Оценка биодоступности этилтиадиазолиламида ацетиламиногексановой кислоты при внутрижелудочном введении кроликам Текст научной статьи по специальности «Фундаментальная медицина»

ышщуц шщшшш «щшмшш сщш1а1М11МИ

Оценка биодоступности этилтиадиазолиламида ацетиламиногексановой кислоты при внутрижелудочном введении кроликам

Малыгин А.С., Попов Н.С., Демидова М.А., Марасанов С.Б.

ФГБОУ ВО Тверской государственный медицинский университет Минздрава России, Тверь

Резюме. Актуальность. Этилтиадиазолиламид ацетиламиногексановой кислоты является новым нестероидным противовоспалительным средством из группы производных 1, 3, 4-тиадиазола и ацексамовой кислоты. Цель. Оценка биодоступности этилтиадиазолиламида ацетиламиногексановой кислоты при однократном внутрижелудочном введении кроликам. Материалы и методы. Фармакокинетические исследования выполнены с использованием 6 кроликов породы шиншилла. Исследование проводили по открытой рандомизированной перекрёстной схеме. Этилтиадиазолиламид ацетиламиногексановой кислоты вводили внутривенно в дозе 1 мг/кг в 0,33 % растворе димексида или внутрижелудочно в дозе 1 мг/кг в 20 мл 2 % слизи крахмала. Определение аналита в плазме крови осуществляли методом ВЭЖХ-МС/МС. Пробоподготовку проводили методом осаждения белков плазмы крови ацетонитрилом. Хроматографию выполняли с использованием аналитической колонки Agilent InfinityLab Poroshell 120 EC-C18 2,7 мкм 4,6x100 мм. В качестве подвижной фазы использовали смесь ацетони-трила и воды деионизированной в соотношении 30:70 с добавлением 0,1 % муравьиной кислоты в изократическом режиме. Идентификацию осуществляли масс-спектрометрически по значению MRM m/z 285,2 ^ m/z 130,2. Результаты и обсуждение. Максимальное содержание этилтиадиазолиламида ацетиламиногексановой кислоты в плазме крови отмечалось через 1,345 ± 0,081 ч после внутрижелудочного введения и было равно 806,8 ± 65,6 нг/мл. Площадь под фармакокинетической кривой AUQ^ составила 5 088,1 ± 442,1 нг*ч/мл, а отношение AUC36 ^/AUQ^ — 2,96 ± 1,59 %. Биодоступность этилтиадиазолиламида ацетиламиногексановой кислоты при внутрижелудочном введении кроликам в дозе 1 мг/кг в виде водной суспензии составила в среднем 37 %. Заключение. Для повышения биодоступности необходимо улучшение биофармацевтических свойств этилтиадиазолиламида ацетиламиногексановой кислоты.

Ключевые слова: нестероидные противовоспалительные средства; этилтиадиазолиламид ацетиламиногексановой кислоты; биодоступность; ВЭЖХ-МС/МС

Для цитирования:

Малыгин А.С., Попов Н.С., Демидова М.А., Марасанов С.Б. Оценка биодоступности этилтиадиазолиламида ацетиламиногексановой кислоты при внутрижелудочном введении кроликам // Фармакокинетика и фармакодинамика. - 2018. - № 1. - С. 56-63.

DOI: 10.24411/2587-7836-2018-10007.

Assessment of bioavailability of ethylthiadiazolylamide of acetylaminohexanoic acid by intragastric administration in rabbits

Malygin A.S., Popov N.S., Demidova M.A., Marasanov S.B.

