CC BY
297. Лотош Т.Д. Гумат натрия из торфа как фактор повышения неспецифической резистентности организма: Автореф. дис... канд. биол. наук. — Одесса, 1985. — 19 с.
8. Малецький О.П. Актуальнють круглого крокуючого (фшалвського) стебла при реконструк-тивних операциях у офтальмоонкологи. «Офталь-молопя» № 1 (01) 2015, С. 87-94.
9. Пронина Е.А. Применение электросна и тканевого препарата алоэ в комплексном лечении больных инфарктом миокарда на санаторном этапе реабилитации с учетом нарушений углеводного обмена: Автореф. дис... канд. мед. наук. - Одесса, 1990. - 23 с.
10. Соловьева В.П. Влияние тканевых препаратов по В.П. Филатову на повышение защитных свойств организма: Автореф. дис... д-ра биол. наук. — Одесса, 1972. — 31 с.
11. Сотникова Е.П., Салдан В.И., Фесюнова Г.С. Этапы развития тканевой терапии и перспективы применения биогенных препаратов в практической медицине. Газета «Новости медицины и фармации» (324), 2010 (тематический номер).
12. Чеботарев Д.Ф. Использование тканевых препаратов плаценты, полученных по методу академика В.П. Филатова, для профилактики ускоренного старения человека / Актуальш питання тка-нинно! терапи та перспективи застосування при-родних бюлопчно активних речовин у сучаснш медицина Наук.-практ. конф. з мiжнар. уч., 17-18 вересня 2003 р. — Одесса: Астропринт, 2003. — С. 108.
13. Чучунов А. А. Пластика дефектов лица кожным стеблем Филатова / А. А. Чучунов, А. А. Ле-венец, Ю. О. Антипенко. - Красноярск : [б. и.], 2012. - 94 с.
14. Экспериментальное изучение безвредности и фармакологической активности глазных лекарственных средств: Методические рекомендации / Сост. Л.А. Чайка, А.Г. Ципкун, Т.Б. Гайдамака и др. - К., 2003. - 43 с.
15. Экстракт алоэ: научно-клинич. данные / Сост. В.П. Соловьева, Е.П. Сотникова. — М.: Мед-экспорт. — 20 с.
FEATURES OF THE CNS SENSITIVITY OF THE EXPERIMENTAL ANIMAL ORGANISM TO THE INFLUENCE OF SOME PSYCHOTROPIC DRUGS ON THE BACKGROUND OF CHRONIC ALCOHOL INTOXICATION IN A CHRONOPHARMACOLOGICAL EXPERIMENT
Philippova E.
Candidate of Medical Sciences, Assistant of the Department of Pharmacology and Clinical Pharmacology, USMU, Ekaterinburg
Izmozherova N.
Doctor of Medical Sciences, Professor, Head of the Department of Pharmacology and Clinical Pharmacology, USMU, Ekaterinburg
Larionov L.
Doctor of Medical Sciences, Professor of the Department of Pharmacology and Clinical Pharmacology, USMU, Ekaterinburg
Kolomiyets O.
Assistant, Department of Pharmacology and Clinical Pharmacology, USMU, Ekaterinburg
ОСОБЕННОСТИ ЧУВСТВИТЕЛЬНОСТИ ЦНС ОРГАНИЗМА ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНЫХ ЖИВОТНЫХ К ВОЗДЕЙСТВИЮ НЕКОТОРЫХ ПСИХОТРОПНЫХ ПРЕПАРАТОВ НА ФОНЕ ХРОНИЧЕСКОЙ АЛКОГОЛЬНОЙ ИНТОКСИКАЦИИ В ХРОНОФАРМАКОЛОГИЧЕСКОМ
ЭКСПЕРИМЕНТЕ
Филиппова Е.В.
к.м.н., ассистент кафедры Фармакологии и клинической фармакологии УГМУ, Екатеринбург
Изможерова Н.В. д.м.н., профессор, заведующая кафедрой Фармакологии и клинической фармакологии УГМУ, Екатеринбург
Ларионов Л.П. д.м.н., профессор кафедры Фармакологии и клинической фармакологии УГМУ, Екатеринбург
Коломиец О.В. Ассистент кафедры
Фармакологии и клинической фармакологии УГМУ, Екатеринбург
Abstract
The effect on the behavior of laboratory animals subjected to chronic alcohol intoxication of two drugs with a psychotropic effect in combinations in a chronopharmacological experiment is considered. A decrease in the threshold of sensitivity to electric irritation and the duration of an aggressive reaction against the background of
the use of a depressing agent and an increase in these indicators with a combination of this drug with an antioxidant were revealed. The desynchronizing effect of the antioxidant on the behavioral reactions of laboratory animals for two days is shown, which indicates a pronounced adaptive effect. A decrease in the processes of destruction of the histological structure of the myocardium against the background of chronic alcoholization in the case of the use of combinations of a depriving agent with an antioxidant has been established.
