CC BY
48
4. Кочемасова Т. В. Состояние эндотелия и адгезия лейкоцитов при сахарном диабете // Сахарный диабет. 2000. № 3.
5. Мрочек А. Г. Тромбоциты, липиды и гормоны при атеросклерозе и ИБС // Кардиология. 1989. Т. 29, № 9. С. 102107.
6. Павлищук С. А., Петрик Г. Г., Никольская Л. Ф. Взаимоотношение агрегационной активности тромбоцитов и некоторых параметров метаболизма у здоровых людей // Физиология человека. 2003. № 1. С. 136-138.
7. Павлищук С. А., Петрик Г. Г., Никольская Л. Ф. Тромбоцита-рно-клеточные взаимоотношения при постпрандиальной гликемии у здоровых людей // Физиология человека. 2004. Т. 3. № 3. С.124-127.
8. Gray R. P., Hendra T. J., Patterson D. L., Yudkin J. S. Spon-taneus platelet aggregation in whole blood in diabetic and nondiabetic survivors of myocardial infarction // Thromb. Haemost. 1993. V. 70. P. 932-936.
9. Marguerie G. A. & Plow E. F. The fibrinogen-dependent pathway of platelet aggregation // Ann. N. Y.Acad.Sci. 1983. V. 108. P. 556-566.
10. Winocour P. D. Platelet, vascular desease and diabetes mellitus // Can. J. Physiol and Pharm. 1994. V. 72. № 3. P. 295-303.
S. A. PAVLISHCHOOK, G. G. PETRIK, J. A. KATUSHKINA
SOME METABOLIC PARAMETERS AND PLATELET-CELLULAR HEMOSTASIS IN TYPE 2 DIABETES
The object of the research was 102patients with Type 2 Diabetes havingdifferentdegree ofmicro- and macrovascular displays. Besides the derangement of carbohydrate exchange in Type 2 Diabetes patients the changes of protein and lipid parameters, i.e. the increase of a2-globulin, fibrinogen and atherogenic lipid fractions have been revealed. In condition cronic hyperglicaemia the average volume erythrocytes and hematocrit the decreese along with the increase of average hemoglobin concentration in the erythrocyte.
The aggregation of activity of blood platelets patients with Type 2 Diabets authentically exceeds the parameters of healthy people and is accompanied by the increase of their average size.
Keywords: Type 2 Diabetes, lipids, fibrinogen, platelet aggregation.
С. Л. ПАЛБА, З. В. ШЕВЦОВА
ОСОБЕННОСТИ ПОКАЗАТЕЛЕЙ СПЕЦИФИЧЕСКОГО И НЕСПЕЦИФИЧЕСКОГО
_
ИММУНИТЕТА ПРИ ВИЧ-ИНФЕКЦИИ У ЖИТЕЛЕЙ АБХАЗИИ
Республиканский центр профилактики и борьбы со СПИД и инфекционными заболеваниями, кафедра «Экспериментальная биология и медицина» БГФ АТУ
ВИЧ-инфекция представляет серьезную проблему здравоохранения и наносит значительный экономический ущерб. По данным ВОЗ, в настоящее время более 40 млн. человек в мире страдают этой инфекцией, из них 15 млн. заразились в последние 2 года, а 24 млн. уже умерли от СПИДа. Ежедневно происходит заражение 14 тыс. человек [7]. Несмотря на достигнутые успехи медицинской науки и усилия ученых всего мира по борьбе с ВИЧ-инфекцией, не удается разработать эффективные методы ее профилактики и лечения и остановить пандемию. При этом распространенность этой инфекции в отдельных странах и регионах различна: самый высокий показатель инфицированности ВИЧ приходится на Африку, регионы Карибского моря и Южной Азии. В Российской Федерации (РФ) в настоящее время зарегистрировано свыше 284 тыс. ВИЧ-инфицированных людей. По степени интенсивности эпидемического процесса регионы РФ можно разделить на группы с низким, средним и высоким уровнем поражен-ности населения. К наиболее неблагополучным зонам по пораженности относятся Санкт-Петербург, Москва, Свердловская, Самарская, Иркутская области [7, 10].
