CC BY
19
«Дни иммунологии в СПб 2017» Immunology Days in St. Petersburg 2017
Медицинская Иммунология Medical Immunology (Russia)/Meditsinskaya Immunologiya
никами 65-84 лет, что также может указывать на более частое инфицирование. В то же время в группе до 45 лет не выявлено защитных уровней анти-NA антител к вирусу А/ Южная Африка/3626/13(НШ1). Наивысшая доля лиц с защитными титрами антител к NA вируса H1N1pdm (50%) выявлена среди лиц старше 65 лет, в то время как титры антител > 1:40 к НА пандемических вирусов среди этой возрастной группы встречались значительно реже в сравнении с лицами 24-45 лет. Эти данные свидетельствуют, что высокий уровень коллективного иммунитета к NA вируса H1N1pdm среди участников старше 65 лет не связан с перенесенными инфекциями пандемическими вирусами 2009 года, а опосредован перекрестно-реагирующими антителами, приобретенными, возможно, вследствие предшествующих контактов с циркулирующими до 1957 г. эпидемическими вирусами A(H1N1).
Заключение. Данные серологического обследования показали, что дрейфовый вариант вируса пандемического гриппа, подобный А/Южная Африка/3626/13(Н1Ш), циркулировал в 2015-2016 гг. на территории Санкт-Петербурга. Уровни коллективного иммунитета к НА дрейфового варианта H1N1pdm среди лиц разного возраста свидетельствует, что наиболее часто инфицированию могли подвергаться лица молодого и среднего возраста. Низкий уровень коллективного иммунитета к NA дрейфового варианта пандемического штамма может свидетельствовать о повышенной уязвимости лиц молодого и среднего возраста перед этим вирусом и указывать на необходимость проведения вакцинации.
ОЦЕНКА Т-КЛЕТОЧНОГО КОМПОНЕНТА В ФОРМИРОВАНИИ ПОСТВАКЦИНАЛЬНОГО ИММУНИТЕТА ПРОТИВ МЕНИНГОКОККОВОЙ ИНФЕКЦИИ
Федорова И.М., Устинова М.А., Комбарова С.Ю., Котелева С.В., Капустин И.В., Рамазанова З.К., Скирда Т.А., Мартыненко И.Г.
ФБУН «Московский научно-исследовательский институт эпидемиологии и микробиологии» им. Т.Н. Габричевского, Москва, Россия
В России профилактика менингококкового менингита предполагает вакцинацию групп риска прежде всего против менингококков серогрупп А и С. В состав отечественных или зарубежных вакцин входят полисахариды: N. meningitidis, иммунный ответ на которые может реализоваться как Т-независимый. Однако поскольку достигнутый иммунный ответ не отличается значительной длительностью, воз-
растает интерес к конъюгированным вакцинам, вызывающим более выраженный Т-клеточный иммунный ответ.
Цель. Отработка оптимальной процедуры оценки специфического клеточного иммунитета на А-полисахарид (АП) N. meningitidis (дозы антигена для активации лимфоцитов, сроков взятия крови у привитых) для последующего мониторинга формирования клеточного иммунитета у лиц, привитых полисахаридной или конъюгированной менингококковой вакцинами.
Методом антигенной стимуляции выделенных из крови лимфоцитов было их культивирование (37 °С, 5% СО2) в присутствии АП, источником которого служила менингококковая группы А полисахаридная вакцина (производство НПО «Микроген», Россия). К 2 х 105 лимфоцитов добавляли 100 мкл раствора АП, с концентрацией от 5 до 25 мкг/мл. Стимуляция клеток длилась 20 часов, после чего культуральные супернатанты отбирали для определения в них концентрации IFNy, а в пуле лимфоцитов методом проточной цитометрии выявляли Т-клетки, экспрессирующие маркер ранней активации CD69. Повышение количества таких клеток, как и повышение продукции ими IFNy, является признаком антигенной активации Т-лимфоцитов. Показатели уровня антигенной стимуляции лимфоцитов сопоставляли с титром антител к N. meningitidis, который оценивали методом РНГА.
Результаты. Определение оптимальной дозы для стимуляции проводили на основе сравнения реакции на АП лимфоцитов непривитых людей и лимфоцитов лиц, привитых за 1-2 года до настоящего исследования вакциной Менцевакс ACWY (GlaxoSmithKline Biologicals, Бельгия).
Исследование исходного фона привитых и непривитых показало следующее. В группе из 16 привитых активация лимфоцитов 25 мкг/мл АП вызывала увеличение количества CD4+CD69+Т-клеток у 38% и CD8+CD69+T-клеток — у 88%, дозой 10 мкг/мл АП, — соответственно, у 25 и у 30%, дозой 5 мкг/мл АП — у 0 и у 21%. В группе из 8 непривитых стимуляция лимфоцитов АП была отмечена только у 2 человек, в сыворотке которых уже исходно определялись антитела к N. meningitidis в титре 1:20. Концентрация АП 10 мкг/мл была признана оптимальной и в дальнейшем использовалась для оценки поствакцинальной динамики Т-клеточного иммунитета.
Через 1 месяц после введения Менцевакс у 71% обследованных отмечалось 4-кратное и более увеличение титров антител к АП. В таблице можно видеть, что при этом в группе ревакцинированных становится в 1,5-2 раза больше лиц, Т-лимфоциты которых активируются в присутствии 10 мкг/мл АП. В группе первично привитых от менингококковой инфекции те или иные
ТАБЛИЦА (К ТЕЗИСАМ ФЕДОРОВОЙ И.М. И ДР.)
Признаки наличия в крови антигенспецифических Т-клеток, первично привитых % людей с наличием признака среди
ревакцинированных
Повышение при стимуляции АП количества клеток с фенотипом CD3+CD4+CD69+ 88 46
CD3+CD4+CD69+ 100 69
Повышение продукции IFNy лимфоцитами при их стимуляции АП 88 62
Заключение. Отработанный метод может служить для оценки клеточного иммунитета к менингококковому полисахариду.
2017, Т. 19, Специальный выпуск 2017, Vol. 19, Special Issue
Иммунология инфекций Immunology infections
признаки наличия в крови антигенспецифических Т-клеток начинали выявляться у всех людей.
ИНТЕРЛЕЙКИНОВЫЙ ПРОФИЛЬ И КОНЦЕНТРАЦИЯ НИТРАТ-НИТРИТОВ В СЫВОРОТКЕ КРОВИ И ПАРОДОНТАЛЬНЫХ КАРМАНАХ БОЛЬНЫХ ХРОНИЧЕСКИМ ГЕНЕРАЛИЗОВАННЫМ ПАРОДОНТИТОМ
Хараева З.Ф., Молова Л.Б.
ФГБОУ ВО «Кабардино-Балкарский государственный университет им. Х.М. Бербекова», Нальчик, КБР, Россия
Введение. Иммунологические сдвиги при пародонтите характеризуются нарушениями во взаимодействии факторов неспецифической резистентности организма, угнетением клеточного и гуморального иммунитета, а также подавлением относительно автономной системы местного иммунитета с дисбалансом показателей цитокинов. Оценка состояния больного пародонтитом в современных условиях предполагает комплексное обследование, включающее в себя помимо традиционных клинических методов, микробиологические и иммунологические исследования, которые позволяют объективизировать состояние больного пародонтитом, прогнозировать течение болезни и анализировать эффективность лечебных мероприятий.
Цель. Изучить показатели IL-1ß, IL-6, IL-10 и концентрацию нитрат-нитритов в сыворотке крови и содержимом пародонтальных карманов пациентов с хроническим генерализованным пародонтитом.
Материалы и методы. Под нашим наблюдением находились 45 пациентов 38-60 лет с хроническим генерализованным пародонтитом средней степени тяжести. Лечение включало обучение гигиене, проведение профессиональной гигиены (удаление над- и поддесневых зубных отложений, полирование поверхности зубов). В зависимости от глубины пародонтальных карманов проводили соответствующее хирургическое лечение (кюретаж, открытый кюретаж). Предоперационная подготовка больных пародонтитом включала лечение зубов и замену некачественных пломб. Местное медикаментозное противовоспалительное лечение включало обильное промывание пародонтальных карманов 0,06% раствором хлоргексидина биглюконата. В послеоперационном периоде назначали нестероидные противовоспалительные препараты, десенсибилизирующую, антибактериальную терапию. Местно применяли раствор хлоргексидина для полоскания. Повторное обследование проводили в динамике — на 7,14,45 сутки с момента начала терапии.