Аннотация
Рассмотрено влияние действие на поведение лабораторных животных, подвергнутых хронической алкогольной интоксикации двух препаратов с психотропным действием в комбинациях в хронофармаколо-гическом эксперименте. Выявлено снижение порога чувствительности к электрическому раздражению и длительности агрессивной реакции на фоне применения депримирующего средства и повышение данных показателей при комбинации данного препарата с антиоксидантом. Показано десинхронизирующее дей-твие антиоксиданта на поведенческие реакции лабораторных животных в течение двух суток, что свидетельствует о выраженном адаптационном влиянии. Установлено снижение процессов разрушения гистологической структуры миокарда на фоне хронической алгкоголизации в случае применения комбинаций депримирующего средства с антиоксидантом.
Keywords: chronopharmacology, chronic alcoholism, Droperidol, EMPS
Ключевые слова: хронофармакологии, хронический алкоголизм, Дроперидол, ЭМПС
В связи со способностью фармакологических соединений вмешиваться в течение ритмических процессов на всех уровнях организации биосистемы хронофармакологический эффект лекарственных средств может быть полезным или нежелательным [2]. Высокой степенью осложнений со стороны сердечно-сосудистой, нервной систем, печени и желудочно-кишечного тракта характеризуется хроническая алкогольная интоксикация [3]. Без избавления пациента от абстинентного синдрома, возникающего при прекращении употребления алкоголя лечение сопутствующих заболеваний не будет эффективным [5]. Эффективных методов фармакотерапии и исследований в рамках данной проблемы на сегодняшний день недостаточно [1]. В показаниях к применению антиоксидантных препаратов указан алкогольный абстинентный синдром с преобладанием неврозоподобных и вегетативно-сосудистых расстройств, однако данная группа препаратов не используется в клинической практике при лечении данного заболевания, в связи с чем существует дефицит официальной информации об эффективности этих препаратов [9]. Согласно официальным источникам, Этилметилгид-роксипиридина сукцинат (ЭМПС) повышает резистентность организма к воздействию экстремальных факторов, в том числе к электрошоку и кислородзависимым патологическим состояниям [4]. Действие препарата проявляется в снижении проявлений абстинентного синдрома, одним из проявлений которого является повышенная агрессия.
Нами было рассмотрено действие двух препаратов на поведенческие реакции крыс в ходе хроно-фармакологического эксперимента, для наиболее эффективного подбора оптимальных комбинаций препаратов, применяемых в лечении больных с алкогольной зависимостью и купировании абстинентного синдрома.
Цель исследования: выявить хронофармако-логические особенности чувствительности центральной нервной системы в виде оценки реакций агрессии лабораторных крыс к действию комбинации психотропных препаратов на фоне хронической алкогольной интоксикации.
Исследование одобрено локальным этическим комитетом ФГБОУ ВО УГМУ Минздрава России (19.02.2017г.). Статистическая обработка полученных экспериментальных данных проводилась с использованием пакета программ Statistica 10.0. Для анализа данных использовалась проверка типа распределения данных с помощью теста Шапиро -Уилка и непараметрические тесты: для зависимых выборок - критерий Вилкоксона; для независимых выборок - ^критерий Манна-Уитни. Уровень значимости в указанном исследовании принимался при значении р < 0,5. Для исследования параметров биологического ритма использовалась компьютерная программы для косинор - анализа «Собшог» 3.1, «Асго» 3.5, разработанные профессором университета Бойсе (США) R. Refinetti [2]. Уровень значимости принимался при значении р < 0,5.
