CC BY
18
6. Кононенко, С.И. Актуальные проблемы организации кормления в современных условиях / С. И. Кононенко // Политематический сетевой электронный научный журнал Кубанского государственного аграрного университета. - 2016. - № 115. - С. 951-980. - http://ej.kubagro.ru/2016/01/pdf/60.pdf
7. Кононенко, С.И. Пути снижения влияния неблагоприятных кормовых факторов на организм животных /Кононенко С.И. //Политематический сетевой электронный научный журнал Кубанского государственного аграрного университета. 2016. № 119. С. 293-312. - Режим доступа: http://ej .kubagro.ru/2016/05/pdf/21.pdf
8. Семененко, М.П. Новые подходы к лабораторной диагностике болезней печени у высокопродуктивного молочного скота / М.П. Семененко, Е.В. Кузьминова, О.А. Фомин // Ветеринария Кубани. - 2014. - № 3. - С. 11-13.
9. Семененко М.П. Фармакология и применение бентонитов в ветеринарии / Семененко Марина Петровна: диссертация... доктора вет. наук: // ФГОУВПО «Кубанский государственный аграрный университет». Краснодар, 2008. - 348 с.
10. Шкуратова, И.А., Состояние здоровья животных в условиях экологического неблагополучия и способы снижения техногенных воздействий / И.А. Шкуратова // Агроэкологические проблемы сельскохозяйственного производства в условиях техногенного загрязнения агроэкосистем. - 2001. - Казань. -С.126-129.
УДК 579.262:578.4:636.52/.58
ПОДХОДЫ К ИЗУЧЕНИЮ ДИНАМИКИ КОЛИ-ТИТРА И ТИТРА КОЛИФАГОВ КИШЕЧНОЙ МИКРОФЛОРЫ МОЛОДНЯКА СЕЛЬСКОХОЗЯЙСТВЕННОЙ ПТИЦЫ DETAILED DYNAMICS OF COLI-TITER AND TITER OF COLI-PHAGES OF GUT MICROFLORA OF GOSLINGS
Скобликов Николай Эдуардович, к.м.н., Осепчук Денис Васильевич, д.с.-х.н., Москаленко Елена Александровна, к.т.н., Авдиенко Валентина Викторовна
Северо-Кавказский научно-исследовательский институт животноводства, Российская Федерация, г. Краснодар Зимин Андрей Антонович, к.б.н.
Институт биологии и физиологии микроорганизмов им. Г. К. Скрябина РАН, Российская Федерация, г. Пущино Skoblikow Nikolaj Jeduardovich, cand. мed. sci., Osepchuk Denis Vasil'evich, doc. agr. sci., Moskalenko Elena Alexandrovna, cand. tech. sci., Avdienko Valentina Viktorovna
North-Caucasian Research Institute of Animal Husbandry, Russia, Krasnodar
Zimin Andrej Antonovich, cand. biol. sci Skryabin Institute of Biochemistry and Physiology of Microorganisms, Pushchino, Russia
Аннотация. Изучена подробная динамика коли-титра и титра колифагов кишечного микробиоценоза гусят раннего возраста. Установлены возрастные периоды, характеризующиеся наиболее выраженными изменениями коли-титра и содержания коли-фагов, а также значения измеряемых параметров в эти периоды.
Ключевые слова: гусята; кишечная микрофлора; E.coli; бактериофаги; возрастная динамика.
Abstract: the detailed dynamics of coli-titer and titer of coli-phages of earliest age goslings was investigated. The age periods with the most expressed changes of the coli-titer and titer of coli-phages was established.
Key words: goslings; gut microflora; E.coli; bacteriophages; age dynamics.
Исследование выполнено при финансовой поддержке РФФИ в рамках научного проекта № 16-44-230855-р_а.
The reported study was partially supported by RFBR, research project No. 16-44-230855-r_a.
Изучение динамики кишечных микробиоценозов животных является актуальным направлением микробиологии [7]. На фоне относительно хорошей изученности динамики бактериальных сегментов микрофлоры, фаговые сегменты изучены недо-
статочно [9]. Работы в этой области немногочисленны и проведены на лошадях [1] и поросятах [2, 3]; работы по фаговой динамке у гусей отсутствуют. Данная работа посвящена описанию количественной и качественной динамики фагов E.coli с высокой частотой детализации (3-7 дней) в кишечном микробиоценозе гусят раннего возраста.
Методика. Исследованы колебания содержания штаммов E.coli (коли-титра) и титра коли-фагов (бактериофагов E.coli) нормофлоры 10 гусят в возрасте от 3 до 47 дней. Пробы отбирались индивидуально у каждой птицы, 12-кратно с интервалом 36 дней. Всего было отобрано и исследовано 120 проб.
После отбора пробы взвешивались, ресуспендировались в буферном растворе, аликвотировались на две части, к одной из которых добавлялись ингибиторы бактериального роста (хлороформ), после чего центрифугировались. Из супернатанта делали серию 10-кратных разведений, из которых производили высевы на селективную среду Эндо, и на культуры лабораторных штаммов E. coli B и BL 21 методом агаровых слоев; после чего посевы инкубировались 24 ч при 37°C.
