CC BY
34
тодом РНИФ выявили положительные реакции с 14 сыворотками в разведении 1:20 (11. сывороток) и 1:40 (3 сыворотки). Различия между процентами неспецифических реакций и титрами антител, выявленных испытуемым препаратом и методом РНИФ, в гетерологичных сыворотках животных статистически незначимы (р=0,50).
При изучении воспроизводимости реакции во всех определениях в РАО с сывороткой донора получены отрицательные, с сывороткой больного легионеллезом человека - положительные результаты.
По скорости постановки реакции и получения результатов анализа, по четкости реакции испытуемый диагностикум и метод РНИФ получили одинаковую оценку.
При полевых испытаниях на 2 базах - Причерноморской противочумной станции и Центра госсанэпиднадзора Ростовской области при исследовании 174 сывороток крови людей больных острыми пневмониями в 11 (63 %) сыворотках в разведениях 1:80 (7 сывороток) и 1:160 (4 сыворотки) с помощью испытуемого препарата выявили легионеллез-ные антитела.
Диагностикум легионеллезный серогруппы 1 антигенный сухой для РАО внедрен в практику здравоохранения.
На основании результатов, полученных при лабораторных и полевых испытаниях, в инструкции по применению дополнено, что необходимо считать людей больными легионеллезом, начиная с титра 1:80. При обнаружении серопозитивных сывороток с титром 1:40 считать подозреваемыми на заболевание легионеллезом и проводить исследование парных сывороток с интервалом в 1-2 нед. В случае нарастания титров антител - ставить диагноз легионеллез.
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ.
1.Гальцева Г.В., Стержантова JI.B., Ус З.И. и др. // Сб. науч. тр. - Новороссийск, 1994. - Вып. 1. - С. 276. -
2.Карбышев Г.Л., Новиков Д.Н., Подоляков М.П. и др. // Сб. науч. тр. - Новороссийск, 1994. - Вып. 1. - С. 271. -
3. Тартаковский И.С., Бархатова О.И., Темежникова Н. Д. и др. // Диагн. возбудит, опасных инф. забол. - Саратов, 1998. - Т. 1. - С. 166. - 4. Темежникова Н. Д. Диагностика легионеллера в Краснодарском крае: Автореф. дис. ... канд. биол. наук. - Саратов,1994. - 23 с. - 5. Byrne В., Swanson M.S. // Infect. Immun. - 1998. - Vol. 66, N 7. - P. 3029-3034. -6. Dominguez J.A., Matas L., Manterola J.M. et al. // J. Clin. Microbiol. - 1997. - Vol. 35, N 6. - P. 1627-1629. - 7. Dominguez J.A., Gali N., Pedroso P. et al. II J. Clin. Microbiol. - 1998. - Vol. 36, N9. - P. 2718-2722. - 8. Swancon M.S., Hammer B.K. // Annu. Rev. Microbiol. - 2000. -Vol. 54.-P. 567-613.-9. Joseph C.A.//EuroSurveill.-2001.-Vol. 6, N4. - P. 53-60. - 10. Sanches J.L., Polyak C.S., Kolavic S.A. etal.ll Mil. Med. - 2001. - Vol. 166.N9.-P. 753.
L.V.Sayapina, G.V.Adamova, T.I.Anisimova, G.L.Karbyshev, A.N.Malakhayeva, I.V.Kassina, L.M.Verkina, G.V.Galtseva, M.M.Shvager
Quality Assessment of Legionella Serogroup 1 Antigenic Polymer Diagnosticum According to the Results of State Trials
State Institute of Standardization and Control of Medical and Biological Preparations Named after LA.Tarasevich, Moscow; Rostov-on-Don Anti-Plague Research Institute;
Black Sea Plague-Control Station, Novorossiysk;
Centre of State Sanitary-Epidemiologic Surveillance for Rostov Region
Summarized are the results of state trials to assess diagnostic value of Legionella Serogroup 1 antigenic polymer diagnosticum for agglomeration tests produced by the Rostov-on-Don APRI with the aim of solving the problem of practicability of its registration.
