото детектируется через 30 мин после к стимуляции процессов апоптоза клеток. Высока в/б введения и продолжает определяться в течение вероятность влияния золота на белки, входящие 48 ч. Анализ полученных данных показывает, что об- в сигнальный каскад трансдукции митогенных сиг-наружено примерно равномерное распределение зо- налов, что может вести к подавлению клеточной про-лота между тканями опухоли, печени, селезенки лиферации и гибели клеток [7, 8, 24]. и легких. Можно отметить, что элиминация золота Необходимо отметить, что аурумакрил является из легких происходит быстрее, чем из опухоли и дру- первым и пока единственным полимерным соедине-гих органов. Обращает на себя внимание существен- нием среди изученных золотосодержащих веществ, но большее накопление золота в ткани почек, что очевидно, способным в определенных условиях фор-можно интерпретировать, как указание на выделение мировать наноразмерные частицы золота в полимерной препарата из организма преимущественно с мочой. матрице, что, возможно, вносит свой вклад в особен-Очень низкое содержание золота в ткани мозга, ука- ности метаболизма этого препарата в физиологиче-зывает на невозможность проникновения полимер- ских условиях [25]. ного препарата через гематоэнцефалический барьер. Кроме того, исходя из известных представле-Для понимания механизмов действия ЛС важное ний о некоторой преимущественной предрасполо-значение имеет исследование их метаболизма в ор- женности опухолевых клеток к взаимодействию
РОССИЙСКИЙ БИОТЕРАПЕВТИЧЕСКИЙ ЖУРНАЛ | RUSSiAN JOURNAL 0F BIOTHERAPY 4'2020 том 19 | vol. 19
c полианионами, можно рассчитывать на некоторую возможность избирательного взаимодействия поли-акрилата золота, как выраженного полианиона, c клетками опухоли [26]. Можно также предположить, что, взаимодействуя в качестве полианиона с положительно заряженными белками, в частности с гистонами, аурумакрил способен вызывать повреждение хроматина с последующим нарушением функций ДНК [24].
Вышеизложенные соображения позволяют отнести золотосодержащие соединения к потенциальным противоопухолевым агентам с мультитаргетным механизмом действия, подлежащим специальному целенаправленному исследованию.
Изучение детального механизма и мишеней противоопухолевого действия аурумакрила — одна из основных задач дальнейших исследований этого перспективного препарата.
Заключение
Установлена значительная противоопухолевая активность препарата полиакрилата золота (аурумакрил), представляющего новый для онкологии класс соединений — металлопроизводные полиакриловой кислоты.
Аурумакрил вызывает торможение роста солидных опухолей мышей (карцинома легких Льюис, аденокарцинома Акатол, аденокарцинома Са-755) на 80—90 % по сравнению с контролем in vivo, гибель от 60 до 90 % клеток опухолей человека различного
генеза (меланома Mel Мо, рак молочной железы MCF-7, рак легкого А549, аденокарцинома толстой кишки НСТ116) in vitro, а также потерю репродуктивной способности клетками выжившей фракции линии MCF-7.
Изменения в кинетике пролиферации выжившей фракции опухолевых клеток MCF-7 под влиянием препарата выражаются в преимущественном накоплении клеток (93 %) в фазе пролиферативного покоя G0 и в значительном уменьшении (7 %) доли делящихся клеток.
Проведено изучение распределения препарата аурумакрил в организме животных-опухоленосите-лей (карцинома легких Льюис) с помощью метода МС-ИСП. Установлено, что препарат обнаруживается через 30 мин после в/б внесосудистого введения в кровяном русле, в опухоли и в исследуемых органах (печень, почки, легкие, селезенка) животных, где детектируется на протяжении всего периода наблюдения в течение 48 ч. Показано преимущественное накопление аурумакрила в почках при крайне низком содержании золота в мозге и относительно равномерном распределении препарата между тканями опухоли, печени, легких и селезенки.
Совокупность полученных нами данных о противоопухолевой активности, клеточных эффектах аурумакрила и фармакокинетике препарата свидетельствует о перспективности дальнейшего изучения этого соединения в качестве потенциального противоопухолевого средства.
ЛИТЕРАТУРА / REFERENCES
1. Бабин В.Н., Белоусов Ю.А., Борисов В.И. и др. Ферроцены как потенциальные противоопухолевые препараты. Факты и гипотезы (Обзор). Изв. РАН. Сер. Хим. 2014;63(11):2405-22. DOI: 10.1007/ s11172-014-0756-7. [Babin V.N., Belousov Yu.A., Borisov V.I. et al. Ferrocenes as potential anticancer drugs. Facts and hypotheses.(Review). Izv. RAN Ser. khim = Russian Chemical Bulletin 2014;63(11):2405-22.