Что касается Абхазии, то за период с 2001 по 2006 г. всего было выявлено 219 ВИЧ-инфицированных людей. Исходя из степени интенсивности эпидемического процесса РФ, Абхазию можно отнести к региону с низким уровнем пораженности.
Известно, что иммунная система, как и другие биологические системы, обладает разнообразием форм ответа на различные раздражения, имеет специфические и неспецифические механизмы реагирования. Патогенез ряда заболеваний связан с дисфункцией и дисбалансом регуляторных механизмов иммунной системы, поэтому изучение звеньев иммунной системы имеет значение для выяснения возможных патогенетических механизмов развития иммунодефицитных заболеваний. Иммунопатогенез ВИЧ-инфекции представляет собой сложный процесс взаимодействия возбудителя с организмом хозяина и складывается из следующих компонентов: патогенных свойств возбудителя, способности иммунной системы адекватно реагировать на ВИЧ-инфекцию и контролировать её.
Клиническая диагностика, определение стадий ВИЧ-инфекции проводятся по классификации В. И. Покровского. Диагностика стадии ВИЧ-инфекции основывается на сопоставлении ведущих клинических синдромов с данными иммунологического обследования. Клиническая картина ВИЧ-инфекции развивается постепенно, в течение многих лет и завершается формированием тяжелой полиорганной патологии [9].
В связи с этим целью нашей работы явилось изучение некоторых показателей специфического и неспецифического иммунитета в группе впервые выявленных нами ВИЧ-инфицированных, проживающих в Абхазии.
УДК 616.98:578.828.6 (479.224)
Методика исследования
Для иммунологического обследования были отобраны 15 ВИЧ-инфицированных (опытная группа) без клинических проявлений и 15 неинфицированных (контрольная группа).
Антитела к ВИЧ определяли методом иммунофер-ментного анализа (ИФА) с помощью тест-систем фирмы «ВекторБест» с дальнейшим подтверждением в иммуноблотинге [9].
Забор крови осуществляли из локтевой вены в утренние часы натощак.
Выделение лимфоцитов проводили в градиенте плотности фиколл-урографин [8, 9]. Количественное определение В- и Т-лимфоцитов и их субпопуляций проводили методом модифицированного розеткообра-зования с помощью моноклональных антител к клеточным кластерам дифференцировки [5, 6]. Содержание иммуноглобулинов классов 1дА, 1дМ, и IgG определяли методом радиальной иммунодиффузии в геле с помощью моноспецифических сывороток («ИмБио», Россия) [8, 9].
Изучение фагоцитарной активности нейтрофиль-ных гранулоцитов (НГ) оценивали по их способности захватывать и переваривать микробные клетки (Б1. Аигеигв, штамм 209). При этом определяли количество активно фагоцитирующих НГ (%ФАН), среднее число бактерий, находящихся внутриклеточно (ФЧ), фагоцитарный индекс (ФИ), процент переваривания (%П) и индекс переваривания (ИП) [4].
Интенсивность кислородзависимого метаболизма в нейтрофилах оценивали по их способности восстанав-
ливать нитросиний тетразолий (НСТ) в диформазан в спонтанном и стимулированном НСТ-тесте [4].
Определение содержания провоспалительных ци-токинов ИЛ-1Р и ИЛ-6 в сыворотке определяли методом твердофазного иммуноферментного анализа с помощью тест-систем ООО «Цитокин» (С.-Петербург) [1].
Статистическую обработку результатов исследования проводили общепринятым методом с определением средней арифметической (М) и средней ошибки (т). Достоверность различий оценивали с использованием ^критерия Стьюдента [3].
Результаты и обсуждение
Результаты исследования иммунного статуса у пациентов опытной и контрольной групп представлены в таблицах 1-3.
При этом показано (табл. 1), что у ВИЧ-инфицированных лиц общее содержание лимфоцитов не отличается от такового у здоровых лиц, однако относительное и абсолютное содержание Т-лимфоцитов (CD3+) и Т-хелперов (CD4+) было значительно ниже, чем в контрольной группе. В то же время содержание цитоток-сических лимфоцитов (CD8+) было достоверно выше в опытной группе. При этом наблюдаемый характер изменения CD4(+)- и CD8(+)-лимфоцитов приводил к закономерному снижению иммунорегуляторного индекса ^4(+)^8(+)).
