CC BY
55УДК 616.62-006.6-073. DOI : 10.37279/2224-6444-2020-10-1-35-46
ОСОБЕННОСТИ МОРФОЛОГИИ И ИММУНОФЕНОТИПА САРКОМАТОИДНОЙ ПОЧЕЧНО-КЛЕТОЧНОЙ КАРЦИНОМЫ
Османов Ю. И., Коган Е. А., Демяшкин Г. А., Нугуманов Р. Г.
ФГАОУ ВО Первый Московский государственный медицинский университет им. И.М. Сеченова Минздрава России (Сеченовский Университет), 119434, ул. Трубецкая, д. 8, Москва, Россия.
Для корреспонденции: Юсиф Исламович Османов, кандидат медицинских наук, доцент кафедры патологической анатомии им. академика А. И. Струкова Первого МГМУ им. И. М. Сеченова (Сеченовский Университет), [email protected]
For correspondens: Youseef Osmanov, PhD, Associate Professor of the Department of Pathology, I. M. Sechenov First Moscow State Medical University (Sechenov University), e-mail:[email protected]
Information about authors: Osmanov Y. I., http://orcid.org/ 0000-0002-7269-4190 Kogan E. А., http://orcid.org/ 0000-0002-1107-3753 Demyashkin G. А., https://orcid.org/0000-0001-8447-2600 Nugumanov R. G., https://orcid.org/0000-0001-6076-4107
РЕЗЮМЕ
Саркоматоидная карцинома почки является относительно редкой опухолью и составляет около 5% всех почечно-клеточных карцином. Результаты мультивариативного прогностического моделирования показывают, что наличие саркоматоидной дифференцировки в почечно-клеточной карциноме является неблагоприятным предиктором клинического течения и исхода заболевания. Цель исследования - сравнительный анализ экспрессии ряда белков в карциноматозном и саркоматоидном компонентах в различных гистологических вариантах саркоматоидной карциномы почки и оценка их диагностической значимости. Исследование выполнено на операционном материале, полученном от 49 пациентов с опухолью почки. ИГХ-исследование проводили на парафиновых срезах по стандартному протоколу с использованием широкой панели антител. На основании проведенного морфологического анализа и ИГХ-исследования из 49 новообразований в 24 (49%) случаях были выявлены морфоиммуногистохимические признаки светлоклеточной почечно-клеточной карциномы, в 9 (18%) новообразованиях - хромофобной почечно-клеточной карциномы, в 8 (16%) образцах - папиллярной почечно-клеточной карциномы, в 1 (2%) наблюдении - карциномы из собирательных трубочек и в 2 (4%) случаях -неклассифицируемой почечно-клеточной карциномы. В 4 (8%) образцах опухолевые клетки не экспрессировали специфические маркеры почечно-клеточной карциномы и при дополнительном иммунофенотипировании было диагностировано по 2 (4%) случая лейомиосаркома и солитарная фиброзная опухоль соответственно, а в 1 (2%) наблюдении - монофазная синовиальная саркома. Имеется явная связь между количеством саркоматоидных клеток и стадией опухоли в саркоматоидных почечно-клеточных карциномах. Установлено, что количество саркоматоидных клеток в стадиях рТ3-рТ4 (n=28; 64%), в подавляющем большинстве случаев (n=27; 96%), составляло более 50 % от всей опухолевой популяции.
Ключевые слова: саркоматоидная почечно-клеточная карцинома, мезенхимальные новообразования почки, иммуногистохимия.
MORPHOLOGICAL AND IMMUNOPHENOTYPIC FEATURES OF SARCOMATOID RENAL CELL CARCINOMA
Osmanov Y. I., Kogan E. A., Demyashkin G. A., Nugumanov R. G.
I. M. Sechenov First Moscow State Medical University (Sechenov University), Moscow, Russia
SUMMARY
Sarcomatoid renal cell carcinoma is a relatively rare tumor and accounts for about 5% of all renal cell carcinomas. The results of multivariate prognostic modeling show that the presence of sarcomatoid differentiation in renal cell carcinoma is an unfavorable predictor of the clinical course and underlying diseases. Objective - а comparative analysis of the expression of a number of proteins in carcinomatous and sarcomatoid components in various histological variants of sarcomatoid renal cell carcinoma and an assessment of their diagnostic significance. Surgical specimens from 49 patients diagnosed with renal neoplasms were investigated. Paraffin sections were immunohistochemically examined using the standard protocol. Based on the morphological analysis and IHC studies, out of 49 neoplasms in 24 (49%) cases revealed morphoimmunohistochemical signs of clear cell renal cell carcinoma, in 9 (18%) neoplasms chromophobe renal cell carcinoma, in 8 (16%) samples -papillary renal cell carcinoma, in 1 (2%) collecting duct carcinoma and in 2 (4%) cases, unclassified renal cell carcinoma. In 4 (8%) samples tumor cells did not express specific markers of renal cell carcinoma and in additional immunophenotyping 2 (4%) cases of leiomyosarcoma and solitary fibrous tumor were diagnosed, respectively, and in 1 (2%) case - monophasic synovial sarcoma. There is a relationship between the number of sarcomatoid cells and the tumor stage in sarcomatoid renal cell carcinomas. It was found that the number of sarcomatoid cells in the stages of pT3-pT4 (n=28; 64%), in the majority of cases (n=27; 96%), was more than 50% of the entire tumor population.
Key words: sarcomatoid renal cell carcinoma, mesenchymal neoplasms of the kidney, immunohistochemistry.
