CC BY
8
МАТЕРИАЛЫ V НАЦИОНАЛЬНОГО КОНГРЕССА ПО РЕГЕНЕРАТИВНОЙ МЕДИЦИНЕ
45
Для оценки эффективности дифференцировки использовали цитофлуоресцентное окрашивание красителем NileRed. Методом ПЦР в реальном времени оценивалась экспрессия ключевых маркеров дифференцировки. Внеклеточные везикулы (ВВ) получали кондиционированием клеток в течение 2 суток. Для концентрирования ВВ использовали центрифужные ультрафильтры-концентраторы. Для оценки активности инсулин-зависимых внутриклеточных сигнальных каскадов использовался метод иммуноблоттинга.
Результаты. При старении происходило значительное снижение адипогенного потенциала МСК, связанное с развитием инсулинорезистентности. Это было обусловлено повышением базального уровня активации Erk1/2 и Akt — основных участников инсулиновой сигнализации. Далее мы выяснили, участвует ли секретом се-несцентных МСК в развитии их инсулинорезистентности. Проанализировав транскриптом секретома сенесцент-ных МСК в сравнении с молодыми, мы обнаружили, что сенесцентные МСК продуцировали ВВ с повышенным содержанием микроРНК, мишенями которых являются молекулы, участвующие в развитии и регуляции адипо-генных сигналов в клетке и в сигнальном ответе на инсулин. Добавление ВВ от молодых МСК к сенесцентным клеткам восстанавливало адипогенный потенциал, а добавление ВВ от сенесцентных МСК к молодым клеткам — снижало. Добавление к молодым МСК ВВ от сенесцент-ных клеток приводило к повышению в них базального уровня активации Erk и Akt.
Таким образом, при старении происходит снижение адипогенного потенциала МСК, связанное индукцией инсулинорезистентности компонентами секретома се-несцентных клеток. Исследование поддержано грантом РФФИ № 19-29-04172 мк.
ПЕРСПЕКТИВНЫЙ ЭЛЕКТРОПРОВОДЯЩИЙ
МАТЕРИАЛ НА ОСНОВЕ КОМПОЗИТА
ХИТОЗАН-СЕРЕБРО С ДОБАВЛЕНИЕМ
ПОЛИЭТИЛЕНОКСИДА
Д.А. Волков1, И.Е. Ребров2, Т.Е. Григорьев1
1 НИЦ Курчатовский институт, Москва, Россия
2 ИЭЭ РАН, Москва, Россия
e-mail: da.volkov@phYsics.msu.ru
Ключевые слова: электроспиннинг, хитозан, серебро, поли-
этиленоксид, электропроводящие материалы.
В последнее время технология электроспиннинга стала универсальным методом получения нетканых материалов с довольно обширной возможностью использовать их в разных областях, включая медицину. В частности, ряд различных нановолокон на основе хи-тозана привлекает большое внимание благодаря возможности их применения в таких направлениях, как тканевая инженерия [1], доставка лекарств [2] и т. д. Одним из перспективных наполнителей хитозановых волокон являются наночастицы серебра, обладающие рядом отличительных антибактериальных, оптических и электропроводящих свойств.
В данной работе наночастицы серебра сферической формы были получены в хитозановом растворе в уксусной кислоте, где хитозан выступал в роли восстановителя. С применением метода электроформования, описанном в работе [3] (рабочее напряжение составляло и=18кВ), были получены материалы на основе хито-зан-серебро с добавлением полиэтиленоксида, который
использовался для улучшения характеристик формуемого раствора для электроспиннинга.
Коллекторная система при формовании представляла собой 2 электрода напротив друг друга на расстоянии 4 см, что позволило получить образцы размером 2x4 см. Сопротивление полученных материалов по направлению укладки волокон составляло ~15 ГОм. Также было определено, что наночастицы серебра распределены по объёму волокна, размер волокон при этом неоднородный: от ~30 нм до ~1 мкм.
Вследствие высокой биологической активности хи-тозана и включению электропроводящих наночастиц серебра полученный материал перспективен для использования в качестве матрикса для ориентированного выращивания клеточных культур мышечных и нейронной тканей. Работа выполнена при финансовой поддержке Министерства науки и высшего образования Российской Федерации в рамках соглашения № 075-15-2021-1357.
Литература:
1. Shabnam M., Javad M., Behnaz B. et al. International Journal of Biological Macromolecules. 2019. V. 140. P. 278.
2. Jiankang S., Stefan J.A., Jinlong S. et al. Nanomedicine: Nano-technology, Biology, and Medicine. 2016. V. 12 P. 1357.
3. Kashin A.V., Rebrov I.E., Khomich V.Yu. Applied physics. 2018. V. 3. P. 85.
ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОЕ ИССЛЕДОВАНИЕ ВЛИЯНИЯ МЕЗЕНХИМАЛЬНЫХ СТРОМАЛЬНЫХ КЛЕТОК НА ЗАЖИВЛЕНИЕ ХИМИЧЕСКОГО ОЖОГА
М.В. Волкова1, В.В. Бояринцев1,
А.В. Трофименко1, С.П. Рыбалкин2, Е.В. Ковалева2,
Г.И. Фильков1, М.О. Дурыманов1
1 Московский физико-технический институт (национальный исследовательский университет), Долгопрудный, Россия
2 Государственный научный центр «Институт иммунологии» ФМБА России, НИЦ ТБП — филиал, Серпухов, п. Большевик, Россия
e-mail: biotech.volkova@list.ru
Ключевые слова: стволовые клетки, гипоксия, нормоксия, доклинические исследования, животная модель
Мезенхимальные стромальные клетки (МСК) являются одной из потенциальных стратегий лечения различного рода травм благодаря их способности стимулировать заживление и регулировать иммунный ответ. Культивирование клеток ex vivo в условиях пониженного содержания кислорода способствует усилению регенеративных свойств МСК [1-3]. Целью работы являлось экспериментальное изучение эффективности МСК, выращенных в условиях нормоксии и гипоксии, на экспериментальной модели химического ожога в условиях гипоксии и гипотермии.
Для проведения исследований использовались охарактеризованные МСК, выделенные из красного костного мозга мышей Balb/c. Одну клеточную популяцию культивировали в условиях нормоксии (21 % O2), другую — в условиях физиологической гипоксии (5 % O2). Химический ожог у животных получали с помощью 40 % раствора гидроксида калия. В течение двух суток (до и после нанесения травмы) животные находились в климатической камере в условиях гипотермии и гипоксии (4 оС, 15 % O2). Через сутки после нанесения травмы
Гены & Клетки XVII, №3, 2022