Поступила 14.01.04
КРАТКИЕ СООБЩЕНИЯ
УДК 616.91/98+616-07(477)
Л.М.Мухарская, Н.И.Голубятников, Л.В.Третьякова, Л.С.Некрасова, В.Н.Свита, И.Н.Капитанова
ОРГАНИЗАЦИЯ РАБОТЫ ЛАБОРАТОРИЙ ПО ДИАГНОСТИКЕ ОСОБО ОПАСНЫХ ИНФЕКЦИЙ В УКРАИНЕ
Министерство здравоохранения Украины; Центральная санэпидстанция М3 Украины;
Центральная санэпидстанция на водном транспорте Украины, Ильичевск
Представлен краткий анализ работы лабораторий отделов особо опасных инфекций учреждений санитарно-эпидемиологического профиля в Украине.
Эпидемиологическая обстановка по особо опас- государство, имеет интенсивные международные
ным инфекциям в Украине остается напряженной, связи, в том числе со странами, где постоянно ре-
Ситуация по указанным инфекциям иногда не про- гистрируются особо опасные карантинные инфек-
гнозируема не только из-за того, что на территории ции, и завоз их реален. Следует отметить, что почти
страны существуют активные стационарно неблаго- все возбудители этих заболеваний относятся к аген-
получные пункты и природные очаги ряда особо там, которые могут быть использованы как бакте-
опасных инфекционных заболеваний человека, а и риологическое (биологическое) оружие. Индикация
потому, что Украина, как центрально-европейское и идентификация возбудителей особо опасных ин-
фекций осуществляется лабораториями областных городских (Киевской и Севастопольской), Центральной М3 Украины санэпидстанциями, Украинским государственным противочумным институтом, Крымской противочумной станцией, Львовским НИИ эпидемиологии и гигиены.
В системе эпиднадзора за особо опасными инфекциями проведение лабораторных исследований на всю группу карантинных, природно-очаговых и зооантропонозных инфекций, а также лабораторный контроль за объектами окружающей среды осуществляют лаборатории отделов особо опасных инфекций. Бактериологическими лабораториями учреждений здравоохранения всех уровней проводится серологическая диагностика некоторых особо опасных инфекций и бактериологические исследования на холеру. В санэпидучреждениях Украины функционирует 30 лабораторий отделов особо опасных инфекций, из них 1 - республиканская в АР Крым, 24 - в областных санэпидстанциях, 4 - в городских и 1 - в Центральной санэпидстанции М3 Украины. Кроме того, определенную практическую работу, идентификацию и молекулярно-генетическое изучение культур проводит Крымская противочумная станция.
Кадровый потенциал этих лабораторий представлен 65 врачами-бактериологами, большинство из которых имеют высокую профессиональную подготовку, более 73 % из них имеют высшую и первую аттестационные категории.
Материально-техническая база лабораторий в основном удовлетворительная, отвечает требованиям санитарных правил по безопасности работы с возбудителями II группы патогенности, и все они имеют специальные разрешения на право работы.
Сегодня стало нормой, что основанием для постановки диагноза таких инфекционных заболеваний как холера, туляремия, риккетсиозы, лептоспи-розы является положительный результат лабораторного исследования. Именно поэтому высока ответственность лабораторных работников за качество, достоверность и своевременность результатов исследований.
Обеспечение достоверности и сравнимости результатов проводимых исследований достигается постоянным контролем, позволяющим оценить не только работу лабораторий, но и профессиональную подготовленность и ответственность каждого специалиста.
Критериями качества работы лаборатории являются: наличие подготовленных кадров; должностных инструкций каждого работника; организационно-распорядительной и нормативной документации на методы исследования; необходимого лабораторного оборудования, средств измерительной техники, их техническое состояние и умение работать на нем; необходимых диагностических иммунобиологических препаратов, питательных сред, реактивов; системы внутреннего и внешнего контроля результатов исследования.
