CC BY
29
Репродуктивное здоровье девочки
Джангишиева А.К.1, Муравьева В.В.1, Уварова Е.В.1, 2, Припутневич Т.В.1, Батырова З.К.1_
Федеральное государственное бюджетное учреждение «Национальный медицинский исследовательский центр акушерства, гинекологии и перинатологии имени академика В.И. Кулакова» Минздрава России, 117997, г. Москва, Российская Федерация
Для корреспонденции
Джангишиева Альбина Карагишигаджиевна - аспирант кафедры акушерства и гинекологии ФГБУ «НМИЦ АГП им. В.И. Кулакова» Минздрава России Адрес: 117997, г. Москва, ул. Академика Опарина, д. 4 Телефон: (495) 438-85-42 E-mail: albina.chervonaya@mail.ru https://orcid.org/0000-0003-2428-2076
Особенности микробиоценоза влагалища у девочек в возрасте от 3 до 8 лет со склерозирующим лихеном вульвы
В статье представлены собственные результаты исследования состава микробиоты влагалища методом MALDI-TOF масс-спектрометрия у девочек с диагнозом «склерозирую-щий лихен вульвы» в сравнении со здоровыми сверстницами.
Ключевые слова: девочки; хронический вульвит; дерматоз; склерозирующий лихен; микробиоценоз; MALDI-TOF масс-спектрометрия
Финансирование. Исследование не имело спонсорской поддержки. Конфликт интересов. Авторы заявляют об отсутствии конфликта интересов.
Для цитирования: Джангишиева А.К., Муравьева В.В., Уварова Е.В., Припутневич Т.В., Батырова З.К. Особенности микробиоценоза влагалища у девочек в возрасте от 3 до 8 лет со склерозирующим лихеном вульвы // Репродуктивное здоровье детей и подростков. 2022. Т. 18, № 4. С. 31-36. 001: https://www.doi.org/10.33029/1816-2134-2022-18-4-31-36 Статья получена 05.09.2022. Принята в печать 01.11.2022.
Dzhangischieva A.k.1, Muravieva V.V.1, Uvarova E.V.1, 2, Priputnevich T.V.1, Batyrova Z.K.1
National Medical Research Center for Obstetrics, Gynecology and Perinatology named after Academician V.I. Kulakov of the Ministry of Health of the Russian Federation, 117997, Moscow, Russian Federation
Features of microbiocenosis of the vagina in girls aged 3 to 8 years with lichen sclerosus of the vulva
The article presents our own results of the study the composition of the vaginal microbiota by MALDI-TOF mass spectrometry in girls diagnosed with lichen sclerosus of the vulva in comparison with healthy peers.
Keywords: girls; dermatosis; chronic vulvitis; lichen sclerosis; microbiocenosis; MALDI-TOF mass spectrometry
Funding. The study had no sponsor support.
Conflict of interest. The authors declare no conflict of interest.
For citation: Dzhangischieva A.G., Muravieva V.V., Uvarova E.V., Priputnevich T.V., Batyrova Z.K. Features of microbiocenosis of the vagina in girls aged 3 to 8 years with lichen sclerosus of the vulva. Reproduktivnoe zdorov'e detey i podrostkov [Pediatric and Adolescent Reproductive Health]. 2022; 18 (4): 31-6. DOI: https://www.doi.org/10.33029/1816-2134-2022-18-4-31-36 (in Russian) Received 05.09.2022. Accepted 01.11.2022.
