CC BY
15
© Боярська Л. М., Герасiмчук Т. С., Котлова Ю. В.
УДК 616-097-053. 2:613. 64-055. 26
Боярська Л. М., Герас'мчук Т. С., Котлова Ю. В.
ОСОБЛИВОСТ iмунних РЕАКЦШ ДiTEЙ,
яких вигОдОвуЮть MАTEPi-КУPЦi
Запорiзький державний медичний унiверситет (м. Запорiжжя)
Дана робота е фрагментом НДР кафедри дитя-чих хвороб ФПО ЗДМУ «Особливост1 переб1гу захво-рювань та розробка програм рацюнального харчу-вання, удосконалення л1кувальних, реаб1л1тац1йних заход1в I проф1лактики в1дхилень в стан1 здоров'я д1тей р1зного вку, мешканц1в промислового м1ст», № держ. реестрацп 114Ш01397.
Вступ. Багато матер1в, що палять, в1дмовляються годувати грудьми, вважаючи, що цим вони зменшу-ють шк1дливий вплив на дитину, хоча залишають малюк1в пасивними курцями. Однак, в останн1 роки наводиться все бтьше доказ1в того, що д1ти матер1в-курц1в, як1 знаходяться на штучному вигодовуваны, б1льше страждають в1д пасивного табакопал1ння в пор1внянн1 з тими д1тьми, яких матер1-курц1 продо-вжують вигодовувати груддю, тому що у грудному молоц1 знаходяться фактори, що захищають дитину вщ шк1дливих вплив1в, в тому числ1 I тютюнового диму [4].
Жшоче молоко - дуже складна рщина, що скла-даеться з безл1ч1 компонент1в I виконуе безл1ч функц1й, зб1льшуе можливост1 немовляти виробляти адекватну 1мунну в1дпов1дь. Воно мютить широкий спектр чинник1в 1мунолог1чного захисту: макрофаги, Т-л1мфоцити, 1мунокомпетентн1 В-л1мфоцити, 1муноглобул1ни, специф1чн1 до патоген1в дитини. Антим1кробний захист широкого спектра забезпе-чують ферменти л1зоцим I лактоферин. Макрофаги жшочого молока продукують практично весь спектр штерлейюыв (1Ь), як1 мають великий потенц1ал впли-ву на 1мунну систему, але 1х значення ще недостат-ньо вивчено [5].
Одним з найдавн1ших в еволюцмному план1 вважаеться IЬ-1 - а. 11_-1-а забезпечуе реал1зац1ю захисту орган1зму при р1зноман1тних пошкод-жуючих впливах. Стимуляторами синтезу його синтезу е р1зноман1тн1 Ыдуктори запалення (в1-русн1, бактер1альн1, ауто1мунн1 процеси, вплив ф1зичних фактор1в). П1сля вид1лення клмтинами-продуцентами I _-1 - а мае короткий перюд нап1ввиведення з кровотоку. До 50 % циркулюючих циток1н1в 1нтернал1зуються протягом 30 хвилин. 1_-1-а мае яскраво виражену 1муностимулюючу д1ю, пов'язану з1 зб1льшенням функц1онально1 активност1 л1мфоцит1в I нейтрофтьних лейкоцит1в, волод1е системною д1ею для приведення у в1дпов1дн1сть запаленню метабол1зм I регуляц1ю, насамперед, 1мунного захисту. Доведено, що у ф1зюлопчних умовах I_-1 - а здатний п1двищувати активнють
ТИ1 - кл1тин-хелпер1в, визначаючи г1перреактивн1сть 1мунно1 вщповд [2].
Разом з тим, вивчення концентрацм ун1вер-сального прозапального цитоюну I_-1 - а встано-вило п1двищений його р1вень в сироватц1 кров1 до-рослих курц1в в пор1внянн1 з тими, хто не палить [1]. Мипои (1990) визначив, що !_-1а знаходився у великих концентрац1ях у молозив1. В1дносно вм1сту в молозив1 та молоц1 ж1нки-курця циток1ну !_-1-а та його впливу на 1мун1тет немовля при пал1нн1 матер1 немае однозначно! вщповд [3,5].