Саркоматоидная карцинома почки (СКП) является относительно редкой опухолью и составляет около 5 % всех почечно-клеточных карцином (ПКК). В Международной классификации опухолей почки ВОЗ, 2016 года СКП не рассматривается в качестве отдельной нозологической единицы и определяется как дедифференциро-ванная форма одного из вариантов ПКК [1; 2]. По данным литературы, СКП встречается в 8% светлоклеточной ПКК (СПКК), 3% папиллярной ПКК (ППКК), 9% хромофобной ПКК (ХПКК), 29% карциномах из собирательных канальцев (КСК) и 11% неклассифицируемых ПКК (НПКК) [3; 4; 5]. Результаты мультивариативного прогностического моделирования показывают, что наличие саркоматоидной дифференцировки в ПКК является неблагоприятным предиктором клинического течения и исхода заболевания. Установлено, что причиной саркоматоидной трансформации опухоли является использование раковыми клетками неполного или полного типов путей эпителиально-мезенхимальной трансформации (ЭМТ) с целью приобретения свойств инвазивности и подвижности. Вместе с тем, по современным представлениям на сегодняшний день патогенез СКП до конца не ясен [6]. В связи с этим, изучение характера экспрессии ряда белков в карциноматозном и саркоматоидном компонентах позволит внести вклад в фундаментальное представление о патогенезе СКП, а полученные результаты могут быть использованы для создания дифференциально-диагностических алгоритмов.
Цель исследования - сравнительный анализ экспрессии ряда белков в карци-номатозном и саркоматоидном компонентах в различных гистологических вариантах саркоматоидной карциномы почки и оценка их диагностической значимости.
МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ
Клинические данные. Объектом исследования послужил архивный биопсийный материал от 49 больных (32 мужчины и 17 женщин) в возрасте от 56 до 89 лет (средний возраст 67 лет), проходивших хирургическое лечение в Урологической клинике Первого МГМУ им. И. М. Сеченова и Урологическом центре Научного клинического центра ОАО РЖД по поводу саркоматоидной опухоли почки в период с 2011 по 2017 гг.
Гистологическое исследование. Участки сар-коматоидной трансформации в хромофобном раке оценивали как G3 по G. Paner. В остальных СКП степень злокачественности была оценена как G4 согласно рекомендациям ВОЗ/ ISUP 2016 года [7; 8]. Количество саркоматоид-
ных клеток выражали в процентах по отношению к общему числу подсчитанных опухолевых клеток. В зависимости от процента саркома-тоидных клеток образцы были разделены на 4 группы: опухоли с саркоматоидным компонентом от 1 до 20%; от 21 до 50%; от 51 до 99%; и 100% по S. Brian и соавт. с изменениями. Стадию опухоли (рТ1 - Т4) определяли согласно протоколу 8-го издания TNM-классификации опухолей мочевыделительной системы [9].
Иммуногистохимическое исследование (ИГХ). Серийные срезы толщиной 5 мкм де-парафинировали и регидратировали по стандартной методике. Для демаскировки антигенов срезы инкубировали 5 мин с 3% раствором перекиси водорода, подвергали высокотемпературной обработке в цитратном буфере (для каждого антитела в соответствии с рекомендуемым протоколом). Список использованных антител приводится в табл. 1.
Для оценки ИГХ-реакции подсчитывали количество антиген-положительных клеток в 10 полях зрения микроскопа (х400), затем определяли уровень реакции по формуле: оценка экспрессии маркера = число антиген-положительных клеток в 10 полях зрения микроскопа х 100 / общее количество клеток. ИГХ-реакцию оценивали как негативную - 0 (менее 0,1% окрашенных клеток), слабо-позитивную - 1 (10% окрашенных клеток и менее), умеренно- позитивную - 2 (11 - 49% окрашенных клеток), сильно-позитивную - 3 (50 - 89% окрашенных клеток) и выраженно-позитивную - 4 (90% окрашенных клеток и более) по J. Rajcani и со-авт. Для оценки экспрессии каждого антигена в карциноматозном и саркоматоидном компонентах были выделены 4 паттерна: позитивная экспрессия маркера в карциноматозных и сар-коматоидных клетках (К+/С+); позитивная экспрессия маркера в карциноматозных клетках и негативная экспрессия в саркоматоидных клетках (К+/С-); негативная экспрессия маркера в карциноматозных клетках и позитивная экспрессия в саркоматоидных клетках (К-/С+); и негативная экспрессия маркера в клетках обоих компонентов (К-/С-) по Y. Wenjuan и соавт [10].
Статическая обработка данных выполнена на персональном компьютере с помощью электронных таблиц Microsoft Excel и пакета прикладных программ Statistica for Windows v. 7.0, "StatSoft Inc." (США).
Для сравнения экспрессии каждого маркера в карциноме и саркоматоидных компонентах использовали критерий хи-квадрат (Х2) или точный тест Фишера. Статистически значимыми считали отличия при р<0,05.
Таблица 1
Панель использованных в исследовании антител
Антитела Клон Производитель Разведение Источник
CK 7 RN7. Novocastra RTU Mouse
CK 8/18 5D3 Novocastra RTU »
AE1/AE3 AE1+AE3 Novocastra RTU »
HMWCK 34ßE12 Novocastra RTU »
EpCAM VU1D9 Novocastra 1:100 »
EMA E29 Cell Marque RTU »
CA9 M75 Dako 1:200 »
AMACR 13H4 Dako RTU »
PAX8 EP298 Cell Marque RTU Rabbit
ULEX1 UEA1 Abcam 1:500 Mouse
Vimentin V9 Novocastra RTU »
CD10 56C6 Novocastra RTU »
CD34 QBEND/10 Novocastra RTU »
CD99 12E7 Novocastra RTU »
CD117 T595 Novocastra RTU »
P53 BP53-12 Novocastra RTU »
Bcl2 BCL-2/100/D5 Novocastra RTU »
SMA sm-1a Novocastra RTU »
S100 S1/61/69 Novocastra RTU »
H-Cald. CALD1/820 Novocastra RTU »
Desmin D33 Novocastra RTU »
Calponin 26A11 Novocastra RTU »
STAT-6 YE361 Abcam 1:50 Rabbit
TLE-1 Ab183742 Abcam 1:250
Примечание. ЯТИ- готовые к применению.
РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ
На основании проведенного морфологического анализа и ИГХ-исследования из 49 новообразований в 24 (49%) случаях были выявлены морфоиммуногистохимические признаки СПКК, в 9 (18%) новообразованиях - ХПКК, в 8 (16%) образцах - ППКК, в 1 (2%) наблюдении -КСК и в 2 (4%) случаях - СНПКК (табл. 2).