Склерозирующий лихен (СЛ) вульвы -это медленно развивающееся хроническое заболевание с малоизученными этиологией и патогенезом, проявляющееся в виде выраженной очаговой атрофии кожи и слизистых оболочек половых органов [1-4]. Среди причин, возможно, вызывающих СЛ вульвы, до сих пор нет единого мнения [5-7]. В этиологии и патогенезе данной патологии наряду с многочисленными теориями важную роль играет инфекционная [8, 9]. А в инфекционной составляющей не исключается влияние условно-патогенных микроорганизмов (УПМ), многие из них входят в состав нормальной микрофлоры или являются облигатными патогенами человека [10]. Среди таких возбудителей грам-отрицательные, грамположительные микроорганизмы, аэробные и анаэробные бактерии [11]. Считается, что, с одной стороны, данные микроорганизмы являются представителями нормальной микрофлоры и, препятствуя заселению патогенов, обеспечивают колонизационную резистентность экологической ниши [12]. С другой стороны, при определенных условиях, приобретая агрессивные свойства, могут быть этиологическим фактором воспалительного процесса [13, 14]. Несмотря на частое указание роли микробного агента в формировании и рецидивировании изучаемой патологии, в доступных литературных источниках не было найдено систематического описания микробиологического состава влагалища девочек с СЛ вульвы.
Цель - проанализировать состав мик-робиоты влагалища у девочек с диагнозом «склерозирующий лихен вульвы» методом MALDI-TOF масс-спектрометрии.
Материал и методы
Были обследованы 105 девочек в возрасте от 3 до 8 лет с подтвержденным диагнозом «склерозирующий лихен вульвы» на базе ФГБУ «НМИЦ АГП им. акад. В.И. Кулакова» Минздрава России. В 1-ю группу включены 75 девочек с подтверж-
денным диагнозом «СЛ вульвы», II группу составили здоровые девочки (п=30). Все девочки были включены в исследование после обязательного получения добровольного информированного согласия законного представителя. Далее с целью изучения возможной этиопатогенетической роли микробиоты влагалища в формировании и прогрессировании изучаемого дерматоза было проведено бактериологическое исследование, которое основывалось на оценке состояния микробиоты влагалища путем видовой идентификации микроорганизмов методом времяпролетной MALDI-TOF масс-спектрометрии. Материалом для микробиологического исследования служило отделяемое из просвета слизистой оболочки влагалища, полученное за ги-менальным кольцом, взятое в стандартные одноразовые пластиковые пробирки с транспортной средой, пробирки транспортировались в микробиологическую лабораторию в течение 2 ч.
Результаты
В процессе проведенного бактериологического исследования содержимого влагалища методом MALDI-TOF масс-спектрометрии выделено 123 микроорганизма у 105 пациенток. При культуральном исследовании установлено, что композиционный состав микрофлоры влагалища пациенток с СЛ, как и в группе сравнения, включает широкий спектр УПМ из групп факультативных и облигатных анаэробов и микроаэрофилов (рис. 1).
Согласно полученным результатам, превалирующими представителями влагалищной микробиоты (ВМ) в обеих группах были факультативно-анаэробные микроорганизмы, что составило 65% всего микробного пула в 1-й и 79% во 2-й группе. Существенных различий в частоте выявления лактобацилл, бифидобактерий, гард-нереллы не выявлено.
При более детальном сравнительном анализе состава ВМ (рис. 2) показано следующее.
■ Факультативно- ■ Облигатные ■ Gardnerella ■ Бифидобактерии ■ Лактобактерии анаэробные анаэробы vaginalis
Рис. 1. Состав микробиоты влагалища в сравниваемых группах Здесь и на рис. 2: расшифровка аббревиатур дана в тесте.