Таким чином, 1мунотоксичнють тютюнового диму не викликае сумыву, однак вплив табакопал1нння матер1в-годувальниць на 1мунолог1чн1 реакцИ малю-к1в вивчен1 недостатньо.
Мета досл1дження - вивчення 1мунолопчних зм1н у дггей матер1в-курц1в.
Об'ект I методи дослщження. П1д наглядом перебувало 47 д1тей в1ком в1д 8 до 12 мю., як1 пере-бували на лкуваны з приводу гострих респ1раторних 1нфекц1й у в1дд1ленн1 раннього в1ку мюько! багатопрофтьно! дитячо! л1карн1 № 5 м. Запор1жжя (головний лкар - Е. I. Токар) за перюд з 01.2013 по 05.2014. Ми пор1вняли показники 1мунограм 1-го р1вня д1тей, матер1 яких палили, роздтивши !х на 2 групи. Д1ти дослщно! групи (група № 1) отримували молоко матер1 (п = 24), дгги групи пор1вняння (група № 2) перебували на штучному вигодовуванн (п = 23). Групи дггей не розр1знялись за вком - середн1й в1к пац1ент1в в основн1й груп1 складав 9,9 ± 0,6 м1с., у груп1 пор1вняння - 9,7 ± 0,7 мю (р > 0,05). Критерм виключення 1з досл1дження - наявнють первинних 1мунодеф1цитних стан1в. Вс1м д1тям в пер1од1 ранньо! реконвалесценцИ доогмджували стан 1мунно! систе-ми методом прямого розеткоутворення з еритро-цитами, вкритими моноклональними антит1лами до СйЗ, Сй4, Сй8, Сй16, Сй19, Сй25 (виробництво В1тебського медичного ун1верситету, м. Вгтебськ, Б1лорусь); визначали тест вщновлення н1тросинього тетразол1я («НСТ-тест спонтанний»), проводили роз-рахунок фагоцитарного числа, Ыдекс завершеност1 фагоцитозу, визначали р1вень 1дА, 1дО, 1дМ в плазм1 кров1 методом рад1ально! 1мунодифузИ в агар1 по Мапо1п1 А. е1 а1. (1965) на баз1 м1сько! 1мунолопчно1 лабораторИ дитячо! кл1н1чно! л1карн1 № 1 (головний лкар - В. I. ЛПхачова).
Пор1внювали концентрац1! уыверсального прозапального циток1ну I_-1 - а в молоц1 120 ж1нок-годувальниць, роздтивши !х на дв1 групи: перша група об'еднувала ж1нок-курц1в I ж1нок - пасивних
Таблиця 1
Порiвняння показнимв фагоцитарноГ ланки iMyHiTeTy
Показник Референты значення Група 1 (n = 24) Група 2 (n = 23)
Me |25 % - 75 %| Me |25 % - 75 %|
Фагоцитарний шдекс 60-80 74,00 |66,50-85,00| 76,00 |65,00-78,00|
Фагоцитарне число 5-10 6,00 |4,00-6,00| 5,00 |5,00-5,00|
1ндекс заюнченост фагоцитозу Бтьше1 1,20 |1,10-1,20| 1,20 |1,10-1,20|
НСТ-тест спонтанний 12-26 15,50 |11,00-32,00|* 21,00 |14,00-32,00|*
1ндекс НСТ-теста спонт. 0,2-1,1 0,35 |0,25-0,65| 0,50|0,30-0,60|
Примггка: *р < 0,05. Таблиця 2 Показники кттинно'Г ланки iMyHiTeTy
Показник Референты значення Група 1(n = 24) Група 2(n = 23)
Me |25 % - 75 %| Me |25 % - 75 %|
Лейкоцити, абс. 5,8-8,0 7,60* |6,65-10,10| 9,00* |7,90-11,80|
Лiмфоцити,вiдноcнi 39-59 58,50 |51,00-73,50| 60,00 |52,00-69,00|