FSBEI HE Tver SMU MOH Russia

Resume. Relevance. Ethylthiadiazolamide of acetylaminohexanoic acid is a new non-steroidal anti-inflammatory agent from derivative of 1, 3, 4-thiadiazole and acexamic acid. Purpose. Evaluation of the bioavailability of ethylthiadiazolamide of acetylaminohexanoic acid with single intragastric administration to rabbits. Materials and Methods. Pharmacokinetic studies were performed using 6 rabbits of the Chinchilla breed. The study was conducted using an open, randomized, cross-sectional scheme. Ethylthiadiazolamide of acetylaminohexanoic acid was administered intravenously at a dose of 1 mg/kg in a 0.33 % solution of dimexide or intragastrically at a dose of 1 mg/kg in 20 ml of 2 % starch mucus. Determination of analyte in blood plasma was carried out by HPLC-MS/MS method. Sample preparation was carried out by the method of blood plasma protein precipitation by acetonitrile. Chromatography was performed with an analytical column Agilent InfinityLab Poroshell 120 EC-C18 2.7 |±m 4.6 x100 mm. As a mobile phase, a mixture of acetonitrile and deionized water at the ratio 30:70 with adding 0.1 % formic acid in the isocratic mode. The identification was carried out by mass spectrometry according to MRM m/z 285.2 ^ m/z 130.2. Results and Discussion. The maximum content of ethylthiadiazolamide of acetylaminohexanoic acid in blood plasma was 806.8 ± 65.6 ng/ml at 1.345 ± 0.081 h after intragastric administration. The area under the pharmacokinetic curve AUC0^36 was 5 088.1 ± 442.1 ngхh/ml, and the ratio AUC36^„/AUC0^36 — 2,96 ± 1,59 %. Bioavailability of ethylthiadiazolamide of acetylaminohexanoic acid with intragastric administration to rabbits at a dose of 1 mg/kg as an aqueous suspension averaged 37 %. Conclusion. It is necessary to improve biopharmaceutical properties of ethylthiadiazolamide of acetylaminohexanoic acid to increase bioavailability.

Keywords: nonsteroidal anti-inflammatory agents; ethylthiadiazolamide of acetylaminohexanoic acid; bioavailability; HPLC-MS/MS

For citations:

Malygin AS, Popov NS, Demidova MA, Marasanov SB. Assessment of bioavailability of ethylthiadiazolylamide of acetylaminohexanoic acid by intragastric

administration in rabbits. Farmakokinetika ifarmakodinamika. 2018;1:56-63. (In Russ). DOI: 10.24411/2587-7836-2018-10007.

56

ФАРМАКОКИНЕТИКА И ФШЩИШИКА

-МШ4УМ Ш1ЩШШИ Я^ШОШШ

Введение

Этилтиадиазолиламид ацетиламиногексановой (ацексамовой) кислоты представляет собой новое нестероидное противовоспалительное средство из группы производных 1,3,4-тиадиазола. В экспериментальных исследованиях с использованием моделей острого воспалительного отёка и хронического пролиферативного воспаления было показано, что по своей эффективности он не уступает кетопрофену и диклофенаку, не обладая при этом ульцерогенной активностью [1-3]. Важнейшим этапом доклинических исследований оригинальных лекарственных средств наряду с оценкой их токсичности и фармакологической активности является определение фармакокинетических параметров, в том числе биодоступности при различных путях введения в организм [4]. Современным методом, позволяющим осуществлять идентификацию и количественное определение лекарственных соединений в биологических объектах, является высокоэффективная жидкостная хроматография с масс-спектрометрическим детектированием (ВЭЖХ-МС/МС). Высокая точность и специфичность этого метода позволяет использовать его для фармакокинетических исследований.

Целью настоящего исследования явилась оценка биодоступности этилтиадиазолиламида ацетиламиногексановой кислоты при однократном внутрижелу-дочном введении кроликам с помощью ВЭЖХ-масс-спектрометрии.

Материалы и методы

В исследовании использовали активную фармацевтическую субстанцию нового нестероидного противовоспалительного средства из группы 1, 3, 4-тиадиазо-ла - этилтиадиазолиламид ацетиламиногексановой (ацексамовой) кислоты (рис. 1).

Рис. 1. Химическая структура этилтиадиазолиламида ацетиламиногексановой кислоты (брутто формула С12Н20К4О2В; химическая формула 2-(5-этил-1,3,4-тиадиазолил)амид 2-ацетиламиногексановой кислоты; Мм - 284,39 г/моль)

Оценку биодоступности этилтиадиазолиламида ацетиламиногексановой кислоты проводили в экспериментах на 6 кроликах-самцах породы шиншилла массой 3,2 ± 0,2 кг. Все эксперименты с животными осуществляли в соответствии с методическими рекомендациями по проведению доклинических исследований фармакокинетики лекарственных средств [5], международными правилами (Директива 86/629/ЕЕС) и правилами лабораторной практики [6] при наличии

разрешения этического комитета Тверского государственного медицинского университета.

