CC BY
11
УДК 616.65-018+616.006.6-091:577.218+616-091.8/616-097
ПАТОПСТОЛОГШШ ТА 1МУНОПСТОХ1МШШ ОСОБЛИВОСТ1 РАКУ
ПЕРЕДМ1ХУРОВО1 ЗАЛОЗИ
У роботi з використанням комплексу пстолопчних та iмуногiстохiмiчних методик описанi морфологiчнi особливостi раку передмiхуровоi залози. Визначено патерн та кшьюсш показники експресп маркеру кл^инно1 пролiферащi, простатспецифiчного антигена, рецепторiв до андрогену та маркерiв базальних кл™н, якi дозволяють диференцiювати рак передмiхуровоl залози вiд доброякiсних змiн. Описан найбiльш поширенi гiстологiчнi рiзновиди раку передмiхуровоl залози та показанi вiрогiднi вiдмiнностi кiлькiсних iмуногiстохiмiчних показникiв мiж ацинарно-клiтинною та протоковою карциномою передмiхуровоl залози.
Ключовi слова: рак передмiхуровоl залози, iмуногiстохiмiчне забарвлення, простатспецифiчний антиген, пролiферацiя.
Рак передмiхуровоï залози (РПЗ) е однieю з найбшьш розповсюджених злоякiсних пухлин, яка складае близько 12% у CTpyKTypi захворюваност чоловiкiв та посiдае друге мюце у CTpyKTypi смертност вiд злояюсних новоутворень. Дiагностика РПЗ базуеться на визначенш рiвня простатспецифiчного антигена (PSA) у сироватщ кровi та патоморфолопчному дослiдженнi бiопсiйного та iнтраоперацiйного матерiалy [1]. Значне пiдвищення рiвня сироваткового PSA е важливою ознакою, однак цей показник не е специфiчним для РПЗ, тому для вiрогiдноï верифшаци наявностi злоякiсноï пухлини у передмiхyровiй залозi використовують мультифокальну трансуретральну бiопсiю. Дiагностичнi трyднощi виникають при дослщженш малих за об'емом трепанбютапв передмiхyровоï залози, що обумовлено обмеженими розмiрами патологiчно змiненоï тканини, особливо на раншх стадiях РПЗ [2].
Розрiзняють декiлька гiстологiчних тишв РПЗ. Найбiльш частою формою е ацинарно-клiтинна аденокарцинома (ААК), яка зyстрiчаеться у 95% всiх випадюв РПЗ [5]. Також видiляють yротелiальний, плоскоклiтинний, залозисто-плоскоклiтинний (аденосквамозний) РПЗ, а також особливi форми, до яких вiдносяться муцинозний, крiбрiформний, персневидноклiтинний, дрiбноклiтинний та саркоматощний типи, а також протокову аденокарциному (ПАК) передмiхyровоï залози, яка складае приблизно 1% ушх РПЗ [4]. Гiстологiчнi i iмyногiстохiмiчнi (1ГХ) особливостi рiзних форм РПЗ на сьогодшшнш день вивченi недостатньо.
Метою роботи було визначення патопстолопчних та iмyногiстохiмiчних особливостей раку передмiхyровоï залози.
Матерiал та методи дослщження. Комплексне дослiдження було проведене на шсляоперацшному матерiалi 40 пацiентiв вшом вiд 52 до 75 роюв, з патогiстологiчно верифiкованим дiагнозом РПЗ. Шматочки тканини фiксyвали в 10% нейтральному забуференому формалш й ущшьнили у парафiн. Зрiзи забарвлювали гематоксилшом i еозином, за Ван Пзон i альцiановим синiм за загальноприйнятими методиками. При мiкроскопiчномy дослiдженнi патопстолопчних препара^в визначали гiстологiчний тип пухлини та оцшювали стyпiнь злоякiсностi за системою Глюона. 1ГХ дослiдження проводили за стандартною методикою [3] з використанням моноклональних первинних антитш проти Ki-67 Antigen, Clone MIB-1; AMACR (P504S), Clone 13H4; Cytokeratin, High Molecular Weight (CK HMW), Clone 34bE12 та полшлональних первинних антитш проти Prostate-Specific Antigen (PSA) та Androgen Receptor (AR) (DAKO, США). Для цього парафiновi зрiзи завтовшки 4 мкм помщали на адгезивш скельця SuperFrost Plus (Menzel Gläser, Шмеччина), пiсля депарафiнацiï та високотемпературного демаскування антигенiв у Трис-ЕДТА бyферi з рН=9 проводили iнкyбацiю з первинними антитшами згiдно рекомендацiй фiрми-виробника, та вiзyалiзацiю IГХ-реакцiï за допомогою системи детекци EnVision FLEX з дiамiнобензидином (DAKO, США). Зрiзи дозабарвлювали гематоксилiном Майера, укладали в бальзам i проводили мшроскошчну оцiнкy результат 1ГХ-реакцiï з фотодокyментацiею. Статистичну обробку отриманих резyльтатiв проводили на персональному комп'ютерi в програмi Microsoft Excel 2007. Обчислювали середне значения (М) та стандартне вщхилення (g). Вiрогiднiсть вiдмiнностей порiвнюваних величин визначали за допомогою критерда Стьюдента (Т). Результати вважали вiрогiдними при р<0,05.