В 4 (8%) образцах опухолевые клетки не экспрессировали специфические маркеры ПКК и при дополнительном иммунофено-типировании было диагностировано по 2 (4%) случая лейомиосаркома (ЛС) и соли-тарная фиброзная опухоль (СФО) соответственно, а в 1 (2%) наблюдении - монофазная синовиальная саркома (МСС) (табл. 3).
Саркоматоидная СПКК (ССПКК). Во всех наблюдениях (п=24) выявлена положительная коэкспрессия маркерных антигенов СПКК: СА9, СБ10, СК8/18 и РАХ8 преимущественно в кар-циноматозном компоненте. В 22 опухолях ядерная градация клеток карциноматозного компонента соответствовала С3, а в 2 случаях - С2. В большинстве случаев (п=14; 58%) количество саркоматоидных клеток варьировало в интервале от 50 до 99%, а в 7 наблюдениях в диапазоне от 21 до 50%. В 3 образцах количество саркомато-
идных клеток не превышало 20%. В 19 ССПКК саркоматоидный компонент был представлен веретенообразными клетками с гиперхромны-ми ядрами подобно фибросаркоме (рис. 1а).
В 4 новообразованиях саркоматоидный компонент состоял из плеоморфных и единичных причудливых клеток с выраженной атипией подобно недифференцированной плеоморф-ной саркоме. Преобладали опухоли в стадии рТ3 (п=11). В 7 случаях определена стадия рТ2 и в 2 наблюдениях - рТ1. У 4 пациентов на момент обращения стадия опухоли соответствовала рТ4. В опухолях в стадиях рТ3-рТ4 клетки саркоматоидного компонента составляли более 50% всей опухолевой популяции (табл. 4).
Саркоматоидная ХПКК (СХПКК). В 9 наблюдениях в карциноматоидном компоненте выявлена положительная коэкспрессия маркерных антигенов ХПКК-СК7, СК8/18, ЕрСАМ и ЕМА. В большинстве случаев (п=6) количество клеток саркоматоидного компонента варьировало в интервале от 50 до 90%, а в 1 образце в диапазоне от 21 до 50%. В 2 наблюдениях количество саркоматоидных клеток не превышало 20%. Во всех случаях саркомато-идный компонент состоял из веретеновидных клеток и напоминал фибросаркому (рис. 1б).
ИГХ-профиль саркоматоидных почечно-клеточных карцином
Таблица 2
о м о
о £
N Диаг- Антитела
ноз СК7 СК8/18 АЕ1/ НМУЛЖ ЕрСАМ ЕМА СА9 АМАСК РАХ8 1Лех1 Ут СБЮ СБ34 С099 СБ 117 Вс12 ША Р53 вюо
АЕЗ
24 СПКК 0/21 0/0 0/10 0/19 0/21 0/7 0/0 0/17 0/0 0/22 0/0 0/0 0/24 0/17 0/21 0/9 0/19 0/6 0/24
1/0 1/" 1/0 1/0 1/3 1/0 1/" 1/5 1/" 1/2 1/" 1/" 1/0 1/0 1/0 1/0 1/0 1/0 1/0
2/3 21" 2/6 2/2 2/0 2/5 2/" 2/2 2/7 2/0 2/3 2/3 21" 2/7 2/3 2/6 2/5 2/5 21"
3/0 3/16 3/5 3/3 31" 3/6 3/14 3/0 3/11 31" 3/12 3/14 31" 3/0 3/0 3/9 3/0 3/13 31"
41" 4/8 4/3 4/0 4 Г 4/6 4/10 4/0 4/6 41" 4/9 4/7 41" 41" 41" 4/0 41" 4/0 41"
всего 24 24 24 24 24 24 24 24 24 24 24 24 24 24 24 24 24 24 24
9 ХПКК 0/0 0/0 0/2 0/7 0/0 0/0 0/0 0/8 0/3 0/9 0/0 0/4 0/9 0/7 0/2 0/4 0/8 0/4 0/9
1/" 1/" 1/0 1/0 1/" 1/" 1/" 1/1 1/0 1/0 1/" 1/0 1/0 1/0 1/0 1/0 1/0 1/0 1/0
2/7 21" 2/1 2/2 2/7 2/2 2/2 2/0 2/2 21" 2/2 21" 21" 2/2 2/7 2/2 2/1 2/1 21"
3/2 3/5 3/6 3/0 3/2 3/5 3/4 31" 3/3 31" 3/1 3/5 31" 3/0 3/0 3/3 3/0 3/4 31"
4/0 4/4 4/0 41" 4/0 4/2 4/3 41" 4/1 41" 4/6 4/0 41" 41" 41" 4/0 41" 4/0 41"
всего 9 9 9 9 9 9 9 9 9 9 9 9 9 9 9 9 9 9 9
8 ППКК 0/0 0/0 0/0 0/5 0/7 0/1 0/2 0/0 0/0 0/7 0/0 0/0 0/8 0/5 0/7 0/3 0/5 0/3 0/8
1/3 1/" 1/" 1/0 1/1 1/3 1/1 1/" 1/" 1/1 1/" 1/" 1/0 1/1 1/0 1/0 1/2 1/0 1/0
2/5 21" 21" 2/1 2/0 2/4 2/3 2/3 2/2 2/0 2/' 2/1 21" 2/2 2/1 2/1 2/1 2/3 21"
3/0 3/5 3/6 3/2 31" 3/0 3/2 3/3 3/3 31" 3/3 3/4 31" 3/0 3/0 3/3 3/0 3/2 31"
41" 4/3 4/2 4/0 41" 41" 4/0 4/2 4/3 41" 4/5 4/3 41" 41" 41" 4/1 41" 4/0 41"
всего 8 8 8 8 8 8 8 8 8 8 8 8 8 8 8 8 8 8 8
1 КСТ 0/0 0/0 0/0 0/0 0/1 0/0 0/1 0/1 0/0 0/0 0/0 0/0 0/1 0/1 0/1 0/1 0/1 0/0 0/1
1/" 1/" 1/" 1/" 1/0 1/" 1/0 1/0 1/" 1/" 1/" 1/1 1/0 1/0 1/0 1/0 1/0 1/" 1/0