Исследование проводили по открытой рандомизированной перекрёстной схеме. Период вымывания исследуемого лекарственного средства между этапами составлял 7 дней. Этилтиадиазолиламид ацетиламиногексановой кислоты вводили подопытным кроликам внутрижелудочно (через зонд) в дозе 1 мг/кг в 20 мл 2 % слизи крахмала или внутривенно в дозе 1 мг/кг в 0,33 % растворе димексида. Забор крови осуществляли через катетер из вены уха в обработанные натриевой солью гепарина пробирки в объёме 1 мл до начала исследования и через 0,016; 0,08; 0,16; 0,25; 0,5; 0,75; 1; 2; 3; 4; 6; 8; 10; 12; 24 и 36 ч после введения тестируемого соединения. Продолжительность мониторинга концентрации исследуемого соединения в плазме крови в среднем в 5 раз превышала период полувыведения (Ту2). Кровь центрифугировали в течение 10 мин при скорости 3000 оборотов в минуту, полученную плазму крови хранили при температуре -40 °С. Пробоподго-товку осуществляли методом осаждения белков плазмы крови ацетонитрилом. Разведение проб плазмы крови в процессе пробоподготовки осуществляли с учётом аналитического диапазона методики.

Количественное определение этилтиадиазолиламида ацексамовой кислоты в плазме крови осуществляли валидированным методом высокоэффективной жидкостной хроматографии с масс-спектрометрическим детектированием (ВЭЖХ-МС/МС) [7].

Оборудование: высокоэффективный жидкостной хроматограф Agilent 1260 Infinity II (Agilent Technologies, ФРГ), квадрупольный масс-спектрометр AB Sciex QTrap 3200 MD (AB Sciex, Сингапур) с электрораспылительным источником ионов (Turbo V с зондом TurboIonSpray), аналитические весы Acculab ALC-80d4, центрифуга с охлаждением ротора Eppendorf 5810R, система получения особо чистой воды Мил-липор DirectQ UV, вортекс-встряхиватель Elmi V-3, термостат твердотельный «Термит», шейкер Elmi S-3, автоматические дозаторы Black Thermo и Eppendorf, морозильный шкаф Liebherr LGT 2325.

Реактивы и расходные материалы: активная фармацевтическая субстанция этилтиадиазолиламида ацетиламиногексановой кислоты (ОАО «ВНЦ БАВ»), ацето-нитрил (LC-MS, Scharlau), муравьиная кислота (99 %, ЗАО «База №1 Химреактивов»), виалы 2 мл (Agilent Technologies), пробирки Eppendorf 2 мл, наконечники для автоматических дозаторов, мерные колбы 25, 50, 100 мл.

Для анализа образцов плазмы крови применяли следующие условия хроматографирования: аналитическая колонка Phenomenex Synerdgi C18 4 мкм 2Ч50 мм при температуре 40 °С; градиентный режим элюиро-вания: 0-0,4 мин - 10 % ацетонитрила с добавлением 0,1 % муравьиной кислоты; 0,41-0,8 мин - увеличение концентрации ацетонитрила до 90 %; 0,81-1,2 мин -кондиционирование колонки 10 % ацетонитрилом;

57

ФШКОШЕТШ И ФШЩШМШ

ШШШ llWeMJMWIMIiMffi Ш МУШШКШШ

Рис. 2. Хроматограмма плазмы крови с содержанием этилтиадиазолиламида ацетиламиногексановой кислоты 50 нг/мл

Рис. 3. Масс-спектр протонированной молекулы этилтиадиазолиламида ацетиламиногексановой кислоты (в режиме сканирования положительных ионов [М+Н]+)

скорость потока подвижной фазы - 0,6 мл/мин; объём

Количественное определение проводили по иону-

вводимой пробы - 5 мкл. При использовании данных продукту с m/z 130,2 Да.

условий время удерживания исследуемого соединения составляло 1,23 мин (рис. 2).

Идентификацию этилтиадиазолиламида ацетиламиногексановой кислоты осуществляли на основании регистрации MRM-переходов в режиме положительной ионизации (m/z 285,2 ^ m/z 75,1; m/z 114,2 и m/z 130,2) (рис. 3, 4)

Зависимость аналитического сигнала от концентрации исследуемого соединения в анализируемой пробе в пределах аналитического диапазона методики (0,0210 мкг/мл) носила линейный характер и описывалась следующим уравнением:

у = 6030х+9900,

-МШ4УМ Ш1ЩШШИ Я^ШОШШ

Рис. 4. Масс-спектр ионов-продуктов (в режиме сканирования положительных ионов, ион-предшественник m/z 285,2 Да)

Рис. 5. Калибровочный график для количественного определения этилтиадиазолиламида ацетиламиногексановой кислоты в плазме крови кроликов

где:

х - концентрация этилтиадиазолиламида ацетиламиногексановой кислоты, нг/мл;

у - величина аналитического сигнала. Значение коэффициента корреляции составило r2 = 0,9998 (рис. 5).

