УДК / UDK 619:616.36-007.17:619:616-074:619:615.32:636.52/.58
ОЦЕНКА ЭФФЕКТИВНОСТИ ФИТОКОМПОЗИЦИЙ ПРИ БЕЛКОВОЙ ДИСТРОФИИ ПЕЧЕНИ У КУР ПУТЕМ БИОХИМИЧЕСКОГО ИССЛЕДОВАНИЯ КРОВИ
EVALUATION OF FITOKOMPOZITIONS IN CHICKENS WITH PROTEIN LIVER DISEASE BY BIOCHEMICAL BLOOD TESTS
Ермашкевич Е.И., аспирант Ermashkevich E.I., Post-Graduate Student Клетикова Л.В., доктор биологических наук, профессор Kletikova L.V., Doctor of Biological Sciences, Professor ФГБОУ ВО Ивановская ГСХА Ivanovo State Agricultural Academy E-mail: [email protected]
КЛЮЧЕВЫЕ СЛОВА
куры, белковая дистрофия печени, фитокомпозиция, биохимические исследования.
KEY WORDS
chickens, protein liver desiase, fitokompozition, biochemical studies.
Современный потребительский рынок предъявляет высокие требования к качеству и безопасности продукции. В условия крупных промышленных комплексов по производству яиц и мяса птицы нельзя избежать профилактических вакцинаций и других ветеринарных обработок. Нестабильный кормовой фон с учетом зональных особенностей химического состава кормов [1] предполагает внедрение в лечебно-профилактическую практику специалистов безопасных средств и изучение их влияния на гематологические и биохимические показатели крови птиц. С этой целью применяются витамины [2; 3], пробиотики [4; 5], гуминовые вещества [6], миро- и макроэлементы [7; 8], растительные добавки [9], эффективность действия которых можно оценить при гематологическом и биохимическом исследовании крови птиц [10], так как кровь является связующим звеном всех органов и систем организма. В связи с этим особо важное значение приобретает поиск биохимических тестов для диагностики скрыто или хронически протекающих болезней у птиц, назначения и корректировки лечебных мероприятий [11; 12]. Актуальной является и проблема поиска экономически оправданных биологически активных веществ, где приоритетное место могут занять фитосборы при условии правильно подобранных лекарственных трав.
Цель исследования проанализировать эффективность применения фитокомпозициий при белковой дистрофии печени у кур-несушек биохимическим исследованием крови.
Исследование выполнено в 2016 г. на базе «ООО Птицефабрика "Север"» (Ярославская обл.). Объектом исследования послужили куры кросса Ломанн браун содержащиеся в четырехярусном типовом помещении, кормление птицы автоматизировано, поение - из ниппельных поилок, контроль параметров микроклимата компьютеризирован. Ветеринарно-санитарные мероприятия проводятся согласно плану, принятому на предприятии.
До начала опыта из общего поголовья 160-суточных кур методом случайной выборки отобрали 5 птиц, и подвергли патологоанатомическому вскрытию и гистологическому исследованию печени, в результате чего у четырех из них установлена белковая дистрофия печени.
Для коррекционной терапии использовали две фитокомпозиции, которые задавались курам один раз в день в определенной дозе. Схема проведения эксперимента представлена на рисунке 1.
1 этап
Референсные значения
--~ + 1
белковый пул крови
энергетическии потенциал
макроэлементы в крови
Основной рацион (ОР) 2 группа - 3 группа -
30 дней, n=50 опытная опытная
1
ОР + ФК
ОР + ФК №1 №2
30 дней, n=50 30 дней,
1 г n=50
1
Биохимическое исследование сыворотки крови
Рисунок 1 - Схема проведения эксперимента
Материалом для исследований послужила кровь, которую получали из подкрыльцовой вены в вакуумные пробирки с активатором свертываемости. Аналитический этап исследований проводили на кафедре акушерства, хирургии и незаразных болезней животных и ветеринарном центре «Ветасс». Биохимические показатели - общий белок, альбумин, холестерол, триглицериды, неорганический фосфор, общий кальций, активность ферментов аспартатаминотрансферазы (ACT), аланинаминотрансферазы (АЛТ) и щелочной фосфатазы (ЩФ) определяли на биохимических анализаторах BioChem BA и bA - 88A (mindray) Semi-auto-chemistry Analyzer. Статистическую обработку результатов проводили с использованием стандартного пакета программ.
