CC BY
31
®
ребёнка
КлУчна пед1атр1я / Clinical Pediatrics
УДК 616.233-002.1-036-053.4 АБАТУРОВ O.e., РУСАКОВА О.О.
A3 «Анпропетровська медична академм МОЗ Укра!ни»
ОСОБЛИВОСП ЗАПАЛЬНОГО ПРОЦЕСУ У ДПЕЙ РАННЬОГО BiKy З Р1ЗНИМИ ФОРМАМИ ГОСТРИХ БРОНХПВ
Резюме. У cmammi показано особлuвосmi деяких молекулярних MexamsMie запального процесу у дтей раннього вшу залежно вгд клжчно'1 форми гострого бронхту.
Ключовi слова: dimu раннього вжу, гострий бронхт, у-ттерферон, ттерлейкти, IgE, фактор тран-скрипцП NF-kB.
Гострi бронхгти займають провщне мюце в но-золопчнш структурi гострих шфекцшно-запальних захворювань нижик дихальних шлях1в у дггей про-тягом останнiх десятилиъ [3, 7]. На сьогоднi гострий бронхи" е достатньо частою причиною госпи^зацп дiтей перших трьох роюв життя, що обумовлено особливостями переб^ захворювання на сучас-ному етат, а саме тяжким та затяжним перебiгом, частим (у 20—25 % випадюв) розвитком синдрому бронхiальноI обструкцп [6, 7]. Незважаючи на досягнул успiхи педiатричноI науки, юнують об'ективнi труднощi при виборi ращонально! фармакотерапи гострих бронхiтiв у дггей раннього вiку у зв'язку з недостатшм вивченням механiзмiв розвитку запа-лення при рiзних клiнiчних формах захворювання.
Мета: дослщити особливостi деяких молекулярних механiзмiв запального процесу у дней раннього вiку залежно вщ клшчно! форми гострого бронхиу.
Матер1али та методи
Пщ нашим спостереженням знаходилось 60 да-тей вжом вщ 6 мiсяцiв до 3 роюв з гострим бронхь том, якi перебували на стащонарному лiкуваннi в умовах iнфекцiйного вщдшення № 3 КЗ «Дншро-петровська МДКЛ № 1» ДОР. Верифiкацiя дiагно-зу та надання медично! допомоги були стандарти-зованими вщповщно до наказу № 18 МОЗ Укра!ни (2005 р.). На пiдставi клiнiко-анамнестичних даних, загально-клiнiчних та рентгенолопчних дослiджень у 40 пацiентiв дiагностовано гострий обструктив-ний бронхiт (ГОБ) з проявами дихально! недостат-носп 1—11 ст. (перша група спостереження). Другу групу спостереження становили 20 дней з гострим простим бронхггом (ГПБ). За вiком, статтю та обся-гом проведених дослiджень групи обстежених дiтей були порiвнянними.
3a6ip KpoBi для iмунологiчного та молекулярно-генетичного обстежень проводили за наявносп ш-формовано! згоди з боку батьюв чи опiкунiв обстежених дггей. Дослiдження проводились вiдповiдно до основних положень GCP ICH i Гельсшсько! де-кларацй, повнютю вщповщали бiоетичним вимогам.
Визначення концентраций загального IgE у сиро-ватцi кров1 проводилось методом електрохемшюмь несцентного iмуноаналiзу ECLIA з використанням набору реактивiв «Elecsys IgE» REF 04827031 190 (Roche Diagnostics). Умют Y-iнтерферону (IFN-y), iнтерлейкiну-4 (IL-4) та -13 (IL-13) у сироватцi кровГ визначали з використанням вщповщних монокло-нальних антитш тест-систем Human IFN-y Platinum ELISA BMS228 (eBioscience), «А-8754 ИЛ-4-ИФА-БЕСТ» (ЗАТ «ВЕКТОР-БЕСТ», Рося) та Human IL-13 Platinum ELISA BMS231/3 (eBioscience) за допомогою твердофазного «сендвiч»-варiанта ¡му-ноферментного аналiзу. Молекулярно-генетичнi дослiдження включали в себе визначення р1вня екс-преси транскрипцiйного фактора NF-kB у л1мфоци-тах перифершно! кровГ методом проточно! цитоме-три [2]. Зпдно з поставленою метою вс дослщження проводили двГчГ — на початку захворювання та в пе-рюд1 реконвалесценци.