Определяли максимальную концентрацию этилтиадиазолиламида ацетиламиногексановой кислоты в

крови (Стах) и время её достижения (?шах) после однократного внутрижелудочного введения. Рассчитывали значения площадей под фармакокинетической кривой ЛиС0^м (от момента введения исследуемого соединения до бесконечности) и ЛИС0^36 (от момента введения исследуемого соединения до 36 ч) для внутрижелудочного и внутривенного введения. Расчёт биодоступности исследуемого лекарственного сред-

59

ФШШШШ И ФШЩШМШ

ышщум шщшшш «щшмшш сщш1а1ш1ми

ства при внутрижелудочном применении проводили по формуле (1):

= ШСв/ж х1оо % AUCb/b

(1)

Таблица 1

Максимальная концентрация (Стах) этилтиадиазолиламида ацетиламиногексановой кислоты в плазме крови кроликов при внутрижелудочном и внутривенном введении в дозе 1 мг/кг

В качестве программного обеспечения использовали Analyst MD 1.6.3.Software (AB Sciex). Статистическую обработку результатов исследования и расчёт фармакокинетических параметров осуществляли с помощью пакета программ Microsoft Office Excel 2013. Для каждого фармакокинетического параметра определяли среднее арифметическое (Mean), среднее геометрическое (GMean), стандартное отклонение (SD), значение коэффициента вариации (CV, %) и медианы (Median), доверительный интервал (L-95 %; Up-95 %).

Результаты и обсуждение

Анализ результатов экспериментального исследования показал, что через 1 мин после внутривенного введения этилтиадиазолиламида ацетиламиногексановой кислоты (1 мг/кг) его содержание в плазме крови кроликов составило 20323 ± 1136 нг/мл. Полученное значение соответствовало теоретической концентрации, рассчитанной путём деления количества препарата, введённого подопытным кроликам на предполагаемый объём циркулирующей крови.

При внутрижелудочном введении (1 мг/кг) максимальное содержание этилтиадиазолиламида ацетиламиногексановой кислоты составило 806,8 ± 65,6 нг/мл, что было в среднем в 25,2 раза (р < 0,001) ниже, чем максимальная концентрация при внутривенном введении (табл. 1).

По результатам фармакокинетических исследований были построены графики зависимости концентрации исследованного лекарственного средства от времени (фармакокинетические кривые концентрация -

Показатель Этилтиадиазолиламид ацетиламиногексановой кислоты, внутрижелудочно Этилтиадиазолиламид ацетиламиногексановой кислоты, внутривенно

Gnax, нг/мл ^max, Ч Cmax, нг/мл

1 860 1,385 21 454

2 890 1,323 20 621

3 804 1,258 19 108

4 784 1,317 21 411

5 701 1,299 20 560

6 802 1,487 18 784

Mean 806,8 1,345 20 323

Gmean 804,6 1,343 20 296

SD 65,6 0,081 1 136,0

CV, % 8,1 6,020 5,6

Median 803 1,320 20 590,5

min 701 1,258 18 784

max 890 1,487 21 454

Доверительный интервал (L-95 %; Up-95 %) 754,4-859,3 1,28 - 1,41 19 130-21 515

время) для внутривенного и внутрижелудочного введения (рис. 6 и 7).