Для корректного анализа результатов эксперимента провели диагностическое исследование сыворотки крови, полученной от 86 кур кросса Ломанн браун, содержащихся на птицефабрике «Север» и сравнили их со
средними физиологическими показателями, установленными Б.Ф. Бессарабовым и соавторами [13].
Многообразие функций, выполняемых в организме общим белком и альбумином, делает их константными величинами [14], составляющими 43,059,0 г/л и 22,0-29,0 г/л соответственно. У кур концентрация общего белка превысила верхнюю границу нормы на 35,6%, альбумина - на 33,4%. О преобладании процессов анаболизма или катаболизма можно судить по белковому коэффициенту, который составил 0,94, при норме 0,9-1,1.
Норма содержания холестерола имеет широкий диапазон и колеблется от 2,9 до 6,6 ммоль/л, тем не менее, верхний предел был превышен на 10,6%, что свидетельствует о развитии сильного стресса. Дополняет данное положение повышенный уровень триглицеридов в крови. Уровень кальция в крови меньше нижней границы нормы на 26,7%, а концентрация фосфора выше нормы на 27,1% (Р<0,05).
Ответом на высокий уровень общего белка, альбумина, холестерола, триглицеридов и фосфора, пониженное содержание кальция в крови была энзиматическая активность ACT, АЛТ и щелочной фосфатазы, превысившая физиологическую норму в 1,5-3,0 раза.
Таким образом, совокупность данных биохимических исследований до начала проведения эксперимента свидетельствовала о нарушении синтетической функции печени, дефекте антитоксического барьера, недостатке транспортной системы, нарушении гомеостаза у кур и адаптивной ферметемии.
После 30-дневного курса терапии травяными сборами провели исследование сыворотки крови у кур контрольной и опытной групп (табл.1).
Таблица 1. Результаты исследования сыворотки крови после применения фитокомпозиций, M±m
Показатель Группы кур
До опыта, п=86 Контрольная - 1 группа, п=50 Опытные
2 группа, п=50 3 группа, п=50
Общий белок, г/л 80,05±19,25 69,40±0,70 61,80 ± 1,80 68,25±1,95
Альбумин, г/л 38,70±2,10 29,35±0,35 30,82±0,20 33,20 ±0,70
Альбумин, % 48,3 42,3 49,9 48,7
Холестерол, ммоль/л 7,30±1,32 2,31±0,09 3,12±0,07 3,27±0,15
Триглицириды, ммоль/л 6,60±1,02 6,12±1,06 4,16±0,61 4,61±0,57
Общий кальций, ммоль/л 2,75±0,25 4,35±0,09 4,06±0,38 4,25±0,03
Неорганический фосфор, ммоль/л 2,30±1,10 3,12±0,23 2,06±0,09 2,29±0,02
АСТ, Ед/л 438,95±19,35 192,55±9,55 150,40±1,50 175,05±8,55
АЛТ, Ед/л 328,96±28,70 156,25±8,35 139,00±17,30 150,25±7,05
ЩФ, Ед/л 627,40±31,10 553,95±28,45 308,60±49,20 491,20±17,50
Относительно физиологического показателя в контрольной и в опытных группах содержание общего белка в сыворотке крови осталось повышенным, тем не менее, отмечено его снижение на фоне данных, полученных у 160-суточных кур до начала проведения эксперимента. Относительно контрольной группы во второй, получившей травяной сбор №1 произошло достоверное снижение белка на 10,95%; в третьей - наметилась лишь тенденция к его снижению. В контрольной группе, вероятно, на фоне использования некачественных кормов отмечено процентное снижение альбуминов и соответственно повышение доли глобулинов, что привело к смещению белкового коэффициента в сторону ацидоза. Во 2 и 3 группах относительно контроля процентная концентрация альбумина повысилась, белковый коэффициент составил 0,995 и 0,947 соответственно. Очевидно, фитосборы, примененные для коррекционной терапии, способствовали уменьшению эндогенной интоксикации и повреждению гепатоцитов.
