CC BY
78
Лекарственные растения
О ИЗАТУЛИН В.Г., СЕМЕНОВ A.A., М А Н Ю К Е.С. -УДК 616.441:615.322+616-092.9
МОРФОМЕТРИЧЕСКОЕ ИССЛЕДОВАНИЕ СТРУКТУРЫ ЩИТОВИДНОЙ ЖЕЛЕЗЫ БЕЛЫХ КРЫС ПРИ КОРРЕКЦИИ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОГО ГИПО- И ГИПЕРТИРЕОЗА РАСТИТЕЛЬНЫМ ПРЕПАРАТОМ "БАЯКОН"
ВТ. Изатулии, А. А. Семенов, Е.С. Маток.
(Иркутский государственный медицинский университет, ректор - акад. МТА и АН ВШ, д.м.н., проф.
A.A. Майборода, кафедра гистологии и эмбриологии, зав. - д.м.н., проф. Л.С. Васильева)
Резюме. Работа посвящена исследованию влияния растительного препарата аконита байкальского на морфологическое состояние щитовидной железы в условиях экспериментального гипо- и гипертиреоза. Адекватность полученной модели и эффективность коррекции оценивали путем определения морфометрических показателей щитовидной железы.
По данным эпидемиологических исследований, в последние два десятилетия отмечается рост заболеваемости щитовидной железы, что вызывает интерес исследователей к данной проблеме. Дисфункция щитовидной железы полиэтиологич-на, может быть связана с аномалией развития, генетической аутоиммунной патологией, дефицитом Т-супрсссоров, воспалительным процессом в ткани щитовидной железы, врожденным дефектом ферментных систем, медикаментозной терапией, струмогенным эффектом дефицита микроэлементов (йод, селен, кобальт, хром, медь и магний) и другими причинами [1,6,10].
Лечебная тактика заболеваний щитовидной железы за последние 10-15 лег заменю не изменилась, а арсенал эффективных лекарственных средств, предназначенных для лечения и профилактики указанной патологии, явно недостаточен. В связи свыше изложенным, актуальность исследований по изучению эффективных лекарственных средств, предназначенных для лечения и профилактики заболеваний щитовидной железы, не вызывает сомнений [7,9].
Наиболее перспективным в данном отношении представляется препарат аконита байкальского "Баякон". Биологическая активность аконита байкальского обусловлена содержанием дитерпено-вых алкалоидов (зонгорин, напеллин, мезакони-тин и гипаконитин) и флавоноидов (гликозиды бикемпферола и бикверцетина, а также кверцети-на и кемпферола) [13,20]. Настойка аконита байкальского представляет собой комплекс вещее ТВ, экстрагируемых из травы аконита байкальского 30% раствором этилового спирта с последующим отстаиванием и фильтрацией. Нами была проведена коррекция нарушения структуры щитовидной железы растительным препаратом "Баякон" при различной обеспеченности организма тирео-идными гормонами в условиях экспериментального гипо- и гипертргреоза, что и явилось основной задачей нашего исследования [2,5].
Материалы и методы
Экспериментальный гипертиреоз моделировали у 98 беспородных белых крыс-самцов, в возрасте 3-4 месяцев, массой 160-180 г. Животные были разделены на 3 группы: 1 Оя группа получила тиреотом ("BERLIN-CHEMIE AG", Германия) в дозе 4 табл. на кг массы (1 таблетка содержит 10 мг лиотиронина и 40 мг левотироксина). Препарат вводили перорально, ежедневно, в составе обычного рациона пиши, в течение 2-х недель; 2-я группа получила тиреотом в такой же дозировке, в аналогичные сроки, с последующей коррекцией препаратом "Баякон". Препарат вводили крысам эндогастрально, ежедневно, в дозировке 0,5 мл на кг массы, в течение 4-х недель, 3-я группа - ин-такные животные того же возраста и пола, получавшие по аналогичной схеме в соответствующем объеме дистиллированную воду.
