CC BY
60
1 1
128 ЛЕКАРСТВЕННАЯ ТЕРАПИЯ
к УДК 611.814.1:612.018:616-006-085.357 I. Yu. Kubasova, L. M. Borisova, M. P. Kiseleva, L. I. Smirnova, A. P. Smirnova, S. V. Ustinkina, L. P. Sushinina, Z. S. Smirnova SEARCH OF POTENTIAL ANTITUMOUR COMPOUNDS AMONG OF SOMATOSTATIN HYPOTHALAMIC HORMONE ANALOGUES N. N. Blokhin Russian Cancer Research Center RAMS, Moscow ABSTRACT Hormonal and antitumour activities of 4 somatostatin hypothalamic hormone analogues were investigated. It has been showed that the compounds partially retain their specific somatostatin hormonal activity, and this was appeared in secretion inhibition of somatotrophic hormone, prolactin and insulin by corresponding endocrine glands in vitro and in vivo. It has been established that the compounds inhibit the growth of adenocarcinoma prostate of rats R-3327-H, DMBA induced breast tumours of rats and compounds I and II of breast tumor PM-1 in nude mice, exceeding antitumour action of sandostatine. The compounds I and II are the most active analogues. Key words: somatostatin, hormonal activity, antitumour activity. И. Ю. Кубасова, Л. М. Борисова, М. П. Киселева, Л. И. Смирнова, А. П. Смирнова, С. В. Устинкина, Л. П. Сушинина, 3. С. Смирнова ПОИСК ПОТЕНЦИАЛЬНЫХ ПРОТИВООПУХОЛЕВЫХ СОЕДИНЕНИЙ СРЕДИ АНАЛОГОВ ГИПОТАЛАМИЧЕСКОГО ГОРМОНА СОМАТОСТАТИНА ГУ РОНЦ им. НН Блохина РАМН, Москва РЕЗЮМЕ Работа посвящена изучению гормональной и противоопухолевой активности 4 синтезированных аналогов гипоталамического гормона соматостатина. Показано, что соединения частично сохраняют специфические гормональные свойства соматостатина и это проявляется подавлением секреции соматотропного гормона, пролак-тина и инсулина соответствующими эндокринными железами in vitro и in vivo. Выявлена противоопухолевая активность соединений на перевиваемой аденокарциноме предстательной железы Dunning R 332 H, ДМБА-инду-цированных опухолях молочной железы крыс и соединений I и II на раке молочной железы РМ-1 бестимусных мышей. Показана более высокая противоопухолевая активность 2 синтезированных аналогов соматостатина в сравнении с применяемым в медицине сандостатином (Sandos, Sweden). Отобраны соединения I и II для дальнейшего изучения. Ключевые слова: соматостатин, гормональная активность, противоопухолевая активность. вышенный интерес вызывает поиск принципиально ВВЕДЕНИЕ новых противоопухолевых веществ среди пептидных В последние годы фундаментальная медико-биоло- гормонов гипоталамуса, которые способны селектив-гическая наука достигла значительных успехов визуче- но воздействовать на процессы рецептороопосредо-нии механизма злокачественной трансформации кле- ванного взаимодействия и участвовать в передаче вну-ток и процесса метастазирования новообразований. триклеточных сигналов [9; 11]. Это позволило определить новые мишени воздействия Особое внимание привлекает гипоталамический потенциальных противоопухолевых средств [1; 2]. гормон соматостатин. Одной из основных функций соВ свете современных представлений о значении матостатина в организме является ингибирование сек-гормонов в развитии гормонозависимых опухолей по- реции гормона роста, наряду с этим соматостатин об- ч
№3/том5/2006 РОССИЙСКИЙ БИОТЕРАПЕВТИЧЕСКИЙ ЖУРНАЛ
1 1
1
ЛЕКАРСТВЕННАЯ ТЕРАПИЯ 129