УПМ представлены 11 родами факуль тат ивно-анаэробных микроорганизмов (Escherichia, Proteus, Staphylococcus, En terococcus, Streptococcus, Corynebacterium Haemophilus, Facklamia, Actinomyces, Aero coccus, Micrococcus), 8 родами строгих анаэробов (Propionomicrobium, Fusobac terium, Porphyromonas, Dialist er, Veillonella
%
■ СЛ (n=75), % ■ Зд (n=30), %
Рис. 2. Состав микробиоты влагалища в группах сравнения
- Anaerococcus, Finegoldia, Prevotella) и одним родом микроаэрофилов - Gardner- ella vaginalis (G. vaginalis). Микроорганизмы
, из группы комменсалов представлены
- 2 родами (Lactobacillus, Bifidobacterium). Среди факультативно-анаэробных микро- организмов лидирующие позиции статистически значимо чаще (р=0,0002)
в группе СЛ занимали микроорганизмы рода Streptococcus (92,6% случаев), преимущественно стрептококки, с которыми ассоциированы инфекционно-воспали-тельные заболевания урогенитального тракта (S. anginosus - 57,3%, S. agalactiae -12%, S. pyogenes - 1,3%), в группе сравнения они выделялись статистически значимо реже (3%). Стрептококки, выявляемые преимущественно у здоровых девочек (S. oralis, S. constellatus, S. parasanguis, S. parasanguis, S. mitis, S. gordonii, S. parasanguinis), обнаружены в 22% случаев в основной группе и в 27% - во 2-й. Вторую позицию среди факультативно-анаэробных УПМ занимали преимущественно коагулазоотри-цательные стафилококки (44,7 и 30,6% соответственно). Среди них (S. epidermidis, S. hominis, S. haemolyticus, S. simulans), в обеих группах лидировал вид S. epidermidis (33 и 13% соответственно). Обращает на себя внимание, что Staphylococ-cus aureus, обладающий большими патогенными потенциями, обнаружен только в группе пациентов с СЛ вульвы - 9,3% (у каждой 10-й девочки) (р=0,018). Доля энтеробактерий в обеих группах составила 40 и 43% соответственно, с преобладанием Escherichia coli (E. coli), выявляемой с практически одинаковой частотой (32 и 36%). Частота обнаружения Klebsiella pneumoniae составила по 4% в каждой группе, а Proteus mirabilis выявлен только при СЛ (6%). Существенной разницы в колонизации влагалища энтерококками, преимущественно Enterococcus faecalis, в обеих группах не выявлено (30,6 и 40%). Коринебактерии (преимущественно Corynebacterium amycolatum) встречались с одинаковой частотой в обеих группах (по 37,3%). Значительно чаще (р=0,038) в группе СЛ вульвы в сравнении со здоровыми выявляли Facklamia hominis (16 и 4% соответственно). Бактерии рода Actinomyces (А. urogenitalis, A. radingae, A. turicencis) более чем в 2 раза чаще обнаруживали у девочек с СЛ вульвы -
29,2 и 13,3% - в группе сравнения. В основной группе доминировал вид A. turicencis - 21,3%.
Суммарно облигатно-анаэробные микроорганизмы реже обнаруживали в группе сравнения (30 и 19% соответственно). Статистически значимо чаще (р=0,006) выявлялись микроорганизмы рода Propiono-microbium (P. limphophilum, P. propionicum, Р. avidum) - 34,6% в 1-й группе против 6,6% во 2-й группе с преобладанием вида P. limphophilum. Fusobacterium naviforme встретилась у 12 и 0% соответственно (р=0,056), Porphyromonas somerae в 9,3 и 0% (р=0,018), Dialister microaerophilus высевалась в 5,3 и 0% соответственно (р=0,321). Veillonella (V. parvula, V. mont-pellierensis) в 12,6 и 3,3% соответственно (р=0,441), Anaerococcus (А. vaginalis, A. mur-dochii, A. lactolyticus, A. tetradius) в 34,6 и 3,3% соответственно (р<0,001), Fine-goldia magna - 33,3 и 3,3% соответственно (р=0,001), Peptoniphilus harei - 37,3 и 13% соответственно (р=0,018), Peptococcus niger - 2,6 и 0% соответственно (р=0,556), Peptostreptococcus anaerobium - 20 и 1% соответственно (р=0,017), Prevotella (P. mela-ninogenica, P. bivia, P. bergensis, P. temonen-sis, P. buccalis) - 28 и 0% соответственно (р=0,001). Bacteroides (В. thetaiotamicron,
B. fragilis, B. uniformis) - 8 и 0% соответственно (р=0,179). Campylobacter ureolyti-cus - 14 и 0% соответственно (р=0,059),
C. jejuni - 16 и 3,3% соответственно (р=0,103), Actinobaculum schaaii - 16 и 3,3% соответственно (р=0,103). Gardnerella vaginalis выделяли редко - в 1% только в 1-й группе.
