CC BY
13
Выводы
1. Абсолютная зависимость инактивируюшего действия ивермектина от присутствия во внешней среде ионов хлора согласуется с литературными данными в том, что ивермектин является агонистом гли-цинзависимых хлорных каналов, которыми обладают макрофаги печени [3, 7].
2. Способность ивермектина, с одной стороны, сушественно блокировать индуцируемую ЛПС секрецию медиаторов воспалительной реакции макрофагов, а с другой - практически не влиять на фагоцитоз может иметь благоприятные физиологические последствия на уровне всего организма в виде снижения эндотоксемических проявлений.
Литература
1. Dawson G.R., Wafford K.A., Smith A., et al.//J. Pharmacol. exp.
therapeut. - 2000. - Vol. 295, N 3. - P. 1051 - 1060.
2. Froh M., Thurman R.G., Wheeler M.D. //Physiol. gastrointest.
liver physiol. - 2002. - Vol. 283, N 4. - P. G 856 - 863.
3. Goa K.L., Mctavish D., Clissold S.P.//Drugs. - 1991. - Vol. 42.
- P. 640 - 658.
4. Green L.C., Wagner D.A., Glogowsky J. et al.//Anal. biochem.
- 1982. - Vol. 126. - P. 131 - 138.
5. Hirose M., Tomono M., Takeuchi M. et al.//Acta hepatol. Jap.
- 1987. - Vol. 28. - P. 1327 - 1330.
6. Schemmer P., Enomoto N., Bradford B.U. et al.//Physiol. gastrointest. Liver physiol. - 2001. - Vol. 280. - P. G1076-G1082.
7. Shang Q., Haddrill J.L., Lynch J.W. //Biol. chem. - 2001. - Vol. 276, N 16. - P. 12556 - 12564.
8. Su G.L. //Physiol. gastrointest. Liver physiol. - 2002. - Vol. 283, N 2. - P. G256 - 265.
9. Vassilatis D.K., Arena J.P., Plasterk R.H., et al. //Biol. chem. -1997. - Vol. 272, N 52. - P. 33167 - 33174.
10. Victorov A.V., Abril E.R., Hamlin C.E. et al.//Cells of the hepatic sinusoid, kupffer cell foundation, E.Wisse, D.L.Knook, R.S.Mccuskey eds. - 1991. - Vol. 3. - P. 449 - 452.
11. Victorov A.V., Hoek J.B //Biochim. biophys. res. commun. -1995. Vol. 215, N 2. - P. 691 - 697.
12. Wheeler M.D., Ikejima K., Enomoto N, et al.//Cell mol. life sci.
- 1999. - VOL. 56, N 9-10. - P. 843 - 856.
Особенности патогенеза эндогенных увеитов у детей с хронической герпес-вирусной инфекцией
Т.В. Сидорова, В.В. Лебедев, Г.И. Кричевская, Л.А. Катаргина, Г.Н. Быковская
ГУ Центральный НИИ эпилемиологии Минзлрава России, Москва
Московский НИИ глазных болезней им. Гельмгольца
Энлогенные увеиты - полиэтиологические воспалительные заболевания сосулистой оболочки глаза - характеризуются различными вариантами клинического течения. Наиболее важной особенностью их развития в летском возрасте являются большая частота инфекционных форм увеитов и реииливируюший характер увеального воспалительного процесса.
Р
I азвитию рецидива увеального воспалительного процесса обычно способствуют различные иммунные нарушения. К числу таковых относят нарастание явлений аутоиммунной агрессии, расстройства клеточного иммунитета, развитие локальной недостаточности 1§А, нарушение баланса цитокинов в сторону преобладания провоспалительных медиаторов [3].
Указанные иммунные расстройства сопутствуют усилению реакции воспаления и персистенции герпес-вирусной инфекции [7]. При этом инфекционный агент может не только быть причиной заболевания, но и выступать одним из патогенетических факторов обострения увеита другой этиологии: фокальных, инфек-
ционно-аллергических, аутоиммунных [1, 5, 6]. В то же время обострение эндогенного увеита (ЭУ) может наблюдаться и в отсутствие инфекционного агента. Существование инфекционного и неинфекционного путей развития ЭУ предполагает наличие разных патогенетических механизмов развития воспаления в сосудистой оболочке и соответственно - различных вариантов клинического течения данного заболевания.
В этой связи мы проанализировали варианты клинического течения эндогенных увеитов в зависимости от активности герпес-вирусных инфекций и состояния иммунной реактивности детского организма.
Цель работы: выявить особенности клинического
Рисуноки 1а-г.
Варианты иммунограмм у летей с энлогенными увеитами
течения в зависимости от состояния специфического клеточного и гуморального иммунитета к офтальмо-тропным герпес-вирусным инфекциям.