Последние годы вопросам внешнего контроля качества и достоверности результатов лабораторных исследований уделяется значительное внимание. Этот контроль включает периодический мониторинг
качества работы лабораторий; выборочный контроль готовности к проведению исследований методом контрольных задач или шифрованных проб; выборочный контроль правильности идентификации микроорганизмов (подтверждение культур).
Лаборатории отделов особо опасных инфекций - централизованные, специализированные, выполняющие сложные дорогостоящие виды исследований. Ежегодно лабораториями проводится более 600 тыс. бактериологических, биологических и иммунологических исследований, из них на природноочаговые инфекции - около 51 % исследований, на холеру - 20 %, сибирскую язву, бруцеллез и др. -около 30 %.
По отдельным нозологическим единицам из суммы природно-очаговых инфекций объем исследований составляет на лептоспирозы более 28 %, туляремию -11%, иерсиниозы - до 50 %, листери-оз и еризипеллоид - 1,5-2 % и риккетсиозы - 5-7 %.
При проведении диагностических исследований материалов от людей в 65 % случаев используются бактериологические и биологические методы, чуть более 35 % - иммунологические, а при профилактических обследованиях более 97 % составляют серологические методы.
Объем исследований на холеру в последние годы постепенно уменьшается. В 2001 г. издан приказ Минздрава Украины № 188 «Об изменении объема исследований на холеру». В 2002 г. по сравнению с 2001 объем исследований уменьшился на 24 %. Однако, несмотря на уменьшение объема исследований проб из объектов окружающей среды, высев холерных вибрионов 01 и не 01 увеличился (с 0,11 до 0,15 % холерного вибриона 01 и с 15 до 20,1 % холерного вибриона не 01). Из общего количества исследований, как и в прошлые годы, 51 % составляет вода открытых водоемов, 23 % - сточные воды, 13 % - морская вода, около 10 % - пищевые продукты, 3 % - другие объекты окружающей среды и около 1 % - питьевая вода. В 2002 г. выделен 51 штамм холерного вибриона 01 в 7 регионах страны. Все они отнесены к биовару Эльтор, 32 штамма - к серовару Огава, 19 - Инаба, токсиген не выявлен.
От людей в 2002 г. холерные вибрионы не выделялись. Выделены 162 штамма холерного вибриона не 01 в 8 регионах Украины, причем высев холерного вибриона не 01 от людей также увеличился, и 184 штамма галофильных вибрионов в 5 регионах страны. Бактериологическими исследованиями охвачено более 70 % больных острыми кишечными заболеваниями.
В последние годы в стране увеличилось количество исследований на сибирскую язву, особенно проб из окружающей среды. Это связано с использованием возбудителя сибирской язвы в террористических целях и случаями заражения людей в некоторых странах, а также с целью предупреждения возникновения чрезвычайных ситуаций в стране. Наличие практически на всей территории Украины стационарно неблагополучных пунктов по сибирской язве, неблагополучная эпизоотическая ситуация представляет постоянную угрозу возможного возникновения случаев заболевания сибирской язвой. При проведении планового контроля объектов
окружающей среды ежегодно выделяются культуры сибирской язвы.
Лаборатории, осуществляющие диагностику особо опасных инфекций, испытывают некоторые трудности в обеспечении диагностическими иммунобиологическими препаратами и некоторыми питательными средами, т.к. Украина их не производит, а закупает за рубежом. Среди главных поставщиков, безусловно, Россия.
К сожалению, случаи ввоза в Украину некачественных препаратов не редки, ряд из них не имеют сертификатов (паспортов), с просроченными сроками годности или экспериментальные, не прошедшие сертификации. Все это немедленно отражается на достоверности исследований, результатах идентификации культур.
В Украине принят ряд нормативных документов по организации и проведению системы входного контроля ввозимых препаратов. Определенные трудности связаны и с приобретением контрольных
тест-штаммов, заложенных в фармстатьи госу-дарств-разработчиков или производителей.
Нами уже заострялось внимание на необходимости помощи Координационного Совета стран СНГ в этих вопросах, однако, реальных решений и рекомендаций пока не выработано.