После подсчета образовавшихся колоний коли-титр в образце рассчитывали в lg КОЕ/мл, а после подсчета образовавшихся бляшек титр фагов рассчитывали в lg БОЕ/мл.
Результаты исследований и их обсуждение. Из 120 проб штаммы E.coli выделялись в доступном для детекции титре на среде Эндо не во всех пробах, а лишь в 93. При этом отмечены два возрастных периода, характеризующиеся снижением высе-ваемости штаммов E.coli: в возрасте 9-19 дней штаммы E.coli выделялись лишь у 6 птиц, а в возрасте 30 дней - лишь у 3 птиц. Также отмечались характерные подъемы и снижения детектируемого коли-титра.
Бактериофаги E.coli выделялись в доступном для детекции титре на культуре E. coli BL 21 лишь в 45 пробах. При этом фаги выделялись в возрасте в возрасте 3-9 дней у 6-8 птиц, в возрасте 12, 30 и 33 дней всего у 1 птицы, в возрасте 37 и 40 дней - у двух птиц, в возрасте 44 дней - у 5 птиц. Наибольшие показатели содержания коли-фагов отмечены в возрасте 6 дней (подъем на два порядка за три дня), после чего отмечалось критическое падение до нулевых значений к возрасту 12 дней.
Выводы. В результате исследования получена картина естественной возрастной динамики содержания E. coli и колифа-гов у гусят первых 47 дней жизни. Это новые данные, полезные для общего понимания становления кишечной нормофоры птиц в онтогенезе [4], её биоразнообразия и для определения критических периодов развития при применении ветеринарных препаратов, в т.ч. - фаговых [5, 6] и пробиотических кормовых добавок [8]. Применённые в данном исследовании подходы к изучению динамики коли-титра и титра колифагов кишечной микрофлоры гусят могут быть применены и на других видах птиц, в т.ч. - на цыплятах-бройлерах.
Список литературы
1. Golomidova A, Kulikov E, Isaeva A, Manykin A, Letarov A. The Diversity of Coliphages and Coliforms in Horse Feces Reveals a Complex Pattern of Ecological Interactions. Appl Environ Microbiol. 2007 October; 73(19): 5975-5981.
2. Скобликов, Н. Э., Забашта, Н. Н., Москаленко, Е. А., Зимин, А. А. Особенности возрастной динамики E.coli кишечного микробиоценоза поросят / Сборник научных трудов СевероКавказского научно-исследовательского института животноводства. - 2012. - № 1. - С. 8-11.
3. Скобликов, Н. Э., Забашта, Н. Н., Зимин, А. А. Особенности возрастной динамики бактериофагов E.coli кишечного микробиоценоза поросят / Сборник научных трудов СевероКавказского научно-исследовательского института животноводства. - 2012. - № 1. - С. 22-26.
4. Скобликов, Н.Э. Комбинированное применение нетранс-дуцирующих бактериофагов e.coli с пробиотиком в постотъёмном периоде у поросят /Н.Э. Скобликов, С.И. Кононенко, А.А. Зимин // Политематический сетевой электронный научный журнал Кубанского государственного аграрного университета. 2012, № 78. - С. 599-609. -http://ej .kubagro.ru/2012/04/pdf/61.pdf
5. Скобликов, Н.Э. Эффективность различных способов применения нетрансдуцирующих бактериофагов E.coli для профилактики пост-отъёмной диареи поросят // Скобликов Н.Э., Кононенко С.И., Зимин А.А. // Политематический сетевой электронный научный журнал Кубанского государственного аграр-
ного университета. - 2012. - № 78. - С. 653-664. - Режим доступа: http : // ej .kubagro.ru/2012/04/pdf/60.pdf.
6. Скобликов, Н.Э. Оптимальная схема применения нетран-сдуцирующих бактериофагов E. coli для профилактики постотъемной диареи поросят / Н.Э. Скобликов, С.И. Кононенко, А.А. Зимин // Труды Кубанского государственного аграрного университета. - 2012. - № 37. - С. 169-173.
7. Скобликов, Н.Э. Выделение и отбор нетрансдуцирующих бактериофагов e.coli для противоколибактериозных препаратов / Н.Э. Скобликов, С.И. Кононенко, Д.В. Осепчук, Е.А. Москаленко, В.В. Авдиенко, А.А. Зимин // Политематический сетевой электронный научный журнал Кубанского государственного аграрного университета. - 2016.- № 122. - С. 554-566. -http://ej.kubagro.ru/2016/08/pdf/40.pdf
8. Нигоев, О. А., Скворцова, Л. Н., Скобликов, Н. Э., Малик, Е. В. Интестевит корректирует кишечный биоценоз бройлеров // Животноводство России. — 2007. — № 12. — С. 19-20.
9. Зимин, А.А. Использование бактериофагов для борьбы с колибактериозом и кампилобактериозом в птицеводстве / А.А. Зимин, Ф.В. Кочетков, С.И. Кононенко, Д.В. Осепчук, Н.Э. Скобликов //Политематический сетевой электронный научный журнал Кубанского государственного аграрного университета. 2016. № 123. С. 421-432. - http://ej.kubagro.ru/2016/09/pdf/29.pdf