Анализ частоты выделения микроорганизмов из группы комменсалов (Alloscardovia, Bifidobacterium, Lactoba-cillus) показал, что существенной разницы в колонизации влагалища девочек этими микроорганизмами в обеих группах не выявлено. При относительно невысокой частоте выделения обращает на себя внимание видовое разнообразие лактобацилл (L. crispatus, L. rham-
nosus, L. paracasei). Дрожжевые грибы рода Candida у обследованных девочек не обнаружены.
Заключение
Анализ влагалищной микробиоты у девочек с подтвержденным диагнозом «СЛ вульвы» показал доминирование факультативно-анаэробных УПМ бактерий. Лидирующие позиции статистически значимо чаще по сравнению с группой контроля (р<0,001) занимали представители рода Streptococcus, особенно вида S. anginosus -43/57,3%, и стрептококка группы В Streptococcus agalactiae - 9/12,3%. Среди представителей рода Staphylococcus, занявших 2-ю позицию, наиболее значимым было определение вида Staphylococcus aureus - 9/12,3%. Вышеописанные микроорганизмы чаще всего ассоциируются с инфекционно-воспалительными заболеваниями кожи, ЛОР-органов и урогениталь-ной системы. Что касается строгих анаэро-
бов, наиболее важным было обнаружение микроорганизмов из группы грамотрица-тельных неспорообразующих анаэробов, особенно Fusobacterium naviforme - 9/12% и бактерий рода Prevotella - 21/28%, выявленных только в основной группе, преимущественно у девочек с тяжелым течением заболевания. Как известно, эти виды относятся к УПМ, способным вызывать язвенно-некротические поражения кожных покровов и слизистых оболочек. В связи с этим воспалительный процесс, вызванный УПМ, в особенности при обнаружении ассоциаций Streptococcus anginosus, Streptococcus agalactiae, Fusobacterium naviforme, может служить одним из возможных механизмов, способствующих прогрессированию и ре-цидивированию СЛ вульвы. Таким образом, проведение микробиологического исследования следует рассматривать как один из важных компонентов комплексной диагностики, необходимой для выбора правильной тактики ведения пациенток.
Сведения об авторах
Джангишиева Альбина Карагишигаджиевна (Albina K. Dzhangischieva) - аспирант кафедры акушерства и гинекологии ФГБУ «НМИЦ АГП им. В.И. Кулакова» Минздрава России (Москва, Российская Федерация) E-mail: albina.chervonaya@mail.ru https://orcid.org/0000-0003-2428-2076
Муравьева Вера Васильевна (Vera V. Muravieva) - кандидат биологических наук, врач-бактериолог, старший научный сотрудник отдела молекулярной микробиологии и биоинформатики Института микробиологии, антимикробной терапии и эпидемиологии ФГБУ «НМИЦ АГП им. В.И. Кулакова» Минздрава России (Москва, Российская Федерация) E-mail: v_muravyova@oparina4.ru https://orcid.org/0000-0003-0383-0731
Уварова Елена Витальевна (Elena V. Uvarovа) - член-корреспондент РАН, доктор медицинских наук, профессор, заведующий 2-м гинекологическим отделением ФГБУ «НМИЦ АГП им. В.И. Кулакова» Минздрава России, профессор кафедры акушерства, гинекологии, перинатологии и репродуктологии Института профессионального образования ФГАОУ ВО Первый Московский государственный медицинский университет им. И.М. Сеченова Минздрава России (Сеченовский Университет), президент Ассоциации детских и подростковых гинекологов (Москва, Российская Федерация) E-mail: elena-uvarova@yandex.ru https://orcid.org/0000-0002-3105-5640