Материалы и методы исследования
Исследование проведено на 152 белых половозрелых лабораторных крысах (виварий ФГБОУ ВО УГМУ Минздрава России, г. Екатеринбург) -самцах чистой линии с массой 250 - 400 г., содержащихся в условиях лабораторного вивария с круглосуточным доступом к воде и корму. Группам животных, включенных в исследование, кроме контрольной группы, для моделирования хронической алкогольной интоксикации вместо воды в поилки заливали 12% водный раствор этилового спирта в течение 20 дней [8]. Препараты, использовавшиеся в ходе исследования: Дроперидол® (Раствор для внутривенного и внутримышечного введения 2,5 мг/мл, во флаконах по 5 мл, производитель: ОАО Дальхимфарм, Россия); Этилметилгидроксипири-дина сукцинат, Мексиприм®, в дальнейшем ЭМПС (раствор для внутривенного и внутримышечного введения 50 мг/мл; ампула 2 мл; производитель: Московский эндокринный завод, Россия). Препараты вводили крысам внутрибрюшинно в течении 10 дней по 1 мл 0,3% растворов (дозы были подобраны в соответствии с используемыми в клинике из перерасчета на поверхность тела животного) [7]. После проведения насыщения препаратами крысам проводили тест электротермического раздражения конечностей, предназначенной для измерения реакции агрессии под действием фармакологических
эффектов лекарственных препаратов в ответ на физический фактор раздражения (электрический ток) [4]. Крыс помещали в клетку, дно которой проводит ток. С пульта управления давалось напряжение, начинающееся от 10 V, постепенно нараставшее до уровня, когда крысы проявляли агрессию по отношению друг к другу (сцепление животных в стойке на задних лапах). Фиксировали показатель напряжения тока, вызывавшего агрессивную реакцию, в вольтах и длительность стойки в секундах. Эксперимент проводили в регулярном режиме в течение двух суток. Все крысы были поделены на 6 групп, по 2 пары, путем стратифицированной рандомизации (стратификация по полу, возрасту и весу). Всего, в течение двух суток, исследовали 6 пар животных, поочередно помещаемых в электрическую установку, интервал для каждой пары 16 часов, в соответствии с протоколами ведения хронобиоло-гических исследований [10]. Принципом постановки животных в пару было обязательное условие их проживания в разных клетках, при этом во время последующего помещения животных в экспериментальную установку пары ротировали для исключения привыкания. Впоследствии животных подвергли патоморфологическому исследованию после эвтаназии путем усыпления под эфирным наркозом и взятием крови из сердца до его остановки.
Группы сравнения:
1. Интактные крысы (контрольная группа) в количестве 24 (на стандартном режиме содержания, без введения алкоголя и лекарственных средств);
Сравнительная характеристика порога чувствительности к электрическому току, вызывающего агрессивную реакцию животных
—509
й 290 - - -
S I '
: 11»
X 1*00 2100 too 1Н «00 UOO 17 00 21.00 1 00 100
Часы похшмпга жшаотщых a iHinp«4f*n.u№« качгр> tap»*» о ток)
• — •
■*»«гат mi ■ точи" иЬоп*вилэл| lí%tfMW» ГМа«м1а1М>*/^о*1«омаел| * a i 0pi
2. Животные с моделированным хроническим алкоголизмом в количестве 34 (предоставление 12%-ного раствора этанола в течение 20 дней);
3. Животные с применением ЭМПС на фоне модели хронического алкоголизма в количестве 32 (предоставление 12%-ного раствора этанола в течение 20 дней и последующее внутрибрюшинное введение ЭМПС в течение 10 дней);
4. Животные, которым вводили Дроперидол на фоне хронической алкогольной интоксикации (28 животных);
5. Животные (34 экземпляра), которым вводили Дроперидол и ЭМПС на фоне хронической алкогольной интоксикации [6].
Результаты исследования и их обсуждение
При анализе результатов проведенного эксперимента было выявлено, что изучаемые психотропные препараты, оказывают значимое воздействие на биологические ритмы организма животных, подвергнутых хронической алкогольной интоксикации (рис. 1). При проведении косинор-анализа по данным, полученным при эксперименте, были построены косинусоиды предполагаемых биологических ритмов (рис. 1).
Рис. 1. Сравнительная характеристика порога чувствительности к электрическому току, вызывающего агрессивную реакцию. (Цвет косинусоиды соответствует цвету группы исследуемых животных)
Дроперидол, препарат группы нейролептиков, на фоне алкогольной интоксикации на статистически достоверном уровне снижал мезор порога чувствительности животных к электрическому раздражению (до 150 V на 5 утра в первые сутки, тогда как у интактных крыс этот уровень в данное время суток составлял 200 V, а у крыс, получавших комбинацию Дроперидола с ЭМПС, 240 V). При проведении косинор-анализа было выявлено, что Дропери-дол у животных, подвергнутых хронической алкогольной интоксикаиции, увеличивал периоды между положительными экстремумами (акрофа-зами) порога чувствительности к электрическому
раздражению до 17 часов (от 13 часов дня по 5 часов утра), в сравнении с интактной группой (15 часов), тогда как при комбинации Дроперидола с ЭМПС у крыс на фоне хронической алкоголизации период между двумя акрофазами составил 12 часов (от 19 часов вечера по 7 часов утра). В ходе эксперимента выявлена способность ЭМПС стабилизировать состояние нервной системы при хронической алкоголизации и приеме депримирующих средств, о чём свидетельствует повышение величины напряжения, вызывающего агрессивную реакцию. Таким образом, ЭМПС оказывает прямое
физиологическое влияние на чувствительность лабораторных животных к электрическому раздражению, повышая их порог чувствительности и приближая его к нормальному (у интактных животных). Достоверное увеличение мезора в сравнении с группой животных, получавших один Дропери-дол на фоне хронической алкоголизации, доказывает присутствие анальгезирующего воздействия на организм лабораторных животных.