>- ладает широким спектром биологического действия: учения цитотоксической активности отобрано не-угнетает выделение пролактина, инсулина, глюкагона, сколько пептидов для углубленного изучения. гормонов поджелудочной железы и желудочно-кишеч- В работе представлены результаты изучения горного тракта, стимулирующих пролиферативные про- мональной и противоопухолевой активности 4 синте-цессы в клетке [4]. Механизм ингибирования секре- зированных аналогов соматостатина. торных и пролиферативных процессов соматостатина и его аналогов реализуется через специфические ре- МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ цепторы, которые широко представлены на клетках Химический синтез тканей-мишеней: в ЦНС (гипоталамус, гипофиз, спин- Синтез аналогов соматостатина проводили класси-ной мозг) и желудочно-кишечном тракте (преимущес- ческими методами пептидной химии, используя метод твенно в поджелудочной железе, желудке, верхних смешанных ангидридов, активированных эфиров отделах тонкого кишечника). Показана высокая экс- и карбодиимидный. прессия рецепторов соматостатина на клетках злокаче- Для защиты а-аминогруппы на всех стадиях син-ственных опухолей: гастриноме, глюкагономе, карци- теза применяли трет-бутилоксикарбонильную (Вос) ноидных опухолях, мелкоклеточном раке лёгкого группы. Для защиты реакционноспособных групп и других [7]. в боковых цепях трифункциональных аминокислот ис- Соматостатин является естественным эндогенным пользовали бензилоксикарбонильную (Z) группу для регулятором клеточной пролиферации [6]. В основе защиты N£-аминогруппы лизина, тетрагидропира-непосредственного антипролиферативного эффекта нильную (Thp) для защиты сульфгидрильной группы соматостатина предполагается: цистеина. • прямое цитотоксическое действие на опухоль Вос-группу удаляли ацидолизом при комнатной при взаимодействии с рецепторами соматоста- температуре. Последовательность природного пепти-тина на клетках; да была модифицирована заменой остатка триптофана • торможение секреции ряда гормонов и факто- остатком D-триптофана. ров роста опухолей (СТГ, инсулиноподобный фактор роста, гастрин, глюкагон, вазоактивный Изучение гормональной активности соединений in интестинальный пептид, инсулин, холецисто- vitro и in vivo кинин, мотилин, серотонин и др.); В опытах in vitro применяли 5-дневные клеточные • угнетение образования сосудов, питающих опу- культуры островковых клеток поджелудочной железы холь (подавление неоваскуляризации). новорожденных крысят и клеточные культуры адено- Отличительной особенностью соединений этого гипофизов взрослых крыс. Активность соединений класса является отсутствие токсичности и высокая оценивали по их способности оказывать влияние на избирательность действия. Недостатком является секрецию пролактина культивируемыми клетками аде-то, что они быстро метаболизируют под действием ногипофизов крыс. протеиназ. Короткое время полужизни соматостати- В экспериментах in vivo использовали крыс линии на в крови (3 мин) нежелательно при его клиничес- Wistar массой 180-200 г, и было изучено только соедиком применении. Ферментативная устойчивость нение I. Инсулин в плазме крови определяли с помо-пептидных гормонов может быть достигнута путем щью готовых коммерческих наборов РИО-ИНС-ПГ125 J химической модификации аминокислотной цепи (Минск, Республика Беларусь). Гормон роста (СТГ) молекулы соматостатина, в частности, заменой ами- и пролактин определяли радиоиммунологическим ме-нокислот в нативном пептиде неприродными амино- тодом в гомологичной системе. Для определения прокислотами [8]. лактина в культуральной среде применяли систему Применяемый в настоящее время в клинической иммуноферментного анализа (ИФА) с использованием практике структурный аналог соматостатина - сан- пролактина крыс (в качестве антигена) и антисыво-достатин или октреотид состоит из 8 аминокислот ротки к нему. и имеет циклическое строение. Показаниями для применения сандостатина являются опухоли ост- Изучение противоопухолевой активности соеди-ровкового аппарата поджелудочной железы, рак нений поджелудочной железы, карциноидные опухоли, ме- Противоопухолевая активность соединений из-дуллярный рак щитовидной железы, аденомы гипо- учалась на опухолях крыс и на перевиваемом раке физа[5; 10]. молочной железы человека РМ-1 на бестимусных В ГУ РОНЦ им. Н. Н. Блохина РАМН на протяже- мышах. нии ряда лет также ведутся исследования по поиску Перевиваемая аденокарцинома предстательной потенциальных противоопухолевых соединений в ря- железы Dunning R 3327H (РПЖ) характеризуется ду аналогов гипоталамических гормонов. Впервые бы- наличием мембранных рецепторов для соматостати-ла обнаружена противоопухолевая активность гипота- на. Опухоль перевивали крысам-самцам линии ламического гормона меланостатина и его аналогов, Copenhagen массой тела 200-250 г, находящимся под в том числе цитотоксических [3]. Синтезирован боль- гексеналовым наркозом, фрагментом 5 мм3 подкожно шой ряд аналогов соматостатина. По результатам из- через разрез на правом боку животного. Лечение на- ч
№3/том5/2006 РОССИЙСКИЙ БИОТЕРАПЕВТИЧЕСКИЙ ЖУРНАЛ
1
1 1
130 ЛЕКАРСТВЕННАЯ ТЕРАПИЯ
к чинали при достижении объема аденокарциномы не торфениловым эфиром трет-бутилоксикарбонил-D-менее 1000 мм3. триптофаном (Boc-D-Trp-OPfp). К трипептиду при-На ДМБА-индуцированных опухолях молочной соединяли следующую аминокислоту фенилаланин железы крыс изучали действие синтезированных со- (Phe) также методом активированных эфиров, ис-единений в зависимости от степени угнетения выделе- пользуя пентафторфениловый эфир ^^-трет-бути-ния пролактина. Индукцию опухолей молочной желе- локсикарбонилфенилаланин (Boc-Phe-OPfp). К полу-зы осуществляли 4-кратным еженедельным внутри- ченному тетрапептиду присоединяли защищенный венным введением водно-жировой эмульсии ДМБА цистеин ^^-трет-бутилоксикарбонил^-тетрагидро-в суммарной дозе 8 мг на крысу. Опухоли индуцирова- пиранил-цистеин пентафторфениловый эфир (Boc-ли укрыс-самок породы Wistar в 55-дневном возрасте. Cys(Thp)-OPfp). В результате синтеза получили за-Лечение начинали при достижении первичными опу- щищенный пентапептид (I). Удаление защитных холями размеров не менее 1500 мм3, когда они практи- групп с соединения (I) привело к соединениям чески не подвергаются спонтанной регрессии. (II) и (III). Аналоги соматостатина вводили в дозе 100 мкг/кг Гексапептид (IV) получали присоединением цис-и 200 мкг/кг подкожно ежедневно в течение 30 дней теина H-Cys(Thp)-OMe к пентапептиду Boc-Cys(Thp)-в 10%-ном водно-спиртовом растворе. Длительность Phe-D-Trp-Lys(Z)-Thr-OH. введения соединения I на РПЖ составила 55 дней, т.к. В результате синтеза и хроматографической очист-его гормональное действие in vivo (ингибирование се- ки выделены соединения: креции гормона роста, пролактина) не соответствова- Boc-Cys(Thp)-Phe-D-Trp-Lys(Z)-Thr-OMe (I); ло противоопухолевому эффекту при лечении в тече- H-Cys-Phe-D-Trp-Lys-Thr-OMe (II); ние 30 дней, что послужило основанием продлить HCl H-Cys(Thp)-Phe-D-Trp-Lys(Z)-Thr-OMe (III); курс введения препарата. Boc-Cys(Thp)-Phe-D-Trp-Lys(Z)-Thr-Cys(Thp)-Опытные группы формировали из 8 животных, OMe (IV). контрольные- из 10-22 крыс. Пептиды были охарактеризованы элементным Рак молочной железы РМ-1 бестимусных мышей, анализом, тонкослойной хроматографией, HPLC, полученный из аденокарциномы молочной железы че- NMR и аминокислотным анализом. ловека Е. С. Ревазовой, перевивали подкожно в правый бок животного взвесью опухолевых клеток (1 х 106 Изучение гормональной активности соединений in в 0,5 мл среды 199). Лечение начинали на 9-е сутки vitro и in vivo после перевивки. В исследованиях in vitro соединение I не влияло Противоопухолевый эффект оценивали по крите- на секрецию СТГ в культуре аденогипофизарных кле-рию торможения роста опухоли (ТРО, %) в опытных ток и на секрецию инсулина в культуре клеток подже-группах по сравнению с контролем. Наблюдение за лудочной железы (табл. 1). In vivo ^единение I подав-опытными крысами проводили в зависимости от дли- ляло секрецию СТГ: через 2 ч после его введения тельности сохранения противоопухолевого