CC BY
17
«Дни иммунологии в СПб 2017» Immunology Days in St. Petersburg 2017
Медицинская Иммунология Medical Immunology (Russia)/Meditsinskaya Immunologiya
способов диагностики пародонтита, оценки активности процесса и прогноза прогрессирования заболевания.
Цель. Выявить клинико-иммунологические особенности больных хроническим пародонтитом.
Материалы и методы. Работа основана на исследовании 101 человек, которые на основе ретроспективного анализа были распределены на две группы. Основная группа — 69 больных с пародонтитом средней и тяжелой степени. Клиническое обследование на ряду со стандартным стоматологическим осмотром включало дополнительные методы: подсчет индекса интенсивности кариеса зубов (КПУ), определение значения упрощенного индекса гигиены (OHS) и папиллярно-маргинально-альвеолярного индекса (РМА). Контрольная группа — 32 практически здоровых добровольцев.
Содержание в ротовой жидкости (РЖ) интерлей-кина-2 (IL-2), интерлейкина-4 (IL-4) интерлейкина-17 (IL-17) и лактоферрина (Лф) определяли методом твердофазного гетерогенного ИФА с использованием тест систем «Вектор-Бест» и регистрацией на фотометре Multiscan.
Статистическая обработка результатов проводилась на основании принципов вариационной статистики с использованием программы Gretl. Переменные с непараметрическим распределением сравнивались при помощи критерия Манна—Уитни. Для оценки диагностической эффективности лабораторных тестов проводили ROC-анализ.
Результаты и обсуждение. Объективными клиническими показателями состояния полости рта являются стоматологические индексы. Их значительное повышение указывает на поражение тканей полости рта, особенно — индекс РМА, отражающий тяжесть поражения пародонта.
У больных пародонтитом концентрация IL-2 в РЖ повышалась на 31,1% (р = 0,05). У этих же пациентов наблюдалось значительно возрастание уровня IL-4 в 26 раз (р = 0,001) в сравнении с контрольной группой. Это дает основание предположить, что цитокиновый баланс при пародонтите характеризуется преобладанием Th-2 продуцируемых факторов, то есть при пародонтите активируются «противовоспалительные» иммуноопосредован-ные механизмы. Концентрация IL-17 у пациентов обеих групп существенно не различалась.
Среди параметров врожденного иммунитета оценивали содержание ЛФ, которое возрастало при пародонтите как отражение активности воспалительного процесса.
Для оценки диагностических характеристик изучаемых показателей использован ROC анализ с определением площади под ROC кривой (AUC — Area Under Curve). Он позволил установить, что наиболее высокую диагностическую эффективность имеет уровень IL-4 в РЖ при пародонтите: диагностическая чувствительность — 88%, диагностическая специфичность — 99%, AUC = 0,95.
В ходе исследования нами разработаны новые подходы к традиционному цитологическому исследованию буккального эпителия. Подсчет цитограммы показал, что у пациентов с пародонтитом значительно чаще выявляются кариологические аномалии (микроядра, пикноз и др.), что позволило оценить реактивность слизистой оболочки полости рта при воспалительном процессе.
Заключение. На основании результатов данного исследования мы пришли к заключению, что определение иммунологических показателей в РЖ (в частности IL-4
и Лф), а также микроядерный тест с буккальным эпителием могут рассматриваться в качестве дополнительного инструмента лабораторной диагностики воспалительных заболеваний полости рта, в частности пародонтита. Поэтому сегодня вполне обосновано включение обсуждаемых показателей в алгоритмы диагностики заболеваний полости рта в комплексе с другими методами.
ОСОБЕННОСТИ ИММУННОГО ОТВЕТА ПРИ ИСПОЛЬЗОВАНИИ ОТЕЧЕСТВЕННЫХ ТЕРАПЕВТИЧЕСКИХ БАКТЕРИАЛЬНЫХ ВАКЦИН ИММУНОВАК ВП-4 И СТАФИЛОВАК
Серова Т.А.1, Краснопрошина Л.И.1, Феофанова Т.В.2, Бишева И.В.1, Фошина Е.П.1
1ФГБНУ «Научно-исследовательский институт вакцин и сывороток им. И.И. Мечникова», Москва, Россия 2 ФГБУ«ГНЦИнститут иммунологии» ФМБА, Москва, Россия
В течение последних десятилетий наблюдается значительный рост рецидивирующих инфекционно-воспали-тельных заболеваний, сопровождающихся нарушениями у больных как системного, так и местного иммунитета. Такие пациенты нуждаются в проведении иммуномоду-лирующей терапии, и наиболее перспективными для этой цели являются терапевтические бактериальные вакцины. Первыми отечественными препаратами такого рода являются Иммуновак ВП-4, содержащий компоненты 4-х условно-патогенных микроорганизмов (для взрослого контингента применяются две схемы введения: инъекционное и назально-оральное), и моновакцина Стафиловак.