1мунолопчш дослiдження проводились у серти-фiкованiй центральнiй науково-дослiдницькiй лабораторий ДЗ «Днiпропетровська медична академiя МОЗ Украши», молекулярно-генетичнi — на базi
Адреса для листування з авторами: Русакова О.О.
E-mail: [email protected]
© Абатуров О.6., Русакова О.О., 2014 © «Здоров'я дитини», 2014 © Заславський О.Ю., 2014
KëiHi4Ha neAiorpifl / Clinical Pediatrics
НД1 генетичних та iмунологiчних основ розвитку патологИ та фармакогенетики ВДНЗУ «УМСА», м. Полтава.
Математична обробка результата дослiдження проводилась з використанням статистичних про-грам Statgraf, Matstat, Microsoft Excel для Windows, ощнка значущост1 вiдмiнностей показникiв — за до-помогою пара- та непараметричних методiв статистики. Для виявлення взаемозв'язюв мiж визначува-ними показниками застосовувався кореляцшний аналiз Спiрмена [4].
Результата Аосодження та ïx обговорення
Результата дослщжень дiтей обох груп спостере-ження в динамiцi перебiгу ГОБ та ГПБ узагальнеш на рис. 1.
За даними нашого дослщження, гострий перiод захворювання у дгтей першо'г групи спостережен-ня характеризувався вiрогiдно низькими рiвнями IFN-y у сироватщ кровi порiвняно з показниками дггей друго'г групи спостереження (1,12 ± 0,45 пг/мл у дггей з ГОБ проти з 1,92 ± 1,03 пг/мл у дггей 1з ГПБ; р < 0,05), характер змш яких зберпався до перюду реконвалесценщ'г (0,79 ± 0,36 пг/мл у дггей з ГОБ проти 3,43 ± 1,79 пг/мл у дггей 1з ГПБ; р < 0,05). У динам1ц1 переб1гу захворювання у д1тей першо'г та друго'г груп спостереження середн1 показники вм1с-ту шших циток1н1в у сироватщ кров1 в1рог1дно не змшювались. Отриман1 нами результати дозволя-ють стверджувати, що у д1тей раннього в1ку з ГОБ мало м1сце значне зниження продукций IFN-y як у гострому, так i в перюд1 реконвалесценщ'г захворювання, що може св1дчити про неспроможн1сть Tht-асоцшовано'г в1дпов1д1 у цих дггей [5, 9, 10].
60 % дггей, хворих на ГПБ (половина з них — дгти до року), та 54,5 % дггей з ГОБ (серед них бгля трети-ни дггей першого року життя) на початку захворювання мали вищу за в1кову концентращю основного
1001 9080706050403020100-
Гострий перюд Перiод Гострий перiод Перiод реконвалесценцп реконвалесценцп Д1ти з ГОБ Д1ти з ГПБ
□ IFN-y, пг/мл ■ IgE, МО/мл ■ IL-4, пг/мл ■ Лiмфоцити, що еспресують NF-кВ, % □ IL-13, пг/мл ■ NF-кВ, Од
Рисунок 1. Результати '¡мунолопчних та молеку-лярно-генетичних дослщжень дтей раннього в'1ку з р1зними кл1н1чними формами гострого бронх'¡ту в динамц перебгу захворювання
маркера алерпчного запалення 1§Б у сироватщ кро-в^ а в перiодi реконвалесценцп питома вага таких дь тей становила вщповщно 50 та 31,6 % (кожна друга дитина — першого року життя). Отримат нами результати можна пояснити вжовими фiзiологiчними особливостями iмунiтету у дггей раннього вжу, що визначають ютотне пiдвищення 'гх чутливостi як до шфекцшних факторiв середовища, так i до експози-ц1г алергенiв [9, 10].