лiмфоцити, абс. 2,26-4,72 4,37 |3,78-6,28| 5,44 |4,66-6,49|
СД3 + , % 62-69 62,00 |60,00-64,50| 63,00 |59,00-66,00|
СД3 + , абс. 1,4-3,30 2,71* |2,38-3,50| 2,89* |2,91-4,03|
СД4+, % 30-40 38,00 |35,50-41,00| 39,00 |35,00-44,00|
СД4+, абс. 0,7-1,9 1,69 |1,49-2,16| 1,96 |1,69-2. 77|
СД8+, % 25-32 26,50 |23,00-28,00| 27,00 |25,00-28,00|
СД8+, абс. 0,60-1,50 1,18* |0,97-1,51| 1,52* |1,37-1,70|
СД4/СД8 1,2-1,3 1,40 |1,30-1,60| 1,50 |1,20 - 1,60|
СД19+, % 21-28 28,00* |25,00-29,00| 29,00* |26,00-34,00|
СД19+, абс. 0,50-1,30 1,12* |0,93-1,46| 1,55* |1,36-2,12|
СД16+, % 8-15 22,50 |19,00-26,00| 23,00 |20,00-29,00|
СД16+, абс. 0,18-0,70 0,99* |0,70-1,25| 1,45* |1,29-1,80|
СД25+, % 8-12 22,00 |18,00-26,00| 27,00 |22,00-29,00|
СД25+, абс. 0,18-0,56 1,07* |0,84-1,35| 1,46* |1,12-1,78|
СД95+, % 10-45 26,50*|24,00-28,50| 30,00*|26,00-33,00|
СД95+, абс. 0,23-2,13 1,21* |0,91-1,17| 1,54* |1,31-2,08|
Примiткa: *р < 0,05.
кур^в (n = 46), до друго! групи увiйшли жiнки, якi не палять caMi i в родинах яких не палять (n = 74). Bei жЫки на момент обстеження вважали себе здоро-вими. Термш лaктaцiI складав вiд 3-х до 12 мюя^в.
Жiнкaми - курцями вважали тих, що палять понад 5 цигарок щоденно протягом щонайменше 5 рокiв. Молоко збирали ранком через 1 годину пюля палЫня цигарки.
IL-1-а визначали методом iмуноферментного анализу за допомогою пол^ональних aнтитiл, cпецифiчних до IL-1 - а iмуноферментним набором Кат. № BMS243/2 HumanIL-1 alpha Platinum ELISA Bender Med System.
Для статистично! оброб-ки використовували програму «^аИвИоа - 2006» (31а13оШпо., № АХХР7120833214РАЫ5). ОцЫки показникiв проводили описовим методом (медiана (Ме), межi квартель-ых вiдрiзкiв |25 % -75 %|); порiвняння двох незалежних груп проводили за допомогою и критерiю Манна-Уiтнi, достовiрнiсть вважали наявною при р < 0,05.
Результати дослщжень та 'Гх обговорення. Визначення рiвня прозапального 11_-1-а в молоцi жшок-кур^в i жiнок-пасивних курцiв статистично достовiрно (и = 1357,5, Z = 1,96, р < 0,05) подтвердило факт збiльшення його синтезу у порiвняннi з вмiстом в молоц матерiв, якi не палять. За результатами доотдження рiвень I_-1 - а в жiночому молоцi мaтерiв першо! групи склав 0,31 |0,21-0,49| (пг/мл), у мaтерiв друго! групи - 0,21|0,00 - 049| (пг/мл).
Отже, вiдпрaцьовуючи гiпотезу про можливе збiльшене «стимулю-вання» iмунноI вщпов^д завдяки про-запальному I_-1 - а, який мютиться у жiночому молоц мaтерiв-курцiв годувальниць, на наступному етап дослiдження aнaлiзувaли iмунну вiдповiдь дтей пасивних курцiв, яким збережене природне вигодовування, в перiодi ранньо! реконвалесценци пiсля перенесеного гострого ре-страторного захворювання за умов вiдсутностi Ыфекта.