Цель. Выявление особенностей динамики иммунологических показателей при трех различных способах иммунотерапии: инъекционном и назально-оральном применении Иммуновак ВП-4 и инъекционном применении вакцины Стафиловак.
Материалы и методы. Больные в возрасте 18-50 лет с хроническими воспалительными заболеваниями кожи и ЛОР-органов были распределены в три группы: первая (1) — 11 чел. — получала Иммуновак ВП-4 назально-орально, вторая (2) — 9 чел. — инъекционно, и третья (3) — 8 чел. — получала инъекционно вакцину Стафиловак. До и через 0,5-1,5 месяца после последнего приема препарата у больных определяли параметры системного иммунитета (субпопуляционный состав лимфоцитов и общие иммуноглобулины) и уровень специфических антител к антигенам S. aureus и Kl. pneumoniae разных изотипов в сыворотке крови, слюне и назальном секрете методом твердофазного ИФА. Для сравнения показателей в трех группах до и после лечения использовали критерий множественного сравнения — медианный тест с уровнем статистической значимости рмт < 0,05. Для оценки однородности групп по полу применяли критерий %2 Пирсона с уровнем статистической значимости рХИ < 0,05. Для парного сравнения использовали критерий Манн—Уитни с поправкой Бонфер-рони (рми-в < 0,0167). Значение величины p для поправки Бонферрони было найдено по формуле рми-в = рми/к, где k — число сравнений между группами (в нашем случае k = 3), а рми = 0,05. Результаты расчетов представлены медианой (Ме) и размахом (min-max).
Результаты. Группы были однородны по полу (рХИ = 0,25) и возрасту (рмт = 0,14), исследуемые показа-
2017, Т. 19, Специальный выпуск 2017, Vol. 19, Special Issue
Иммунология инфекций Immunology infections
тели в трёх группах до лечения не различались (р^ > 0,05). После проведенного лечения между тремя группами были выявлены статистически значимые различия по четырем показателям: 1) уровню специфических антител А-изотипа в сыворотке к стафилококку (р^ = 0,0336) и 2) к клебсиелле (рмт = 0,0374), 3) уровню специфических антител А-изотипа к стафилококку в слюне (рмт = 0,0357) и 4) относительному значению NK-клеток CD16+ фенотипа (рмт= 0,0281). Для этих четырёх показателей дополнительно провели парные сравнения по критерию Манн—Уитни с поправкой Бонферрони. Статистически значимые различия по показателю 1 после проведенного лечения (рми B = 0,0123) были выявлены между группой 1 [Ме = 809,5 (448,0-3650,0)] и 2 [Ме = 4147,0 (959,015344,0)]; между группой 1 и 3 [Ме = 3200,0 (624,0-4907,0)] имелась только тенденция к отличию (рми-в = 0,0205). По показателю 2 значимо (рми в = 0,0066) отличались только группа 1 [Ме = 70,5 (5,0-141,0)] и 2 [Ме = 277,0 (112,01523,0)], а по показателю 3 имелась только тенденция к отличию (рми в = 0,0276) между группами 1 [Ме = 26,0 (2,0-251,0)] и 3 [Ме = 73,0 (66,0-400,0)]. Значение показателя 4 в группе 3 [Ме = 18,0 (15,0-32,0)] имело тенденцию к отличию от такового в группе 1 [Ме = 10,0 (7,0-25,0)] с рми-в = 0,0396 и 2 [Ме = 12,0 (4,0-21,0)] с р^ = 0,0497.
Заключение. Применение критерия множественного сравнения для анализа результатов динамического исследования в трех группах дало возможность обнаружить на малых выборках наиболее сильные эффекты воздействия на показатели иммунного статуса при использовании трех различных методов иммунотерапии бактериальными вакцинами.