Результати дослiдження та ïx обговорення. Проведене комплексне патопстолопчне дослiдження зрiзiв, забарвлених гематоксилiном i еозином, методом Ван Пзон та альщановим сишм показало, що серед 40 пащенпв з дiагнозом РПЗ, яким було виконано радикальну
пpостaтектомiю, aцинapно-клiтинний paк 6ув веpифiковaний y 25 випaдкax (62,5%); y 15 xвоpиx 6уло дiaгностовaно пpотоковy aденокapциномy (37,5%). У вж випaдкax ААК 6уло вiдзнaчено високий piвень злоякiсностi за показником Глюона (G3 - 7-10 бaлiв), тодi як у ПАК градащя за Глiсоном у S випaдкax (53,3%) складала 5-6 батв (G2), а у 7 випaдкax (46,7%) - 7-10 бaлiв (G3). В обоx гpyпax спостеpеження ypaження однieï долi пеpедмixypовоï залози було виявлено у 7 xвоpиx (17,5%); дво^^он^ ypaження обоx доль пеpедмixypовоï залози було вiдзнaчено у S2,5% випaдкiв. Пpи спiвстaвленнi пaцieнтiв обоx гpyп за цим показником, а також за показниками pозмipiв пеpедмixypовоï залози, об'ему пyxлини та piвнем iнвaзiï вipогiдниx вiдмiнностей мiж ААК та ПАК нами встановлено не було (p>0,05).
^оведене 1ГХ дослщження показало, що для ААК та ПАК пеpедмixypовоï залози був xapaктеpним високий piвень експpесiï пpостaтспецифiчного антигена. ^и цьому xapaктеp iмyнозaбapвлення ^и викоpистaннi полiклонaльниx пеpвинниx aнтитiл до PSA коливався вщ помipного до в^азного DAB-зaбapвлення цитоплазми paковиx клггин як зaлозистиx (aцинapниx), так i пpотоковиx (дyктyляpниx) злоякiсниx стpyктyp. Сеpеднiй показник вiдносноï кiлькостi iмyнопозитивниx клггин склав 95,14±3,0S% у xвоpиx на ААК, та 7S,65±12,35% у xвоpиx на ПАК (p<0,05).
Пpи дослiдженнi piвня експpесiï pецептоpiв до aндpогенy злояюсними клiтинaми РПЗ було встановлено, що як для ААК, так i для ПАК у бшьшост випадюв xapaктеpним e яскpaвий ядеpний пaтеpн iмyнозaбapвлення майже всix пyxлинниx кл^ин. Сеpеднiй показник вiдносноï кiлькостi AR-позитивниx клiтин склав 97,35±2,15 у xвоpиx на ААК, та 96,4S±2,36 у xвоpиx на ПАК (p>0,05). Водночас, у 4 випaдкax ПАК (26,7%) та у 5 випaдкax ААК (20,S%) було визначено слабке ядеpне DAB-зaбapвлення AR менш нiж у 50% злояюснж клiтин. Депpесiя piвня експpесiï AR може бути дичиною зниження вiдповiдi тaкиx пyxлин на гоpмонaльнy теpaпiю.