Наряду с этим у ВИЧ-инфицированных было выявлено более высокое процентное содержание В-лим-фоцитов и активированных лимфоцитов с кластерами дифференцировки CD25+, CD71+ и Н1_А^К+ . На рисун-
Таблица 1
Содержание популяций и субпопуляций В- и Т-лимфоцитов у ВИЧ-инфицированных и в контрольной группе (M±m,р)
Показатели Опытная группа п=15 Контрольная группа п=15
Лимфоциты 109/л 2,02±0,21 2,16±0,11
Т-лимфоциты (CD3) % 41,5±1,1* 50,1±1,81
109/л 0,83±0,06* 1,08±0,08
Т-хелперы (CD4) % 26,0±2,6* 32,9±2,2
109/л 0,52±0,07* 0,71±0,05
Т-цитотоксические (CD8) % 26,2±1,1* 22,0±1,6
109/л 0,53±0,03* 0,47±0,02
ИРИ (иммунорегуляторный индекс) CD4/CD8 1,0±0,09* 1,4±0,1
ЫК ^16) % 16,6±1,86 12,8±1,3
109/л 0,33±0,04 0,27±0,05
В-лимфоциты (CD22) % 24,4±1,04* 19,0±1,6
109/л 0,49±0,03* 0,41±0,03
CD 25 лимфоциты % 14, 9±1,40* 9,0±1,47
109/л 0,31±0,03* 0,19±0,05
CD71 лимфоциты % 12,5±1,37* 7,8±1,21
109/л 0,25±0,04* 0,16±0,02
Н1_А^К лимфоциты % 13,2±1,35* 6,6±0,96
109/л 0,26±0,05* 0,14±0,02
136
Примечание: *- достоверные отличия от контроля.
Рис. 1. Процентное содержание лимфоцитов с разными кластерами дифференцировки
Tààëuôà 2
Содержание иммуноглобулинов разных классов в сыворотках крови
Группы Количество иммуноглобулинов, г/л Mim
IgM IgG IgA
1 (n=15) 1,48±0,18 19,5±1,4 2,87±0,5З
2 (n=15) 0,9±0,11 12,3±1,85 1,3±0,31
p р<0,02 р<0,01 р<0,02
Рис. 2. Сравнительные данные о количестве иммуноглобулинов IgM, IgG, IgA
Рис. 3. Концентрация цитокинов у ВИЧ-инфицированных и в контроле
Таблица 3
Показатели фагоцитарной и кислородзависимой микробицидной системы нейтрофильных гранулоцитов
Показатели Опытная группа Контрольная группа р
Mim Mim
% ФАН 47,1±2,18 54,8±1,76 р<0,02
Фагоцитарное число (ФЧ) 5,48±1,28 4,З5±0,2З p>0,5
Фагоцитарный индекс (ФИ) 2,04±0,21 2,65±0,26 p>0,1
Процент переваривания (%П) 64,2±1,15 65,3±1,18 p>0,5
Индекс переваривания (ИП) 1,3±0,13 1,61±0,14 p>0,1
ке 1 представлены данные о процентном содержании популяций и субпопуляций лимфоцитов в сыворотках пациентов контрольной и опытной групп в сравнительном аспекте.
При исследовании гуморального звена иммунитета у ВИЧ-инфицированных жителей Абхазии установлено возрастание концентрации иммуноглобулинов основных классов, преимущественно за счет IgG (табл. 2, рис. 2).
Определение содержания провоспалительных цитокинов (ИЛ-Iß и ИЛ-6) в сыворотке крови ВИЧ-инфицированных позволило выявить их достоверное по сравнению с таковыми у неинфицированных практически здоровых лиц увеличение. Так, отмечено увеличение ИЛ-Iß с 1,20±0,39 до 4,50±1,20 (р<0,02), а ИЛ-6 - с 15,00±1,40 до 38,10±3,20 (р<0,001) (рис. 3).
Результаты исследования фагоцитарной активности нейтрофилов, которая отражает как способность к поглощению патогенов, так и к их перевариванию, представлены в таблице 3. Как следует из данных таблицы, величины показателей в обеих сравниваемых группах существенно не отличались. Между тем у ВИЧ-инфицированных выявлена более высокая активность кислородзависимой микробицидной системы нейтро-фильных гранулоцитов, о чем свидетельствует возрастание %ФПК и СЦИ в спонтанном и стимулированном НСТ-тесте (табл. 3).
