CC BY
38
УДК 615.322
ПОИСК ГОРМОНОРЕГУЛИРУЮЩИХ ВЕЩЕСТВ В КУЛЬТИВИРУЕМЫХ КЛЕТКАХ ACONITUM BAIKALENSE.
л О
А. А. Семенов1, А. Г. Еникеев2
ФГБОУ ВПО НИ Иркутский государственный технический университет, 664074, г. Иркутск, ул. Лермонтова, 83, laps1936@mail.ru. 2ФГБУН Сибирский институт физиологии и биохимии растений СО РАН, 664033, г. Иркутск, ул. Лермонтова, 132, and56irk@mail.ru.
Водно-спиртовая настойка (баякон) из растения Aconitum baikalense (аконит байкальский, аконит Чекановского) обладает широким спектром физиологического действия на организм млекопитаю-
щих и человека. Научными экспериментами подтверждено её противовоспалительное, противоме-тастатическое, стресс регулирующее действие. Используется она и для лечения многих гормональных расстройств. Объектом исследования биологической активности аконита байкальского послужила суспензионная культура клеток. Ил. 3. Библиограф. 5 назв.
Ключевые слова: растительное сырье, фармацевтика, биологически активные вещества, суспензионная культура клеток.
HORMONE REGULATING SUBSTANCES IN CULTURED CELL OF ACONITUM BAIKALENSE
A.A. Semenov, A.G. Enikeev
Irkutsk State Technical University,
83, Lermontov St., Irkutsk 664074 Russia.
Siberian Institute of Plant Physiology and Biochemistry,
132, Lermontov St., Irkutsk 664033 Russia.
Water-alcohol tincture of Aconitum baikalense has a wide range of physiological effects on the organism of mammals and man. Scientific experiments confirmed its anti-inflammatory, anti-metastatic, stress regulatory activity. The tincture can applied to treat hormonal disorders. In this work, the suspension culture of cells has been studied. 3 figures. 5 sources.
Keywords: plant materials, pharmacy, biological active substances, suspension culture of cells.
Водно-спиртовая настойка (баякон) из растения Aconitum baikalense (аконит байкальский, аконит Чекановского) обладает широким спектром физиологического действия на организм млекопитающих и человека. Научными экспериментами подтверждено её противовоспалительное [1], про-тивометастатическое [2], стресс регулирующее действие [3]. Кроме того, как показывает практика народной медицины, это единственное известное на сегодня средство для безрецидивного лечения псориаза. Используется она и для лечения многих гормональных расстройств. Причём одна и та же доза этого средства эффективна как при патологически повышенной продукции гормонов, так и
при их недостаточном содержании в организме. В то же время никаких гормонально активных веществ она не содержит. Например, рисунок 1 иллюстрирует действие баякона на продукцию гормонов щитовидной железы в эксперименте, проведённом на крысах [4].
Как видно, функция щитовидной железы нормализуется одинаковой дозой баякона при любом знаке отклонения от нормы. Это совершенно новое, ранее не наблюдавшееся явление. Мы считаем, что такое действие возможно только в том случае, если баякон способен регулировать функцию гипоталамо-гипофизарной системы головного мозга. Очень краткая схема этой системы показа-
Степень отклонения от контроля
12
10
8
6
и
Гипертиреоз
Баякон
Гипотиреоз Баякон
| | - Т3 | - Т4 | | - ТТГ • - диапазон нормальных значений Рис. 1. Содержание тиреоидных гормонов и ТТГ в крови крыс с гипер- и гипотиреозом к концу 4-х недельного лечения экстрактом аконита байкальского (баякон)
4
2
0
-2
-4
Сигналы ЦНС
Гипоталамус
Рилизг-гомоны
Щитовидная железа
Т3, Т4
Г ипофиз
Пролактин, окситоцин
Надпоч ечники
Гонады
.1
Половые гормоны
Кортикостероиды
Рис. 2. Краткая схема регуляции гормонального гомеостаза
на на рисунке 2.
Основную роль играет центральная нервная система, которая посылает электрические импульсы в отдел мозга гипоталамус. В ответ на это гипоталамус вырабатывает белковые рилизинг-гормоны, которые побуждают другую мозговую структуру - гипофиз - синтезировать также белковые тропные гормоны. Они поступают в кровь и достигают желез внутренней секреции, побуждая их выделять гормональные вещества, непосредственно регулирующие деятельность многих органов. Их называю гормонами эффекторными. Эф-фекторные гормоны - пролактин и окситоцин, и некоторые другие - синтезируются гипофизом непосредственно.