Окpiм цього, нами було ^оведене визначення мapкеpiв базальнж клiтин а-метилацил-коензим-A-paцемaзи (AMACR), або P504S, та цитокеpaтинy високо1' молекyляpноï маси (CK HMW). Пaтеpн iмyнозaбapвлення AMACR xapaктеpизyвaвся помipною або в^азною гpaнyляpною цитоплазматичною експpесieю мapкеpa у бшьшосп пyxлинниx клiтин. Для CK HMW було xapaктеpним виpaзне iмyнозaбapвлення бaзaльниx клiтин, у той час як секpетоpнi клiтини залишались iмyнонегaтивними або спостеpiгaлось лише фокальне слабке iмyнозaбapвлення. Також помipнa та в^азна експpесiя цього мapкеpa спостеpiгaлaсь у злояюснж клiтинax РПЗ у вогнищax плоскоклiтинного дифеpенцiювaння. Вiдсyтнiсть CK HMW-позитивниx бaзaльниx клiтин та бaзaльниx мембpaн в AMACR-позитивниx дiлянкax спостеpiгaлaсь лише у випaдкax ПАК. Позитивна екс^ешя AMACR була вiдсyтньою в непyxлиннiй ткaнинi, що оточувала злоякiснi стpyктypи РПЗ.
Визначення iндексy клiтинноï пpолiфеpaцiï за показником експpесiï антигена Ю-67 показало, що пpолiфеpaтивнa aктивнiсть злояюснж клiтин ААК e вipогiдно вищою за цей показник у ПАК. Так, сеpеднiй iндекс клiтинноï пpолiфеpaцiï за B. Risberg et al. (2002) в ААК склав 3,75±0,55 бaлiв, у той час як цей показник у ПАК склав 2,54±0,62 бaлiв (p<0,05). Пaтеpн iмyнозaбapвлення цього мapкеpa пpи викоpистaннi клону М1В-1 xapaктеpизyвaвся виpaзною ядеpною е^^ешсю з чiтким дифузним DAB-зaбapвленням ядеp злоякiсниx клiтин та повною вщсутшстю неспецифiчного зaбapвлення цитоплазми.
Таким чином, викоpистaння 1ГХ методу дозволяe шдвищити специфiчнiсть та вipогiднiсть моpфологiчного визначення РПЗ навт у невеликиx за об^мом шмaточкax тканини пеpедмixypовоï залози. Також, завдяки ч^кому iмyнозaбapвленню злоякiсниx стpyктyp, викоpистaння 1ГХ мapкеpiв дозволяe вipогiдно визначити iнтpaдyктaльне pозповсюдження ПАК та зони екстpaкaпсyляpноï iнвaзiï пyxлини.
1. Сеpед yсix випaдкiв pa^ пеpедмixypовоï залози нaйчaстiше зyстpiчaeться aцинapно-клiтиннa aденокapциномa з високим piвнем злояюсносп за показником Глiсонa (G3).
2. Як aцинapно-клiтиннi, так i пpотоковi кapциноми пеpедмixypовоï залози xapaктеpизyються високим piвнем цитоплазматично1' експpесiï PSA.
3. До S0% випaдкiв paкy пеpедмixypовоï залози e AR-позитивними. Викоpистaння антитш пpоти aндpогенниx pецептоpiв дозволяe визначити ^упу пaцieнтiв, потенцiйно pезистентниx до гоpмонaльноï теpaпiï.
4. Викоpистaння мapкеpiв AMACR та CK HMW дозволяe чiтко дифеpенцiювaти iмyнопозитивнi стpyктypи pa^ пеpедмixypовоï залози вiд iмyнонегaтивноï непyxлинноï тканини та добpоякiсниx
змш у передмiхуровiй залоз1. Вщсутшсть CK HMW-позитивних базальних клiтин та базальних мембран в AMACR-позитивних дiлянках спостерiгалась лише у випадках протокового раку. 5. Пролiферативна активнiсть злоякiсних клiтин ацинарно-кл1тинного раку е вiрогiдно вищою за аналопчний показник клiтин протокового раку передм1хурово! залози.
Перспективи подальших дослгджень. У майбутньому плануеться провести клiнiко-морфологiчне ствставлення лабораторних показнитв is морфологiчним патерном та особливостями 1ГХ експресн дотджуваних MapKepie з фотоморфометричним дотдженням рiвнiв iнтенсивностi та вiдносноí площi експресн, а також nоpiвняльний aнaлiз клшжо-лабораторних показнитв та пaтогiстологiчних i 1ГХзмт мiж групами пaцiентiв, хворих на доброятсну гтерплазЮ nepeдмiхуpовоl залози та на РПЗ.
1. Amin M. Prognostic and predictive factors and reporting of prostate carcinoma in prostate needle biopsy specimens / M. Amin, L. Boccon-Gibod, L. Egevad [et al.] // - Scand. J. Urol. Nephrol. - 2005, Vol. 216, P. 20-33.