2/1 21" 21" 2/1 21" 2/1 2/" 21" 21" 2/1 2/" 2/0 21" 21" 21" 21" 21" 2/1 21"
3/0 3/1 3/1 3/0 31" 3/0 3/" 31" 3/1 3/0 3/" 31" 31" 31" 31" 31" 31" 3/0 31"
41" 4/0 4/0 41" 41" 41" 4/" 41" 4/0 41" 4/1 41" 41" 41" 41" 41" 41" 41" 41"
всего 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1
2 НПКК 0/1 0/1 0/0 0/1 0/2 0/2 0/1 0/1 0/0 0/2 0/0 0/1 0/2 0/2 0/2 0/2 0/2 0/0 0/2
1/0 1/0 1/" 1/1 1/0 1/0 1/0 1/1 1/" 1/0 1/" 1/0 1/0 1/0 1/0 1/0 1/0 1/1 1/0
2/1 21" 21" 2/0 21" 21" 2/1 2/0 21" 21" 2/" 2/1 21" 21" 21" 21" 21" 2/0 21"
3/0 3/1 3/2 31" 31" 31" 3/0 31" 3/2 31" 3/" 3/0 31" 31" 31" 31" 31" 3/1 31"
41" 4/0 4/0 4 Г 41" 41" 4/" 41" 4/0 41" 4/2 41" 41" 41" 41" 41" 41" 4/0 41"
всего 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2
Я ►и
Е
§
0 я
в »
N
►и
1
>
ш я
о =
м ►и
в
§
м в
н
>
V
в
о
»
В
Я ^
в в
X
м о я
о
»
§
м й в в в в
5-
ы оо
Примечание. СПКК - светлоклеточная почечно-клеточная карцинома; ХПКК - хромофобная почечно-клеточная карцинома; ППКК-папиллярная почечно-клеточная карцинома; КСТ - карцинома из собирательных трубочек; НПКК - неклассифицируемая почечно-клеточная карцинома. В числителе выраженность экспрессии; в знаменателе - число случаев.
Рис.1. Опухоли почки, гематоксилин и эозин, увел. х100. А - Саркоматоидная светлоклеточная почечно-клеточная карцинома. Саркоматоидный компонент представлен разрастаниями веретеновидных клеток. Б - Саркоматоидная хромофобная почечно-кле-точная карцинома. Саркоматоидный компонент представлен разрастаниями фибробластоподобных клеток. В - Саркоматоидная неклассифицируемая почечно-клеточная карцинома. Опухоль состоит
из недиффренцированных веретеновидных клеток. Г - Лейомиосаркома. Опухоль представлена пучками веретеновидных клеток с наличием плеоморфных клеток. Д - Монофазная синовиальная саркома. Опухоль представлена компактно расположенными клетками с веретеновидными ядрами и плохо различимой цитоплазмой. Е - Солитарная фиброзная опухоль. Опухоль состоит из веретеновидных клеток, формирующих разнонаправленные клеточно-волокнистые пучки.
Таблица 3
ИГХ-исследование веретеноклеточных мезенхимальных опухолей почки
Антитела
СК7 СК ЛЕ1/ ЕМЛ Н- Без. БМЛ Са1р. СБ СБ Вс1-2 БТЛТ-6 ТЬЕ-
8/18 ЛЕ3 СаЫ 34 99 1
ЛС 0/2 0/2 0/1 0/1 0/0 0/0 0/0 0/0 0/1 0/2 0/1 0/2 0/2
1/0 1/0 1/1 1/1 1/" 1/" 1/" 1/" 1/1 1/0 1/0 1/0 1/0
2/" 2/" 2/" 2/0 2/" 2/" 2/" 2/" 2/0 2/" 2/1 2/" 2/"
3/" 3/" 3/" 3/" 3/1 3/2 3/" 3/2 3/" 3/" 3/0 3/" 3/"
4/" 4/" 4/" 4/" 4/1 4/" 4/2 4/0 4/" 4/" 4/" 4/" 4/"
всего 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2
МСС 0/0 0/0 0/0 0/0 0/1 0/1 0/1 0/0 0/1 0/0 0/0 0/1 0/0
1/1 1/1 1/1 1/1 1/0 1/0 1/0 1/0 1/0 1/" 1/" 1/0 1/"
2/0 2/0 2/0 2/0 2/" 2/" 2/" 2/1 2/" 2/" 2/" 2/" 2/"
3/" 3/" 3/" 3/" 3/" 3/" 3/" 3/" 3/" 3/1 3/1 3/" 3/"
4/" 4/" 4/" 4/" 4/" 4/" 4/" 4/" 4/" 4/0 4/0 4/" 4/1
всего 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1
СФО 0/2 0/2 0/2 0/1 0/1 0/2 0/0 0/0 0/0 0/0 0/1 0/0 0/2
1/0 1/0 1/0 1/1 1/1 1/0 1/2 1/" 1/" 1/" 1/0 1/" 1/0
2/" 2/" 2/" 2/0 2/0 2/" 2/0 2/1 2/" 2/2 2/1 2/" 2/"
3/" 3/" 3/" 3/" 3/" 3/" 3/" 3/" 3/" 3/0 3/0 3/" 3/"
4/" 4/" 4/" 4/" 4/" 4/" 4/" 4/0 4/2 4/" 4/" 4/2 4/"
всего 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2
Примечание. ЛС-лейомиосаркома; МСС-монофазная синовиальная саркома; СФО-солитарная фиброзная опухоль. В числителе выраженность экспрессии, в знаменателе- число случаев по [10].
Преобладали опухоли в стадии рТ3 (п=6). В остальных случаях опухоль соответствовала стадиям рТ1-рТ2. Во всех СХПКК в стадии рТ3 клетки саркоматоидного компонента составляли более 50% всей опухолевой популяции.