Аналiз стану гуморально'г вщповщ у дiтей раннього вжу з iнфекцiйним ураженням бронхiально-го дерева показав, що незалежно вщ фази розви-нення гострого бронхиу середне значения вмiсту 1§Б у дггей раннього вжу з ГОБ було вiрогiдно ви-щим, нгж у дiтей з ГПБ (р < 0,05): на початку захворювання 96,0 ± 27,5 МО/мл (у дггей першого року життя — 36,4 ± 13,6 МО/мл, у дггей старше року — 130,1 ± 35,5 МО/мл) проти 50,5 ± 18,6 МО/мл (у дггей першого року життя — 22,0 ± 6,2 МО/мл, у дггей старше року — 69,4 ± 31,1 МО/мл) та 79,0 ± 28,1 МО/мл (у дггей першого року життя — 49,2 ± 23,3 МО/мл, у дггей старше року — 96,4 ± 40,4 МО/мл) проти 45,6 ± 17,7 МО/мл (у да-тей першого року життя — 15,5 ± 4,7 МО/мл, у дггей старше року — 65,7 ± 26,4 МО/мл) в перiодi реконвалесценцп. Порiвняльний аналiз змш середнього вмюту сироваткового 1§Б у вах обстежених дггей першо'г групи спостереження на початку та в перiодi реконвалесценцп ГОБ показав вщсутнють вiрогiд-них змш, що ствпадае з динамжою концентрацп 1§Б у дггей з ГПБ (р > 0,05; рис. 1).
1муногенетичт дослщження у дггей раннього вжу з рiзними формами гострих бронхiтiв показали, що вщносна кiлькiсть лiмфоцитiв, що експресують фактор транскрипци МБ-кВ, та рiвень експресп МБ-кВ не залежали вщ клшчно'г форми гострого бронхиу. Це, можливо, свiдчить про подiбнiсть мо-лекулярно-генетичних характеристик запального процесу при iнфекцiйному уражент бронхiального дерева, що збiгаеться з даними шших дослiдникiв [1, 11]. Вщсутнють динамiки молекулярно-генетичних показникiв залежно вiд перiоду розвинення рiзних клшчних форм гострого бронхiту, на наш погляд, може свiдчити про наявшсть субклшчно'г активнос-тi цих механiзмiв у дiтей раннього вiку.
Для ощнки та характеристики активностi запального процесу у дггей раннього вжу з гострими бронхггами нами окремо були побудоват кореля-щйт дерева iмунологiчних та молекулярно-гене-тичних показникiв запалення в динамiцi ГПБ та ГОБ (рис. 2-4).
Так, за нашими даними, у гострому перiодi ГПБ рiвень експресп транскрипцшного фактора МБ-кВ визначав концентрацiю 1§Б у сироватцi кровi (г = +0,58; р < 0,05), що свщчить про наявнiсть алерпчного механiзму розвитку запалення, яке конт-ролювалося сильним оберненим зв'язком МБ-кВ з умiстом протизапального 1Б-13 (г = -0,52; р < 0,05), що i знижувало в цглому активнiсть запального процесу (рис. 2).
КлШчна пед1атр1я / Clinicаl Pediatrics
При ГОБ (рис. 3) рiвень експресп транскрипцш-ного фактора МБ-кВ визначав рiвень вмiсту проза-пального цитокшу 1К№-у (г = +0,40; р < 0,05) та кон-центращю 1§Б у сироватцi кровi (г = +0,59; р < 0,05), що у сукупностi i формувало актившсть запально! реакцГi, характер яко! мав алергiчну спрямованiсть, що пщкршлювалося виявленими кореляцiйними взаемозв'язками концентраци 1§Б та вмiсту 1Б-4 у сироватщ кровi (г = +0,32; р < 0,05), жорсткiсть зв'язкiв м1ж якими пiдсилювалась досить сильною корелящею м1ж умiстом 1Б-4 та 1К№-у (г = +0,42; р < 0,05).