Материалы и методы
Под наблюдением находилось 40 детей в возрасте 4 - 16 лет с хроническими рецидивирующими периферическими и генерализованными увеитами, в патогенезе которых предполагалась роль вирусной инфекции [3]. Все больные характеризовались тяжелым прогрессирующим течением заболевания и недостаточным эффектом от стандартной противовоспалительной терапии [2].
Клинико-иммунологическое обследование и лечение проведено на базе отделения патологии глаз у детей МНИИ им Гельмгольца в 1999 - 2002 годах (руководитель отдела A.B. Хватова).
Исследовали сыворотку крови больных (160 проб) в различные фазы увеита: субактивную, обострения, улучшения, начальной и стойкой ремиссии.
Иммунологические методы включали: 1 - определение клеточной сенсибилизации лимфоцитов к вирусу простого герпеса в реакции бласт-трансформации (РБТЛ) путем внесения в среду специфического антигена в соответствующих разведениях [8]; 2 - определение уровня антител (Ат) класса IgG к ранним неструктурным вирусным белкам (РВБ) методом иммуноферментного анализа (ИФА). Учет ИФА проводили на спектрофотометре по величине оптической плотности исследуемой сыворотки в сравнении с оптической плотностью отрицательной контрольной сыворотки [4].
Результаты и обсуждение
С целью определения отдельных вариантов течения ЭУ в зависимости от состояния специфического иммунитета к герпес-вирусной инфекции (ГВИ) были изучены репликативная вирусная активность и состояние специфической клеточной противовирусной за-
щиты. Репликативную фазу инфекции определяли по наличию специфических антител к РВБ. Положительная реакция соответствовала значению титра 0,35 ед. оптической плотности для вируса простого герпеса (ВПГ) и 0,50 ед. - для цитомегаловируса (ЦМВ) [4].
При реактивации латентного вируса в инфицированных клетках появляются ранние неструктурные вирусные белки, которые участвуют в репликации вируса, но не входят в состав зрелого вириона. На стадии хронической персистируюшей инфекции эти белки в клетках инфицированного организма не выявляются. Таким образом, определение вирусспецифиче-ских антител к ранним неструктурным белкам ВПГ и ЦМВ возможно только в случае активной репликации вируса, что позволяет дифференцировать активную и латентную фазы заболевания.
Положительная реакция бласт-трансформации отражает наличие специфической клеточной сенсибилизации к вирусу простого герпеса, а следовательно, факт инфицирования и адекватность клеточной реакции. Отрицательная реакция указывает только на отсутствие специфической клеточной сенсибилизации и не является критерием инфицирования данного организма вирусом простого герпеса. Отсутствие специфической сенсибилизации при наличии вируса в организме может быть вызвано снижением его иммунной реактивности и недостаточностью клеточной системы противовирусной зашиты [8].
Среди обследованных пациентов инфицирование вирусами семейства НегреБУтСае выявлено у 29 детей (72,5%). Активная герпетическая инфекция отмечена у 18 больных (45%). Сенсибилизация к ВПГ была у 26 больных (65 %) и у 11 из 26 сопровождалась повышенной концентрацией антител к ранним белкам ВПГ-1 или -II, а у 4 из 26 - антителами к ВПГ-11 и ЦМВ.
У 11 больных данные РБТЛ и ИФА были отрицательные при многократных исследованиях.
На основании полученных лабораторных данных по специфической сенсибилизации лимфоцитов и ре-пликативной активности ВПГ и ЦМВ все больные были разделены на три группы (таблица 1):
I группа (вируснегативная) включает больных с ЭУ, у которых в течение всего периода наблюдения не выявлена герпес-вирусная инфекция;
II группа - дети, инфицированные вирусами семейства НегреБУтСае без репликативной активности на момент обследования (латентная фаза инфекции);
III группа - инфицированные пациенты с репликативной активностью ВПГ и ЦМВ (активная фаза инфекции).
Выделение подобных вариантов течения ЭУ основывается на этиопатогенетических признаках развития заболевания, включаюших наличие или отсутствие инфицирования вирусами семейства НегреБУтСае и степень активности инфекционного процесса.
Мы полагаем, что у больных вируснегативной группы герпетическая инфекция не участвует в патогенезе увеита. Возможно, в развитии данного варианта ЭУ ведушая роль принадлежит другим инфекцион-
ным агентам или другим патогенетическим факторам, таким как аутосенсибилизация к S-антигену сетчатки, провоспалительным медиаторам и т.д.
Важно отметить, что в группе вирусинфицирован-ных больных с латентной фазой вирусной инфекции сенсибилизация к ВПГ носила волнообразный характер. Усиление клеточного иммунного ответа по времени не совпадало с периодами обострения увеита. Возможно, волнообразное усиление специфической сенсибилизации препятствует активизации герпетической инфекции и не позволяет развиться обострению увеита.