Саркоматоидная ППКК (СППКК). В 8 наблюдениях в карциноматоидном компоненте выявлена коэкспрессия маркерных антигенов ППКК: ЛМЛСЯ, СК8/18, ЛБ1/ЛБ3 и РАХ8. В 2 случаях из 8 СППКК карциноматозный компонент был представлен ППКК обоих типов. В 1 СППКК карциноматозный компонент состоял исключительно из ППКК 1-го типа, а в остальных случаях ППКК 2-го типа. Позитивная реакция на СБ10 выявлена в 7 случаях в папиллярных структурах 2-го типа. Положительная экспрессия СК7 и ЕМА обнаружена в 5 СППКК преимущественно в зонах роста ППКК 1-го типа. В большинстве случаев (п=4) количество клеток саркоматоид-ного компонента варьировало в интервале от 50 до 90%, а в 1 образце в диапазоне от 21 до 50%. В 3 наблюдениях количество саркоматоидных клеток не превышало 20%. В 7 СППКК сарко-матоидный компонент был представлен веретенообразными клетками подобно фибросар-коме. В 1 образце саркоматоидный компонент
состоял из плеоморфных клеток и напоминал недифференцированную плеоморфную саркому. Преобладали опухоли в стадии рТ2 (п=4). В 3 случаях определена стадия рТ3 и в 1 наблюдении - рТ4. Во всех СППКК в стадиях рТ3-рТ4 клетки саркоматоидного компонента составляли более 50% всей опухолевой популяции.
Саркоматоидная КСК (СКСК). В 1 наблюдении карциноматоидный компонент опухоли был представлен тубулярными, тубуло-папил-лярными и солидными структурами клеток с эозинофильной цитоплазмой. Степень ядерной градации соответствовала С3. Карциноматоз-ный компонент позитивно реагировал на и1ех-1, СК7, СК8/18, АЕ1/АЕ3, HMWCK, ЕМА, РЛХ8, УтепИп и по иммунопрофилю соответствовал КСК. Количество саркоматоидных клеток в этом случае составило около 60% всей опухолевой популяции. Стадия опухоли была оценена как рТ3.
Саркоматоидная НПКК (СНПКК). В 2 образцах микроскопически опухоль характеризовалась пролиферацией фибробластоподоб-ных клеток с ареалами опухолевого некроза и кровоизлияния. Клетки имели веретенообразную форму, скудную цитоплазму и ги-перхромные ядра с наличием фигур мито-
зов более 10 в 10 полей зрения микроскопа (п. з. м.) при большом увеличении (рис. 1в).
В обоих случаях в опухолевых клетках в сильно- и выраженно-позитивном диапазоне выявлена коэкспрессия ЛЕ1/ЛЕ3, РЛХ8 и У1шепНп. В 1 СНПКК обнаружена умеренно-позитивная коэкспрессия СК7 и СА9, а в другой - умеренно- и сильно-позитивная реакция на СБ10 и СК8/18. Стадия опухоли в обоих наблюдениях соответствовала стадии рТ3.
Лейомиосаркома (ЛС). Первичная ЛС по данным литературы составляет менее 1% всех злокачественных опухолей почки [11]. В нашем исследовании в 2 случаях опухоль микроскопически была представлена из пучков веретеновидных клеток с обильной цитоплазмой, овальными и/или веретеновидными гиперхромными ядрами с закругленными концами и выраженными ядрышками (рис. 1г).
В отдельных полях микроскопа визуализировались клетки с выраженным плеоморфизмом и ареалы коагуляционного некроза. В обоих наблюдениях количество митозов составило более 10 на 10 п. з. м. при большом увеличении. При ИГХ-исследовании в опухолевых клетках на фоне выраженно-позитивной коэкспрессии 8МЛ и УтепИп была обнаружена положительная реакция на Н-саЫезшоп, Са1рошп и Безш1 в сильно-и выраженно-позитивном диапазонах (рис. 2а).
В 1 образце опухолевые клетки позитивно реагировали с Вс1-2. Стадия опухоли была определена в пределах рТ3-рТ4.
Монофазная синовиальная саркома. На сегодняшний момент в литературе описано около 50 случаев синовиальной саркомы почки [12]. В нашем исследовании у 1 пациента основу целлюлярного матрикса опухоли составляли компактно расположенные клетки с веретеновидными ядрами и плохо различимой цитоплазмой. Большинство клеток имели гиперхромные ядра, однако встречались клетки, в ядрах которых определялись по 1-2 мелких ядрышка и мелкогранулярный хроматин, хаотично расположенный в кариоплазме. Располагаясь в виде беспорядочно переплетающихся тяжей, эти клетки местами формировали фасцикулярные структуры (рис. 1д).
Количество митозов составило 9 на 10 п. з. м. при большом увеличении. При ИГХ-исследовании в опухолевых клетках на фоне выраженно-позитивной ядерной экспрессии ТЬЕ-1 была выявлена сильно-позитивная реакция с СБ99, Вс1-2, У1шепНп и Са1рошп. Кроме того, визуализировалась фокальная коэкспрессия ЕМА, СК7 и СК 8/18 (рис. 2б). Стадия опухоли соответствовала рТ4.
Солитарная фиброзная опухоль. Почечная локализация для этой опухоли является чрезвычайно редкой. На сегодняшний день в англоязычной литературе описано около 40 подобных случаев [13]. В нашем исследовании в 2 наблюдениях гистологически опухоль состояла из большого количества широких капилляров и синусоидов, выстланных эндотелием и окруженных компактно расположенными опухолевыми клетками. Целлюлярный матрикс формировали клетки с нечеткими контурами и узким, неразличимым ободком цитоплазмы. Ядра имели округлую, овальную или веретеновидную форму и варьировали в размерах от 1,5 до 2 раз. В большинстве клеток определялись 1 центральное или 2-3 мелких, хаотично расположенных в кариоплазме, ядрышка. В обоих случаях преобладали клетки с веретеновидными ядрами. Эти клетки местами формировали широкие разнонаправленные клеточно-волокнистые пучки (рис. 1е).
Количество митозов было незначительным и составило от 1 до 3 в 10 п. з. м. при большом увеличении. При ИГХ-исследовании в опухолевых клетках на фоне выраженной ядерной экспрессии 8ТЛТ-6 была выявлена выраженно-позитив-ная реакция на СБ34, Утепйп и умеренно-позитивная коэкспрессия СБ99 и Са1рошп (рис. 2в).