Через 30 дней от начала опыта в контрольной группе у кур-несушек холестерол снизился в 3,2 раза и, таким образом, его количество оказалось меньше физиологической нормы. Во 2 и 3 группах также произошло снижение холестерола, но его содержание было больше на 35,1% и 41,6% чем в 1 группе и находилось в пределах номы (Р<0,05). Уровень триглицеридов не имел достоверных отличий до начала эксперимента и в контрольной группе. Во 2 группе кур-несушек триглицериды снизились на 32,0%, в третьей - на 24,7% (Р<0,05), при этом липидемия сохранилась.
К окончанию эксперимента в 1 группе увеличилось содержание общего кальция на 58,2% и неорганического фосфора на 35,7%. В опытных, 2 и 3 группах, количество Ca в крови повысилось относительно первоначального показателя, но было меньше, чем в 1 группе на 6,7% и 2,3%. Фитосборы способствовали снижению фосфора в периферической крови во 2 и 3 группах птиц на 33,9% и 26,6% соответственно (Р<0,05).
У кур контрольной группы на 30 сутки эксперимента скорость катализа снизилась: ACT - на 56,1%. АЛТ - на 52,5%, ЩФ - на 11,7% (Р<0,05).
В опытных группах активность ферментов оказалась ниже, чем в контрольной, так во второй группе ACT, АЛТ и ЩФ - на 21,9%, 11,0% и 44,3%; в третьей группе соответственно на 9,1%, 3,8% и 11,3% (Р<0,05). Повышенный уровень трансаминаз в совокупности с повышенной щелочной фосфатазой свидетельствует о хроническом (неактивном) течении воспалительного процесса в печени и поджелудочной железе. Высокое содержание щелочной фосфатазы и не выраженная гиперфосфатемия могут служить признаком остеодистрофических процессов у кур-несушек.
Несмотря на выявленные метаболические нарушения, яйценоскость у кур экспериментальных групп повысилась на 11,0%. Патологоанатомическое вскрытие показало значительные отложения жира под кожей и вокруг внутренних органов, при гистологическом исследовании печени белковая дистрофия не выявлена.
Проведение эксперимента в сложной ситуации при использовании некачественных кормов на птицефабрике показало, что у кур выражен дисбаланс обменных процессов, проявившийся гиперпротеинемией,
гиперхолестеринеминей, триглицеридемией, гиперфосфатемией, высокой каталитической активностью ферментов на фоне снижения белкового коэффициента и уровня кальция в крови.
Переход к новой стадии развития организма у кур-несушек, а именно достижение ими периода максимальной продуктивности, совпал по времени с экспериментом, отразился на интенсивности метаболических процессов, что привело к количественным и качественным изменениям биохимических показателей крови в контрольной группе. Гиперпротеинемия, обусловленная гипергаммаглобулинемией, липидемия и гиперфосфатемия, вероятно, создают определенный фон на уровне микросреды для функционирования ферментов, обладающих высокой адаптивной пластичностью к изменившимся условиям [15].
Введение в рацион композиций из трав курам опытных групп оказало положительное влияние на обмен веществ, снизив концентрацию общего белка и повысив альбуминовую фракцию в крови; нормализовав уровень холестерола и кальций-фосфорное соотношение, и тем самым, ослабив скорость ферментативных реакций.
Таким образом, выявленные изменения с помощью биохимического исследования сыворотке крови, позволили:
— подтвердить диагноз и в дальнейшем использовать биохимические тесты для диагностики дистрофии печени у кур;
— показать эффективность применения фитокомпозиций в терапии субклинических форм гепатозов у кур-несушек в условиях птицефабрики.
БИБЛИОГРАФИЯ
1. Шацких Е.В. Физиологическое обоснование использования разных форм соединений селена, йода и цинка в кормлении цыплят-бройлеров / Е.В. Шацких: автореф... докт. биолог. наук. - Боровск, 2009. - 42 с.
