CC BY
8
DOI: 10.34617/892y-1568 УДК 579.262:578.4:636.5
ПОДРОБНАЯ ДИНАМИКА ТИТРА КОЛИФАГОВ КИШЕЧНОЙ МИКРОФЛОРЫ ГУСЯТ DETAILED DYNAMICS OF TITER OF COLI-PHAGES OF GUT MICROFLORA OF GOSLINGS
Скобликов Николай Эдуардович1, канд. мед. наук Осепчук Денис Васильевич1, д-р с.-х. наук Москаленко Елена Александровна1, канд. тех. наук Зимин Андрей Антонович2, канд. биол. наук
1 ФГБНУ «Краснодарский научный центр по зоотехнии и ветеринарии», г. Краснодар, Российская Федерация
2 Институт биохимии и физиологии микроорганизмов
им. Г. К. Скрябина РАН - обособленное подразделение ФГБНУ
«Пущинский научный центр биологических
исследований» РАН, г. Пущино, Российская Федерация
Skoblikow Nikolai Edwardovich1, Ph.D. Med.
Osepchuk Denis Vasilyevich1, Dr. Agr. Sc.
Moskalenko Elena Aleksandrovna1, PhD. Tech.
Zimin Andrey Antonovich2, PhD. Biol.
1 Krasnodar Research Centre for Animal Husbandry
and Veterinary Medicine, Ю-asnodar, Russian Federation,
2 G. K. Skryabin Institute of Biochemistry and Physiology of Microorganisms of the Russian Academy of Sciences, Pushchino, Russian Federation.
Аннотация: изучена подробная динамика титра колифа-гов кишечного микробиоценоза гусят раннего возраста. Установлены возрастные периоды, характеризующиеся наиболее выраженными изменениями содержания коли-фагов, а также значения измеряемых параметров в эти периоды.
Ключевые слова: гусята; кишечная микрофлора; E.coli; бактериофаги; возрастная динамика.
Abstract: the detailed dynamics of titer of coli-phages of earliest age goslings was investigated. The age periods with the most expressed changes of the titer of coli-phages was established.
Keywords: goslings; gut microflora; E.coli; bacteriophages; age dynamics.
Изучение динамики кишечных микробиоценозов животных является актуальным направлением микробиологии. На фоне относительно хорошей изученности динамики бактериальных сегментов микрофлоры, фаговые сегменты изучены недостаточно. Работы в этой области немногочисленны и проведены на лошадях [1], поросятах [2]; работы по фаговой динамике у гусят отсутствуют. Данная работа посвящена описанию количественной и качественной динамики фагов E.coli с высокой частотой детализации (6-8 дней) в кишечном микробиоценозе гусят раннего возраста.
Методика. Исследования проводились с опорой на сформулированные и изложенные ранее принципы [3]. Исследованы колебания титра коли-фагов (бактериофагов E. coli) нормофлоры 10 гусят в возрасте от 3 до 47 дней. Пробы отбирались индивидуально у каждой птицы, 12-кратно с интервалом 3-6 дней. Всего было отобрано и исследовано 120 проб. После отбора пробы взвешивались, ресуспендировались в буферном растворе, алик-вотировались на две части, к одной из которых добавлялись ингибиторы бактериального роста (хлороформ), после чего центрифугировались. Из супернатанта делали серию 10-кратных разведений, из которых производили высевы на культуры лабораторных штаммов E. coli B и BL 21 методом агаровых слоев; после чего посевы инкубировались 24 ч при 37°C. После подсчета образовавшихся бляшек титр фагов рассчитывали в lg БОЕ/мл.
Результаты исследований и их обсуждение. Из 120
проб штаммы E.coli выделялись в доступном для детекции титре на среде Эндо не во всех пробах, а лишь в 93. При этом отмечены два возрастных периода, характеризующиеся снижением вы-севаемости штаммов E.coli: в возрасте 9-19 дней штаммы E.coli выделялись лишь у 6 птиц, а в возрасте 30 дней - лишь у 3 птиц. Также отмечались характерные подъемы и снижения детектируемого коли-титра.
Бактериофаги E.coli выделялись в доступном для детекции титре на культуре E. coli BL 21 лишь в 45 пробах. При этом фаги
выделялись в возрасте в возрасте 3-9 дней у 6-8 птиц, в возрасте 12, 30 и 33 дней всего у 1 птицы, в возрасте 37 и 40 дней - у двух птиц, в возрасте 44 дней - у 5 птиц. Наибольшие показатели содержания коли-фагов отмечены в возрасте 6 дней (подъём на два порядка за три дня), после чего отмечалось критическое падение до нулевых значений к возрасту 12 дней.
Выводы. В результате исследования получена картина естественной возрастной динамики содержания E. coli и колифа-гов у гусят первых 47 дней жизни, что представляет собой новые данные, полезные для общего понимания становления кишечной нормофоры птиц в онтогенезе, её биоразнообразия и для определения критических периодов развития при применении ветеринарных препаратов, в т.ч. - фаговых [4] и кормовых добавок [5].
Исследование выполнено при финансовой поддержке РФФИ и администрации Краснодарского края в рамках научных проектов № 16-44-230855-р_а и № 19-44-230040-р_а.
Список литературы
1. Golomidova, A, Kulikov, E, Isaeva, A, Manykin, A, Leta-rov, A. The Diversity of Coliphages and Coliforms in Horse Feces Reveals a Complex Pattern of Ecological Interactions. Appl Environ Microbiol. 2007 October; 73(19): 5975-5981.
2. Скобликов, Н. Э., Забашта, Н. Н., Зимин, А. А. Особенности возрастной динамики бактериофагов E.coli кишечного микробиоценоза поросят / Сборник научных трудов СевероКавказского научно-исследовательского института животноводства. - 2012. - Т. 1. - С.22-26.
3. Скобликов, Н.Э., Осепчук, Д.В., Москаленко, Е.А., Ав-диенко, В.В., Зимин, А.А. Подходы к изучению динамики коли-титра и титра коли-фагов кишечной микрофлоры молодняка сельскохозяйственной птицы // Сборник научных трудов Северо-Кавказского научно-исследовательского института животноводства. - 2017. - Т. 1. - № 6. - C. 176 - 180.
4. Скобликов, Н. Э., Кононенко, С.И., Зимин, А. А. Комбинированное применение нетрансдуцирующих бактериофагов E.coli с пробиотиком в пост-отъёмном периоде у поросят // Политематический сетевой электронный научный журнал КубГАУ. - Краснодар: КубГАУ, 2012. - №78(04).- С.599-609.