Экспериментальный гипотиреоз моделировали у 96 белых крыс по аналогичной схеме. Животные также были разделены на 3 группы: 1-я группа
получала мерказолил ("Акрихин", Россия) в дозе 10 мг на кг массы. Препарат вводили ежедневно, перорально, в составе обычного рациона пищи, в течении2-х недель; 2-я группа получала мерказолил в такой же дозировке, в аналогичные сроки, с последующей коррекцией препаратом "Баякон". Препарат вводили крысам эндогастрально, ежедневно, в дозировке 0,5 мл на кг массы, в течение 4-х недель. Третья группа - интактные животные. На 4-й, 6-й и8-й неделе эксперимента после декантации проводили забор морфологического материала [12]. Для морфометрического исследования ЩК использовали обе доли, которые фиксировали в 10% растворе формалина и заливали в гистопласт. Серийные срезы толщиной 7 мкм окрашивали гематоксилином и эозином. Часть срезов толщиной 5 мкм окрашивали азуром и эозином [8,11].
Для патоморфологического анализа щитовидной железы нами были использованы алгоритмы
гистологического описания, разработанные O.K. Хмельницким [15], для унифицированного патогистологического исследования и объективизации оценки отмеченных изменений [3,4,14].
Так, как изменение функциональной активности щитовидной железы сопровождается перестройкой ее гистоструктуры, которая выражается в изменении ее тканевых компонентов, в работе была использована методика определения соотношения тканевых компонентов. Методом точечного счета проводили морфометрню структурных компонентов ЩЖ: фолликулярного эпителия,
стромы, интерфолликулярного эпителия, сосудов [11,15]. Полученные результаты обрабатывали методами вариационной статистики.
Результаты и обсуждение
Клинические признаки нарушения функции щитовидной железы обнаруживались у животных обеих опытных серий к концу 1-го месяца эксперимента. У крыс, получавших мерказолнл, отмечалось понижение двигательной активности, а у животных, подвергавшихся действию тнреотома, двигательное беспокойство. К концу эксперимента появились признаки трофических расстройств (участки облысения). Средняя масса крыс с ги-пертиреозом составила 141,5±2,8 г., с гипотиреозом - 281,8±3,6 г., в контрольной группе - 176,4± ±2,5 г. (р<0,01).
Весьма наглядны были изменения основных функциональных единиц щитовидной железы -фолликулов и, в особенности, тироцитов. как продуцентов тиреоидных гормонов. Прн гнпертнрео-зе отмечались изменения в структуре железы, свидетельствующие о стимуляции внутриклеточных процессов, связанных с увеличением ее секреторной активности. Наблюдалась гиперплазия тиреондното эпителия, фолликулярный эпителий приобретал высокопризматическую форму, фолликулы были небольших размеров, неправильной формы. Отмечалось новообразование фолликулов, развитие в них сосочковых выростов и скопление тиреоцитов у полюсов или по всему периметру фолликулов. Аналогичным образом приближалась к нормальным значениям площадь тироцитов. У гипертиреоидных животных она достигала в среднем 52,3±0,41 мкм', а после коррекции "Балконом" уменьшалась до 37,4±0,33 мкм2.
Регулирующее действие "Баякона" при гипер-и гипофункциях щитовидной железы подтверждается и на других морфологических характеристиках функционирующей ткани щитовидной железы. Особенности развивающихся морфофункциональных отношений можно было также оценить по состоянию коллоида, количество которого зависит от функционального состояния железы. Прн повышении ее активности утилизация тироглобу-лина усиливается, что приводит к уменьшению его относительного объема. По данным авторов [6,12], тироглобулин синтезируется на рибосомах шероховатой эндоплазматической сети тироцита в виде претироглобулина, затем переносится в цистерны, где и формируются вторичные и третич-
ные структуры тироглобулина, а также углеводные компоненты молекулы. Из цистерн шероховатой эндоплазматической сети тироглобулин транспортируется в комплекс Гольджн, где происходит окончательное образование углеводных компонентов. Далее тироглобулин перемещается к апикальной части клетки, образуя пузырьки, содержимое которых освобождается в просвет фолликула путем экзоцитоза. В апикальной части тироцита происходит йодирование тиреоглобулина с последующим его депонированием в виде коллоида.