L.M.Mukharskaya, N.I.Golubiatnikov, L.V.Tretyakova, L.S.Nekrasova, V.N.Svita, I.N.Kapitanova
Organization of Laboratory Practices to Diagnose Particularly Dangerous Infections
Ministry of Public Health of the Ukraine;
Central Sanitary Epidemiologic Station ofMPH of the Ukraine;
Central Sanitary Epidemiologic Station in Water Transport, Ilichevsk
Laboratory activities of departments of sanitary and epidemiologic facilities dealing with particularly dangerous infections in the Ukraine are analyzed and briefly described.
Поступила 11.11.03
УДК 616.982.27-039
Н.Г.Плеханова, В.В.Алексеев, Н.Н.Пивень, Н.П.Храпова, Д.В.Викторов, С.Н.Тихонов, ТЛО.Кивокурцева, С.В.Перепелицына, Т.Н.Вязьмина
ОЦЕНКА ПРОДУКЦИИ КАПСУЛЬНОГО ГЛИКОПРОТЕИНОВОГО КОМПЛЕКСА Bl//?KHOLDE/?/A Р8ЕІЮОМАИ.ЕІ ПРИ МЕЛИОИДОЗНОЙ ИНФЕКЦИИ
Волгоградский научно-исследовательский противочумный институт
В экспериментах на белых крысах и морских свинках при аэрогенном и подкожном заражении их возбудителем мелиоидоза прослежены количественные и качественные изменения белковых компонентов и капсульного гликопротеинового комплекса возбудителя как фактора патогенности.
Патогенность возбудителя мелиоидоза следует рассматривать в аспекте взаимодействия двух подвижных в своем развитии биологических систем: макро- и микроорганизмов, обладающих многочисленными факторами агрессии и защиты [2, 3, 4]. К потенциальным факторам вирулентности ВигкЬоШе-па ряеис1ота1Ш относят капсульный гликопротеи-новый комплекс (антиген 8) [1, 2].
Целью исследования являлось изучение адаптационного изменения продукции капсульного гликопротеина В. рэеийопийЫ 100 в организме аэро-генно и подкожно инфицированных белых крыс и морских свинок, используя культуры возбудителя мелиоидоза, выделенные от экспериментальных животных в разные сроки заболевания. Изучено также изменение спектра белковых бактериальных компонентов возбудителя.
Исследования проводили, используя тест-систему иммуноферментную моноклональную для обнаружения антигена 8 возбудителя мелиоидоза, выпускаемую ВолгНИПЧИ. Данная тест-система предназначена для исследования бактериальных взвесей, экстрацеллюлярных антигенных смесей, проб биологического материала. Чувствительность тест-системы - 3,7 нг/мл полисахарида, входящего в состав высокомолекулярного капсульного гликопротеина.
Установлено, что при моделировании острой формы мелиоидоза у белых крыс, инфицированных аэрозолем В. pseudomallei 100, изменения антигенного спектра субкультур бактерий по параметру одного из эпитопов гликопротеинового комплекса происходят в сторону увеличения их плотности и могут быть выявлены через 2 сут после инфицирования. Через 3 сут и далее в течение всего срока наблюдения (7 сут) отмечено достоверное увеличение плотности эпитопов, гомологичных МКА 2к^.
В случае моделирования острого процесса методом подкожного заражения белых крыс В. pseudomallei 100 выявлены иные закономерности. В субкультурах, изолированных в течение первых 7 сут после заражения, гликопротеиновый комплекс обнаружен, но в меньших количествах, чем в исходной культуре. С 9-х суток у некоторых культур отмечено восстановление продукции искомого комплекса до уровня исходной культуры, а у 7 из 13 культур этот уровень был достоверно выше исходного.
Таким образом, субкультуры В. pseudomallei 100, изолированные из органов и тканей животных с одной и той же формой заболевания и в одинаковые сроки после заражения, но инфицированные различными способами, демонстрировали различную степень адаптированное™ к условиям