Избыточное содержание пролактина в крови женского организма - распространённая причина бесплодия. Баякон нормализует этот показатель и индуцирует способность к деторождению. Так как пролактин является непосредственным продуктом гипофиза, мы считаем, что большинство эффектов баякона опосредуются через нормализацию гипоталамо-гипофизарной системы головного мозга. Такой способ действия является уникальным, и его исследование имеет большое научное и практическое значение. И, конечно, для его изучения необходимо знать химическую природу веществ, вовлеченных в этот процесс. В данной статье описываются начальные попытки выяснить это.
Объектом исследования послужила суспензионная культура клеток аконита байкальского [5], которая сохраняла способность регулировать гормональный фон. Лиофильно высушенная биомасса клеток экстрагировалась последовательно растворителями с увеличивающейся полярностью:
петролейный эфир (гексан), хлороформ, этилаце-тат, ацетон, спирт, вода. Искомая биологическая активность обнаруживалась в петролейноэфир-ном, хлороформном и спиртовом экстрактах. Это говорило о том, что биологический эффект не привязан к одному химическому веществу. Петро-лейноэфирный экстракт подвергали колоночной хроматографии на силикагелевых колонках, используя в качестве элюэнта смеси гексана с хлороформом. При этом была получена биологически активная фракция, состоящая в основном из р-ситостерина. После отделения основной массы стерина биологическая активность сосредоточилась в смеси, содержащей р-ситостерин и смесь его сложных эфиров с длинноцепными полиненасыщенными жирными кислотами. Используя методы высокоразрешающей хроматомасс-спектрометории и ядерного магнитного резонанса, удалось примерно определить преобладающие компоненты этой смеси, как это показано на рисунке 3.
Так как заранее не было известно, к каким химическим веществам принадлежат биологически активные составляющие, то не были предприняты меры защиты полиеновых кислотных остатков от деградации. Указанные положения двойных связей наиболее вероятны, но не бесспорны. Из-за их нестабильности в обычных условиях вопрос точной химической структуры не выяснен. Для того чтобы это сделать, выделение их и работа с ними будут повторены в инертной атмосфере
Водно-спиртовая настойка дикорастущего растения сохраняет биологическую активность, по крайней мере, в течение года, что трудно согласовать с нестабильностью выявленных действую-.
RO
ММ 758,57702 о O
C26
ММ 782,57690
Рис. 3. Основные ингредиенты биологически активной фракции
щих веществ. Возможны два объяснения этому.
Первое. Гормонорегулирующую активность проявляют не сами полиеновые эфиры, а продукты их окислительной деградации. Аналогия этому имеется: мощные биорегуляторы гипоксилины -продукты окисления тетраеновой арахидоновой кислоты в животных организмах.
Второе. После деградации полиеновых эфи-ров биологический эффект может сохраняться за счёт действия неизвестных веществ, давших о себе знать в спиртовом экстракте из клеточной биомассы.
БИБЛИОГРАФИЧЕСКИМ СПИСОК
1. Новый препарат для лечения пролифера-тивно-воспалительных заболеваний / В. Г. Пашин-ский [и др.] // Отчёт Томского института фармакологии СО АМН. 1999.
2. Пат. № 2189832 РФ Средство, обладающее противометастатической активностью / Па-шинский В.Г., Семенов А.А., Поветьева Т.Н. и др. 2001г.
3. Стресс-модулирующий эффект алкалоидов Aconitum baicalense при воспалении и мобилизации / С.В. Пушкарский [и др.] // Раст. ресурсы. 2006. Т. 42, № 2. 115-118.
4. Корригирующее действие настойки баякон на функцию щитовидной железы / Л.С. Васильева [и др.] // Хим. фарм. Журнал. 2005. Т. 39, № 5. С. 23-25.
5. Культура клеток Aconitum baicalense 1907 -перспективный источник биологически активных соединений / А.Г. Еникеев [и др.] // Научные ведомости Белгородского государственного университета : естеств. науки. 2011. № 3, вып. 14/1. С. 2530.
Поступило в редакцию 19 октября 2012 г