При экспериментальном гипертиреозе относительный объем коллоида уменьшался и к 8 неделям составлял 22,4±0,3% (в контроле 46,2±0,8%). В результате уменьшения относительного объема коллоида фолликулярно-коллоидный индекс ЩЖ (ФКИ) -отношение объемных фракций эпителия н коллоида значительно увеличился (почти в 3 раза) и составлял 2,34 (в контроле 0,77). Содержание ннтрафолликулярного йода увеличивалось до 0,81±0,08 (в контроле 0,35±0,01), плотность коллоида уменьшилась до 19,8+0,17 (в контроле 34,6± ±0,2). Прн экспериментальном гипотиреозе за счет накопления коллоида внутри фолликулов его относительный объем увеличивался до 70,±0,43% (в контроле 46,2±0,8%), за счет чего величина фолликулярно-коллоидного индекса (ФКИ) уменьшилась до 0,33 (в контроле 0,77). Прн снижении активности щитовидной железы синтез н накопление основного компонента коллоида - тн-роглобулина усиливается. За счет чего увеличивается его относительный объем. Концентрация ин-трафоллнкулярного йода уменьшилась до 0,22± ±0,22 (в контроле 0,35+0,01), а плотность коллоида - до 52,1 ±0,1 8 (в контроле 34,6±0,2).
90
80
70
60
50
40
30
20
10
о
Рнс. 1. Динамика изменения среднего диаметра фолликулов (в мкм) прн коррекции экспериментального ги-пертиреоза.
Очевидно, препарат "Баякон" оказывает влияние на процессы депонирования тиреоглобулина, так как при коррекции в течение 8 недель содержание коллоида изменялось следующим образом: при коррекции гипертиреоза относительный объем коллоида к 56 суткам увеличивался до 47,0+ ±0,38% (без коррекции 26,5±0,6%), плотность коллоида достигла значения 31,5±0,08 (без кор-
мкм
□ интакгные □ гипертиреоз □ гипотиреоз
1 2
недели
рекцнн 25,4+0,08). За счет увеличения объема коллонда величина фоллнкулярно-коллондного индекса (ФКИ) уменьшалась и была равна 0,82± ±0,04 (без коррекции 2,6±0,49). Концентрация нн-терфоллнкулярного йода уменьшилась до 0,42± ±0,02 (без коррекции 0,71 ±0,03).
При коррекции экспериментального гипотиреоза относительный объем коллонда несколько уменьшался: 67,8±0,36% (без коррекции 69,5±
+0,35%), в результате уменьшения относительного объема коллонда фоллнкулярно-коллондный индекс (ФКИ) увеличился н составляет 0,38±0,003 (без коррекции 0,35±0,007). Плотность коллонда уменьшилась до 38,5+0,18 (без коррекции 41,2± ±0,34). Концентрация ннтерфоллнкулярного йода составила 0,27±0.09 (без коррекции 0,26±0,08).
недели
Рнс.2. Динамика изменения средней площади тнроцнтов (мкм*) при коррекции экспериментального гнпер-гнреоза
Накопление коллонда, плотность его, а также содержание ннтерфоллнкулярного йода зависят от процессов синтеза тнрорвдных гормонов в просвете фолликулов. После захвата йода щитовидной железой тнроцнт осуществляет органнфнкацню (окисление) йода н йодирование тирозина в ти-роглобулнне. Синтез тнрондных гормонов начинается с фиксации йода в молекулу тирозина. Для этого йоднд должен быть окислен до активной формы при помощи фермента тнропероксндазы н перекиси водорода (Н2О2). Перекись водорода генерируется днгндроннкотннамндаденнндннуклео-тндфосфат (МаБРН), который при участии соответствующей оксндазы окисляется в присутствии нонов кальция н этот процесс стимулируется ТТГ. Активированный таким образом йоднд способен йодировать молекулу тирозина с образованием монойодтнрознна (МИТ) нлн днйодтнрознна (ДИТ). При помощи этой тнропероксндазной системы щитовидная железа использует каждый поступающий в нее атом йода н препятствует возможному возвращению йоднда в кровяное русло. Очевидно, препарат "Баякон" влияет на обмен тнропероксндазной системы, влияя на синтез тирозина н тем самым изменяя количество н состояние коллонда при коррекции. Изменение содержание ннтерфоллнкулярного йода в процесс коррекции также может говорить о влиянии препарата на его обмен.
