CC BY
42
УДК 577.121:436.2
В. В. МУГАК И. П. СТЕПАНОВА В. Д. ПЬЯНОВ
Институт ветеринарной медицины Омского государственного аграрного университета
ОЦЕНКА СОРБЦИОННОЙ СПОСОБНОСТИ ЭРИТРОЦИТОВ КРОВИ КРУПНОГО РОГАТОГО СКОТА_
Целью исследования являлась оценка сорбционной способности эритроцитов (ССЭ) крови телок в онтогенезе и коров при разных физиологических состоятях. Исследование проведено на клинически здоровых и с признаками метаболических нарушений животных. Объект исследования - кровь. Показатель ССЭ определен по методу А.Я. Тогайбаева. Показано, что метод оценки ССЭ может использоваться в ветеринарной практике для диагностики сдвигов в обмене веществ телок и коров.
В медицинской практике для оценки эндогенной интоксикации используется метод А.Я. Тогайбаева, основанный на определения сорбционной способности эритроцитов (ССЭ) крови [ 1 ]. В основу метода положено представление об эритроците как универсальном адсорбенте. Метод А.Я. Тогайбаева основан на способнос ти эритроцитов поглощать краситель мети-леновый-синий в зависимости от функционального состояния их клеточной мембраны, т. е. отражает восстановительную способность эритроцитов. Известно, что эта способность меняется по мере изменения проницаемости эритроцитарной мембраны: в начале интоксикации она снижена, а затем, при повреждении ее бислойной структуры и взаимодействии индикатора с внутриэритроцитарными субстанциями ССЭ возрастает выше нормы, что свидетельствует о клеточной дезорганизации.
Однако в ветеринарной практике до настоящего момента данный метод не применялся. В связи с этим целью исследования являлась оценка ССЭ крови телок в онтогенезе и коров при разных физиологических состояниях.
Научное исследование выполнено на базе ЗАО им. Ф. Энгельса и п/з им. В. Куйбышева Любинского района, ОАО «Колос» Шербакульского района, СПК «Колос » Павлоградского района Омской области на телках и коровах красной степной породы. Была определена группа клинически здоровых коров (п = 32) в возрасте 2-4 лет при разных физиологических состояниях с аналогичными показателями массы и молочной продуктивности в периоды раздоя (1 -я группа - контроль), начального этапа сухостойности (2-я), заключительного этапа сухостойности (3-я) и новотельности (4-я). Продолжительность сухостойного периода составила 60 суток, период раздоя-100 суток после отела. Исследования проводились в зимний стойловый период, Все животные получали одинаковый рацион, соответствующий принятому в хозяйстве.
Группа больных коров состояла из 20 голов с клиническими признаками токсикоза: уменьшение волосяного покрова в области живота и шеи, уменьшение массы тела, снижение молочной продуктивности, расстройства пищеварения (диарея) и т.д., ко-I торая была разделена на две подгруппы с 1-й (5-я груп-
па) и 2-й степенью (6-я) выраженности эндогенной интоксикации.
Были обследованы 9 клинически здоровых групп телок (п = 142) в возрасте от 2 до 15 суток (7-я группа), 1 месяца (8-я группа - контроль), 3 месяца (9-я), 6 месяцев (10-я), 9 месяцев (11-я), 12 месяцев (12-я), 18 месяцев (13-я) и 24 месяцев (14-я). Исследования проводились в зимний стойловый период. Животные находились на рационе, принятом в хозяйстве.
Было сформировано 3 группы больных телят (п = 45) с 1-й степенью выраженности интоксикации (сильное отставание в росте и развитии, уменьшение веса тела, облысение, диарея) в возрасте 6 месяцев (15-я группа), 9 месяцев (16-я) и 12 месяцев (17-я).
Сорбционную способность эритроцитов (ССЭ) определяли по методу А.Я. Тогайбаева с соавт. |2]. Методика состоит в следующем: 1 мл эритроцитарной массы помещают в центрифужную пробирку с 3 мл метиленового-синего. Перемешивают содержимое пробирки и оставляют пробирку на 10-12 минут при комнатной температуре. Затем центифугируют 10 при 3000 об/мин. Надосадочную жидкость переносят в кювету КФК-56. Фотометрируктг при красном светофильтре, длина волны 630 нм, против воды. Производят и фотометрию исходного раствора красителя. Расчет ведется по формуле:
/1%= 100%
0,100%
где D, — показатель оптической плотности после инкубации с эритроцитами, усл. ед.; Dj — оптическая плотность исходного красителя, усл. ед;
А — сорбционная способность эритроцитов, %.