Рис. 2. Гистологический срез препарата (окраска гемоксилин-эозином, увеличение х40) 1. сердца интактной крысы (кардиомиоциты с несколько расширенными межмышечными промежутками за счет небольшого отека); 2. сердца крысы после алкогольной интоксикации и приёма Дроперидола (строма межмышечных промежутков
неравномерно отечна, определяются дистрофиче-ско-дегенеративные изменения кардиомиоцитов: умеренно выраженная волнообразная деформация пучков кардиомиоцитов, мышечные волокна с признаками атрофии, местами гипертрофии, единичные клетки имеют вытянутые ядра и зернистость цитоплазмы по типу белковой дистрофии); 3. сердца крысы после алкогольной интоксикации и приёма комбинации Дропериол+ЭМПС (мышечные волокна с признаками гипертрофии, дегенеративно-дистрофическими явлениями и потерей поперечной исчерченности, гомогенизация стенки сосуда, неравномерное плазматическое пропитывание, кардиомиоциты с волнообразной деформацией, признаки кардиомиопатии)
1. Ш2.\
В ходе гистоморфологического исследования установлено, что на фоне хронической алкогольной интоксикации Дроперидол® вызывает поражение сердечной мышцы, в отличие от ЭМПС, в комбинации с которым наблюдается снижение ишемизиро-ванных зон в миокарде (рис. 2).
Выводы:
1. После курса 10-тидневного введения Дро-перидола наблюдается достоверное снижение длительности проявления агрессивной реакции у группы животных, подвергнутых хронической алкоголизации, по сравнению с интактной группой (р<0,05), кроме того, обнаружено снижение мезора ритма у группы после приема препарата на 42% (р<0,05);
2. При сравнении данных в контрольной группе экспериментальных животных с данными опытных групп (без использования данных о статистической значимости) прослеживается укорочение периода ритма со снижением экстремумов у группы после приема Дроперидола в сравнении с данными группы, где применяли комбинацию Дро-перидол+ ЭМПС.
3. Приём ЭМПС позволяет снизить разрушительные эффекты Дроперидола на морфоструктуру миокарда.
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ:
1. Агибалова Т.В. Федеральные клинические рекомендации по диагностике и лечению синдрома зависимости / Т.В. Агибалова, В.Б. Альтшулер, М.А. Винникова, 2014 г.
2. Арушанян Э.Б. Хронофармакология на рубеже веков / Э.Б. Арушанян, Ставрополь, 2005. 575с.
3. Верткин А.Л. Особенности клинического течения и фармакотерапии алкогольной болезни печени, сердца и головного мозга у больных с соматической патологией / А.Л. Верткин, А.С. Скотников, Е.Ю. Тихоновская, A.A. Скворцова // Medical Journal Лечащий врач. URL: http://www.lvrach.ru/2009/07/10445801/ (04.03.2015)
4. Волчегорский ИА. Экспериментальное моделирование и лабораторная оценка адаптивных реакций организма / ИА. Волчегорский, Челябинск, 2010.
5. Гофман AX. Клиническая наркология / AX. Гофман, 2012 г
6. Костенко Е. В. Опыт применения антиок-сидантной терапии (мексиприм) при лечении больных в раннем восстановительном периоде ишеми-ческого инсульта полушарной локализации / Е.В. Костенко, Л.В. Петрова, K.A. Зайцев // Рус. мед. журн. - 2010. - Т. 18, № 22. - С. 1-5.
7. Mостбауер Г.В. Aлкогольная кардиомио-патия. Лекция / Г.В. Mостбауэр // Therapia № 1. - № 43 - 2010. - С. 22-26
8. О состоянии санитарно-эпидемиологического благополучия населения в Российской Федерации в 2013 году: Государственный доклад. - M.: Федеральная служба по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека, 2014. - 191 с.
9. Регистр Лекарственных Средств России, 2017 г // https://www.rlsnet.ru/tn_index_id_36387.htm
10. Death highest in heart failure patients admitted in January, on Friday, and overnight // European Society of Cardiology (ESC) - 2013. - URL: http://www.sciencedaily.com ( 15.03.2015)