Визначили, що система приро-джено! резистентностi характеризу-валась статистично достовiрним пе-ревищуванням верхньо! межi норми ктькост лейкоцитiв у дiтей групи № 2, ыж у дтей групи № 1, однако-вим рiвнем поглинально! aктивностi фaгоцитiв в обох групах пащетчв та бтыш активними метaболiчними про-цесами (НСТ-тест), як вiдбувaлись
всерединi фагоцитуючих клмтин, у групi порiвняння - малююв, якi не отримували материнського молока (табл. 1).
У дтей групи порiвняння виявлена пiдвищенa кiлькiсть лiмфоцитiв, якi експресують рецепто-ри готовност до апоптозу (стану, що передуе за-прогрaмовaнiй зaгибелi iмуноцитiв): рiвень СД95+ був достовiрно вищим як в абсолютна кiлькостi (21,43 %), так i у вiдноснiй (11,67 % ) в порiвняннi з групою № 1 (табл. 2), що, враховуючи перiод ранньо! реконвалесценци дтей, не виключае один з мехaнiзмiв виникнення вторинних iмунодефiцитних стаыв.
Таблиця 3
Показники гуморально'Г ланки ÏMyHÏTeTy
Показник Референты зна-чення Група 1 (n = 24) Група 2(n = 23)
Me 125 % - 75 %| Me 125 % - 75 %|
Сиpовaтковi gG, мг/мл 5,90-8,30 5,91 |5,10-7,07| 7,30 |5,10-8,76|
Сиpовaтковi IgA, мг/мл 0,60-1,00 0,55 |0,41-0,57| 0,55 |0,41-0,72|
Сиpовaтковi IgM, мг/мл 0,60-1,00 1,27 |1,18-1,68| 1,27 |1,10-1,89|
Серед пов'язаних закономiрностей визначили пiдвищення за норму показника iMyHoperyr^TopHora iндексу (табл. 2), що е спiввiдношенням pîbhîb CD4+ до CD8+ Т-лiмфоцитiв. PiBeHb цього показника у nep^i реконвалесценцп був вище референт-них значень, незважаючи на пiдвищeння за верх-ню межу норми абсолютно'! юлькост CD8+ Т-клiтин (кiлepiв), та виявився на 22,37 % ви1^м у малююв групи поpiвняння, ыж у пацiентiв гpупi спостережен-ня (р < 0,05), що може свщчити про неадекватнють iмунноï вщповд у дiтeй групи № 2.
Гуморальна ланка iмунiтeту, яка е переважаючою при бактepiальних iнфeкцiях iз позаклiтинним пере-буванням патогену, у дтей групи № 2 характеризу-валась достовipно збiльшeною вiдносною i абсолютною (на 27,74 %) юльюстю CD19+ як у поpiвняннi з дiтьми основно'1 групи, так i з показниками рефе-рентних значень.
Одночасне збтышення CD19+ та абсолютно'! ктькост (на 13,78 %) CD4+ Т^мфоци^в вiдобpажае Т-залежний процес синтезу антитт. Змiни концeнтpацiй сироваткових iмуноглобулiнiв Ig A, IgM в обох групах не мали статистично значимих
pозбiжностeй. Загальн тенденцп до збiльшeння вмiсту IgM та дефщиту IgA, вipогiднiшe, вщображали прояви вiкових особливостей. Вщносно концентрацп сироваткового IgG у малююв групи № 2 спостepiгали тен-дeнцiю до ÏÏ збiльшeння (на 23,51 %) поpiвняно з показниками пащетчв групи № 1 (табл. 3).
Висновки.
1. Визначений статистично достовipний (р < 0,05) вищий piвeнь прозапального IL-1 - а в молоц мaтepiв-куpцiв - 0,31 |0,21-0,49| (пг/мл).
2. Встановили пiдвищeний прозапальний потен^ал iмунноï peaктивностi (за рахунок збть-шення piвня лeйкоцитiв, НСТ-теста, iмуноpeгуля-торного iндeксу, Т лiмфоцитiв: CD8+, CD19+, CD25+, сироваткових IgG) (р < 0,05) в пepiодi ранньо'| реконвалесценцп за умов пасивного палшня дiтeй, якi знаходились на штучному вигодовуваны, поpiвняно з дггьми пасивними курцями, що вигодо-вувались природньо.