Отсутствие корреляционной связи между фазами увеита и периодами повышения сенсибилизации к ВПГ у наблюдаемых нами пациентов в латентной фазе инфекции не согласуется с литературными данными, что высокие значения реакции бласт-трансфор-мации сопутствуют или предшествуют рецидиву эндогенного увеита [5, 6]. Таким образом, вирус простого герпеса в латентной фазе не определяет тяжесть течения увеита, а изменение специфической клеточной сенсибилизации - фазу заболевания.
В случае развития активной, репликативной фазы инфекции увеиты в III группе больных имели более тяжелое течение по сравнению с пациентами двух других групп, отличались клинической неоднородностью и варьировали по тяжести. Для оценки механизма влияния герпетической инфекции на течение уве-ального процесса все серопозитивные больные в период обострения увеита были разделены на две подгруппы в зависимости от уровня репликативной активности вирусов и сопутствующей реакции бласт-трансформации лимфоцитов к ВПГ.
I подгруппа (8 детей) - с повышенным уровнем антител к РВБ (0,47±0,04 _ОП) и высокой специфической клеточной сенсибилизацией в реакции бласт-трансформации (6 - 12%). Течение увеита в данной группе, несмотря на тяжесть процесса, не сопровождалось прогрессированием осложнений, и для него было характерно наличие периодов нестойкой ремиссии. После лечения у всех пациентов отмечалось значительное снижение специфической сенсибилизации лимфоцитов (до 0,5 - 3%) с достижением сероконвер-сии - исчезновения антител к РВБ (рисунок 1а). Проведение курсов противорецицивного лечения у таких больных обычно обеспечивает стойкую ремиссию.
II подгруппа включала 10 детей с наиболее высоким уровнем антител к РВБ (1,45 ± 0,1 АОП). В то же время уровень специфической сенсибилизации был низким (не более 3,5%) или отрицательным в 70% случаев. Пациенты данной группы отличались более тяжелым прогрессирующим течением увеита с быстрым формированием осложнений и отсутствием периодов ремиссии. В процессе лечения происходили снижение титра специфических Ат (до 0,93 ± 0,14 АОП) и трансформация клеточной сенсибилизации к вирусу простого герпеса. Изменения РБТЛ носили разнонаправленный характер: при исходно отрицательных значениях РБТЛ она увеличивалась, при гиперсенсибилизации - уменьшалась (рисунки 16, 1в). В результате средние значения РБТЛ в фазе начальной
ремиссии достигали 2 - 6 %, что в два раза превышает аналогичные показатели в I подгруппе. Данное усиление клеточных зашитных реакций является зашит-но-компенсаторным механизмом в условиях активной герпетической инфекции, но все же недостаточным для инактивации вируса. После проведенного лечения ремиссия наступила только в 60% случаев, но не носила стойкого характера. Для достижения стойкой ремиссии необходимо снизить активность инфекционного процесса до латентной фазы.
У 40% больных II подгруппы противовоспалительная терапия оказывалась малоэффективной, заболевание продолжало прогрессировать, быстро наступал рецидив увеита. При анализе иммунологических показателей у данных больных отмечены дальнейшее повышение титра Ат к РВБ (1,82±0,14 АОП) и низкий уровень сенсибилизации к вирусу простого герпеса (рисунок 1 г). Развитие недостаточности клеточной противовирусной зашиты инициирует повышение активности герпес-вирусной инфекции. Клинически это проявляется развитием резистентности к неспецифической противовоспалительной и стероидной терапии.
Важно отметить, что у 3-х из 4-х больных (75%) в этой группе выявлена одновременная активизация ВПГ II и ЦМВ. Сочетание этих двух инфекций следует считать неблагоприятным фактором, утяжеляюшим течение и прогноз заболевания.
Обобшая полученные результаты, можно сделать вывод, что тяжесть течения эндогенного увеита у ви-русинфицированных пациентов в большей степени определяется активностью герпес-вирусной инфекции. По нашим данным, патогенетическое значение ГВИ при эндогенных увеитах проявляется только в активной, репликативной фазе, когда развиваются тяжелые рецидивируюшие формы эндогенных увеитов.
Чем выше титр специфических антител к ранним вирусным белкам и продолжительнее период их обнаружения в крови, тем более тяжелый характер увеаль-ного процесса, тем хуже прогноз заболевания. Наиболее неблагоприятным иммунологическим фоном в этом случае следует считать отсутствие адекватной клеточной противовирусной зашиты.
В этой связи представляется целесообразным определение фазы течения инфекционного процесса, а также исключение возможного влияния сопутствую-ших иммунных расстройств. Констатация только одного факта наличия ГВИ является совершенно недостаточной для определения прогноза заболевания и необходимого объема терапии.
