CC BY
33
УДК 619:615:577.1:616-003.269:636
Томчук В.А., к.б.н., доцент, Грищенко В.А., д.вет.н., професор, Литвиненко О.М., пров. шженер @ Нацюнальний утверситет бюресурав I природокористування Украгни, м. Кигв
ПОКАЗНИКИ ГЛУТАТЮНОВО1 СИСТЕМИ ЗАХИСТУ В ОРГАН1ЗМ1 ЩУР1В ЗА ДП 1ОН1ЗУЮЧОГО ВИПРОМ1НЕННЯ
Встановлено штенсифтацт втьнорадикального окиснення л1тд\е в оргашзм1 щур1в за дп юшзуючог радгацгг. Пероральне застосування опромтеним тваринам лтосомально'г форми БАД FLP-MD нормал1зуе в гх оргашзм1 антиоксидантну р1вновагу, що дозволяе рекомендувати зазначену бгодобавку як зааб медикаментозного захисту тварин в умовах дп юшзуючог радгацгг.
Ключовi слова: щури, токсичний гепатит, рад1ац1я, фосфолтди, втьнорадикальне окиснення, бюлог\чно активна добавка
Вступ. Радiацiя, що викликае формування активних вшьних радикалiв-окисниюв, зумовлюе у мембраш перехресне зв'язування сульфгщрильних груп поверхневих бшюв, зшивання лiпiдних молекул та пероксидне окиснення жирних кислот. Внаслщок цього можуть утворюватися i звiльнятися токсичнi для клiтини продукти розкладу, наприклад, ТБК-реактивнi продукти. У визначенш специфiчноl дп вiльних радикалiв використовуеться виявлення продуктiв лшщно1 пероксидаци. У кровi переважно! бiльшостi хворих тварин мктиться вiрогiдно бiльше продукив пероксидаци лiпiдiв, нiж у клмчно здорових [1-3]. Патогеннiй дп вшьних радикалiв i продуктiв ПОЛ у тваринному органiзмi протидiе складна багатоступенева система антиоксидантного захисту. Встановлено, що до складу систему антиоксидантного захисту входять ферменти (супероксиддисмутаза, каталаза, пероксидаза, глутатюнпероксидаза тощо), низькомолекулярнi сполуки, яю каталiзують вiльнорадикальнi реакци або вловлюють продукти окиснення (бiлки, полiпептиди, глутатюн, амiнокислоти, вiтамiни Е, С, Р, каротинощи, фенольнi сполуки, деякi мжроелементи) [4]. Метою нашо1 роботи було дослщити показники глутатюново1 системи захисту за дп юшзуючо1 радiацil та застосуваннi бiологiчно активно1 добавки (БАД) FLP-MD на основi фосфолiпiдiв молока.
Матер1ал 1 методи дослщжень. Дослщження були проведенi на безпородних щурах-самцях масою 180-200 г, яких утримували на стандартному рацiонi вiварiю. Тварин роздшяли на групи по вiсiм особин у кожнiй. I група -контрольш тварини; II група - тваринам перорально вводили лшосомальну форму БАД FLP-MD [5], створену на основi фосфолiпiдiв молока, полiенових жирних кислот та вiтамiнiв а-токоферолу i ретинолу ацетату (2,7 мг на одну тварину); III та V групи - тварин тотально однократно опромшювали рентгешвськими променями в дозi 2,0 Гр на установщ РУМ-17; IV та VI групи -
® Томчук В.А., Грищенко В.А., Литвиненко О.М., 2010
345
тваринам вводили БАД FLP-MD упродовж 5 дiб, а поим тддавали рентгетвському опромшенню в дозi 2,0 Гр. fflypiB декаттували через 1 добу (III та IV групи тварин) та через 2 доби (V та VI групи тварин).
Отримання гомогенно! фракци печшки та слизово! оболонки тонко! кишки (СОТК) проводили згщно з [6]. Актившсть глутатюнпероксидази (ГП) та глутатюнтранферази (ГТ) визначали згiдно методики [7], а вмют вiдновленого глутатюну (ВГЛ) - за методом [8].