Статистическую обработку результатов проводили с использованием критериев Стьюдента и Фишера (F).
На первом этапе нашего исследования была изучена возможность использования метода A.A. Тогайбаева для оценки ССЭ крови у КРС. Статистическая обработка результатов выявила, что сравнение средних значений ССЭ крови можно провести во всех парах групп коров (табл.1), поскольку значения FTa(Vi больше значений F
Таблица 1
Сравнение средних значений показателя ССЭ крови у коров при разных физиологических состояниях
Показатель Критерий Сравниваемые группы коров
Периоды раздоя и начального этапа сухостойности Периоды раздоя и заключительного этапа сухостойности Периоды раздоя и новотельности Периоды начального и заключительного этапа сухостойности Периоды начального этапа сухостойности и новотельности s 5 t- 8 X •S О ь о X 6 2 Е га t fc о 0 л 1 1 £ о ^ ш 0) о т 2 5 го ГЭ ъ ч о X Q. «и с
ССЭ, % F^KCn ^"табл 0.95 2,75 1,96 2,75 2,11 2,75 0,93 2.75 0,39 2.75 0,93 2.75
Таблица 2
Показатель ССЭ крови коров при разных физиологических состояниях, (М±т)
Показатель Группа животных
Период Период Период Период
раздоя, начального заключительного новотельности
(контроль) этапа этапа
сухостойности сухостойности
ССЭ, 42,52±3,14 41,67±3,60 40.78 ±3,67 40,49 ±3,69
% п=30 п=28 п=13 п=12
Это указывает на то, что метод является хорошо воспроизводимым и может быть использован для оценки ССЭ крови во всех изучаемых группах животных.
Значения ССЭ крови клинически здоровых коров при разных физиологических состояниях представлены в таблице 2. Этот показатель для КРС принимает значения от 36,79 до 45,66 %, что принято нами за норму. Средние значения ССЭ крови клинически здоровых коров 2-й, 3-й, 4-й групп по отношению к контролю достоверно не различаются (табл. 2).
Таким образом, результаты исследования свидетельствуют о том, что значения показателя ССЭ находятся практически на постоянном уровне независимо от физиологического состояния коров.
При исследовании ССЭ крови коров с извращенным метаболизмом обнаружено, что значения показателя ССЭ в группах с 1-й и 2-й степенью интоксикации колеблются в диапазонах 35,14-М2,80 и 47,37^--^-57,51% соответственно. Выявлено достоверное снижение средних значений ССЭ крови коров 5-й группы (р<0,01) и достоверное повышение этого показателя у 6-й группы животных (р<0,01) в сравнении с контролем (табл. 3). Причем выявлены достоверные различия между группами коров с 1 -й и 2-й стадиями эндогенной интоксикации (р<0,01).
Полученные результаты показывают, что показатель ССЭ крови зависит от состояния обмена веществ коров. Это позволяет с помощью показателя
ССЭ определять степень метаболических нарушений в организме КРС.
Также изучена динамика этого показателя у клинически здоровых телок в возрасте 2-15 суток, 1, 3,6, 9,12, 18 и 24 месяцев.
Проведенные исследования выявили достоверное снижение ССЭ крови у группы новорожденных гелок и достоверное повышение данного показателя у телок с 3-месячного возраста в сравнении с контрольной группой (1 месяц), причем значения показателя практически одинаковые у животных в возрасте отЗдо 24 месяцев (табл. 3).
Таблица 3
Показатель ССЭ клинически здоровых телок в постнатальном онтогенезе, (М±т)
Группа телок ССЭ, % Группа телок ССЭ, %
2-15 сут. 32,48±3,79*" п=24 9 мес. 41,79±3,63" п=10
1 мес (контроль) 37,44±3,94 п=15 12 мес. 42,44±3,75*" п=10
3 мес. 40,20±3,61* П=14 18 мес. 42,31±3,79"* п=9
6 мес. 41,28±3,10"* п=20 24 мес. 42,09±4,12" П=7
Примечание; *,","*- достоверность различий в сравнении с контролем (соответственно р<0,1; р<0,05 р<0.01).
Итак, полученные данные свидетельствуют о том, что в группах клинически здоровых телок до 3 месяцев значения ССЭ достоверно повышаются, а затем значения этого показателя остаются практически на постоянном уровне.