3. Природне вигодовування, незважаючи на пщ-вищений piвeнь прозапального IL-1-а в молоцi ма-тepiв-куpцiв, дозволяе зменшити напругу пперре-активно'! iмунноï вiдповiдi у дiтeй, яю знаходяться в умовах пасивного палшня.
Перспективи подальших досл1джень. Отри-манн результати спонукають до вивчення мехаыз-мiв зменшення пперреактивно! iмунноï вщпов^д при природньому вигодовувaннi у дтей, якi зростають в умовах пасивного палшня, та можуть використову-ватись для профтактики пaлiння у жшок.
^iTepaTypa
1. Fernando M. Botelho. IL-1a/IL-1R1 Expression in Chronic Obstructive Pulmonary Disease and Mechanistic Relevance to Smoke-Induced / Fernando M. Botelho, Carla M. T. Bauer, Donna Finch [et al.] // Neutrophilia in Mice Published. - 2011. -DOI: 10. 1371/journal. pone. 0028457.
2. Sims John E. The IL-1 family: regulators of immunity Nature Reviews // Sims John E., Smith Dirk E. // Immunology. - 2010. - Vol. 10. - P. 89-102.
3. Szlagatys-Sidorkiewicz A. The Cytokine Profile of Mature Milk from Smoking and Non-smoking Mothers / A. Szlagatys-Sidorkiewicz, E. Wos, E. Aleksandrowicz [et al.] // Journal of pediatric gastroenterology and nutrition. - 2012. - Vol. 10. -P. 2-18.
4. Weiser T. M. Association of maternal smoking status with breastfeeding practices / T. M. Weiser, M. Lin, V. Garikapaty [et al.] // Pediatrics. - 2009. - Vol. 124, № 6. - P. 1603-1610.
5. Zanardo V. Effect of maternal smoking on breast milk interleukin-1alpha, beta-endorphin, and leptin concentrations and leptin concentrations. / V. Zanardo, S. Nicolussi, S. Cavallin // Environ Health Perspect. - 2005. - Vol. 113, № 10. - P. 14101413.
УДК 616-097-053. 2: 613. 64-055. 26
ОСОБЛИВОСТ iМУHHИX РЕАКЦМ Д^ЕЙ ПРИ ПРИРОДНЬОМУ ВИГОДОВУВАШ МАТЕРЯМИ, ЩО ПАЛЯТЬ
Боярская Л. Н., ГераЫмчук Т. С., Котлова Ю. В.
Резюме. Залишаеться вщкритим питання про рацюнальнють годування грудним молоком жшками, яю курять. Мета роботи - вивчення 1мунолопчних зм1н у д1тей матер1в-курц1в при природному I штучному вигодовуваны на пщстав1 анал1зу 1мунолопчних дослщжень у 47 немовлят I визначены рол1 прозапального 1_-1-а в молоц1 120 матер1в при палшнк Встановили 1мунний дисбаланс 1з збтьшенням показниюв вроджено! I специф1чно! 1мунно! в1дпов1д1, яю були б1льш значними у д1тей-пасивних курц1в при штучному вигодовуванн1.
Незважаючи на прозапальних ефект IL-1-a материнського молока у MaTepiB-Kyp^B, воно мае протективну дiю на iмyннy вiдповiдь малююв i дозволяе зменшити у них напругу гiпeppeaктивностi iмyнноI вiдповiдi в умо-вах пасивного кypiння.
Kлючовi слова дiти, iмyнiтeт, пасивне кypiння, природне вигодовування.
УДК 616-097-053. 2:613. 64-055. 26
ОСОБЕННОСТИ ИММУННЫХ РЕАКЦИЙ ДЕТЕЙ, КОТОРЫЕ ВСКАРМЛИВАЮТСЯ КУРЯЩИМИ МАТЕРЯМИ
Боярская Л. Н., Герасимчук Т. С., Котлова Ю. В.