Анализ полученных результатов исследования в целом позволил заключить, что у обследованных нами ВИЧ-инфицированных лиц Республики Абхазия наблюдались достоверные изменения в Т-звене иммунной системы, что выражалось в снижении абсолютного и процентного содержания общего количества Т-лимфо-цитов и Т-хелперов, а также в достоверно более низком иммунорегуляторном индексе.
Наряду с этим содержание В-лимфоцитов и количество продуцируемых ими иммуноглобулинов (преимущественно IgG) у ВИЧ-инфицированных было достоверно и сопровождалось более высоким содержанием активированных лимфоцитов, экспрессирующих кластеры дифференцировки CD25+ CD71+ и HLA-DR+, и более высоким содержанием провоспалительных цитокинов (ИЛ-^ и ИЛ-6). Между тем состояние фагоцитарной системы не имело существенных нарушений, за исключением более высокой, чем у неинфицирован-ных, активности кислородзависимой биоцидности ней-трофильных гранулоцитов.
Таким образом, изучение показателей иммунного статуса у ВИЧ-инфицированных жителей Абхазии свидетельствует об их сходстве с таковыми у лиц, проживающих в других регионах, что подтверждается данными литературы [1, 2, 8, 9, 11]
Поступила 16.12.2006
ЛИТЕРАТУРА
1. Змушко Е. И., Дмитриев В. И., Малков А. Н. и др. Роль мононуклеарных фагоцитов в иммунопатогенезе ВИЧ-инфекции // Журн. микробиол. 1997. № 6. С. 51-54.
2. Иммунодефицитные состояния / Под ред. В. С. Смирнова, И. С. Фрейдлин. СПб: Фолиант. 2000. 568 с.
3. Каминский Л. С. Статистическая обработка лабораторных и клинических данных. Л.,1964. С. 99-119.
4. Нестерова И. В., Колесникова Н. В., Чудилова Г. А. Комплексное трехуровневое исследование системы нейтрофильных гранулоцитов с возможной диагностикой ИДС при различной патологии: Методич. рекомендации № 96/11. Краснодар, 1996. 22 с.
5. Новиков П. Д., Новиков Д. К. Сравнительная характеристика современных методов иммунофенотипирования лимфоцитов // Иммунопатология, аллергология, инфектология. 2000. № 1. С. 62-66.
6. Новиков Д. К., Новиков В. И. Оценка иммунного статуса. Витебск - Москва, 1996. 86 с.
7. Онищенко Г. Г. Основные направления деятельности по противодействию эпидемии ВИЧ/СПИДА в Российской Федерации // Иммунология. 2006. № 6. С. 356-361.
8. Папуашвили М. Н., Щелканов М. Ю. Клинико-
иммунологический мониторинг ВИЧ-инфицированных пациентов: сравнительный анализ показателей,
характеризующих развитие заболевания // Вопр. вирусол. 2003. № 6. С. 26-30.
9. Справочник по клинической иммунологии / Под ред. Л. П. Сизякина, И. И. Андреева. Ростов н/Д: Феникс, 2005. 448 с.
10. Федотова Т. Т., Земеров В. Б., Ефимова О. С. Развитие эпидемии ВИЧ-инфекции среди потребителей инъекционных наркотиков в Свердловской области // Журн. микробиол. 2003. № 3. С. 86-89.
11. Rook G. A., Vyakarnan A. Cytokines, limphokines, mycobacteria and AIDS // Res. Microbiol. 1992. Vol. 143, № 4. P. 406-410.
S. L. PALBA, Z.. V. SHEVTSOVA
SOME SPECIFIC AND NONSPECIFIC IMMUNITY RATE IN HIV INFECTION
Some disturbances has been founded in T-cell immunity of the HIV-infected patients. It was observed that patients had high level of the inflammatory cytokines and high percent of the activated lymphocytes. We didn’t observed the disturbances of the phagocytes activity of neutrophilic granulocytes.
Sign of the immunodeficiency may be considered as moderate.
Key words: HIV infection, immunity, lymphocyte, cytokine.