В 1 образце опухолевые клетки положительно реагировали с Вс1-2 в умеренно-позитивном диапазоне. Стадия опухоли была оценена в пределах рТ1-рТ2.
При сравнительном ИГХ-анализе в карци-номатозном и саркоматоидном компонентах СПКК были получены статистически значимые различия (р<0,05) по экспрессии панци-токератина (АЕ1/АЕ3), ЕрСЛМ, ЕМЛ, СЛ9, У1шепИп, Вс1-2, 8МЛ и р53. В то же время экспрессия остальных использованных в исследовании маркеров в обоих компонентах не была статистически значимой (р>0,05) (табл. 5).
Экспрессия ЛЕ1/ЛЕ3, ЕМЛ и У1шепНп в СПКК. Положительная экспрессия АЕ1/АЕ3 выявлена в 38 (86%) случаях в карциноматозном компоненте и в 28 (64%) наблюдениях в саркома-тоидных клетках (Р=0,025). Реакция на АЕ1/АЕ3 обнаружена в паттернах К+/С+ (24/44), К+/С-(14/44) и К-/С+ (4/44). Частота позитивной экспрессии ЕМА в карциноматозном и саркомато-идном компонентах составила 70% (31/44) и 41% (18/44) соответственно (Р=0,009). Позитивная реакция на ЕМА была обнаружена в паттернах К+/С+ (18/44) и К+/С- (13/44). Положительная экспрессия У1шепИп выявлена в 26 (59%) случаях в карциноматозном компоненте и во всех наблюдениях (100%) в саркоматоидных клетках (Р=0,000) в виде К+/С+ (26/44) и К-/С+ (18/44).
2В 2Е
Рис.2. Опухоли почки, гематоксилин и эозин, увел. х100. А - Диффузная экспрессия SMA в клетках лейомиосаркомы почки. Б - Диффузная ядерная экспрессия TLE-1 в клетках первичной монофазной синовиальной саркомы почки. В - Диффузная ядерная экспрессия STAT-6 в клетках солитарной фиброзной опухоли почки. Г - Мембранная экспрессия СА9 в клетках обоих компонентов саркоматоидной светлоклеточной почечно-клеточной карциномы. Д - Экспрессия CD10 в клетках обоих компонентов саркоматоидной светлоклеточной почечно-кле-точной карциномы. Е - Экспрессия CD10 в клетках обоих компонентах саркоматоидной светлокле-
точной почечно-клеточной карциномы.
Экспрессия СК7, СК8/18, ЕрСАМ и НМ"^СК в СПКК. Положительная экспрессия СК7 выявлена в 14 (32%) случаях в карциноматозном компоненте и в 6 (14%) в саркоматоидных клетках (Р=0,073). Реакция на маркер обнаружена в паттернах К+/С- (14/44) и К-/С+ (6/44). Одновременная экспрессия СК7 в клетках обоих компонентов не отмечалась. Позитивная экспрессия СК8/18 выявлена в 39 (89%) случаях в карциноматозных клетках и в 34 (77%) образцах в саркоматоидного компонента (Р=0,256). Реакция на СК8/18 обнаружена во всех паттернах в виде К+/С+ (30/44), К+/С- (9/44) и К-/ С+ (4/44). Положительная экспрессия ЕрСАМ выявлена в 9 (20%) случаях только в паттерне К+/С- (Р=0,002). Частота позитивной экспрессии HMWCK в карциноматозном и саркомато-идном компонентах составила 9% (3/44) и 23% (10/44) соответственно (Р=0,143). Реакция на HMWCK была обнаружена во всех паттернах в виде К+/С+ (3/44), К+/С- (1/44) и К-/С+ (7/44).
Экспрессия АМАСЯ, СА9, СБ10 и РАХ8 в СПКК. Положительная экспрессия АМАСЯ выявлена в 8 (18%) случаях в карциноматозном компоненте и в 9 (20%) наблюдениях в клетках саркоматоидного компонента (Р=0,999). Реакция на маркер обнаружена во всех паттернах в виде К+/С+ (7/44), К+/С- (1/44) и К-/ С+ (2/44). Частота позитивной экспрессии СА9 в карциноматозном и саркоматоидном компонентах составила 55% (24/44) и 84 % (37/44) соответственно (Р=0,005). Реакция на СА9 выявлена во всех паттернах в виде К+/С+ (22/44), К+/С- (2/44) и К-/С+ (15/44) (рис. 2г).
Позитивная экспрессия СБ10 обнаружена в 33 (75%) случаях в карциноматозном компоненте и в 31 (70%) наблюдении в саркома-тоидных клетках (Р=0,811). Реакция на маркер выявлена во всех паттернах в виде К+/С+ (26/44), К+/С- (7/44) и К-/С+ (5/44) (рис. 2д).
Позитивная экспрессия РАХ8 визуализировалась в 31 (70%) случае карциноматозного компонента и в 28 (64%) образцах в клетках сар-коматоидного компонента (Р=0,650). Реакция на маркер обнаружена во всех паттернах в виде К+/С+ (18/44), К+/С- (13/44) и К-/С+ (10/44).
Экспрессия СБ117, СБ99, СБ34 и и1ех-1 в СПКК. Положительная экспрессия СБ117 выявлена в 7 (16%) случаях в карциноматозном компоненте и в 4 (9%) наблюдениях в сарко-матоидных клетках (Р=0,358). Одновременная экспрессия СБ117 в обоих компонентах не наблюдалась. Частота положительной экспрессии СБ99 в карциноматозном и саркома-тоидном компонентах составила 7% (3/44) и 18% (8/44) соответственно (Р=0,196). Одновременная экспрессия СБ99 в клетках обоих
компонентов не визуализировалась. Во всех случаях отмечена негативная реакция на СБ34 в обоих компонентах. Позитивная экспрессия и1ех-1 обнаружена в 1 (2%) случае в карци-номатозном компоненте опухоли (Р=0,999).