Выводы
1. Результаты исследования специфической сенсибилизации лимфоцитов и репликативной активности ВПГ и ЦМВ позволяют выделить три варианта течения эндогенного увеита: вируснезависимый, с латентной и активной фазой инфекции.
2. У пациентов с латентной инфекцией вирус простого герпеса не является патогенетическим фактором и не оказывает сушесгвенного влияния на течение увеального процесса.
3. В случае развития активной герпетической инфекции увеит приобретает тяжелый рецидивирующий характер с развитием резистентности к проводимой терапии и прогрессированием осложнений.
4. Высокий уровень антител к ранним вирусным белкам на фоне сниженной специфической сенсибилизации лимфоцитов отражает несостоятельность системы противовирусной защиты и является патогенетической основой для развития хронического воспалительного процесса в сосудистой оболочке глаза.
5. Для достижения клинической ремиссии в этом случае необходимо снижение активности герпетической инфекции до латентной фазы и усиление клеточной противовирусной защиты с помощью противовирусных и иммунотропных препаратов.
Литература
1. Денисова Е.В., Катаргина Л.А., Кричевская Г.И. и др. Роль персистентных офтальмотропных инфекций в патогенезе осложнений энтеровирусного увеита //Актуал. вопросы воспал. Заболев. глаз. - М., 2001. - С. 165 - 168.
2. Зайцева Н.С., Слепова О.С., Теплинская Л.Е. и др. Нарушение иммунитета и лечение увеитов. // Метод. рекоменд. -М., 1991. - 30 с.
3. Катаргина Л.А., Хватова А.В./Эндогенные увеиты у детей и подростков. - М: Медицина, 2000. - С. 176 - 190.
4. Кличко В.И., Звонарев А.Ю., Шаталин К.Ю. и др.// Молекул. генет. - 1994. - <3 - С. 720 - 722.
5. Кричевская Г.И., Анжелов В.О., Катаргина Л.А. и др. Цито-мегаловирусная инфекция у детей с эндогенными увеита-ми//Вестн. офтальмол. - 1999. - <5 - с.23 - 25.
6. Кричевская Г.И., Анжелов В.О., Катаргина Л.А. и др. Распространенность и клиническое значение активной цито-мегаловирусной инфекции у больных с офтальмопатологи-ей воспалительного характера//Вестн. офтальмол. - 2000. -< 5. - С. 51 - 53.
7. Кусельман А.И., Черданцев А.П., Соловьева И.Л. и др. Состояние иммунной и эндокринной систем у детей, инфицированных вирусами семейства герпес // Педиатрия. - 1996. - <5. - С. 28 - 31.
8. Слепова О.С. Реакции бласттрансформации лимфоцитов и торможения миграции лейкоцитов в патогенезе и дифференциальной диагностике офтальмогерпеса//Дис. к.б.н. -М., 1980. - С. 49 - 51.
Иммунорегуляторная оценка естественных и синтетических препаратов в системе прайминга лейкоцитов
A.B. Тутельян
ГУ Центральный НИИ эпилемиологии Минзлрава России, Москва
Хорошо известно, что возникновение и развитие инфекционной патологии сопровожлается лейкоцитозом и увеличением функциональной активности лейкоцитов, в том числе фагоцитов. Фагоцитируюшие лейкоциты (полиморфно-ялерные лейкоциты (ПМЛ) и мононуклеарные клетки (МНК) принимают участие в развитии специфического иммунитета [3], улалении ленатурированных белков, остатков умерших клеток, тканей и различных пролуктов из очага воспаления или инфицирования [7, 11 ]. Кроме того, МНК, равно как и ПМЛ, в процессе активации пролуцируют значительное количество биологически активных соелинений, оказываюших сушественное влияние на условия жизнелеятельности организма [4 - 6, 10].
Д
я фагоцитирующих клеток характерны два хорошо различаемых состояния: исходное - с низким уровнем протекания метаболических процессов и активированное, переход в которое обусловлен взаимодействием клеток с различными стимуляторами. Активация фагоцитов сопровождается существенными морфологическими, биохимическими и биофизическими перестройками клеток [7, 8].
Известно, что фагоцитирующие клетки, находящиеся вне контакта с антигеном, малоактивны. Однако если ПМЛ предынкубировать с каким-либо стимулятором,
взятым в концентрации, недостаточной для активации гранулоцитов, а затем воздействовать на них тем же стимулятором или каким-либо другим в стимулирующей концентрации, то наблюдается увеличение эффектор-ных ответов фагоцитов по сравнению с контролем. Повышение функционального потенциала фагоцитов в процессе предварительного стимулирования получило название «прайминг» (priming) [McPhail, 1984]. Прай-минг фагоцитов выражается в увеличении ответа ПМЛ на последующую стимуляцию, определяемом в виде индекса прайминга (ИП); в сокращении лаг-периода разви-