Отмечено, что при внутривенном введении уменьшение концентрации этилтиадиазолиламида ацетиламиногексановой кислоты в плазме крови подопытных кроликов имело 2-фазный характер (а и в-фазы). В а-фазе в течение 45 мин наблюдалось быстрое снижение концентрации исследованного лекарственного

Рис. 6. Концентрация этилтиадиазолиламида ацетиламиногексановой кислоты в плазме крови кроликов при внутривенном введении (1 мг/кг)

Рис. 7. Концентрация этилтиадиазолиламида ацетила-миногексановой кислоты в плазме крови кроликов при внутрижелудочном введении (1 мг/кг)

-мшдуи отшщшшш ядашошш сщшмшыжшш-

Таблица 2

Значения площадей под фармакокинетической кривой

(АиС0^3б и AUCo^„), при внутривенном введении этилтиадиазолиламида ацетиламиногексановой кислоты в дозе 1 мг/кг

Показатель AUCo^36, нг x ч /мл AUCo^^, нг x ч /мл AUC36^„/ AUCo^36, %

1 15 642 16 373 4,67

2 12 761 13 216 3,56

3 13 168 13 307 1,05

4 15 061 15 766 4,69

5 11 905 12 196 2,44

6 12 650 12 821 1,35

Mean 13 531 13 946 2,96

Gmean 13 466 13 863 2,54

SD 1 478 1 701 1,59

CV, % 10,9 12,2 53,9

Median 12 965 13 262 3,0

Min 11 906 12 196 1,05

Max 15 642 16 373 4,68

Доверительный интервал (L-95 %; Up-95 %) 11 979-15 083 12 161 - 15 732 1,28 - 4,63

Таблица 3

Значения площадей под фармакокинетической кривой

(АиС0^3б и AUCo^„), при внутрижелудочном введении этилтиадиазолиламида ацетиламиногексановой кислоты в дозе 1 мг/кг

Показатель AUCo^36 AUCo^„ AUC36^»/ AUCo^36, %

1 5 725,5 5 784,9 1,04

2 5 400,3 5 496,1 1,77

3 5 144,1 5 262,0 2,29

4 5 033,8 5 127,3 1,86

5 4 525,8 4 598,8 1,61

6 4 699,5 4 759,9 1,29

Mean 5 088,1 5 171,5 1,64

Gmean 5 072,2 5 155,5 1,59

SD 442,1 444,8 0,44

CV, % 8,688 8,6 26,9

Median 5 088,938 5 194,6 1,69

Min 4 525,75 4 598,8 1,03

Max 5 725,5 5 784,9 2,29

Доверительный интервал (L-95 %; Up-95 %) 4 734,4-5 441,9 4 815,6-5 527,4 1,29-1,99

средства в плазме крови, вероятно, за счет перераспределения в ткани (фаза распределения). В фазе от-

мечалось медленное снижение концентрации этилтиадиазолиламида ацетиламиногексановой кислоты. Через 36 ч после внутривенного введения содержание исследуемого лекарственного средства в плазме крови приближалось к нижнему пределу количественного определения. Площадь под фармакокинетической кривой АиС0^36 составила 13 531 ± 1 478 нг х ч/мл, при этом отношение АиС36^м/АиС0^36 было равно 2,96 ± 1,59 %, что свидетельствовало об адекватности продолжительности мониторинга концентрации исследуемого лекарственного средства в плазме крови (табл. 2).

Концентрация этилтиадиазолиламида ацетиламиногексановой кислоты в плазме крови подопытных животных при внутрижелудочном введении (1 мг/кг) постепенно увеличивалась и достигала максимального значения через 1,345 ± 0,081 ч, затем наблюдались фазы быстрого и медленного снижения концентрации исследуемого вещества в крови. Площадь под фармакокинетической кривой АИС0^36 составила 5 088,1 ± 442,1 нг х ч/мл, а отношение АиС36^ю/АИС0^36 -2,96 ± 1,59 % (табл. 3).

По результатам проведенных фармакокинетических исследований была рассчитана величина абсолютной биодоступности этилтиадиазолиламида ацетиламиногексановой кислоты при внутрижелудочном введении кроликам в дозе 1 мг/кг в 2 % слизи крахмала. Показано, что значение этого показателя составило в среднем 37 %. Следует отметить, что исследованное новое аминокислотное производное тиадиазола обладает выраженными противовоспалительным, жаропонижающим и обезболивающим свойствами в сочетании с низкой ульцерогенной активностью, что делает перспективным использование его в качестве нестероидного противо-спалительного средства. Существенными недостатками этилтиадиазолиламида ацетиламиногексановой кислоты являются низкая растворимость (практически нерастворим в воде) и невысокая биодоступность, что свидетельствует о необходимости совершенствования ее биофармацевтических свойств. Одним из возможных направлений является получение супрамолекуляр-ных комплексов включения с в-циклодекстринами. Циклодекстрины представляют собой циклические олигосахариды, молекулы которых по форме похожи на тор. Они обладают внешней гидрофильной поверхностью и внутренней гидрофобной полостью. Подобная уникальная структура позволяет формировать комплексы включения, в которых липофильные (гидрофобные) вещества входят во внутреннюю полость в-циклодекстрина без образования ковалентных связей [8]. Обладая способностью к молекулярной инкапсуляции различных веществ, в-циклодекстрины помогают повысить растворимость и стабильность лекарственных субстанций, а также биодоступность препаратов. Наиболее подходящим для получения супрамолекулярных комплексов включения с производными тиадиазола