Припутневич Татьяна Валерьевна (Tatyana V. Priputnevich) - член-корреспондент РАН, доктор медицинских наук, директор Института микробиологии, антимикробной терапии и эпидемиологии ФГБУ «НМИЦ АГП им. В.И. Кулакова» Минздрава России (Москва, Российская Федерация) E-mail: priput1@gmail.com http://orcid.org/0000-0002-4126-9730
Батырова Залина Кимовна (Zalina K. Batyrova) - кандидат медицинских наук, старший научный сотрудник 2-го гинекологического отделения (гинекологии детского и юношеского возраста) ФГБУ «НМИЦ АГП им. В.И. Кулакова» Минздрава России (Москва, Российская Федерация)
E-mail: linadoctor@mail.ru https://orcid.org/QQQQ-QQQ3-4997-6090
Литература
1. Федеральные клинические рекомендации. Дерматовенерология 2015: Болезни кожи. URL: https://cnikvi.ru/docs/2335_ maket_30.pdf
2. Чернова Н.И., Арутюнян Э. Современные аспекты терапии пациенток с дистрофией и атрофией интимной зоны. Что нового? // Российский вестник акушера-гинеколога. 2018. Т. 18, № 3. С. 95-98. DOI: https://www.doi.org/10.17116/ rosakush201818295-98
3. Батырова З.К., Джангишиева А.К., Уварова Е.В., Кумыко-ва З.Х. Склерозирующий лихен вульвы и перианальной зоны у девочек раннего возраста. Лечебный подход, обоснованный патогенезом заболевания // Репродуктивное здоровье детей и подростков. 2019. Т. 15, № 1. С. 24-29. DOI: https://www.doi. org/10.24411/1816-2134-2019-11003
4. Kirtschig G., Becker K., G^thert A. et al. Evidence-based (S3) guideline on (anogenital) Lichen sclerosus // J. Eur. Acad. Dermatol. Venereol. 2015. Vol. 29, N 10. P. e1-e43. DOI: https://www.doi. org/10.1111/jdv.13136
5. Powell J.J., Wojnarowska F., Winsey S. et al. Lichen sclerosus pre-menarche: autoimmunity and immunogenetics // Br. J. Dermatol. 2000. Vol. 142, N 3. P. 481-484. DOI: https://www.doi.org/10.1046/ j.1365-2133.2000.03360.x
6. Powell J., Wojnarowska F. Childhood vulvar lichen sclerosus. The course after puberty // J. Reprod. Med. 2002. Vol. 47, N 9. P. 706-709. PMID: 12380449
7. Dendrinos M.L., Quint E.H. Lichen sclerosus in children and adolescents // Curr. Opin. Obstet. Gynecol. 2013. Vol. 25, N 5. P. 370-374.
8. Guideline on Lichen sclerosus developed by the Guideline Subcommittee of the European Dermatology Forum. 2017.
9. Lewis F.M., Tatnall F.M., Velangi S.S., Bunker C.B., Kumar A., Brackenbury F., Mohd Mustapa M.F., Exton L.S., Lewis F.M. British Association of Dermatologists guidelines for the management of lichen sclerosus // Br. J. Dermatol. 2018. Vol. 178, N 4. P. 839-853. DOI: https://www.doi.org/10.1111/bjd.16241
10. «Микробиота». Монография под ред. Е.Л. Никонова и Е.Н. Поповой. 2019. C. 63-66. eLIBRARY ID: 38244535.
11. Уварова Е.В., Комарова М.В., Казакова А.В. Оценка микро-биоты влагалища c учетом стадии полового развития с позиции биологического разнообразия // Репродуктивное здоровье детей и подростков. 2022. Т. 18, № 2. DOI: https://www.doi. org/10.33029/1816-2134-2022-18-2-48-57
12. Уварова Е.В., Батырова З.К. Физиология и патология наружных половых органов у девочек в периоде детства // Репродуктивное здоровье детей и подростков. 2012. № 4. С. 35-50.
13. Косых С.Л., Мозес В.Г. Оптимизация ведения детей и подростков с неспецифическим бактериальным вульвовагини-том : руководство для врачей. Москва : Адамантъ, 2011. 28 с
14. Hickey R.J., Zhou X., Settles M.L. et al. Vaginal microbiota of adolescent girls prior to the onset of menarche resemble those of reproductive-age women // mBio. 2015. Vol. 6, N 2. Article ID e00097-15.