эффекта, в дозе 2,5 мг/кг содержание гормона роста в сыворот-но не менее 15 нед. ке крови крыс уменьшалось в 3,8 раза по сравнению Торможение роста опухоли вычислялось по фор- с контролем. Содержание пролактина достоверно муле: снижалось до 8,6 мкЕД/мл после применения соеди-ТРО (%) = (V к - Vо)/ Vк x 100, нения I в диапазоне доз 0,62-2,5 мг/жив и инсулина -где Vк - средний объем опухолей в контрольной до 3,4 мкЕД/мл. Содержание инсулина в сыворотке группе (мм3); крови крыс через 60 мин после внутрибрюшинного Vо средний объем опухолей в опытной груп- введения соединения I в дозе 1,25 мг/кг снижалось пе (мм3). в 2,4 раза, а в дозе 2,5 мг/кг - в 4,9 раза по сравнению с контролем. Объем (V) = произведению 3 максимальных вза- При изучении влияния соединения II в дозе имно перпендикулярных размеров опухоли. 1 мкг/мл на секрецию пролактина в культуре аденоги-Статистическую обработку полученных результа- пофизов крыс выяснилось, что оно не оказывает су-тов проводили по методу Фишера-Стьюдента. Разли- щественного влияния на базальную секрецию пролак-чия между сравниваемыми группами считались стати- тина культивируемыми клетками. Не выявлено также стически достоверными при р<0,05. выраженного эффекта соединения II в той же дозе на стимулированную секрецию пролактина, вызванную РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ действием тиролиберина (ТРГ) и дибутилрил-цикли-Химический синтез ческого аденозин-монофосфата (дбцАМФ). Однако В качестве исходного соединения для синтеза пен- в дозе 10,0 мкг/мл (что превышает в 10 раз эффектив-тапептида (I) использовали треонин (Thr). Метиловый ную дозу природного стимулятора - соматостатина) эфир треонина реагировал с ^^-трет-бутилоксикарбо- у этого соединения обнаруживается тенденция к по-нил^£- карбобензоксилизином (Boc-Lys(Z)-OH). Со- давлению стимулированной ТРГ и дбцАМФ секреции единяли дициклогексилкарбодиимидным методом. пролактина культивируемыми клетками аденогипо-Полученный дипептид взаимодействовал с пентаф- физов. ч
№3/том5/2006 РОССИЙСКИЙ БИОТЕРАПЕВТИЧЕСКИЙ ЖУРНАЛ
1 1
Таблица 1
Гормональная активность аналогов соматостатина
Соединения Гормональная активность
Boc-Cys-Phe-D-Trp-Lys)-Thr-OMe (I) Ингибирует секрецию СТГ, пролактина и инсулина in vivo
H-Cys-Phe-D-T rp-Lys)-Thr-OMe (II) Выявлена тенденция к подавлению стимулированной ТРГ и дбцАМФ секреции пролактина in vitro
HCl-H-Cys(Tbp)-Phe-D^-Lys(Z)-Thr-OMe(III) Выявлена тенденция к подавлению стимулированной ТРГ и дбцАМФ секреции пролактина in vitro
Boc-Cys(Thp)-Phe-D-Trp-Lys(Z)-Thr-Cys(Thp)-OMe (IV) Выявлена тенденция к подавлению стимулированной ТРГ и дбцАМФ секреции пролактина in vitro
Соединения III и IV не проявили существенного влияния на базальную секрецию пролактина клетками в культуре аденогипофизов крыс. В дозе 10,0 мкг/мл у них обнаруживалась тенденция к подавлению стимулированной ТРГ и дбцАМФ секреции пролактина.
Изучение противоопухолевой активности соединений
Противоопухолевое действие соединений изучалось на перевиваемой гормонозависимой аденокарциноме предстательной железы R3327-H (РПЖ) крыс-самцов линии Copenhagen и на ДМБА-индуцирован-ных опухолях молочной железы (ОМЖ) неинбредных крыс-самок. На клетках РПЖ и ОМЖ экспрессированы мембранные рецепторы соматостатина, что позволило оценить антипролиферативное действие соединений, опосредованное через эти рецепторы. На ОМЖ противоопухолевое действие аналогов соматостатина проявляется вследствии угнетения выделения пролактина и также опосредованно через рецепторы соматостатина.
При изучении противоопухолевого действия аналогов соматостатина на перевиваемой гормонозависимой аденокарциноме предстательной железы R3327-H соединения вводили в дозе 100 мкг/кг в течение 30 дней ежедневно, а соединение I - в течение 55 дней (рис. 1).