(In Russ.)].
2. Корман Д.Б. Основы противоопухолевой химиотерапии. М.: Практическая медицина, 2006. 503 с. [Korman D. B. The Basics of Antitumor Chemotherapy. Moscow: Prakticheskaya meditsina, 2006. 503 р. (In Russ.)].
3. Markowska A., Kasprzak B., Jaszczynska-Nowinka K. et al. Nobel metals in oncology. Contemp Oncol (Pozn) 2015;19:271-5.
DOI: 10.5114/wo.2015.54386.
4. Da Silva Maia P.I., Deflon V.M., Abram U. Gold (III) complexes
in medicinal chemistry. Future Med Chem 2014;6:1515-36. DOI: 10.4155/fmc.14.87.
5. Nardon C., Pettenuzzo N., Fregona D. Gold complexes for therapeutic purpose: an update patent review (2010-2015). Curr Med Chem 2016;23:3374-403. DOI: 10.2174/092986732366616050410 3843.
6. Nobili S., Mini E., Landini I. et al. Gold compounds as anticancer agents: chemistry, cellular pharmacology and preclinical studies. Med Res Rev 2010;30(3):550-80.
DOI: 10.1002/med.20168.
7. Корман Д.Б., Островская Л.А., Кузьмин В.А. Золотосодержащие комплексные соединения - противоопухолевые свойства, мишени и механизмы действия (Обзор). Вопросы онкологии 2018;64(6):697-707. [Korman D.B., Ostrovskaya L.A.,
Kuz'min V.A. Gold complexes — antitumor properties, targets and mechanism of action (An Overview). Voprosy onkologii = Problems in oncology 2018;64(6):697-707. (In Russ.)].
8. Корман Д.Б., Островская Л.А., Кузьмин В.А. Индукция оксидатив-ного стресса в опухолевых клетках — новый подход к лекарственному лечению злокачественных опухолей (Обзор). Биофизика 2019;64(3):552—62. DOI: 10.1134/S0006302919030165 [Korman D.B., Ostrovskaya L.A., Kuz'min V.A. Induction of Oxidative Stress in Tumor Cells: A New Strategy for Drug Therapy of Malignant Tumors(An Overview). Biophizika = Biophysics 2019;64(3):552—62.
(In Russ.)].
9. Ostrovskaya L.A., Voronkov M.G., Korman D.B. et al. Experimental Study of Antitumor Activity of Polymetal-acrylates against Animal Trasplantable
84
Оригинальные статьи
Tumors. J of Cancer Therapy
2010;1(2):59-65.
DOI: 10.4236/jct.2010.12010.
10. Ostrovskaya L.A., Korman D.B., Bluhterova N.V. et al. Antitumor Activity of Polyacrylates of Noble Metals
in Experiment. Biointerface Research in Applied Chemistry 2014;4:816-9.
11. Островская Л.А., Воронков М.Г., Корман Д.Б. и др. Полиакрилаты благородных металлов как потенциальные противоопухолевые препараты. Биофизика 2014;59(4):785-89.
DOI: 10.1134/S0006350914040216. [Ostrovskaya L.A., Voronkov M.G., Korman D.B. et al. Polyacrylates of Noble Metals as Potential Antitumor Drugs. Biophizika = Biophysics 2014;59(4):785-89. (In Russ.)].
12. Островская Л.А., Варфоломеев С.Д., Воронков М.Г. и др. Полиметалло-акрилаты, ферроценсодержащие соединения и полисукцинимид как потенциальные противоопухолевые препараты. Изв. РАН. Сер. хим. 2014;5:1211-8. DOI: 10.1007/s11172-014-0575-x. [Ostrovskaya L.A., Varfolomeev S.D., Voronkov M.G. et al. Polymetalacrylates, ferrocene compounds, polysuccinimide as potential antitumor drugs. Izv. RAN Ser. khim. = Russian Chemical Bulletin 2014;5:1211-8. (In Russ.)].
13. Островская Л.А., Корман Д.Б., Грехова А.К. и др. Экспериментальное исследование противоопухолевого эффекта препарата аурумакрила. Изв. РАН. Сер. хим. 2017;66(12):2333-7. DOI: 10.1007/s11172-017-2025-z. [Ostrovskaya L.A., Grehova A.K., Korman D.B. et al. Experimental study of the antitumor effect of aurumacryl. Izv. RAN Ser. khim. = Russian Chemical Bulletin 2017;66(12):2333-7.
(In Russ.)].