Экспрессия Вс1-2, 8МА, р53 и 8-100 в СПКК. Положительная экспрессия Вс1-2 выявлена в 25 (57%) случаях в карциноматозном компоненте и в 9 (20%) наблюдениях в саркоматоидных клетках (Р=0,000). Реакция на маркер обнаружена в паттернах К+/С+ (9/44) и К+/С- (16/44). Позитивная экспрессия 8МА определялась в 7 образцах только в клетках саркоматоидного компонента (Р=0,012). Положительная экспрессия р53 визуализировалась в 12 (27%) образцах в карциноматозном компоненте и в 28 (64%) случаях в саркоматоидных клетках (Р=0,001). Реакция на р53 обнаружена во всех паттернах в виде К+/С+ (10/44), К+/С- (2/44) и К-/С+ (18/44) (рис. 2е). Во всех случаях отмечена негативная реакция на 8-100 в обоих компонентах.
Сравнительная оценка экспрессии СА9, СБ10, СК7, СБ117, ЕрСАМ, АМАСЯ и У1теп«п в обоих компонентах ССПКК, СХПКК и СППКК. При сравнительном ИГХ-анализе реакций с маркерными антигенами ССПКК, СХПКК и СППКК, в карциноматозном компоненте, были получены статистически значимые различия (р<0,05) экспрессии СА9, СБ10, СК7, СБ 117, ЕрСАМ, АМАСЯ и У1тепНп, в то же время различия между экспрессиями этих маркеров в саркоматоидном компоненте не были статистически значимы (табл. 6, 7, 8).
ЗАКЛЮЧЕНИЕ
1. Имеется явная связь между количеством саркоматоидных клеток и стадией опухоли в СКП. Установлено, что количество саркоматоидных клеток в стадиях рТ3-рТ4 (п=28; 64%), в подавляющем большинстве случаев (п=27; 96%), составляло более 50% от всей опухолевой популяции.
2. В нашем исследовании во всех случаях в саркоматоидных клетках выявлена позитивная экспрессия Утепйп. Синхронная экспрессия маркера в карциноматозном компоненте обнаружена в 26 (59%) наблюдениях. Помимо этого, в ряде случаев (п=7; 16%) саркоматоидные клетки демонстрировали миофибробластический фенотип и экспрессировали 8МА. Таким образом, полученные данные позволяют утверждать, что для СКП свойственен полный тип ЭМТ в результате глубокой дерепрессии генома ПКК.
3. При дифференциальной диагностике ме-зенхимальных опухолей почки с СКП наиболее информативными маркерами в пользу последней являются СК8/18, АЕ1/АЕ3, СА9, РАХ8 и СБ10.
Таблица 4
Распределение случаев в зависимости от гистологического строения
N
Морфология Стадия опухоли Количество саркоматоидных клеток в процентах (%)
рТ1 рТ2 рТ3 рТ4 1-20% 21-50% 50-99% 100%
Светлоклеточная почечно-клеточ- 2 7 11 4 3 7 14 0
ная карцинома
Хромофобная почечно-клеточная карцинома 1 2 6 0 2 1 6 0
Папиллярная почечно-клеточная карцинома 0 4 3 1 3 1 4 0
Карцинома из собирательных канальцев 0 1 0 0 1 0
Неклассифицируемая саркоматоид-ная почечно-клеточная карцинома 0 2 0 0 2
Лейомиосаркома 0 1 1 0 2
Монофазная синовиальная саркома 0 1 0 1
Солитарная фиброзная опухоль 1 1 0 0 2
Всего 4 14 24 7 8 9 25 7
Таблица 5
Сравнительная оценка экспрессий маркеров в карциноматозном и саркоматоидном компонентах СПКК
Маркеры К+/С+ К+/С- К-/С+ К-/С- Всего К+ Всего С+ Р
СК7 0 14 6 24 14 (32%) 6 (14%) 0,073
СК8/18 30 9 4 1 39 (89%) 34 (77%) 0,256
АЕ1/АЕ3 24 14 4 2 38 (86%) 28 (64%) 0,025*
HMWCK 3 1 7 33 4 (9%) 10 (23%) 0,143
ЕрСАМ 0 9 0 35 9 (20%) 0 (0%) 0,002*
ЕМА 18 13 0 13 31 (70%) 18 (41%) 0,009*
СА9 22 2 15 5 24 (55%) 37 (84%) 0,005*
АМАСЯ 7 1 2 34 8 (18%) 9 (20%) 0,999
РАХ8 18 13 10 3 31 (70%) 28 (64%) 0,650
и1ех-1 0 1 0 43 1 (2%) 0 (0%) 0,999
У1тепИп 26 0 18 0 26 (59%) 44 (100%) 0,000*
СБ10 26 7 5 6 33 (75%) 31 (70%) 0,811
СБ34 0 44 0 (0%) -
СБ99 0 3 8 33 3 (7%) 8 (18%) 0,196
СБ117 0 7 4 33 7 (16%) 4 (9%) 0,358
Вс1-2 9 16 0 19 25 (57%) 9 (20%) 0,000*
8МА 0 " 7 37 0 (0%) 7 (16%) 0,012*
Р53 10 2 18 14 12 (27%) 28 (64%) 0,001*
8-100 0 44 0 (0%) -
Примечание. СПКК-саркоматоидная почечно-клеточная карцинома; К-карциноматозные клетки; С-саркоматоидные клетки. *Статически значимая разница.