61

ФШКОШЕТШ И ФШЩШМШ

ышщум шщшшш ям«!« вдш^шшм^

является 2-гидроксипропил-в-циклодекстрин [9]. Заключение

Таким образом, результаты проведённого экспериментального исследования показали, что биодоступность этилтиадиазолиламида ацетиламиногексановой кислоты при внутрижелудочном введении кроликам (1 мг/кг) в виде суспензии с 2 % слизью крахмала составила в среднем 37 %. Для повышения биодоступности нового нестероидного противоспалительного средства необходимо улучшение его биофармацевтических свойств.

Благодарности

Выражаем глубочайшую признательность профессору, д. х. н. Скачиловой Софии Яковлевне (ОАО «ВНЦ БАВ», Старая Купавна) за синтезированное и

предоставленное для исследования новое производное 1,3,4-тиадиазола - этилтиадиазолиламид ацексамовой кислоты (ацексазоламид).

ДОПОЛНИТЕЛЬНАЯ ИНФОРМАЦИЯ

Конфликт интересов. У авторов отсутствует конфликт интересов.

Участие авторов. Попов Н.С. — разработка концепции и дизайна исследования, проведение экспериментов, написание и редактирование статьи; Малыгин А.С. — проведение экспериментов на лабораторных животных; Демидова М.А — идея исследования, анализ экспериментального материала, результатов и выводов; Марасанов С.Б. — анализ экспериментального материала, результатов и выводов.

СВЕДЕНИЯ ОБ АВТОРАХ

Попов Никита Сергеевич

Автор, ответственный за переписку

e-mail: [email protected]

ORCID ID: 0000-0002-1792-7414

SPIN-код: 1974-7300

ассистент кафедры управления и

экономики фармации ФГБОУ ВО Тверской

государственный медицинский университет

Минздрава России

Малыгин Александр Сергеевич

ORCID ID: 0000-0003-1955-5105 SPIN-код: 9757-6843 клинический ординатор кафедры фармакологии и клинической фармакологии ФГБОУ ВО Тверской государственный медицинский университет Минздрава России

Popov Nikita Corresponding author

e-mail: [email protected] ORCID ID: 0000-0002-1792-7414 SPIN code: 1974-7300

Assistant of the Department of Management and Economic of Pharmacy FSBEI HE Tver SMU MOH Russia

Malygin Alexander

ORCID ID: 0000-0003-1955-5105 SPIN code: 9757-6843

Resident Physician of the Department of Pharmacology and Clinical Pharmacology, FSBEI HE Tver SMU MOH Russia

Демидова Марина Александровна

SPIN-код: 2373-0829

д. м. н., профессор, зав. кафедрой управления и экономики фармации ФГБОУ ВО Тверской государственный медицинский университет Минздрава России

Demidova Marina

SPIN code: 2373-0829

Doctor of Medical Sciences, Full Professor, Head of the Department of Management and Economic of Pharmacy, FSBEI HE Tver SMU MOH Russia

Марасанов Сергей Борисович ORCID ГО: 0000-0002-7031-7797 SPIN-код: 2983-0003 д. м. н., профессор, зав. кафедрой фармакологии и клинической фармакологии ФГБОУ ВО Тверской государственный медицинский университет Минздрава России

Marasanov Sergey

ORCID ID: 0000-0002-7031-7797 SPIN code: 2983-0003

Doctor of Medical Sciences, Full Professor, Head of the Department of Pharmacology and Clinical Pharmacology, FSBEI HE Tver SMU MOH Russia

62

ФШШШШ и ФШЩШМШ

мшдуи Ш1ЩШШИ Ш^ЮМШМШ СЩШ Ш

Литература / References

1. Казаишвили Ю.Г., Попов Н.С. Исследование противовоспалительной активности новых производных тиадиазола при формалиновом отеке лапы у крыс // Современные проблемы науки и образования. - 2013. - № 3. [Kazaishvili YG, Popov NS. Study of anti-inflammatory activity of derivatives thiadiazole at formalin paw edema in rats. Sovremennye problemy nauki i obrazovaniya. 2013;3. (In Russ).] URL: www.science-education.ru/109-9598 (дата обращения: 18.10.2015).