Микроскопическая картина структурных изменений щитовидной железы при коррекции ги-по- н гнпертнреоза затрагивала также стромаль-ные компоненты: относительный объем стромы н относительный объем пернфоллнкулярного сосудистого русла.
При сравнрртельной оценке терапевтического эффекта данного растительного препарата на со-стоянрре сосудистого русла были отмечены следующие изменения кровоснабжения щитовидной железы: при экспериментальном гнпертнреозе относительный объем перррфоллнкулярного сосудистого русла увелррчнлся до 0,164 мкм/100 г (в контроле 0,14 мкм/100 г) за счет расшрррення меж-дольковых венул н капилляров, окружающих фолликулы. При экспериментальном гршотррреозе относительный объем пернфоллнкулярного сосудистого русла к 56 суткам уменьшился незначительно - 0,131 мкм/100 г (в контроле 0,14 мкм/ 100 г) за счет сужения междольковых венул н капилляров, окружающих фоллрркульг.
Относительный объем пернфоллнкулярного сосудистого русла к 56 суткам коррекции гнпертнреоза был равен 0,141 мкм/100 г (без коррекции
0,142 мкм/100 г) за счет суженрря междольковых венул н капилляров, окружающих фолликулы.
При коррекции экспериментального относительный объем пернфоллнкулярного сосудистого русла незначительно увелррчнлся до 0,134 мкм/ 100 г (без коррекции 0,133 мкмЮО г) за счет расширения междольковых венул н капилляров, ок-ружающр!.х фолликулы.
Стромально-паренхнматозные отношения изменялись в течение моделрррованрря н коррекции, наиболее показательно в данном случае было изменение относрртельного объема стромы. Благоприятный эффект был более выражен при коррекции экспериментального гррпертррреоза: данный
показатель возрастал до 15,5+0,4% (в контроле Г1,7± 1,0%), при коррекции гнпотррреоза стромально-паренхнматозные отношения изменялись в сторону уменьшенрря относрртельного объема стромы до 6,93±0,1 9% (без коррекции 6,78±0,3%). Было отмечено также влияние препарата "Баякон" на содержание тучноклеточного компонента. Из данных лрртературьг известно, что тканевые базо-фнлы наряду с парафоллнкулдярнымн клетками обеспечивают гомеостаз брюгенных аминов в ЩЖ. Тучные клеткрр периферических зон могут выступать в качестве переносчиков серотонина н катехоламинов в функционально более активные центральные зоны органа. Серогоннн н катехоламины, в свою очередь, стимулируют эндоцнтоз коллонда фолликулярными клетками н выведение тнреоррдных гормонов в кровь, а также регулируют функциональное состояние мнкроцнркулятор-ного русла железы. Очевррдно, ррзмененне содержания коллоррда при коррекцррн препаратом "Баякон" связано также с воздействием на содержание тучных клеток РР степень нх де грануляцрррг.
При моделргрованррр1 экспериментального гнпертнреоза чррсло тканевых базофнлов в этот пе-
рнод составило 83,76+0,15 в 1 мм (в контроле 21,42+0,71 в 1 мм‘), индекс дегрануляцнн повысился до 79,12+0,14% (в контроле 70,43+0,61%). Прн гнпотнреозе число тканевых базофнлов в 1 мм2 было равно 31,02+0,52 (в контроле 21,42+ +0,71 в 1 мм2), индекс дегрануляцнн возрастал и составлял в этот период 82,14+0,15% (в контроле 70,43+0,61%).
Прн коррекции гнпертнреоза к 56 суткам отмечена выраженная миграция лаброцнтов с нх массовой дегрануляцней, что говорит об истощении тучноклеточного компонента.
Число тканевых базофнлов в этот период уменьшается до 31,48+0,28 в 1 мм2 (без коррекции 65,34+0,11 в 1 мм‘). Индекс дегрануляцнн к 56 суткам составлял 71,56+0,0,36%. Индекс дегрануляцнн к 56 суткам достиг значения 71,56+ +0,36%.
Прн коррекции экспериментального гипотиреоза число тканевых базофнлов, выявленных в 1 мм2 27,41+0,16 (без коррекции 26,ЗОЮ, 12 в
1 мм2). Индекс дегрануляцнн лаброцнтов воз-
растал до значения 77,15+0,48% (без коррекции 76,12+0,15%).