Результати дослщжень обробляли статистично, з використанням комп'ютерно! програми MS Excel.
Результати дослщження. Проведене дослiдження активност ферментiв глутатiоново!' антиоксидантно! системи рiзних органiв щурiв представлене у таблищ. Для клiтин печiнки встановлено зниження вмкту ВГЛ - на 25 % та зростання активност ГП - на 12 % тсля опромшення. Для СОТК спостерiгаeться зниження вмкту ВГЛ (у середньому на 20 % тсля опромшення), а актившсть ГП за цих умов пщвищуеться - на 50 %.
Таблиця
Вмкт вщновленого глутатiону та актившсть глутатшнових ферменпв сироватки кровь клггин печшки i слизовоУ оболонки тонко** кишки в _контролi, за дй* iонiзуючо'l' рад1ацп* та лiпосом (M ± m, n = 8)_
Умови дослщу ГТ (ммоль/хв-мг бшка) ГП (мкмоль/ хв^мг бшка) ВГЛ (мкмоль/мг бшка)
Печ1нка
Контроль 0,272 ± 0,014 0,242 ± 0,025 0,927 ± 0,015
БАД FLP-MD 0,300 ± 0,015 0,221 ± 0,019 0,920 ± 0,012
2 Гр 0,251 ± 0,009 0,270 ± 0,015* 0,699 ± 0,016*
2 Гр + БАД FLP-MD 0,303 ± 0,015 0,261 ± 0,018 0,700 ± 0, 014*
Слизова оболонка тонко!' кишки
Контроль 0,043 ± 0,006 0,022 ± 0,005 0,677 ± 0,010
БАД FLP-MD 0,033 ± 0,004 0,034 ± 0,005 0,669 ± 0,011
2 Гр 0,047 ± 0,04 0,033 ± 0,006* 0,524 ± 0,018*
2 Гр + БАД FLP-MD 0,041 ± 0,003 0,035 ± 0,008 0,543 ± 0,009*
Сироватка кров1
ммоль/хв л ммоль/хв л мкг/л
Контроль 47,5 ± 0,5 0,191 ± 0,016 140,8 ± 15,0
БАД FLP-MD 40,5 ± 0,8 0,221 ± 0,014 134,8 ± 16.3
2 Гр 38,2 ± 0,4* 0,236 ± 0,017* 118,9 ± 12,1*
2 Гр + БАД FLP-MD 37,5 ± 0,5* 0,178 ± 0,09 98,1 ± 11,2*
Примггка: ГТ - глугатюнтрансфераза; ГП - глугатюнпероксидаза; ВГЛ - вщновлений глутатюн.
* - р < 0,05 - вщносно контрольних значень.
Вмiст ВГЛ у сироватщ кровi знижуеться -на 15 % тсля опромшення. При цьому актившсть ГП зростае - на 24 %, а актившсть ГТ знижуеться - на 22 %. За умов уведення тваринам лшосомально! форми БАД FLP-MD перед опромшенням вмкт ВГЛ у дослщжуваних препаратах також знижуеться порiвняно з контролем. Актившсть ГТ та ГП за цих умов не вiдрiзняеться вщ контрольних значень.
346
Отримаш результати свщчать про штенсифжацш вшьнорадикального окиснення та порушення функцюнування антиоксидантно! системи захисту оргашзму за ди iонiзуючо! радiацi!, причому характер цих змiн мае особливост для рiзних органiв. Можливо, це свiдчить про порушення взаемоди !! функцiонування за експериментальних умов.
Одшею з унiверсальних систем розкладу та знешкодження пероксидiв е глутатюнова система захисту, функцiонування яко! запоб^ае iнiцiацi! вторинних реакцiй окиснення лшвдв [9, 10]. Активнiсть ГП також зростае тсля опромшення, особливо у препаратах СОТК i сироватки кров1 При цьому вмют ВГЛ, знижуеться тсля опромшення, що, можливо, пов'язано iз зростанням iнтенсивностi його використання.