2. Попов Н.С., Демидова М.А. Оценка острой токсичности нового аминокислотного производного тиадиазола при внутрибрюшинном введении мышам // Верхневолжский медицинский журнал. - 2016. - Т.15. -№ 1. - С. 9-12. [Popov NS, Demidova MA. Acute toxicity evaluation of the new amino acid derivative from thiadiazole at intragastric dministration on mice. Nerhnevolzhskijmedicinskijzhurnal. 2016;15(1): 9-12. (In Russ).]

3. Попов Н.С., Демидова М.А. Оценка ульцерогенности нового аминокислотного производного тиадиазола при внутрижелудочном введении крысам // Врач-аспирант. - 2017. - Т. 80. - 1. - С. 71-77. [Popov NS, Demidova MA. Ocenka ulcerogennosti novogo aminokislotnogo proizvodnogo tiadiazola pri vnutrizheludochnom vvedenii krysam. Vrach-aspirant. 2017;1(80):71-77. (In Russ).]

4. Жердев В.П., Литвин АА. Роль и организация фармакокинетических исследований // Клиническая фармакокинетика. - 2005. - № 3(2). -С. 1-3. [Zherdev VP, Litvin AA. Rol' i organizaciya farmakokineticheskih issledovanij. Klinicheskaya farmakokinetika. 2005;3(2):1-3. (In Russ).]

5. «Об утверждении правил лабораторной практики»: Приказ Министерства здравоохранения и социального развития РФ от 23 августа 2010 г. № 708н. [«Ob utverzhdenii pravil laboratornoj praktiki»: Prikaz Ministerstva zdravoohraneniya i social'nogo razvitiya RF ot 23 avgusta 2010 g.

№ 708n. (In Russ).] URL: http://www.garant.ru/products/ipo/prime/ doc/12079613/

6. Руководство по проведению доклинических исследований лекарственных средств / под ред. Миронова А.Н. - М.: Гриф и К.; 2012. [Rukovodstvo po provedeniyu doklinicheskih issledovanij lekarstvennyh sredstv. Ed by Mironov AN. Moscow: Grif i K.; 2012. (In Russ).]

7. Попов Н.С., Малыгин А.С., Демидова М.А. Разработка ВЭЖХ-МС/МС-метода для идентификации и количественного определения нового производного тиадиазола // Современные проблемы науки и образования. -2017. - 5. [Popov NS, Malygin AS, Demidova MA. Development of a HPLS-MS-MS method for identification and quantification of new derivative from thiadiazole. Modern problems of science and education. 2017;5. (In Russ).] URL: https://www.science-education.ru/ru/article/view?id=26988 (дата обращения: 25.10.2017)

8. Иванова Л.А., Войно Л.И., Шипарева Д.Г. Циклодекстрины и комплексы включения на их основе // Международный журнал экспериментального образования. - 2011. - № 11. - С. 94-95. [Ivanova LA, Voino LI, Shipareva DG. Ciklodekstriny i kompleksy vklyucheniya na ih osnove. International journal of experimental education. 2011;11:94-95. (In Russ).]

9. Ольхович М.В., Шарапова А.В., Блохина С.В. и др. Комплекс включения 2-гидроксипропил-Р-циклодекстрина с биологически активным производным 1,3,4 - тиадиазола [Текст] // Тезисы докладов «XX Менделеевский съезд по общей и прикладной химии». - Уральское отделение Российской академии наук. - 2016. - С. 529. [Olkhovich MV, Sharapova AV, Blokhina SV et al. Kompleks vklyucheniya 2-gidroksipropil-P-ciklodekstrina s biologicheski aktivnym proizvodnym 1,3,4 - tiadiazola [Tekst] // Tezisy dokladov «XX Mendeleevskij s"ezd po obshchej i prikladnoj himii». Ural'skoe otdelenie Rossijskoj akademii nauk. 2016;529. (In Russ).

63

ФАРМАКОКИНЕТИКА И ФШЩИШИКА