Резюме. Остается открытым вопрос о рациональности кормления грудным молоком женщинами, которые курят. Цель работы - изучение иммунологических изменений у детей матерей-курильщиц при естественном и искусственном вскармливании на основании анализа иммунологических исследований у 47 младенцев и определении роли провоспалительного IL-1-а в молоке 120 матерей при курении. Установили иммунный дисбаланс с увеличением показателей врожденного и специфического иммунного ответа, которые были более значительными у детей-пассивных курильщиков при искусственном вскармливании. Несмотря на провоспалительных эффект IL-1-а материнского молока у матерей курильщиц, оно имеет про-тективное действие на иммунный ответ малышей и позволяет уменшить у них напряжение гиперреактивного иммунного ответа в условиях пассивного курения.
Ключевые слова: дети, иммунитет, пассивное курение, естественное вскармливание.
UDC 616-097-053. 2:613. 64-055. 26
Immunoreaction Features of Children, Feeded by Mothers-smokers
Boyarskaya L. N., Herasimchuk T. S., Kotlova Yu. V.
Abstract. Introduction. Breastfeeding of babies with mothers-smokers leaves many controversial questions. Macrophages of human milk produce whole range of interleukins (IL) which has a high potential impact on the immune system. IL-1-а has a distinct immunostimulatory effect, that causes the immune defense system with a level of inflammation. Under physiological conditions, IL-1-а is able to detect hyperreactivity immune response. The increasing proinflammatory cytokine IL-1-а in serum of adult smokers. There is no clear answer to the content in colostrum and milk of women smokers cytokine IL-1-а and its impact on infant immune smoking mothers.
The aim - to study the immunological changes in children of mothers-smokers.
Object and methods. Tested the hypothesis of a possible increased «stimulate» the immune response with proinflammatory IL-1-а, which is contained in human milk of mothers nursing-smokers. Compared concentrations of IL-1-а in the milk of 120 lactating women: the first group comprised women smokers and women - passive smokers (n = 46), the second group included women who do not smoke themselves and the families that do not smoke (n = 74).
Mathers- smokers considered smokers more than 5 cigarettes daily for at least 5 years. Milk was collected in the morning 1 hour after smoking cigarettes. IL-1-а were determined by ELISA analysis using polyclonal antibodies to IL-1-а ELISA set Cat. Number VMS243 / 2 HumanIL-1 alpha Platinum ELISA Bender Med System. The next phase of the study was analyzing the immune responses of passive smokers who saved breastfeeding in the early period of convalescence after acute respiratory illness. We studied the immunological 1-st level 47 children aged 8 to 12 monthes babies whose mothers were smoked. Children experimental group (group № 1) receiving mother's milk (n = 24), children of the comparison group (group № 2) were bottle-fed (n = 23). The criterion of exclusion from the study - the availability of primary immunodeficiencies. For statistical treatment used the program «Statistica -2006» (StatSoftInc., № AXXR712D833214FAN5). Evaluation of conducted descriptive method (median (Me), limits quaterly segments | 25 % -75 % |); comparing two independent groups was performed using U-criterion MannWhitney, reliability considered available at p < 0.05. Designated statistically significant (p < 0.05) higher levels of proinflammatory IL-1-а in the milk of mothers smokers - 0,31 | 0,21-0,49 | (pg / ml).
Installed increased proinflammatory potential of immune reactivity (by increasing the level of white blood cells, NBT-test, immunoregulatory index, T lymphocytes: CD8 +, CD19 +, CD25 +, serum IgG) (p < 0.05) during early convalescence under conditions of passive smoking children were bottle-fed compared with children passive smokers that vyhodovuvalys naturally. Breastfeeding, despite elevated levels of proinflammatory IL-1-а in the milk of mothers smokers can reduce stress hyperreactive immune response from children that are living in conditions of passive smoking.
Keywords: children, immunity, passive smoking, breast-feeding.
Рецензент - проф. Траверсе Г. М.
Стаття надшшла 19. 12. 2014 р.