ИЗУЧЕНИЕ КОЛЛЕКТИВНОГО ИММУНИТЕТА К ПАНДЕМИЧЕСКИМ ВИРУСАМ ГРИППА А(Н1N1)pdm СРЕДИ ПАЦИЕНТОВ РАЗНОГО ВОЗРАСТА
Сычев И.А.1, Смолоногина Т.А.1, Лернер А.А.1, Кучинская М.М.1, Краббе Н.В.1, Дешева Ю.АЛ 2
1ФГБНУ«Институт экспериментальной медицины», Санкт-Петербург, Россия
2 ФГБОУВО «Санкт-Петербургский государственный университет», Санкт-Петербург, Россия
Введение. Пандемия гриппа 2009 г., вызванная вирусом A(H1N1)pdm, дала стимул к исследованиям перекрестно-реагирующих антител к нейраминидазе (NA) подтипа N1. Антитела, направленные против основного антигена вируса гриппа — гемагглютинина (НА) — являются вирус-
нейтрализующими, однако не защищают от инфекции при появлении в циркуляции вирусов с новым подтипом НА. В этом случае наличие у части людей перекрестно-реагирующих анти^А антител, приобретенных вследствие контактов с ранее циркулирующими вирусами гриппа, может стать решающим в снижении заболеваемости и смертности. В связи с этим в настоящее время целый ряд исследований посвящен изучению формирования и защитной функции антител к NA при инфекции вирусами гриппа и иммунизации гриппозными вакцинами.
Цель. Оценка коллективного иммунитета к НА и NA вируса гриппа A(H1N1)pdm09 и его дрейфового варианта в течение эпидемического сезона 2015-2016 гг. среди пациентов МНЦ ФГБНУ «ИЭМ». Для этого потребовалась разработка нового диагностического вируса гриппа, содержащего NA вируса гриппа А/Южная Африка/3626/2013(Н1Ш).
Материалы и методы. В исследовании изучались сыворотки крови 134 пациентов МНЦ ФГБНУ «ИЭМ» в возрасте от 24 до 84 лет, собранные в январе-марте 2016 г. согласно протоколу Локального Этического комитета при ФГБНУ «ИЭМ» № 2/16 от 12 мая 2016 г. Для определения антител к NA в твердофазной реакции ин-гибирования нейраминидазной активности (РИНА) (Смолоногина ТА. и соавт., 2011) использовались следующие реассортантные вирусы гриппа: А(Н7Ш), содержащий NA вируса А/Калифорния/07/2009(Н1Ш) pdm [H1N1pdm] и А(Н6Ш), содержащий NA вируса А/ Южная Африка/3626/2013(Н1Ш). Вирусы ШШрёт, А/Южная Африка/3626/2013(Н1Ш) и А/Новая Каледония/20/1999(Н1Ш) использовали в качестве антигенов в реакции торможения агглютинации (РТГА).
Результаты. Выявлено статистически значимое повышение средних титров антигемагглютинирующих антител к пандемическим вирусам гриппа среди лиц, перенесших ОРЗ в текущем эпидемическом сезоне, по сравнению с лицами, не имеющими ОРЗ в анамнезе (Р < 0,05). В группе пациентов 24-45 лет доли лиц с защитными уровнями антигемагглютинирующих антител (> 1:40) к вирусу A(H1N1)pdm и эпидемическому вирусу А/Новая Каледония/20/1999(Н1Ш), вышедшему из циркуляции в 2009 г., были значительно выше по сравнению с лицами старшего возраста (табл.). Это может свидетельствовать о наиболее частом инфицировании указанными вирусами в данной возрастной группе. Среди участников молодого и среднего возраста доля лиц с защитными титрами антител к НА дрейфового варианта А/Южная Африка/3626/13(НШ1) была выше по сравнению со участ-
ТАБЛИЦА. УРОВНИ КОЛЛЕКТИВНОГО ИММУНИТЕТА К ПОВЕРХНОСТНЫМ АНТИГЕНАМ ВИРУСОВ ГРИППА А(ЖМ) СРЕДИ ПАЦИЕНТОВ, ОБСЛЕДОВАННЫХ В ЭПИДЕМИЧЕСКОМ СЕЗОНЕ 2015-2016 гг. (К ТЕЗИСАМ СЫЧЕВА И.А.И ДР.)
Возраст Число в группе % лиц с титрами антител > 1:40
Антитела к НА (РТГА) Антитела к NA (РИНА)
ЮАР/2013 H1N1pdm Новая Каледония/1999 ЮАР/2013 H1N1pdm
24-45 24 8,3a 16,7 33,3b,c 0 17,7d
46-64 48 6,3 10,4 2,1b 2,8 8,3e
65-84 62 3,2a 6,5 4,8c 3,2 50,0de
Примечание. а - Р = 0,049; b - Р = 0,045; c - Р = 0,001; d - P = 0,01; e - P < 0,001.