14. Островская Л.А., Грехова А.К., Корман Д.Б. и др. Клеточные эффекты пpoтивooпуxoлевoгo ще-паpата ауpумакpил. Биофизика 2017;62(3):598-603. DOI: 10.1134/ S0006350917030150. [Ostrovskaya L.A., Grehova A.K., Korman D.B. et al. Cellular Effects of the Antitumor Drug Aurumacryl. Biophizika = Biophysics 2017;62(3):598-603. (In Russ.)].
15. Островская Л.А., Корман Д.Б., Блюх-терова Н.В. и др. Металлополиакри-латы — новый класс потенциальных противоопухолевых препаратов. Химическая физика 2019;38(12):64—73.
DOI: 10.1134/S0207401X19120161. [Ostrovskaya L.A., Korman D.B., Bluhterova N.V. et al. Polyacrylates of metals are the new class of the potential antitumor drugs. Khimicheskaya phizika = Russ J Phys Chem B 2019;38(12):64-73. (In Russ.)].
16. Смирнова М.С., Спиридонов В.В., Позднякова Н.В. и др. Способ получения полиакрилата золота, проявляющего противоопухолевую активность. Патент на изобретение РФ
№ 2690536 от 04.06.2019. [Smirnova M.S., Spiridonov V.V., Pozdniakova N.V. et al. Method of producing gold polyacrylate exhibiting anti-tumor activity. RF Patent of Invention № 2690536 from 04.06.2019. (In Russ.)].
17. Трещалина Е.М., Жукова О.С., Герасимова Г.К. и др. Методические рекомендации по доклиническому изучению противоопухолевой активности лекарственных средств. Руководство по проведению доклинических исследований лекарственных средств. Часть первая.(Ред. А.Н. Миронов
и др.). М.: Гриф и К. 2012. С. 642-57. [Treschalina E.M., Zhukova O.S., Gerasimova G.K. et al. Guidelines for Preclinical Study of Pharmacological Substances. Part one. (Ed. by A.N. Mironov). Moscow: Griff i K. 2012. Pp. 642-57. (In Russ.)].
18. Корман Д.Б., Некрасова Е.И., Островская Л.А. и др. Чувствительность клеток опухолей человека
к цитотоксическому действию полиакрилата золота (аурумакрил). Биофизика 2019;64(6):1138-45. DOI: 10.1134/S0006350919060125. [Korman D.B., Nekrasova E.I., Ostrovskaya L.A. et al. The sensitivity of human tumor cells to the cytotoxic action of aurum polyacrylate (aurumacril). Biophizika = Biophysics 2019;64(6):1138-45 . (In Russ.)].
19. Островская Л.А., Корман Д.Б., Бурмий Ж.П. и др. Экспериментальное изучение фармакокинетики противоопухолевого препарата аурумакрил. Биофизика 2018;63(3):606-14. DOI: 10.1134/S000 6350918030181. [Ostrovskaya L.A., Korman D.B., Burmiy J.P. et al.
An Experimental Study of the Phar-macokinetics of the Antitumor Drug Aurumacryl. Biophizika = Biophysics 2018;63(3):606-14. (In Russ.)].
20. Karandashev V.K., Orlova T.A., Lezhnev A.E. et al. Use of the inductively coupled plasma mass spectrometry for element analysis of environmental objects. Inorganic Materials 2008;44(14):1491-1500.
DOI: 10.1134/S0020168508140045.
21. Абзаева К.А., Жилицкая Л.В., Белозерская Г.Г. и др. Влияние природы металла на гемостатическую активность водорастворимых нанокомпозитов серебра и золота. Изв. РАН. Сер. хим. 2017;12:2314-6. DOI: 10.1007/s11172-017-2021-3. [Abzaeva K.A., Zhilitskaya L.V., Belozerskaya G.G. et al. Effect
of the metal nature on hemostatic activity of water-soluble gold and silver nanocomposites. Izv RAN Ser khim = Russian Chemical Bulletin 2017;66(12): 2314-6. (In Russ.)].
22. Ranconi L., Aldinucoi D.P., Fregona D. Latest insights into anticancer activity of gold(III)-dithiocarbamato complexes. Anti-Cancer Agents in Med Chem 2010;(4):283-92.
DOI: 10.2174/187152010791162298/.
23. Saggioro D., Rigobello M.P., Paloschi L. et al. Gold (III)-dithiocarbamato complexes induce cancer cell death triggered by thioredoxin redox system inhibition and activation of ERK pathway. Chemistry & Biology 2007;14:1128-39.
DOI: 10.1016/j.chembiol.2007.08.016.