При исследовании показателя ССЭ крови телок с 1 -й степенью интоксикации в возрасте б, 9, 12 месяцев получены значения, которые колеблются в диапазонах 40,86^-49,92; 43,28^50,36 и 42,77-^51,29% соответственно. Обнаружено достоверное повышение этого показателя у телок с нарушенным метаболизмом в возрасте 3 месяцев (р<0,05), 9 месяцев (р<0,01) и 12 месяцев (р<0,05) в сравнении с группами клинически здоровых животных соответствующего возраста.
Таким образом, показатель ССЭ позволяет определять степень метаболических сдвигов у КРС. Метод оценки ССЭ является воспроизводимым и может быть использован в ветеринарной практике для
экспресс- диагностики метаболических нарушений у
крс. :
Литература
1. Тогайбаев А.Я., КургузкинА.А. с соавт. Способ диагностики эндогенной интоксикации // Лаб. дело.
- 1988.-№9.-С. 22-25.
2. Первушин Ю.В. Лабораторная диагностика синдрома эндогенной интоксикации. — Ставрополь,
- 1993.-25 с.
ПЬЯНОВ Владимир Дмитриевич, доктор биологических наук, профессор кафедры физиологии. СТЕПАНОВА Ирина Петровна, кандидат биологических наук, доцент кафедры химии. МУГАК Вера Васильевна, старший преподаватель кафедры химии.
УДК419.612.119:636.5 А. С. СТАРУН
Институт ветеринарной медицины Омского государственного аграрного университета
КОСТНОМОЗГОВОЕ КРОВЕТВОРЕНИЕ И ДИНАМИКА ИММУННЫХ ЛИМФОЦИТОВ В ХОДЕ ВАКЦИНАЦИИ ЦЫПЛЯТ ПРОТИВ ИНФЕКЦИОННОГО ЛАРИНГОТРАХЕИТА НА ФОНЕ ПРИМЕНЕНИЯ ВИТАМИНА С
Изучена динамика иммунокомпетентных клеток периферической крови и костномозгового кроветворения цыплят в ходе вакцинации их против инфекционного ларинготрахеита. Показана роль витамина С в создании резистентности организма, профилактики развития стрессового состояния птицы и создания стойкого иммунитета при вакцинации ее против инфекционного лариготрахеита.
ВитаминС — это синтетический препарат. Содержится аскорбиновая кислота в ягодах шиповника, иглах хвои, капусте, крапиве, листьях березы, липы, томатах, черной смородине, хрене, петрушке и других продуктах растительного происхождения. Многочисленные экспериментальные наблюдения касаются, главным образом, изучения биохимии витамина и его роли в обменных процессах. Но мало исследованы функции аскорбиновой кислоты в физиологии иммунной системы. Целый ряд данных указывает на связь витамина С с иммунной реакцией организма. Показано, что иммуноингибируемый эффект при недостатке витамина С связан с нарушением тимус-зависимых факторов; к тому же тимус имеет высокую концентрацию витамина С, что указывает на важную роль витамина в развитии и поддержании структуры лимфоидной ткани. Витамин С шрает важную роль в фагоцитарной функции клеток. В частности, у животных при недостатке витамина функции фагоцитов имеют значительные нарушения, но эти дефекты исчезают при экзогенном введении аскорбиновой кислоты.
Витамин С играет важную роль в регуляции физиологии лимфоидных тканей в Целом. Высокая клеточная концентрация витамина С и ее колебания при инфекционных болезнях указывают на эту взаимосвязь, а эксперименты in vitro подтверждают влияние витамина на подвижность фагоцитарных клеток. Симптомы респираторных инфекций сглаживаются при профилактических добавках в рацион витамина С. Возможно, в этих случаях витамин С оказывает влияние на подвижность фагоцитов за счет прямого воздействия на активность их энзимов и, предполагают, на микротубулярные структуры этих клеток. Витамин С участвует в окислительно-восстановительных процессах, его присутствие также необходимо в тканях для нормального течения их дифференциров-ки. При этом в тканях витамин присутствует в двух формах; окисленной — в виде аскорбиновой кислоты, в виде дегидроаскорбиновой кислоты — восстановленной форме. Последняя легко растворяется в липи-дах, что обеспечивает ее свободный транспорт через клеточные мембраны. Аскорбиновая кислота является неотъемлемым компонентом лейкоцитов, спо-