В качестве биоматериала использовали содержимое пародонтальных карманов (ПК) и периферическую кровь. В сыворотке крови и содержимом пародонтальных карманов исследовали IL-1ß, IL-6, IL-10 (тест-системы BenderMedsystem, USA) концентрацию нитрат-нитритов (реактив Гриса). В качестве группы контроля исследовали 25 доноров (Республиканская станция переливания крови, МЗ КБР). Статистическую обработку проводили с использованием пакета программы Statistica for Windows. Достоверным считали отличие при p < 0,05.
Результаты. До начала терапии уровень IL-1ß в сыворотке крови у больных ХГП превышал таковой у доноров на 70,6%, а в содержимом пародонтальных карманов на 78,4%. Уровень IL-6 в сыворотке крови у больных на 67,7% был выше, чем в группе здоровых доноров, а в содержимом пародонтальных карманов на 68,4%. На фоне тради-
ционной терапии уровни медиаторов снижались (р < 0,05). Спустя 45 суток после терапии концентрации IL-1ß в крови больных ХГП уменьшились на 50% по сравнению с исходными значениями,в содержимом пародонтальных кар-мановна 48,6%. Уровень IL-6 на 41,9 % в плазме крови, а в содержимом пародонтальных карманов на 36,8%. На фоне проводимой стандартной терапии происходит постепенное увеличение концентрации IL-10. На 45 сутки уровень IL-10 в пародонтальных карманах, несмотря на положительную динамику, остается ниже показателей здоровых доноров в течение всего периода исследования.
Уровень нитрат-нитритов в сыворотке крови и паро-донтальных карманах до начала терапии выше показателей здоровых на 35,6 и 89,6% соответственно. На фоне проводимой терапии показатели крови имеют положительную динамику, но остаются на 45 сутки от начал терапии достоверно выше показателей здоровых (р < 0,05).
Заключение. Традиционная терапия пациентов с хроническим генерализованным пародонтитом не приводит к нормализации показателей иммуноцитокинов и нитрат-нитритов, что доказывает необходимость инновационных подходов в терапии пациентов данной категории. Исследованные показатели могут быть использованы в качестве критериев для оценки эффективности проводимой терапии больных с поражением пародонта разной степени тяжести.
СЕРОЛОГИЧЕСКАЯ ДИАГНОСТИКА РЕОВИРУСНОЙ ИНФЕКЦИИ
Шапошников А.В.1, Зыкова Т.А.1, Шевякова Е.А.1, Колпаков С.А.2
1ФГБУ«Ростовский научно-исследовательский онкологический институт» Министерства здравоохранения РФ, Ростов-на-Дону, Россия 2ФБУН«Ростовский научно-исследовательский институт микробиологии и паразитологии» Роспотребнадзора, Ростов-на-Дону, Россия
Введение. В последние десятилетия отмечается возрастающая роль вирусов в инфекционной патологии человека. К числу вирусов, способных одновременно поражать органы дыхания, ЖКТ, головной мозг, лимфоидную и сердечно-сосудистую системы, помимо прочих относятся и реовирусы.
Цель. Изучить распространенность, клиническую значимость и возможность серологической диагностики реовирусной инфекции.
Материалы и методы. Исследовали сыворотки крови детей до 14 лет и взрослых. Для определения вирусспе-цифических антител (АТ) использовали диагностикум эритроцитарный реовирусный иммуноглобулиновый жидкий для реакции торможения непрямой гемагглюти-нации (РТНГА). Было исследовано 169 одиночных и 121 парная сыворотка крови от детей, 469 одиночных и 170 парных сывороток от взрослых.
Результаты. Антитела к реовирусам имели 48,7% здоровых детей и 60,6% взрослых. Средняя геометрическая титра АТ у детей составила 6,0 log2, у взрослых — 5,4 log2.
При исследовании парных сывороток диагностическое (в 4 раза и более) нарастание титра АТ у детей наблюдалось в 10,8% случаев, у взрослых — в 13,5% случаев. В 69,5% случаев реовирусная инфекция регистрировалась на фоне отсутствия АТ в начале заболевания, в т.ч. у детей — в 65,5%, у взрослых — в 73,9%. Диагностическое нарастание титра АТ у детей в 92,3% случаев регистрировалось при установленном клиническом диагнозе грипп,