140
120
100
80
60
40
20
0
□ модель □ коррекция □ без коррекции
ï-гЗг
2 4 8
недели
Рнс.З. Динамика изменения среднего диаметра фолликулов (в мкм) при коррекции экспериментального гипотиреоза.
Рис.4. Динамика изменения средней площади тироцитов (в мкм*) при коррекции экспериментального гипотиреоза.
Таким образом, экспериментальный гипо- и гипертиреоз вызывает адаптационно-компенсаторные морфологические изменения щитовидной железы. Стойкий коррегирующий эффект при лечении препаратом "Баякон" наблюдается при сроках лечения не менее 8 недель. Выраженное кор-регирующее действие растительного средства "Баякон" наблюдается при гипертиреоидных состояниях щитовидной железы (рис.1, 2), которое начинает проявляться после 2-х недель введения препарата. Положительный эффект применения препарата "Баякон" в качестве корректора дисфункционального состояния щитовидной железы подтверждает необходимость дальнейших исследований препарата для рекомендации его в клиническую практику. Слабый коррегирующий эффект "Баякона" гипотнроидных состояний обусловлен недостаточным временем, необходимым для восстановления уровня интрафолликулярного йода и запуска ферментных систем, участвующих в синтезе тиреоидных гормонов (рис.З, 4).
MORPHOMETRIC INVESTIGATION OF THE STRUCTURE OF THYROID GLAND IN WHITE RATS IN CORRECTION OF EXPERIMENTAL HYPO- AND HYPERTIREOSIS WITH THE HELP OF PLANT PREPARATION "BAJAKON"
V.G. Izatulin, A. A. Semenov, E.S. Manuk (Irkutsk State Medical University)
The investigation is devoted to the investigation of the influence of plant preparation Aconitum Baikalense upon the morphological state of thyroid gland in the experiment during hypo- and hyperthyrosis. The identity of the model obtained and the effectiveness of the correction was estimated by definition of morphometric indices of thyroid gland.
Литература
1. Абросимов А.Ю., Ильин А.А., Румянцев П.О., Северская Н.В., Двинских Н.Ю., Терентьев O.P. Клинико-морфологическая характеристика фолликулярных опухолей щитовидной железы у лиц молодого возраста, проживающих на загрязненной радионуклидами территории // Проблемы эндокринологии. - 2000. - №2. - С.7-12.
2. Автандилов В.Г. Проблемы патогенеза и патологоанатомической диагностики болезней в аспектах морфометрии. - М.: Медицина, 19.84. - 324 с.
3. Автандилов Г.Г. Медицинская морфометрия: Руководство. - М.: Медицина, 1990. - 382 с.
4. Агроскин Л.С. Цитофотометрия. Аппаратура и методы анализа клеток по светопоглощению. - М.: Наука, 1977. -2 9 5 с.
5. Алешин Б.В., Бриндак О.П., Мамина В.В. О состоянии функциональной активности и пролиферации паренхимы в щитовидной железе. Формы пролиферации тиреоидной паренхимы // Проблемы эндокринологии. - 1987. - Т.33, №6. - С.67-72.
6. Балаболкин М.И. Эндокринология. - М.: Медицина, 1998. - 580 с.
7. Бомаш Н.Ю. Морфологическая диагностика заболеваний щитовидной железы. - М.: Медицина, 1981. - 175 с.
8. Быков B.JI. Стереологический анализ щитовидной железы (обзор методов) // Арх. ан., гист. и эмбр. -1979. - JVb7. - С.98-106.
9. Глумова В.А., Черенков H.A., Чучкова H.H., Семенов В В., Юминова H.A. Структурные изменения при адаптивно-компенсаторных реакциях щитовидной железы // Морфология. - 2002. - №2-3. -С.41.
10. Зимина С.А. Морфофункциональные особенности щитовидной железы при экспериментальном гипо-селенозе: Автореф. дис.... канд. мед. наук: 14.00.23 / 2000.-22 с.
11. Кириллов Ю.Б., Чумачснко А.П., Аристархов В.Г., Потапов A.A., Пантелеев И.В. Ускоренный морфометрический метод определения функциональной активности щитовидной железы // Проблемы эндокринологии. - 1994. - №4. - С. 19-21.