References
1. Federal clinical guidelines. Dermatovenerology 2015: Skin diseases. URL: https://cnikvi.ru/docs/2335_maket_30.pdf (in Russian)
2. Chernova N.I., Harutyunyan E. Modern aspects of therapy of patients with dystrophy and atrophy of the intimate zone. What's new? Rossiyskiy vestnik akushera-ginekologa [Russian Bulletin of the obstetrician-gynecologist]. 2018; 18 (3): 95-8. DOI: https:// www.doi.org/10.17116/rosakush201818295-98
3. Batyrova Z.K., Dzhangishieva A.K., Uvarova E.V., Kumy-kova Z.Kh. Lichen sclerosus of vulva and perianal area: clinical case of girl of early age. Therapeutic approach based on the patho-genesis of the disease. Reproduktivnoe zdorov'e detey i podrostkov [Pediatric and Adolescent Reproductive Health]. 2019; 15 (1): 24-9. DOI: https://www.doi.org/10.24411/1816-2134-2019-11003 (in Russian)
4. Kirtschig G., Becker K., Gunthert A., et al. Evidence-based (S3) guideline on (anogenital) Lichen sclerosus. J Eur Acad Dermatol Venereol. 2015; 29 (10): e1-e43. DOI: https://www.doi.org/10.1111/ jdv. 13136
5. Powell J.J., Wojnarowska F., Winsey S. et al. Lichen sclerosus premenarche: autoimmunity and immunogenetics. Br J Dermatol. 2000; 142 (3): 481-4. DOI: https://www.doi.org/10.1046/j.1365-2133.2000.03360.x
6. Powell J., Wojnarowska F. Childhood vulvar lichen sclerosus. The course after. J Reprod Med. 2002; 47 (9): 706-9. PMID: 12380449.
7. Dendrinos M.L., Quint E.H. Lichen sclerosus in children and adolescents. Curr Opin Obstet Gynecol. 2013; 25 (5): 370-4.
8. Guideline on Lichen sclerosus developed by the Guideline Subcommittee of the European Dermatology Forum. 2017.
9. Lewis F.M., Tatnall F.M., Velangi S.S., Bunker C.B., Kumar A., Brackenbury F., Mohd Mustapa M.F., Exton L.S., Lewis F.M. British Association of Dermatologists guidelines for the management of lichen sclerosus. Br J Dermatol. 2018; 178 (4): 839-53. DOI: https:// www.doi.org/10.1111/bjd.l6241
10. «Microbiota». Monograph. In E.L. Nikonova, E.N. Popova ed. 2019. Pp. 63-6. eLIBRARY ID: 38244535. (in Russian)
11. Uvarova E.V., Komarova M.V., Kazakova A.V., Rustyanova D.R., Trupakova A.A., Kroider A.S. Evaluation of the vaginal micro-biota taking into account the stage of sexual development from the standpoint of biological diversity. Reproduktivnoe zdorov'e detey i podrostkov [Pediatric and Adolescent Reproductive Health]. 2022; 18 (2): 48-57. DOI: https://www.doi.org/10.33029/1816-2134-2022-18-2-48-57 (in Russian)
12. Uvarova E.V., Batyrova Z.K. Physiology and pathology of external genitalia in girls during childhood. Reproduktivnoe zdorov'e detey i podrostkov [Reproductive Health of Children and Adolescents]. 2012; (4): 35-50. (in Russian)
13. Kosykh S.L., Mozes V.G. Optimize the management of children and adolescents with nonspecific bacterial vulvovaginitis: a guide for physicians. Moscow: Adamant, 2011: 28 p. (in Russian)
14. Hickey R.J., Zhou X., Settles M.L., et al. Vaginal microbiota of adolescent girls prior to the onset of menarche resemble those of reproductive-age women. mBio. 2015; 6 (2). Article ID e00097-15.