Таблица 6
Сравнительная оценка экспрессий маркерных антигенов в обоих компонентах ССПКК и СХПКК
ССПКК СХПКК Р ССПКК СХПКК Р
К+ К+ С+ С+
CA9 24/24 0/9 0,000* 19/24 9/9 0,290
CK7 0/24 9/9 0,000* 3/24 0/9 0,544
CD10 24/24 0/9 0,000* 17/24 5/9 0,437
CD117 0/24 7/9 0,000* 3/24 0/9 0,544
EpCAM 0/24 9/9 0,000* 0/24 0/9 -
Vimentin 15/24 0/24 0,001* 24/24 9/9 -
Таблица 7
Сравнительная оценка экспрессий маркерных антигенов в обоих компонентах СХПКК и ССПКК
СХПКК СППКК Р СХПКК СППКК Р
К+ К+ С+ С+
AMACR 0/9 8/8 0,000* 0/9 2/8 0,205
CK7 9/9 4/8 0,029* 0/9 1/8 0,470
CD10 0/9 7/8 0,000* 5/9 6/8 0,619
CD117 7/9 0/8 0,002* 0/9 1/8 0,470
EpCAM 9/9 0/8 0,000* 0/9 0/8 -
Vimentin 0/9 8/8 0,000* 9/9 8/8 -
Таблица 8
Сравнительная оценка экспрессий маркерных антигенов в обоих компонентах ССПКК и СППКК
ССПКК СППКК Р ССПКК СППКК Р
К+ К+ С+ С+
AMACR 1/24 8/8 0,000* 1/24 2/8 0,146
CA9 24/24 0/8 0,000* 19/24 5/8 0,378
CK7 0/24 4/8 0,001* 3/24 1/8 1,000
В большинстве случаев, в независимости от гистологического варианта СКП эти маркеры были обнаружены в саркоматоидном компоненте.
4. Высокая частота экспрессии СА9 (84%) в саркоматоидных клетках позволяет утверждать, что этот трансмембранный белок способствует саркоматоидной трансформации ПКК. Одной из причин данного феномена, вероятнее всего, является чрезмерная индукция карбоангидразы IX вследствие нарастающей гипоксии в раковых клетках.
5. При оценке реакции опухолевых клеток с Bcl-2 установлено значительное отличие частоты экспрессии в карциноматозном и сар-коматоидном компонентах (57% и 20% соответственно) СКП. Результаты исследования дают основание предполагать, что в условиях
повышенной экспрессии Bcl-2 в клетках карци-номатозного компонента, процесс подавления апоптоза способствует аберрантному росту раковых клеток с последующей саркоматоидной трансформацией. Вместе тем, противоположная картина наблюдается при сравнительной оценке экспрессии р53. Значительное отличие частоты экспрессии р53 в карциноматозном и саркоматоидном компонентах (27% и 64% соответственно) демонстрирует, что данный белок является важным звеном в патогенезе СКП.
Конфликт интересов. Авторы заявляют об отсутствии конфликта интересов.
Conflict of interest. The authors have no conflict of interests to declare.
ЛИТЕРАТУРА/ REFERENCES
1. Shuanzeng W., Tahseen A.S. The Pathology and Molecular Genetics of Sarcomatoid Renal Cell Carcinoma: A Mini-Review. J Kidney Cancer VHL. 2017; 4(2): 19-23. doi: 10.15586/jkcvhl.2017.70.
2. Zhang H., Majeed N.K., Sharifi R., Guzman G. A Case of Sarcomatoid Renal Cell Carcinoma With Osseous Metaplasia and Papillary Renal Cell Carcinoma Metastasis. J Clinical Pathology. 2019; 12. doi.org/10.1177/2632010X19848005.
3. Lebacle C., Pooli A., Bessede T., Irani J., Pan tuck A.J., Drakaki A. Epidemiology, biology and treatment of sarcomatoid RCC: current state of the art. Format: World J Urol. 2019 Jan;37(1):115-123. doi: 10.1007/s00345-018-2355-y.
4. Pichler R., Comperat E., Klatte T., Pichler M., Loidl W., Lusuardi L., Schmidinger M. Renal Cell Carcinoma with Sarcomatoid Features: Finally New Therapeutic Hope? J Cancers. 2019; 11: 422. doi:10.3390/cancers11030422.
5. Mohammed N, Parminder S. Epidemiology and outcome of sarcomatoid renal cell cancer compared to clear cell renal cancer: A Surveillance, Epidemiology, and End Results (SEER) database review. Journal of Clinical Oncology. 2017; 32:504. doi: 10.1200/jco.2014.32.4_suppl.504.
6. Zhang B.Y., Thompson R.H., Lohse C.M., Leibovich B.C., Boorjian S.A., Cheville J.C., Costello B.A. A novel prognostic model for patients with sarcomatoid renal cell carcinoma. BJU Int. 2015; 115: 405-411. doi:10.1111/bju.12781.
7. Tsu-Feng L, Wun-Rong L, Marcelo C. Compare Fuhrman Nuclear and Chromophobe Tumor
Grade on Chromophobe RCC. Open Med (Wars). 2019; 14: 336-342. doi: 10.1515/med-2019-0032.
8. Liu N., Gan W., Qu F., Wang Z., Zhuang W., Agizamhan S., Xu L., Yin J., Guo H., Li D. Does the Fuhrman or World Health Organization/ International Society of Urological Pathology Grading System Apply to the Xp11.2 Translocation Renal Cell Carcinoma? The American Journal of Pathology. 2018;188(4): 929936. https://doi.org/10.1016Zj.ajpath.2017.12.018
9. Williamson S.R., Taneja K., Cheng L. Renal cell carcinoma staging: pitfalls, challenges, and updates. Histopathology. 2019 Jan;74(1):18-30. doi: 10.1111/his. 13743.
10. Yu W., Wang Y., Jiang Y., Zhang W., Li Y. Distinct immunophenotypes and prognostic factors in renal cell carcinoma with sarcomatoid differentiation: a systematic study of 19 immunohistochemical markers in 42 cases. BMC Cancer. 2017; 17: 293. doi: 10.1186/s12885-017-3275-8.
11. Young S.K., Amirali S., Christopher S. H., Jane D. C. H, Eric A. S. Renal Leiomyosarcoma: Case Report and Review of the Literature. World J Nephrol Urol. 2015 Jun; 4(2): 213-217. doi: 10.14740/wjnu214w.
12. El Chediak A., Mukherji D., Temraz S., Nassif S., Sinno S., Mahfouz R., Shamseddine A. Primary synovial sarcoma of the kidney: a case report of complete pathological response at a Lebanese tertiary care center. BMC Urol. 2018; 18: 40. doi: 10.1186/s12894-018-0358-z.
13. Dzmitry F., Edward D., Matthew C. O'Dell, Swetha V., Jeremy B. Solitary Fibrous Tumor of the Kidney: A Case Report and Literature Review. J Cureus. 2016 Feb; 8(2): e490. doi: 10.7759/cureus.490.