2. Клетикова Л.В. Иммунная защита у цыплят при разных способах введения Микровита А / Л.В. Клетикова: автореф...канд. вет. наук. - Иваново, 2004. - 20 с.
3. Дорофеева A.C. Продуктивность гусей шадринской породы при использовании в комбикормах повышенных дозировок витаминов / A.C. Дорофеева: автореф...канд. с.-х. наук. - Курган, 2011. - 16 с.
4. Бессарабова Е.В. Применение микродисперсной формы пробиотика Лактобифадол в птицеводстве / Е.В. Бессарабова: автореф...канд. вет. наук. - Москува, 2011. - 22 с.
5. Клетикова Л.В. Влияние пробиотических препаратов «Лактур» и «Бифитрилак» на яичную продуктивность и обмен веществ у кур / Л.В. Клетикова: автореф...док. биолог. наук. - Саранск, 2012. - 36 с.
6. Глебов Д.П. Цитологические показатели местной защиты трахеи и иммунный статус у кур при применении препаратов «Лигногумат КД-А» на фоне пониженной иммунологической реактивности / Д.П. Глебов: автореф..канд. вет. наук, Екатеринбург. - 2007. - 20 с.
7. Рубцов В.В. Коррекция иммунной защиты у кур при селеновой недостаточности селеноорганическими препаратами / В.В. Рубцов: автореф....канд. вет. наук, Иваново. - 2007. - 22 с.
8. Бессарабов Б.Ф. [и др.]. Фермерское и приусадебное птицеводство / Б.Ф. Бессарабов, И. И. Кочиш, А.Л. Киселев, Л.В. Клетикова, В.В. Пронин, Н.К. Сушкова. - М.: ЗооВетКнига, 2015. - 265 с.
9. Шапошников A.A. [и др.]. Влияние ксантофилсодержащих растительных добавок на биохимические показатели крови, накопление лютеина и зеаксантина в желтке перепелиных яиц/ A.A. Шапошников, Л.Р. Закирова, В.И.
Дейнека, С.М. Вострикова, Л.А. Дейнека, Е.И. Гай, A.M. Бронникова, И.Н. Яковлева. // Научные ведомости БелГУ. Серия: Естественные науки. 2011. №21 (116). URL: hUp://cyberlenmka.m/article/n/vNyanie-ksantofiNsoderzhaschih-rastitelnyh-dobavok-na-biohimicheskie-pokazateN-krovi-nakoplenie-lyuteina-i-zeaksantina-v-zheltke (дата обращения: 01.08.2016).
10. Бессарабов Б.Ф. [и др.]. Клинические и лабораторные методы исследования сельскохозяйственной птицы при незаразных болезнях / Бессарабов, Л.В. Клетикова, С.А. Алексеева, Н.К. Сушкова. - М.: ЗооВетКнига, 2014. - 310 с.
11. Ермашкевич Е.И. [и др.]. Причины возникновения субклинических форм гепатозов у кур-несушек / Е.И. Ермашкевич, Л.В. Клетикова, H.H. Якименко, А.Н. Мартынов // Аграрный вестник Верхневолжья. 2015. №2. С. 18-21.
12. Ермашкевич Е.И. [и др.]. Морфологические изменения пищеварительных желез при болезнях печени у кур / Е.И. Ермашкевич, Л.В. Клетикова, В.В. Пронин, Г.В. Корнева // Иппология и ветеринария. 2016. №1(19). С 43-47.
13. Бессарабов Б.Ф., Алексеева С.А., Клетикова Л.В. Лабораторная диагностика клинического и иммунобиологического статуса у сельскохозяйственной птицы / Б.Ф. Бессарабов, С.А. Алексеева, Л.В. Клетикова. - М.: КолосС, 2008. - 151 с.
14. Рослый И.М., Водолажская М.Г. Правила чтения биохимического анализа / И.М. Рослый, М.Г. Водолажская. - М.: МИА, 2010. - С. 29-67.
15. Хочачка П., Сомеро Дж. Биохимическая адаптация / П. Хочачка, Дж. Сомеро. // Перевод с анг. - М.: Мир, 1988. - 568 с.