2. Boccon-Gibod L. European Society of Uropathology; European Society of Pathology Uropatholog aWorking Group / L. Boccon-Gibod, T.H. van der Kwast, R. Montironi [et al.] // - Handling and pathology reporting of prostate biopsies. Eur. Urol. -2004, Vol. 46, P. 177-181.
3. Dabbs D. J. Diagnostic Immunohistochemistry (3rd ed.) / D. J. Dabbs // - New York: Ch. Livingstone, - 2010, 941 p.
4. Humphrey P.A. Histological variants of prostatic carcinoma and their significance / P.A. Humphrey // - Histopathology. -2012, Vol. 60, P. 59-74.
5. Montironi R. 2005 update on pathology of prostate biopsies with cancer / R. Montironi, R. Vela-Navarrete, A. Lopez-Bertran [et al.] // - Eur.Urol. -2006; 49, P. 241-247.
Ж
ПАТОГИСТОЛОГИЧЕСКИЕ И ИММУНОГИСТОХИМИЧЕСКИЕ ОСОБЕННОСТИ РАКА ПРЕДСТАТЕЛЬНОЙ ЖЕЛЕЗЫ Крутенко О. В.
В работе с использованием комплекса гистологических и иммуногистохимических методик описаны морфологические особенности рака предстательной железы. Определен паттерн и количественные показатели экспрессии маркера клеточной пролиферации, простатспецифического антигена, рецепторов к андрогену и маркеров базальных клеток, которые позволяют дифференцировать рак предстательной железы от доброкачественных изменений. Описаны наиболее распространенные гистологические разновидности рака предстательной железы и показаны достоверные отличия количественных
иммуногистохимических показателей между ацинарно-клеточной и протоковой карциномой предстательной железы.
Ключевые слова: рак предстательной железы, иммуногистохимическая окраска, простатспецифический антиген, пролиферация.
Стаття надшшла 13.10.2016 р.
PATHOHISTOLOGICAL AND IMMUNOHISTOCHEMICAL FEATURES OF PROSTATIC CANCER Krutenko O. V.
In work using a complex of histological and immunohistochemical techniques morphological characteristics of prostate cancer were described. Pattern and quantitative expression of cell proliferation markers, prostate-specific antigen, androgen receptor and basal cell markers that differentiate prostate cancer from benign changes were detected. The most common histological species of prostate cancer are described and showing significant differences between the quantitative immunohistochemical performances of the prostatic acinar cell and ductal carcinoma.
Key words: prostatic cancer,
immunohistochemical staining, prostate-specific antigen, proliferation.
Pe^roeHT CTapneHKO I.I.
УДК 577.151.042.:616.72-002.772:616.72-007.274
ПРОТИМ1КРОБНА ТА NO-СИНТАЗО-МОДУЛЮЮЧА Д1Я НОВОСИНТЕЗОВАНО1
СПОЛУКИ - ПОХ1ДНО1 Т1АЗОЛ1ДИНУ
Встановлено, що новосинтезована сполука №[2-(5,7-диметил-2-оксо-иазоло[4,5-Ь]тридин-3-ш)-ацетил]-пдразид ацетатно! кислоти о^м протимжробно! дп щодо грам позитивних мiкроорганiзмiв, зокрема Streptococcus pyogenes i Staphylococcus aureus, володiе NO-модулюючими властивостями, дозозалежно шпбуючи активност ендотелiальноi' та шдуцибельно! iзоформ NO-синтази. Токсометричними дослщженнями виявлено, що дана сполука належить до V класу безпеки, тобто за ступенем токсичност та безпеки вщповщае вимогам до лжарських засобiв.
Kjii040Bi слова: иазолщини, реактивний артрит, NO-синтаза, протимжробш властивост1.
Робота е фрагментом НДР «Дотдження функцiонaльно-мeтaболiчних peзepвiв стрес^мтуючих систем оргашзму за екстремальних умов з метою виявлення ефективних сnособiв 1х корекци», № держ. реестраци 0111U000121.
До реактивних артрипв вщносять запальш негншш захворювання суглоб1в, яю розвиваються внаслщок ¡мунних порушень тсля перенесено! урогештально!, кишково! чи рестраторно! шфекцп [1-4, 12, 13, 14]. Нами проанал1зоваш етюлопчш чинники розвитку