За використання БАД FLP-MD перед опромшенням встановлено, що актившсть ГП зростае незначно, лише у препаратах сироватки кровi та СОТК, вщносно контрольних значень, що може свщчити про активацш антиоксидантно! системи захисту. Вмкт ВГЛ залишаеться дефiцитним, однак, з урахуванням його участ у багатьох метаболiчних процесах, це може свщчити про тдвищення iнтенсивностi використання ще! сполуки за експериментальних умов. Слщ вiдмiтити, що окреме використання лшосомально! форми БАД FLP-MD не впливае на показники окисно-антиоксидантно! рiвноваги в дослiджуваних препаратах.
Висновок. Отже, бiодобавка виявляе антиоксидантнi властивоси, що обумовлено !! складом, оскшьки основним !! компонентом е фосфолшщи молока, а також вiтамiни (а-токоферол i ретинолу ацетат), що володшть антиоксидантними властивостями.
Л1тература
1. Владимиров Ю. А. Свободные радикалы в биологических системах / Ю. А. Владимиров // Соровский образовательный журнал. ISSEP. -2000. - Т. 6. - № 1. - С. 13 - 19.
2. Титов В.Н. Регуляция перекисного окисления in vivo как етапа воспаления. Олеиновая кислота, захватчики активных форм кислорода и антиоксиданты / В. Н. Титов, Д. М. Лисицын // Клин. лабор. диагностика. -2005. - № 3. - С. 3 - 9.
3. Мельщикова Н. Б. Оксид азота и NO-синтетазы в организме млекопитающих при различных функциональных состояниях / Н. Б. Мельщикова, Н. К. Зенков, В. П. Реутов // Биохимия. - 2000. - Т. 65. -Вып. 4. - С. 485 - 503.
4. Барабой В.А. Биоантиоксиданты / Барабой В.А. - К.: Книга плюс, 2006.462 с.
5. Пат. 86516 Укра!на, МПКА 61К 35/20 А 23К 1/00. Ветеринарна бюлопчно активна добавка лшосомально! форми та споЫб репаративно! терапи в гематологи /Мельничук Д.О., Грищенко В.А., Литвиненко О.М.; заявник i патентовласник НУБШ Укра!ни. - № а 2007 10252; заявл. 14.09.2007; опубл. 27.04.2009, Бюл. № 8.
6. Практикум по биохимии // Под редакцией С.Е. Северина, Г.А. Соловьевой. - М.: Из-во МГУ, 1989. - С. 509.
347
7. Власова С.Н. Активность глутатионзависимых ферментов эритроцитов при хронических заболеваниях печени у детей / С.Н. Власова, Е.И. Шабунина, А.И. Переслегина // Лаб. дело. 1990. - № 8. С. 19-21.
8. Ellman G.L. Tissue sulfhydryl groups / G.L Ellman. // Arch Biochem Biophys. - 1959. - 82 (1). - Р. 70-77.
9. Haloenol lactone is a new isozyme-selective and active site-directed inactivator of glutathione-s-transferase / J. Zheng, A.E. Mitchell, AD. Jones [et al.] // J. Biol. Chem. - 1996. - V. 271, №> 34. - P. 20421-20425.
10. Hiratsuka A., Yamane H., Yamazaki S., Ozawa N., Watabe T. Subunit Ya-specific Glutathione peroxidase activity toward cholesterol 7-hydroperoxides of glutathione-s-transferases in cytosols from rat liver and skin / A. Hiratsuka, H. Yamane, S. Yamazaki [et al.] // J. Biol. Chem. - 1997. - V. 272, № 8. - P. 4763-4769.
Summary
Intensification offree-radical oxidization of lipid is set in the organism of rats at the action of radiation. Peroral introduction the radiation-exposed zoon of BAD FLP-MD normalizes an of antioxidant system in their organism, that allows to recommend the noted bioaddition as mean of medicinal defence of zoons in the conditions of action of radiation.
Стаття надшшла до редакцИ' 2.04.2010
348