12. Кондаленко В.Ф., Калинин А.П., Одинокова В.А. Ультраструктура щитовидной железы человека в норме и при патологии // Арх. пат., 1970. - №4. -С.25-33.
13. Минаева В.Г. Лекарственные растения Сибири. -Новосибирск: Наука, 1991. -4 2 8 с.
14. Мусина Н.Ю., Мусин H.A. Морфологическая характеристика щитовидной железы у молодняка крупного рогатого скота // Морфология. - 2002. -№2-3. -С.111.
15. Хмельницкий O.K., Третьякова М.С. Щитовидная железа как объект морфометрического исследования // Арх. пат., 1998. - №4. - С.47-49.
О БАТОРОВА С.IV!., ЛЕДНЕВА П.П.. ЦЭНД-АЮУШ Д. -УДК 615.43+615.13+615.32
ФИТОКОРРЕКЦИЯ ПРИ НАРУШЕНИЯХ ПИЩЕВАРЕНИЯ И ОБМЕНА ВЕЩЕСТВ В ТИБЕТСКОЙ МЕДИЦИНЕ
С.М. Баторова, И.П. Леднева, Д. Цэнд-Аюуш
(Институт общей экспериментальной лаборатории СО РАН, директор - чл.-корр. РАН, д.б.п., проф.
В.М. Корсунов; Отдел физических проблем Бурятского научного центра СО РАН, зав. - д.ф.н., проф. А.П. Семенов)
Резюме. В статье дана информация из тибетских источников о лекарственных средствах традиционной медицины Тибета, используемых при нарушениях пищеварения и обмена веществ. Приведены комментарии к тибетским понятиям и терминам "несварение", "огненная теплота", "холод слизи".
Все известные тибетской медицине болезни подразделяю гея по характеру течения на две большие группы: "горячие и холодные". В частности, к "холодным" болезням желудка относится "несварение" по-тибетски "ма-жу-ба", возникающее из-за ослабления "огненной" или "жизненной" теплоты. В тибетской традиции врачевания считается, что непосредственной причиной "холод слизи", развивающийся при нарушении регулирующих систем организма или их дисбаланса. В связи с этим для коррекции данного состояния рекомендуется пища и назначаются лекарства с "теплыми" свойствами.
Для нормализации уровня "жизненной" энергии в организме традиционно в практике тибетской медицины используют бульоны из баранины или конины с добавлением чеснока Allium salivum L., листьев разных видов крапивы Urlica spp., плодов и травы просвирника лесного Malva silveslris L., травы подорожника большого Planlago major L. и других растений с "теплыми" свойствами. По результатам перевода рецептурного справочника тибетской медицины установлено, что для коррекции нарушений в пищеварительной системе, для повышения "жизненной" теплоты и для улучшения обмена веществ часто используются фитосборы с плодами граната, в частности "Гранат-6" (порошок), состоящий из плодов
гранатового дерева Punica granalum L., способствующего перевариванию пищи, полезного при болезнях желудка и расстройстве "слизи"; плодов фенхеля обыкновенного. Foeniculum vulgare Mill., применяемого при интоксикациях, расстройстве систем "слизи и ветра"; плодов облепихи крушиновидной Hippophae rhamnoides L., полезного при болезнях крови, сердца, легких, расстройстве "слизи"; надземных частей княжика сибирского Alragene sibirica L. и ломоноса шеетилепесткового Clematis hexapelala Pall., увеличивающих "жизненную" теплоту в организме и плодов можжевельника обыкновенного Juniperus communis L., полезного при болезнях почек, печени и лимфатической системы [9]. При заболеваниях желудка, в частности при секреторной недостаточности в практике тибетской медицины часто назначаю!' лекарственный сбор "Рододендрон-4" - порошок, состоящий из листьев рододендрона Адамса Rhododendron adamsii Rehd., плодов перца черного Piper nigrum L., плодов перца длинного Piper longum L., корневищ имбиря лекарственного Zingiber officinale Rose, с добавлением сахара. Также при расстройствах пищеварения и улучшения обмена веществ применяется фитосбор "Головня-6" - порошок, состоящий из склероций гриба спорыньи Claviccps purpurea Tulasne , плодов гранатника, надземных частей княжика сибирского и