Наявнiсть обернено-пропорцiйного зв'язку м1ж концентрацiею протизапального 1Б-13 та рiвнем ак-тивностi МБ-кВ (г = —0,33; р < 0,05), а також умю-ту 1К№-у (г = —0,36; р < 0,05) пояснюеться тим, що 1Б-13 е одним з основних факторiв, що iнгiбують активнiсть МБ-кВ [1, 8].
Таким чином, у дней з ГПБ, на вщмшу вiд дiтей з ГОБ, на початку захворювання кiлькiсть залучених у корелящйш вiдносини параметрiв була меншою, внутрiшнi зв'язки м1ж вивченими параметрами не визначались.
Перюд реконвалесценцп гострого простого бронхиу характеризувався вiдсутнiстю кореляцш-них зв'язкв м1ж дослiджуваними показниками, але рееструвались зв'язки з клiнiко-анамнестичними характеристиками обстежених дггей, що наведено вище.
( ЫР-кБ ]
(+0,58) / \(-0,52) 11_-13 )
Рисунок 2. Кореляц1йне дерево основних маркер'т запалення на початку захворювання удтей раннього в1ку з гострим простим бронхтом
У дней з ГОБ у перiодi реконвалесценцп структура взаемовщносин визначуваних параметрiв змь нювалась (рис. 4) за рахунок зникнення зв'язкiв м1ж рiвнем експресп транскрипцшного фактора МБ-кВ та вмютом 1К№-у у сироватцi кровi, а також м1ж кон-центрац1ями 1К№-у та 1Б-13.
Крiм того, пiдсилювалась обернена залеж-нiсть м1ж рiвнем експресп МБ-кВ та вмiстом 1Б-13 та з'являвся зв'язок м1ж концентрац1ями Th2-асоцiйованих iнтерлейкiнiв-4 та -13 (г = +0,40; р < 0,05).
Таким чином, можна сказати, що у дней раннього в^, незалежно вiд клжчно! форми гострого бронхиу, на початку захворювання мае мюце алерпчний компонент запалення, який контро-люеться протизапальними мехашзмами при простому бронхiтi та тдкршлюеться розвитком активного запального процесу з формуванням Т^-асоцшовано! вiдповiдi при обструктивному бронхт. Перiод реконвалесценцп ГПБ характеризуемся вiдсутнiстю взаемовiдносин мiж основни-ми маркерами запалення, тодi як при ГОБ змшю-еться !х структура.
Висновки
1. Бшьшють дiтей перших трьох рокiв життя, хворих на гострi бронхiти, мають вищу за вiкову концентрацiю 1§Б у сироватцi кровi, при цьому се-редне значення вмiсту 1§Б, незалежно вiд фази роз-винення захворювання, вiрогiдно вище у пащенпв iз ГОБ, н1ж у дней з ГПБ.
2. Порiвняно з ГОБ гострий перiод простого бронхiту у дней раннього в^ характеризуеться меншою кшьюстю залучених у кореляцiйнi вщно-сини маркерiв запалення та вщсутшстю внутрiшнiх зв'язкiв м1ж ними.
3. У дней перших трьох роюв життя на початку ГОБ визначаеться розвиток активного запального процесу з формуванням Т^-асоцшовано! вщпо-вiдi.
4. Перюд реконвалесценцп гострого обструктив-ного бронхиу характеризуеться посиленням шп-бування транскрипцiйного фактора МБ-кВ та роз-
Рисунок 3. Кореляц1йне дерево основних маркер 'т запалення на початку захворювання у д 'ией з гострим обструктивним бронхтом
Рисунок 4. Кореляц1йне дерево основних маркер 'т запалення в перюд1 реконвалесценцп гострого обструктивного бронх'¡ту
KAiHiHHa пед1атр1я / Clinical Pediatrics
ривом його зв'язку з прозапальним IFN-y, гострого простого бронхтгу — вщсутшстю взаемов1дносин м1ж основними маркерами запалення.