Показано, что на фоне пролонгированного введения соединение I тормозило рост опухоли на 45 % (р=0,05). Максимальный терапевтический эффект наблюдался на 10-й нед опыта (ТРО=55 %; р=0,05), после чего наблюдалось постепенное снижение противоопухолевого эффекта.
Противоопухолевый эффект соединения II стал проявляться уже через 1 нед после начала лечения и составлял 52 % торможения роста опухоли (р<0,05),
Недели
—♦—Соединение I -«-Соединение II -д-Соединение III —к-Соединение IV
Рис. 1. Противоопухолевое действие аналогов соматостатина на аденокарциноме предстательной железы Я3327-Н (режим введения соединений - 100 мкг/кг ежедневно в течение 30 дней)
а максимальный терапевтический эффект выявлен на 7-й нед опыта (ТРО=65 %; р<0,05).
Соединение III тормозило рост опухоли через 2 нед от начала его введения на 59 % (р=0,05). Терапевтический эффект сохранялся в течение 3 нед после окончания курса лечения (ТРО = 50-56 %; р<0,05).
Соединение IV оказывало кратковременное противоопухолевое действие с 4-й по 6-ю нед опыта (ТРО= 43 % и 46 % соответственно; р=0,05). В последующие сроки наблюдения противоопухолевый эффект значительно снижался.
На ДМБА-индуцированных опухолях молочной железы (рис. 2) противоопухолевый эффект соединения I после окончания лечения составлял 49 % ТРО, на 6-й нед - 54 % (р<0,05), на 8-й нед - 64 % и далее нарастал до 90 % (с10-й по 13-ю нед).
Соединение II на ДМБА-индуцированных опухолях не было изучено.
Недели
—♦—Соединение I -« Соединение III —Д-Соединение IV —х-Сандостатин
Рис. 2. Противоопухолевое действие аналогов соматостатина на ДМБА-индуцированных опухолях молочной железы в сравнении с сандостатином (режим введения соединений - 100 мкг/кг ежедневно в течение 30 дней)
У соединения III терапевтический эффект нарастал более медленно, статистически значимое противоопухолевое действие оно оказывало на 6-й нед опыта (ТРО = 54 %; р<0,05), а максимальный - на 14-й (ТРО=85%; р<0,05).
Терапевтический эффект у соединения IV проявлялся уже с 3-й нед опыта (ТРО=51 %; р<0,05), затем постепенно нарастал, и максимальный эффект был обнаружен на 10-й нед (ТРО=79 %; р<0,05).
Сандостатин по противоопухолевой активности уступал всем 3 соединениям, и максимальный, но кратковременный терапевтический эффект наблюдался на 13-й нед опыта и составлял 74 % торможения роста опухоли (р<0,05) .
При изучении зависимости противоопухолевого эффекта соединений I и IV от дозы на ДМБА-индуци-рованных опухолях молочной железы показано, что в диапазоне доз от 100 мкг/кг до 200 мкг/кг терапевтический эффект прямо пропорционален вводимой дозе до 8-й нед наблюдения (рис. 3). В период с 10-й по 14-ю нед наблюдения зависимость терапевтического эффекта соединений от дозы статистически не значима (р>0,05).
100
2 4 6 8 10 12 14
Недели
□ Соединение 1-100 мкг/кг □ Соединение I - 200 мкг/кг
□ Соединение IV-100 мкг/кг □ Соединение IV- 200 мкг/кг
Рис. 3. Зависимость противоопухолевого эффекта аналогов соматостатина от дозы соединения на ДМБА-индуцированных опухолях молочной железы крыс
На раке молочной железы РМ-1 у бестимусных мышей (табл. 2) было выявлено, что на фоне введения соединений максимальный терапевтический эффект составил для соединения I - 47 % ТРО, для соединения II - 63 % ТРО, что превышало действие сандоста-тина (39 % ТРО). Непосредственно после окончания лечения терапевтический эффект сохранялся и составил для соединения I - 45 % ТРО, для соединения II -55 % ТРО, для сандостатина - 40 % ТРО. Наиболее эффективным на РМ-1 оказалось соединение II - в течение 10 дней противоопухолевый эффект составлял 5560 % торможения роста опухоли.