24. Casini A., Messori L. Molecular mechanisms and proposed targets for selected anticancer gold compounds. Curr Top Med Chem 2011;11:2647-60.
DOI: 10.2174/156802611798040732.
25. Западинский Б.И., Котова А.В., Матвеева И.А. и др. Индуцированный УФ облучением процесс формирования наноразмерных частиц золота в трехмерной полимерной матрице. Химическая физика 2010;29(10):87-97. [Zapadinskii B.I., Kotova A.V., Matveeva I.A. et al. Uv radiation induced formation of gold nanoparticles in threedimensional. Khimicheskaya phizika = Russ J Phys Chem B 2010;29(10):87-97.
(In Russ.)].
26. Платэ Н.А., Васильев А.Е. Физиологически активные полимеры. М.: Химия, 1986. 293 с.
[Plate N.A., Vasilyev A.E. Physiologically Active Polymers. Moscow: Khimiya, 1986. 293 р. (In Russ.)].
ORCID авторов/ ORCID of authors
Л.А. Островская /L.A. Ostrovskaya: https://orcid.org/0000-0002-9484-5578 Д.Б. Корман/D.B. Korman: https://orcid.org/0000-0002-8890-1924 Н.В. Блюхтерова/N.V. Bluhterova: https://orcid.org/0000-0002-3295-6950 М.М. Фомина/M.M. Fomina: https://orcid.org/0000-0002-5202-5088 В.А. Рыкова/V.A. Rikova: https://orcid.org/0000-0001-6163-2923 А.К. Чигасова/A.K. Chigasova: https://orcid.org/0000-0001-7288-7155 Е.И. Некрасова/E.I. Nekrasova: https://orcid.org/0000-0002-1703-5010 К.А. Абзаева/K.A. Abzaeva: https://orcid.org/0000-0001-5659-7078 О.О. Рябая/O.O. Riabaya: https://orcid.org/0000-0001-6295-3497 Ж.П. Бурмий/J.P. Burmiy: http://orchid.org/0000-0003-4195-9392
Вклад авторов
Л.А. Островская: разработка дизайна исследования, анализ экспериментальных и литературных данных, написание статьи (текст, рисунки, таблицы);
Д.Б. Корман: обзор публикаций по теме статьи, анализ экспериментальных и литературных данных, участие в написании раздела «Обсуждение результатов»;
Н.В. Блюхтерова, М. М. Фомина, В. А. Рыкова: проведение экспериментальных исследований in vivo; А.К. Чигасова, Е.И. Некрасова, О.О. Рябая: проведение экспериментальных исследований in vitro; К.А. Абзаева: синтез и физико-химическая характеристика препарата аурумакрил; Ж.П. Бурмий: участие в экспериментальном изучении фармакокинетики препарата аурумакрил. Authors' contributions
L.A. Ostrovskaya: study design, analysis of the experimental results and literary data, preparation of the paper (text, tables, figures);
D.B. Korman: review of the publications on the paper topic, participation in the analysis of the experimental results and literary data as well as in
the preparation of the section "Discussion" of the paper;
N.V. Bluhterova, M.M. Fomina, V.A. Rikova: participation in the experimental study of the drug in vivo; A.K. Chigasova, E.I.Nekrasova, O.O. Riabaya: participation in the experimental study of the drug in vitro; K.A. Abzaeva: synthesis, physical and chemical characteristics of the aurumacryl; J.P. Burmiy: participation in the experimental study of the aurumacryl pharmacokinetics.
Конфликт интересов. Авторы заявляют об отсутствии конфликта интересов. Conflict of interest. The authors declare no conflict of interest.
Соблюдение правил биоэтики. Исследование выполнено в соответствии с этическими нормами обращения с животными, принятыми Европейской конвенцией по защите позвоночных животных, используемых для исследовательских и иных научных целей. Statement on the welfare of animals. All applicable international, national, and institutional guidelines for the care and use of animals were followed.
финансирование. Работа выполнена при финансовой поддержке Министерства образования и науки РФ. Федеральная целевая программа «Исследования и разработки по приоритетным направлениям развития научно-технологического комплекса России на 2014-2020 годы». Проект № 14.607.21.0199 (26 сентября 2017 г.).
Financing. The work was financially supported by the Ministry of Education and Science of the Russian Federation in the framework of the Federal Target Program "Research and Development in Priority Areas for the Development of Russia's Science and Technology Complex for 2014-2020". Project № 14.607.21.0199 (26th September 2017).
Статья поступила: 19.06.2020. Принята к публикации: 02.10.2020. Article submitted: 19.06.2020. Accepted for publication: 02.10.2020.