Список л1тератури
1. Абатуров А.Е., Волосовец А.П., Юлиш Е.И. Индукция молекулярных механизмов неспецифической защиты респираторного тракта. — К.: Приватна друкарня ФОП Сторожук О.В., 2012. — 240 с.
2. Абатуров 0.6. Молекулярт особливостi розвитку запалення слизовог оболонки шлунку у дтей з хелжобактер-ною тфекцкю, асоцшованою з CagA (+) штамами H.pylori / 0.6. Абатуров, О.М. Герасименко // Гастроентерологы. — 2014. — № 1. — С. 13-17.
3. Антипкин Ю.Г. Рецидивирующий бронхит у детей: дискуссионные вопросы / Ю.Г. Антипкин, В.Ф. Лапшин // Здоровье Украины. — 2008. — № 18(1). — С. 19-21.
4. Антомонов М.Ю. Математическая обработка и анализ медико-биологических данных [Текст]/М.Ю. Антомонов. — К. : Фiрма малого друку, 2006. — 558 с.
5. Белан Ю.Б. Возможности ранней иммунокоррекции брон-хообструктивных состояний у детей с отягощенным аллерголо-
гическим анамнезом / Ю.Б. Белан, М.В. Старикович, Л.А. Безрукова //Лечащий врач. — 2011. — № 6. — С. 12-15.
6. Германова О.Н. Обструктивные бронхиты у детей с инфекциями респираторного тракта / О.Н. Германова // Педиатрическая фармакология. — 2010. — Т. 7, № 2. — С. 106.
7. Смiян 0.1. 0собливостi клтчного перебгу гострого об-структивного бронхту в дтей раннього вгку / 0.1. Смын, В.А. Плахута // Проблеми безперервног медичног освти та науки. — 2014. — № 2. — С. 38-41.
8. Fan J. Transcriptional mechanisms ofacute lung injury [Text]/ J. Fan, R..D. Ye, A.B. Malik // Am. J. Physiol. Lung Cell Mol. Physiol. — 2001. — V. 281, Issue 5. — P. L1037-L1050.
9. Martin J.G. Immune reponses to viral infections: relevance for asthma / J.G. Martin, S. Siddiqui, M. Hassan // Pediatric. Respir. Rev. — 2006. — V. 7, Suppl. 1. — P. S125-S127.
10. Tregoning J.S. Respiratory Viral Infections in Infants: Causes, Clinical Symptoms, Virology, and Immunology / J.S. Tregoning, J. Schwarze// Clin. Microbiol. Rev. — 2010. — V. 23, № 1. — P. 74-98.
11. Wullaert A. NF-kB in the regulation of epithelial homeostasis and inflammation/A. Wullaert, M.C. Bonnet, M. Pasparakis// Cell. Res. — 2011. — V. 21, № 1. — P. 146-158.
Отримано 14.09.14 ■
Абатуров А.Е., Русакова Е.А. ГУ «Днепропетровская медицинская академия МЗ Украины»
ОСОБЕННОСТИ ВОСПАЛИТЕЛЬНОГО ПРОЦЕССА У ДЕТЕЙ РАННЕГО ВОЗРАСТА С РАЗНЫМИ ФОРМАМИ ОСТРЫХ БРОНХИТОВ
Резюме. В статье показаны особенности некоторых молекулярных механизмов воспалительного процесса у детей раннего возраста в зависимости от клинической формы острого бронхита.
Ключевые слова: дети раннего возраста, острый бронхит, у-интерферон, интерлейкины, ]&Е, фактор транскрипции МБ-кВ.
AbaturovA.Ye., Rusakova Ye.A.
SI «Dnipropetrovsk State Medical Academy of Ministry
of Health of Ukraine», Ukraine
FEATURES OF INFLAMMATORY PROCESS IN INFANTS WITH DIFFERENT FORMS OF ACUTE BRONCHITIS
Summary. The article describes features of some molecular mechanisms of inflammatory process in infants depending on the clinical form of acute bronchitis.
Key words: infants, acute bronchitis, interferon-y, interleu-kins, IgE, transcription factor NF-kB.