ВЫВОДЫ
1. Синтезированы аналоги соматостатина как потенциальные противоопухолевые соединения.
2. Аналоги соматостатина частично сохраняют специфические гормональные свойства последнего, что проявляется подавлением секреции СТГ, пролак-тина и инсулина соответствующими эндокринными железами in vitro и in vivo.
3. Аналоги соматостатина ингибируют рост аденокарциномы простаты крыс R-3327-H (максимальный эффект = 46-65%) и ДМБА индуцированной опу-
Таблица 2
Противоопухолевая активность соединений I и II при раке молочной железы РМ-1 бестимусных мышей в сравнении с сандостатином
Препарат Доза (мкг/кг)/ интервал (ч) х число введений Торможение роста опухолей, %
Дни
13 16 20 23
Соединение I 100/24x21 49* 36 47* 45
Соединение II 100/24x21 60* 54* 63* 55*
Сандостатин 100/24x21 34 38 39 40
*р<0,05
V-
холи молочной железы крыс (максимальный эффект 79-90 %).
4. Аналоги соматостатина I и II тормозят рост перевиваемого рака молочной железы человека РМ-1 у бестимусных мышей на 47 % и 63 % соответственно.
5. Показана более высокая противоопухолевая активность синтезированных аналогов соматостатина I, III и IV на ДМБА-инуцированных опухолях молочной железы, а также соединений I и II на РМ-1 у бестимусных мышей в сравнении с применяемым в медицине сандостатином, эффект которого на этих опухолях составляет 74 % и 40 % ТРО соответственно.
6. Полученные данные демонстрируют перспективность поиска потенциальных противоопухолевых препаратов в ряду аналогов соматостатина.
ЛИТЕРАТУРА
1. Личиницер М. Р., Степанова Е. В. Лекарственная терапия опухолей в XXI веке. - Этюды химиотерапии. - Под ред. Горбуновой В. А., Артамоновой Е. В., Базина С. Г. и др. - М.: Литтерра, 2006. - С. 28-30.
2. Личиницер М. Р., Степанова Е. В. Направленная терапия - новое направление лечения злокачественных опухолей. - Этюды химиотерапии. - Под ред. Горбуновой В. А., Артамоновой Е. В., Базина С. Г. и др. -М.: Литтерра, 2006. - С. 31-38.
3. Смирнова Л. И., Устинкина С. В., Смирнова 3. С. Синтез и противоопухолевая активность гормона гипоталамуса меланостатина и его аналогов. - Экспериментальная онкология на рубеже веков. - Под ред. Давыдова М. И., Барышникова А. Ю. - М., 2003. - С. 261-280.
4. Buscail L., Vernejoul F., Faure P. et al. Regulation of cell proliferation by somatostatin // Ann Endocrinol. -2002. - Vol. 63. - P. 2S13-8.
5. Comary-Schally A. M., Schally A. V. A clinical overview of carcinoid tumors: respectives for improvement in treatment using peptide analogs (review) // International Journal Of Oncology. - 2005. - Vol. 26(2). -P. 301-309.
6. Liebmann C. Regulation of MAP kinase activity by peptide receptor signaling pathway: paradigms of multiplicity // Cell Signal. - 2001. - № 13. - P. 777-785.
7. Nagy A., Schally A. V. Targeting cytotoxic conjugates of somatostatin, luteinizing hormone-releasing hormone and bombensin to cancer expressing their receptors: a “smarter” chemotherapy // Current Pharmaceutical Design. - 2005. - Vol. 11, №9- P. 1167-1180.
8. Schally A. V. Oncological applications of somatostatin analogs // Cancer Research. - 1988. - Vol. 48. - P. 6977-6985.
9. Schally A. V., Comary-Schally A. M., Nagy A. et. al. Hypotalamic hormones and cancer // Front. Neuroendocrinol. - 2001. - № 22. - P. 248-291.
10. Schally A. V., Szepeshazi K., Nagy A. et al. New approaches to therapy of cancers of the stomach, colon and pancreas based on peptide analogs // Cellular and Molecular Life Sciences. - 2004. - Vol. 61. - P. 1042-1048.
11. Weckbecker G., Lewis I., Albert R. et al. Opportunities in somatostatin research: biological, chemical and therapeutic aspects // Nature Rev. Drug Discovery. - 2003. - Vol. 2. - P. 999-1017.
nocTynn^a 25.09.2006.
4
